沐川乌骨黑鸡LIPE基因第1外显子多态性及其与体重、肌内脂肪含量的关联分析

【目的】探究沐川乌骨黑鸡激素敏感脂酶(hormone-sensitive lipase,LIPE)基因第1外显子单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点的遗传变异,并分析其与体重、肌内脂肪(intramuscular fat,IMF)含量的相关性。【方法】采集106只沐川乌骨黑鸡血液,利用PCR扩增和直接测序技术检测LIPE基因第1外显子SNP位点,采用SPSS 21.0软件分析LIPE基因第1外显子SNP位点多态性及其与沐川乌骨黑鸡体重、胸肌IMF含量的相关性;通过生物信息学在线工具分析LIPE基因第1外显子SNP位点对其编码氨基酸的影响;利用实时荧光定量PCR检测LIPE基因在沐川乌骨黑鸡不同组织和不同基因型个体胸肌中的相对表达量。【结果】沐川乌骨黑鸡LIPE基因第1外显子共检测到3个SNP位点,66 bp处SNP位点(SNP1:c.66 A>C)上发现AA、AC和CC 3种基因型;440 bp处SNP位点(SNP2:c.440 A>G)上发现AA和AG 2种基因型;462 bp处SNP位点(SNP3:c.462 G>A)上发现GG和GA 2种基因型。卡方适合性检验表明,沐川乌骨黑鸡LIPE基因第1外显子的SNP2、SNP3位点符号哈迪-温伯格平衡状态(P>0.05),SNP1位点偏离哈迪-温伯格平衡状态(P<0.05)。关联分析表明,SNP2位点的AG基因型个体胸肌IMF含量显著高于AA基因型(P<0.05),各位点不同基因型个体体重均无显著差异(P>0.05)。氨基酸序列比对分析显示,SNP2为非同义突变,其导致赖氨酸变为精氨酸。实时荧光定量PCR结果显示,LIPE基因在脂肪组织中表达量较高,SNP2位点AA基因型个体胸肌中LIPE基因mRNA表达水平极显著高于AG基因型(P<0.01)。【结论】沐川乌骨黑鸡LIPE基因第1外显子存在3个SNP位点,其中SNP2位点对沐川乌骨鸡IMF含量具有显著影响,该位点可作为沐川乌骨黑鸡IMF含量选育的候选分子遗传标记。

沐川乌骨黑鸡生长曲线拟合与分析

为研究沐川乌骨黑鸡的生长发育规律,试验采用Logistic、Bertalanffy和Gompertz模型分别对沐川乌骨黑鸡0~20周龄体重数据进行生长曲线拟合与分析。结果表明：三种数学模型均能很好地拟合沐川乌骨黑鸡的生长曲线,拟合度均在0.988以上,其中Gompertz模型对母鸡生长曲线拟合度最高,达0.999;Bertalanffy模型对公鸡生长曲线拟合度最高,达0.995。根据拟合度高的Gompertz模型对母鸡体重、Bertalanffy模型对公鸡体重的拟合分析,沐川乌骨黑鸡拐点周龄为6.8-6.9周,母鸡拐点体重为692.98 g,公鸡拐点体重为805.57 g。表明运用三种模型对沐川乌骨黑鸡生长曲线进行拟合是可行的。

黑羽和白羽沐川乌骨黑鸡肤色性状及屠宰性能对比分析

本实验旨在分析黑羽和白羽沐川乌骨黑鸡肤色性状及屠宰性能差异。选用100只黑羽和30只白羽沐川乌骨黑鸡成年母鸡,运用比色仪对比分析了不同羽色对沐川乌骨黑鸡背部肤色、翅下肤色、鸡冠色、胫色的影响,选取白羽和黑羽各10只鸡测定并分析屠宰性能和黑色素(皮肤和胸肌)沉积能力的差异。结果表明:黑羽鸡背部肤色和翅下肤色的L值均极显著低于白羽鸡(P<0.01);黑羽鸡胫色的L值、a值和b值与白羽鸡无显著差异(P>0.05);黑羽和白羽乌骨鸡的活体重和屠宰性能(全净膛率、胸肌率、腿肌率和腹脂率)无显著差异(P>0.05);黑羽鸡皮肤和胸肌中黑色素沉积量显著高于白羽鸡(P<0.05)。以上结果表明,黑羽沐川乌骨鸡肤色显著较白羽鸡"乌",黑羽乌骨鸡机体黑色素沉积能力较白羽鸡强。

