胰岛素样生长因子1通过PI3K/Akt信号通路促进髓核细胞聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原的表达

背景:采用生长因子等生物学方法修复退变椎间盘是目前椎间盘退变治疗的研究热点,胰岛素样生长因子1能促进髓核细胞增殖、促进功能性细胞外基质的合成,但其机制仍未阐明。目的:观察胰岛素样生长因子1对髓核细胞聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原表达的促进作用,并探讨其信号转导机制。方法:分离培养人髓核细胞,取第3代细胞给予不同质量浓度的胰岛素样生长因子1(0,20,50,100,200μg/L)进行刺激,采用RT-PCR、Western-blot检测聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原的表达。100μg/L的胰岛素样生长因子1作用于髓核细胞,采用Western-blot检测胰岛素样生长因子1对PI3K/Akt信号通路的激活作用,并通过LY294002的应用检测PI3K/Akt通路的抑制对聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原表达的影响。结果与结论:(1)随胰岛素样生长因子1质量浓度增高,聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原的表达水平逐渐升高,该作用呈剂量依赖性。胰岛素样生长因子1(100μg/L)能显著促进p-PI3K和p-Akt的表达(P<0.01),而LY294002能抑制胰岛素样生长因子1的促进作用(P<0.01);(2)胰岛素样生长因子1(100μg/L)能促进髓核细胞聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原的表达(P<0.01),而LY294002能抑制胰岛素样生长因子1对聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原表达的促进作用(P<0.01);(3)因此认为胰岛素样生长因子1可通过PI3K/Akt通路促进髓核细胞聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原的表达。

胰岛素样生长因子I型受体在恶性血液病骨髓有核细胞的表达及其抗凋亡作用

为探索胰岛素样生长因子I型受体(IGFIR)在骨髓增生异常综合征(MDS)和急性髓细胞白血病(AML)骨髓有核细胞表面的表达及其与细胞凋亡的关系,收集MDS和AML患者各16例骨髓有核细胞,经离心涂片机制片,用免疫酶标记方法(APAAP)及TdT凋亡检测(TUNEL)法先后在同一标本上检测IGFIR表达和凋亡信号,并以16名正常人骨髓有核细胞作对照。结果显示:①MDS组骨髓细胞IGFIR表达[(56.8±14.3)%]高于正常对照[(40.4±9.6)%](P<0.01),AML组骨髓细胞IGFIR表达[(86.8±13.8)%]高于正常对照(P<0.01),AML骨髓细胞IGFIR表达高于MDS骨髓细胞(P<0.01);②MDS组骨髓细胞凋亡率为[(5.4±3.0)%]高于正常对照[(1.2±0.9)%](P<0.01),AML组骨髓细胞凋亡率为[(0.3±0.4)%]低于正常对照(P<0.01),MDS组细胞凋亡率明显高于AML组(P<0.01);③细胞凋亡主要发生在IGFIR阴性细胞[(9.0±4.8)%],IGFIR阳性细胞中凋亡细胞仅占[(1.4±2.4)%](P<0.01),IGFIR表达与细胞凋亡呈负相关(r=-0.852;P<0.01);④MDS骨髓细胞IGFIR表达阳性率RAEB/RAEBt/CMML组高于RA/RAS组,分别为(64.1±3.2)%和(53.5±16.2)%,但差异无显著性,细胞凋亡率RAEB/RAEBt/CMML组低于RA/RAS组,分别为(3.1±2.1)%和(6.4±2.8)%,(P<0.05);⑤MDS和AML中IGFIR阳性率与原始细胞百分比存在明显的?

镍纹蛋白样蛋白、可溶性髓样细胞触发受体-1水平与2型糖尿病患者颈动脉粥样硬化程度的相关性

目的 探究镍纹蛋白样蛋白(METRNL)、可溶性髓样细胞触发性受体1(sTREM-1)水平与2型糖尿病(T2DM)患者颈动脉粥样硬化(CAS)严重程度的关系。方法 选取2021年12月—2023年12月承德市中心医院T2DM患者235例,根据是否伴有CAS分为CAS组(126例)和对照组(109例)。将CAS组根据CAS的严重程度细分为3个亚组[内膜中层厚度(IMT)增厚组(26例)、斑块形成组(41例)、颈动脉狭窄组(59例)]。收集所有患者临床资料和实验室指标检测结果,同时检测血清METRNL、sTREM-1水平。采用Spearman相关分析评估血清METRNL、sTREM-1与CAS严重程度的相关性。采用多因素Logistic回归分析评估CAS严重程度的影响因素。结果 与对照组比较,CAS组血清METRNL水平显著降低(P<0.05),血清sTREM-1水平显著升高(P<0.05)。IMT增厚组、斑块形成组、颈动脉狭窄组血清METRNL水平依次降低(P<0.001),sTREM-1水平依次升高(P<0.001)。METRNL与CAS严重程度呈负相关性(rs=-0.422,P<0.05),sTREM-1与CAS严重程度呈正相关(rs=0.535,P<0.05)。高血压史、sTREM-1、糖化血红蛋白(Hb A1c)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)是CAS严重程度(颈动脉狭窄)的危险因素[比值比(OR)值分别为3.354、2.165、1.642、1.943,95%可信区间(CI)分别为1.580~7.119、1.296~3.618、1.238~2.177、1.188~3.178,P<0.05],METRNL是保护因素(OR=0.768,95%CI为0.640~0.922,P<0.05)。结论 T2DM伴CAS患者血清METRNL水平降低,sTREM-1水平升高,与CAS严重程度密切相关。

