Hedgehog信号通路在人角膜缘微环境来源的基质干细胞中表达情况的研究(英文)

目的:探讨Hedgehog信号通路在人角膜缘微环境来源的基质干细胞(LNC)中的表达情况。方法:对贴壁生长的人角膜缘来源的基质干细胞(LNC)进行分离培养及传代,对骨髓间充质干细胞系(BMMSC)进行培养传代。通过将BMMSC作为阳性对照,采用Western blot技术,免疫荧光技术,real-time PCR技术从蛋白水平及基因水平验证Hedgehog信号通路成员SHH,patched,SMO,Gli-1在LNC中的表达情况。最后采用Cell Count Kit-8检测不同浓度Gli抑制剂GANT61(空白,1,5,10,15,20,25,30μmol/L)处理LNC和BMMSC48h后的增殖抑制效应反向验证Hedgehog信号通路在LNC中的存在。结果:Western blot技术,免疫荧光技术,real-time PCR技术均证明LNC细胞表达Hedgehog信号通路中的Gli-1,patched,SMO,且Gli蛋白抑制剂GANT61可以显著抑制LNC细胞增殖(P<0.05)。结论:Hedgehog信号通路在LNC细胞的增殖过程中发挥重要作用。