羽速基因对沐川乌骨黑鸡肤色性状和体重的影响

为了研究羽速基因对沐川乌骨黑鸡肤色性状和体重的影响,试验对430只沐川乌骨黑鸡成年母鸡进行了快慢羽基因型分型检测,对比分析了快羽和慢羽型鸡体重和肤色性状（背部肤色、翅下肤色、冠色和胫色）的差异。结果表明：快羽和慢羽型鸡在体重和各肤色指标上无显著差异（P〉0.05）。说明在沐川乌骨黑鸡快慢羽品系选育过程中,无需考虑羽速基因对其体重和肤色性状的影响。

利用Illumina MiSeq测序平台分析沐川乌骨黑鸡空肠微生物多样性

为探索沐川乌骨鸡肠道微生物多样性,采用Illumina MiSeq测序平台对10羽沐川乌骨鸡的空肠内容物样本中微生物的16S rDNA-V4变异区进行测序,利用UPARSE等软件分析和统计样品中的操作分类单元(OTUs)数量,并进行物种注释及丰度分析,揭示样品的物种构成。结果表明,共获得667466条tags,在97%相似水平上进行OTU分类,被归类于3154个OTUs,且由稀释曲线可知此次测序结果较全面地覆盖了沐川乌骨黑鸡空肠微生物群落。门水平上,占优势的门主要有厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、变形菌门(Proteobacteria),但这3种优势菌门在不同样品中所占比例均有所差异。在属水平上,在10个样品中所占比例均大于1%的菌属有乳杆菌属(Lactobacillus)和Romboutsia菌属。

CHRDL1基因启动子区变异与沐川乌骨黑鸡肤色的相关性研究

文章探讨了CHRDL1基因启动子区多态性与沐川乌骨黑鸡肤色性状(背部肤色、翅下肤色、冠色和胫色)的相关性。在CHRDL1基因启动子区ATG上游949 bp处发现一个SNP位点(c.-949T>C),CC基因型频率最高(0.368),TT基因型最低(0.304)。相关性分析表明,CT基因型个体背部和翅下皮肤肤色L值显著高于CC和TT基因型(P<0.05),CT基因型个体鸡冠皮肤肤色L和a值极显著高于CC和TT基因型(P<0.01),CC和CT基因型个体胫色a值显著低于TT基因型(P<0.05)。上述结果表明,SNP c.-949T>C与沐川乌骨黑鸡肤色性状具有显著相关性,该SNP位点可作为沐川乌骨黑鸡选育的分子遗传标记之一。

沐川乌骨黑鸡体重与肤色性状的相关性分析

为了研究沐川乌骨黑鸡体重与肤色性状的相关性,试验选用125只成年沐川乌骨黑鸡母鸡,运用比色仪测定了背部肤色、翅下肤色、鸡冠色、胫色,并测定个体体重。结果表明：乌骨鸡背部肤色b＊值与体重相关性显著（P〈0.05）,相关系数0.198;背部肤色、翅下肤色、鸡冠色、胫色的亮度系数L＊值与体重相关性均不显著（P〉0.05）;鸡冠色的L＊值与a＊、b＊值相关性极显著（P〈0.01）,相关系数分别为0.619,0.468;鸡胫色L＊值与b＊值相关性显著（P〈0.05）,相关系数为0.281。可见在沐川乌骨黑鸡选育过程中可以将背部肤色b＊值作为一项选育指标,增加选育效果。

沐川乌骨黑鸡不同部位肤色性状的相关性分析

本研究运用比色仪测定了125只成年健康沐川乌骨黑鸡不同部位的肤色性状,并分析了不同部位肤色性状间的相关性。结果显示:鸡冠亮度系数L值最小(42.99),相对其他身体部位鸡冠颜色最黑;背部肤色亮度系数L值与翅下肤色L值、鸡冠色L值、胫色L值呈极显著相关(P<0.01),背部肤色a值与翅下肤色L值、鸡冠色L值均具有显著相关性(P<0.05),鸡冠色a值与胫色L值显著相关(P<0.05);背部肤色b值、翅下肤色b值与鸡冠色L值呈极显著负相关(P<0.01)。以上结果表明在沐川乌骨黑鸡选种过程中,鸡冠色和胫色同样是肤色性状选育的重要指标,其中背部肤色b值和翅下肤色b值越小越好。