髓样细胞触发受体-1在寻常型银屑病中的表达及意义

目的通过对比髓样细胞触发受体-1(Trem-1)在寻常型银屑病患者与正常人皮肤组织及血液中的表达差异,探索寻常型银屑病发病的可能机制。方法采用免疫组化及实时荧光定量PCR的方法检测Trem-1在不同组织中的表达情况,应用SPSS21.0统计软件进行统计学分析。结果 Trem-1在寻常型银屑病患者皮损中表达增加,主要表达于表皮全层,正常皮肤组织中主要表达于基底细胞层,其表达差异具有统计学意义(P<0.05)。Trem-1mRNA在寻常型银屑病皮损、血液中表达升高,与正常组相比差异具有统计学意义(P<0.05);且Trem-1mRNA表达与银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)呈正相关(P<0.05)。结论Trem-1的异常表达可能参与了寻常型银屑病发病,Trem-1可能成为治疗寻常型银屑病的潜在靶点。

Ⅰ型胰岛素样生长因子受体在人髓母细胞瘤中的表达及其意义

目的探讨Ⅰ型胰岛素样生长因子受体(IGF-ⅠR)对髓母细胞瘤增殖的作用。方法选择34例髓母细胞瘤手术标本,通过免疫组化方法检测其IGF-ⅠR和Ki67的表达,并分析IGF-ⅠR和Ki67表达之间的关系。结果在髓母细胞瘤中IGF-ⅠR表达率(64.7%,22/34)较高。在髓母细胞瘤中Ki67的表达与IGF-ⅠR的表达密切相关。结论髓母细胞瘤IGF-ⅠR的表达促进了肿瘤增殖,提示了IGF-ⅠR在髓母细胞瘤发生发展中起重要作用。

丁苯酞联合美多芭对帕金森病伴抑郁模型小鼠黑质纹状体Ⅱ型髓系细胞触发受体及小胶质细胞炎症标志物表达的影响

目的:探讨丁苯酞联合美多芭对帕金森病伴抑郁模型小鼠黑质纹状体Ⅱ型髓系细胞触发受体(TREM2)及小胶质细胞M1型炎症标志物[白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]及M2型炎症标志物[IL-10和精氨酸酶-1(Arg-1)]表达的影响。方法:随机将40只C57BL/6成年雄性小鼠分正常对照组(对照组)、帕金森病伴抑郁模型组(模型组)、美多芭治疗组和丁苯酞联合美多芭治疗组,每组10只。腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP,30 mg/kg×7 d)制备帕金森病小鼠模型。建立帕金森病模型后,以慢性不可预知温和应激诱导产生帕金森病伴抑郁小鼠模型。美多芭治疗组给予美多芭6.25 mg/kg灌胃治疗,1次/d,持续7 d。丁苯酞联合美多芭治疗组给予丁苯酞120 mg/kg和美多芭6.25 mg/kg灌胃治疗,1次/d,持续7 d。采用免疫组化定性分析黑质纹状体内α-突触核蛋白的阳性表达情况。采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定5-羟色胺(5-HT)含量。采用蛋白免疫印迹法检测TREM2蛋白表达水平。采用蛋白免疫印迹和PCR检测小胶质细胞炎症标志物IL-1β、TNF-α、IL-10、Arg-1蛋白及mRNA表达水平。结果:模型组小鼠黑质纹状体部位可见大量α-突触核蛋白异常积聚;美多芭治疗组及丁苯酞联合美多芭治疗组α-突触核蛋白阳性表达明显减少,染色变浅,以丁苯酞联合美多芭治疗组减少更明显。与对照组比较,模型组5-HT含量明显减低(P<0.05);与模型组比较,美多芭治疗组及丁苯酞联合美多芭治疗组5-HT含量明显增加,以丁苯酞联合美多芭治疗组增加更明显(均P<0.05)。与对照组比较,模型组TREM2明显减低(P<0.05);与模型组比较,美多芭治疗组及丁苯酞联合美多芭治疗组TREM2明显增加,以丁苯酞联合美多芭治疗组增加更明显(均P<0.05)。与对照组比较,模型组小胶质细胞M1型炎症标志物IL-1β和TNF-α明显升高,M2型标炎症标志物IL-10和Arg-1明显下降(均P<0.05);与模型组比较,美多芭治疗组及丁苯酞联合美多芭治疗组IL-1β和TNF-α下降,IL-10和Arg-1增加,以丁苯酞联合美多芭治疗组更明显(均P<0.05)。结论:丁苯酞联合美多芭能促进帕金森病伴抑郁模型小鼠黑质纹状体TREM2表达增加,抑制炎症反应,对神经元具有保护作用。