苗药黑骨藤对CIA大鼠外周血Th22细胞数量及血清IL-17、IL-22和IL-35表达水平的影响

目的观察苗药黑骨藤对CIA大鼠外周血Th22细胞数量和细胞因子IL-17、IL-22和IL-35的表达水平的影响。将60只CIA大鼠作为研究对象,按随机数字表法随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组(雷公藤多苷,9.45mg/kg)、黑骨藤低剂量组(22 mg/kg)、中剂量组(44 mg/kg)和高剂量组(67 mg/kg),每组10只。建立大鼠CIA模型,连续给药21 d后测定大鼠血清IL-17、IL-22、IL-35水平和Th22细胞数量,观察大鼠足趾组织镜下表现。结果与模型对照组比较,阳性对照组、黑骨藤低剂量组、剂量组血清、高剂量组血清IL-17、IL-22水平以及Th22细胞比例明显降低,血清IL-35水平明显增高,黑骨藤高剂量组在降低血清IL-17、IL-22水平,升高血清IL-35水平效果上优于阳性对照组。结论黑骨藤可以减少Th22细胞数量,调节IL-17、IL-22、IL-35等细胞因子表达,具有减少炎症细胞活化和浸润、抑制关节炎症的作用,从而减缓类风湿关节炎的进展。

中药黑骨藤HPLC-ELSD指纹图谱研究

目的 建立中药黑骨藤HPLC-ELSD指纹图谱并结合聚类分析和主成分分析进行药材质量评价。方法 采用通用型ELSD检测器建立17个不同产地的黑骨藤药材的指纹图谱,采用HPLC-Q-TOF-MS技术对黑骨藤中化学成分进行表征,并通过指纹图谱相似度评价系统、层次聚类分析和主成分分析评价药材质量。结果 指纹图谱共标定了14个共有峰,采用液质联用技术共鉴定了58个化合物。除2批广西产地黑骨藤指纹图谱与对照图谱的相似度为0.663和0.826,其他15批产地的指纹图谱与对照图谱相似度均在0.9以上。指纹图谱相似度评价、层次聚类分析和主成分分析结果互相印证。结论 黑骨藤HPLC-ELSD指纹图谱研究结合聚类分析和主成分分析为该药材的真伪鉴别、质量控制提供了参考。

基于网络药理学和分子对接挖掘黑骨藤治疗强直性脊柱炎的作用机制

目的:运用网络药理学技术研究黑骨藤治疗强直性脊柱炎的作用机制。方法:通过检索文献和TCMSP数据库获取黑骨藤的活性成分信息。疾病靶点基因由DISGENET数据库和GeneCards数据库获得,通过瑞士目标预测数据库预测药物成分靶点,借助cytoscape软件构建“中药-化合物-靶点”网络,使用STRING在线平台下载靶点相互作用数据,构建PPI蛋白相互作用网络,挖掘核心靶点;运用DAVID平台对所预测核心靶点网络中的蛋白进行GO功能富集分析、KEGG通路富集分析。最后将筛选出的主要活性成分与核心靶点在pymol、autotool等软件下完成分子对接。结果:筛选出黑骨藤12个有效成分及422个药物靶点,与强直性脊柱炎交集靶点71个,其主要成分有异丙基二烯酚、汉黄芩素、山奈酚等,核心靶点是STAT3、MAPK1、MAPK14、JAK2、JAK1等。GO功能和KEGG通路分析获得主要通路:参与生长激素信号通路JAK-STAT级联反应、JAK-STAT级联、STAT蛋白的酪氨酸磷酸化、Th17细胞分化、Th1和Th2细胞分化等。分子对接显示,成分与靶点都可有效结合,汉黄芩素与JAK1结构最优。结论:从网络药理学角度预测了黑骨藤对强直性脊柱炎的治疗作用,主要以汉黄芩素、山奈酚等有效成分,作用于JAK1、JAK2等靶点,通过JAK/STAT、MAPK等信号通路实现,为后续研究奠定了的基础。

基于网络药理学和分子对接探讨黑骨藤追风活络胶囊治疗类风湿关节炎的作用机制

目的基于网络药理学和分子对接探讨黑骨藤追风活络胶囊(HZC)治疗类风湿关节炎(RA)的作用机制。方法通过ETCM数据库和文献查阅获得复方活性成分,运用Swiss Target Prediction平台进行靶点预测。用GeneCards、DisGeNET、OMIM数据库筛选RA相关靶点,绘制韦恩图获取药物和疾病交集靶点。采用STRING平台构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,利用Cytoscape3.9.1软件中centiscape2.2插件筛选潜在关键靶点。用DAVID数据库对关键靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析,用Cytoscape3.9.1软件绘制药物-活性成分-靶点-通路网络图。最后选取核心成分与核心靶点进行分子对接。结果共筛选出32个有效成分,药物与疾病交集靶点91个,主要活性成分为槲皮素、盐酸青藤碱和杠柳苷元,核心靶点为肿瘤坏死因子(TNF)、信号转导与转录激活因子3(STAT3)、表皮生长因子受体(EGFR)。作用机制可能与HIF-1信号通路、TNF信号通路、PI3K-Akt信号通路、JAK-STAT信号通路等有关。分子对接显示主要活性成分与关键靶点具有很好的对接活性。结论HZC可通过多靶点、多通路的作用机理治疗RA。

干旱胁迫对黑骨藤种子萌发及生理特性的影响

为探究干旱胁迫对黑骨藤种子萌发的影响,本研究采用不同浓度梯度的PEG-6000溶液对黑骨藤种子进行胁迫实验,分析不同浓度PEG-6000胁迫环境下的种子萌发相关指标,比较不同浓度PEG-6000胁迫下种子萌发特性的差异。结果表明,在中低浓度胁迫下,黑骨藤种子有一定的抗逆性,而高浓度则抑制种子萌发,其萌发率、发芽势、发芽指数、逐日萌发率等随PEG-6000浓度的增加而下降,高度干旱胁迫对种子萌发有抑制作用;随着浓度的增大,黑骨藤幼苗的根长、茎长和苗高均受到抑制而逐渐降低。丙二醛含量与PEG-6000浓度成正比,总体呈现上升趋势;中低浓度的PEG-6000处理的种子蛋白质含量随PEG-6000浓度增加而逐渐上升,高浓度处理则下降;可溶性糖含量随PEG-6000浓度变化基本趋于一致。综合分析表明,重度干旱会抑制黑骨藤种子萌发,在今后的黑骨藤引种驯化过程中应适度控制PEG-6000浓度。

黑骨藤追风活络胶囊调节NF-κB/STAT3/mPGES-1信号通路改善胶原诱导性关节炎的作用研究

目的:研究黑骨藤追风活络胶囊(Heiguteng Zhuifenghuoluo cupsule,HZC)调节NF-κB/STAT3/mPGES-1信号通路改善胶原诱导性关节炎(Collagen induced arthritis,CIA)大鼠的作用机制。方法:取24只SD大鼠,随机分组为正常组、模型组、HZC组和甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)组。除正常组外,其余三组采用牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂混合乳化剂构建类风湿性关节(rheumatoid arthritis,RA)大鼠模型。按照实验分组分别给予生理盐水、MTX(1 mg/kg)和HZC(243 mg/kg)灌胃,共给药21天。每周测量大鼠足肿胀程度、观察并进行足肿胀评分、检测大鼠血清中前列腺素E 2(Prostaglandin E2,PGE 2),检测大鼠滑膜组织中微粒体前列腺素E2合酶-1(microsomal prostaglandin E synthase 1,mPGES-1)以及p-p65、p-STAT3蛋白表达情况。结果:模型组大鼠足肿胀程度、肿胀程度评分、大鼠血清PGE 2明显增加,HZC和MTX组大鼠足肿胀程度、肿胀程度评分和大鼠血清PGE 2明显降低。进一步机制研究发现模型组大鼠关节滑膜组织中mPGES-1、p-p65、p-STAT3蛋白的表达增加,HZC和MTX组大鼠关节滑膜组织中mPGES-1、p-p65、p-STAT3蛋白的表达明显降低。结论:HZC通过抑制NF-κB/STAT3/mPGES-1信号通路,发挥其对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的治疗作用。

基于TLR4/NF-κB研究苗药黑骨藤对AGA大鼠Th17/Treg及相关细胞因子的影响

目的探究基于Toll样受体(TLR)4/核转录因子(NF)-κB研究苗药黑骨藤对急性痛风性关节炎(AGA)大鼠辅助性T细胞(Th)17/调节性T细胞(Treg)及相关细胞因子的影响。方法在90只SPF级雄性健康大鼠中选取15只作为正常组,其余大鼠建立AGA模型,模成功后将大鼠随机分为模型组、秋水仙碱组、低剂量组、中剂量组、高剂量组各15只。低剂量组、中剂量组、高剂量组分别给予25、50、100 mg/kg苗药黑骨藤灌胃,秋水仙碱组使用0.1 mg/kg的秋水仙碱灌胃,正常组、模型组给予相同体积的生理盐水灌胃,持续给药7 d。观察各组Th17/Treg及相关细胞因子水平及TLR4、NF-κB蛋白表达量。结果与秋水仙碱组、中剂量组、低剂量组相比,高剂量组Th17、Th17/Treg及相关细胞因子水平及TLR4、NF-κB蛋白表达量明显较低,Treg明显较高(P<0.05)。结论苗药黑骨藤可通过下调TLR4、NF-κB蛋白表达量,抑制TLR4/NF-κB信号通路,减轻AGA炎症反应,降低Th17/Treg及相关细胞因子水平,起到治疗作用。

多指标成分结合多元统计分析法综合评价黔产黑骨藤质量

目的建立多指标成分结合多元统计分析的综合质量评价方法,综合评价黑骨藤药材的质量。方法以贵州不同产地的11批黑骨藤药材为样品,采用高效液相色谱法测定其中新绿原酸、隐绿原酸、绿原酸、原花青素A2、异绿原酸A、异绿原酸C的含量,并采用聚类热图分析、灰色关联度分析(GRA)和熵权逼近理想解排序(TOPSIS)法综合评价其质量。结果含量测定的方法学考察结果均符合相关规定,各待测成分在各自进样量范围内线性关系和准确度均良好。11批样品中绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、原花青素A2、异绿原酸A、异绿原酸C的含量分别为3.650~7.302、0.888~2.575、1.371~2.386、0.947~1.469、0.084~0.169、0.725~1.067 mg/g;各成分含量差异显著,其中以绿原酸含量最高,异绿原酸A最低。综合聚类热图、GRA和TOPSIS分析结果显示,样品S5和S10的综合质量相对较好。结论所建立的含量测定方法准确、稳定、简便,结合多元统计分析方法,可用于黑骨藤药材的质量评价。在11批不同产地样品中,以贵州省安顺市西秀区旧州镇和蔡官镇所产样品的质量相对较好。

钙胁迫对黑骨藤种子萌发及幼苗生长的影响

为了探讨CaCl_(2)胁迫对黑骨藤种子萌发和幼苗生长的影响,采用不同浓度梯度的CaCl_(2)溶液对黑骨藤种子和幼苗进行胁迫实验,分析不同浓度钙胁迫环境下的种子相关萌发指标和种子萌发后的幼苗生长指标,比较不同浓度钙胁迫环境下种子萌发特性的差异,以及钙胁迫对黑骨藤幼苗生长及生理指标变化的影响。结果表明,低浓度钙胁迫处理能促进黑骨藤种子的萌发,而高钙处理则抑制黑骨藤种子萌发,其发芽势、萌发率、发芽指数、逐日萌发率和生长指标随钙浓度的升高而下降,高钙环境对黑骨藤种子的萌发有抑制作用。随着钙胁迫浓度的增大,黑骨藤幼苗表观性状(侧枝数量、株高)生长逐渐受到抑制,其叶绿素含量随之降低,高浓度的钙胁迫会抑制黑骨藤幼苗的生长及叶片的光合作用;黑骨藤幼苗中可溶性糖含量随钙浓度的增加而呈逐渐升高的趋势,同时过氧化物酶、超氧化物歧化酶、谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性随之逐渐升高,表明黑骨藤幼苗在钙胁迫环境下受到了渗透胁迫及黑骨藤幼苗在生长过程中主要依靠抗氧化酶系统来清除氧自由基,通过转氨作用进行代谢反应。综合分析表明,钙离子浓度过高会抑制黑骨藤种子的萌发和幼苗的生长,因此,在今后进行黑骨藤引种驯化过程中应适当控制钙离子浓度。

基于网络药理学和分子对接探讨苗药黑骨藤治疗阿尔茨海默病的作用机制

目的运用网络药理学及分子对接技术,探究苗药黑骨藤治疗阿尔茨海默病(AD)的活性成分和潜在作用机制。方法通过文献搜集苗药黑骨藤的化学成分,利用中药系统药理学数据库(TCMSP)和Swiss ADME数据库筛选黑骨藤的主要活性成分,采用Swiss Target Prediction和SEA数据库预测活性成分的作用靶点。通过GeneCards、OMIM数据库检索AD相关靶点,经Venny2.1.0获取成分-疾病交集靶点,结合STRING数据库和Cytoscape3.8.0软件对交集靶点进行蛋白互作(PPI)网络分析。再借助HIPLOT数据库对交集靶点进行基因本体(GO)分析和基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析。最后,利用AutoDock Tools1.5.6软件将潜在成分与核心靶点进行分子对接。结果苗药黑骨藤的活性成分共24个,对应靶点574个,1513个AD靶点,交集靶点159个;GO分析得到2661条生物过程,587条分子功能,311条细胞成分;KEGG分析得到AD主要参与神经退行性疾病-多发性疾病途径、卡波西肉瘤相关疱疹病毒感染、癌症中的蛋白多糖等相关通路。分子对接结果显示,山柰酚、槲皮素、汉黄芩素、丹参酮ⅡA、杠柳苷元等与类固醇受体辅助活化因子(SRC)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)3、血管内皮生长因子(VEGF)A蛋白等具有较强结合能力。结论通过成分-靶点-通路网络及分子对接验证,筛选出黑骨藤抗AD的有效成分,并探究其抗AD作用机制,为苗药黑骨藤抗AD的新药开发和应用提供思路和理论依据。

黑骨藤对高表达表皮生长因子受体突变体Ⅲ的人胶质母细胞瘤细胞DKMG的影响及机制

目的探讨黑骨藤对高表达表皮生长因子(EGF)受体突变体Ⅲ(EGFRvⅢ)的人胶质母细胞瘤细胞DKMG的影响及其机制。方法取对数生长期的DKMG和不表达EGFRvⅢ的人脑星形胶质母细胞瘤细胞U87MG,各自分为空白(Con)组(DMEM培养液)、低浓度黑骨藤组(100 mg/L黑骨藤培养液)、中浓度黑骨藤组(200 mg/L黑骨藤培养液)及高浓度黑骨藤组(400 mg/L黑骨藤培养液),处理细胞24 h,采用细胞增殖与毒力检测试剂盒(MTS)检测各组DKMG、U87MG细胞的存活率,采用流式细胞术检测各组DKMG细胞凋亡率;实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(qRT-PCR)检测各组DKMG细胞中EGFRvⅢ、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)及BCL2-Associated X(Bax)的信使核糖核酸(mRNA)表达,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组DKMG细胞中EGFRvⅢ、Bcl-2、Bax、半胱氨酸蛋酶家族(Caspase-3、Cleaved caspase-3)蛋白的表达。结果MTS检测显示,与Con组相比,各浓度黑骨藤组DKMG细胞存活率明显降低(P<0.05),各浓度黑骨藤组U87MG细胞存活率比较、差异无统计学意义(P>0.05);流式细胞术结果表明,与Con组比较,各浓度黑骨藤组DKMG细胞凋亡率明显增加(P<0.05);qRT-PCR结果表明,与Con组比较,各浓度黑骨藤组DKMG细胞中EGFRvⅢ和Bcl-2 mRNA表达降低(P<0.05),Bax表达无变化(P>0.05);Western blot结果显示,各浓度黑骨藤组DKMG细胞中EGFRvⅢ、Bcl-2及Caspase-3蛋白表达下降(P<0.05),Bax、Cleaved caspase-3蛋白表达升高(P<0.05)。结论黑骨藤可诱发DKMG细胞凋亡,产生细胞杀伤作用,其机制可能与下调EGFRvⅢ、Bcl-2、Caspase-3表达及上调Bax、Cleaved caspase-3表达有关。