电针对急性痛风性关节炎大鼠踝关节髓样细胞表达激发受体表达的影响

目的探讨电针对急性痛风性关节炎（AGA）大鼠受试踝关节滑膜组织髓样细胞表达激发受体（TREM）-1表达的影响。方法将40只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、西药组、电针组,每组各10只;正常组常规喂养,其余采用尿酸钠溶液注射法建立AGA模型。造模前2 d,正常组与模型组按20 ml/kg予以生理盐水灌胃,西药组按1 mg/kg予以秋水仙碱溶液灌胃,电针组选取受试侧三阴交、解溪、昆仑,频率1.5~2 Hz,电压9V,电流强度1~3 m A,疏密波,留针20 min,1次/d,连续9 d。分析各组大鼠关节功能障碍,采用ELISA法检测受试踝关节滑膜组织中肿瘤坏死因子TNF-α、白细胞介素IL-1β的含量,采用免疫组化及Western blot法检测TREM-1表达。结果与正常组比较,模型组大鼠功能障碍指数显著增高（P〈0.01）,TNF-α和IL-1β含量显著增高（P〈0.05）,受试踝关节滑膜组织TREM-1表达明显增加（P〈0.05）;与模型组比较,西药组和电针组大鼠功能障碍指数显著降低（P〈0.01）,TNF-α和IL-1β含量显著降低（P〈0.05）,受试踝关节滑膜组织TREM-1表达明显降低（P〈0.05）;西药组与电针组比较,均无统计学意义（P〉0.05）。结论电针治疗AGA的机制可能是通过抑制TREM-1的表达。

血管紧张素Ⅱ受体Ⅰ型基因AT1R在髓系白血病患者骨髓样本中的表达

目的探讨血管紧张素Ⅱ受体1型基因AT1RR在髓系白血病患者样品中的altmRNA表达,为临床诊疗提供依据和参考。方法选择2017年5月~2019年6月髓系白血病患者61例作为对象,设为观察组;选择同期治疗的缺铁性贫血者52例,设为对照组。实时定量RT-PCR法检测骨髓中单个核细胞中AT1R mRNA的含量。结果观察组急性髓系白血病患者altmRNA表达水平显著高于对照组缺铁性贫血者(P<0.05)。结论血管紧张素Ⅱ受体1型基因AT1R在髓系白血病患者中呈高表达,有望成为髓系白血病治疗新的靶点。

人髓样细胞触发性受体-1在急性梗阻性化脓性胆管炎外周血单核细胞中的表达

目的研究髓样细胞触发性受体(TREM)-1在急性梗阻性化脓性胆管炎(AOSC)患者外周血单核细胞(PBMC)中表达的规律及其临床意义。方法分别收集36例AOSC患者(实验组)和40例正常人(对照组)外周血单核细胞,以半定量RT-PCR检测单核细胞中TREM-1 mRNA表达;免疫细胞化学检测单核细胞中TREM-1蛋白表达;ELISA检测患者外周血中TNF-表达水平,免疫透射比浊法测C反应蛋白。结果对照组和实验组TREM-1 mRNA半定量比值分别为0.457±0.053和1.007±0.252(P<0.05)。免疫细胞化学观察结果示实验组TREM-1蛋白阳性表达率与对照组之间差异显著(P<0.01)。实验组TNF-和C反应蛋白水平均高于对照组(P<0.01)。结论人TREM-1在急性梗阻性化脓性胆管炎发病初表达明显升高,提示TREM-1在急性梗阻性化脓性胆管炎的发生中可能起重要作用。

髓样细胞表达激发受体-1在大鼠急性胰腺炎继发感染早期肺损伤时的表达

目的:探讨重症急性胰腺炎继发感染(SISAP)早期肺损伤时髓样细胞表达激发受体-1(TREM-1)的表达变化。方法:24只大鼠随机分为对照组(C组)、重症急性胰腺炎组(SAP组)、重症急性胰腺炎继发感染组(SISAP)组。通过腹腔注射L-精氨酸、大肠杆菌造模,24h后取血及腹水行细菌培养;测定血淀粉酶活性、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及TREM-1表达变化;胰腺及肺组织进行病理学评分;Real-timePCR和Western Blot分别检测肺组织中TREM-1mRNA和蛋白的表达。结果:血和腹水细菌培养阳性率:C组为0/8,SAP组为1/8,SISAP组为8/8;SAP组和SISAP组胰腺和肺组织病理评分及血淀粉酶活性均明显高于C组(P<0.05),且SISAP组较SAP组增高;SAP组和SISAP组的CRP、TNF-α均明显高于C组(P<0.05),但两组之间差异无统计学意义;血清TREM-1ELISA检测显示:SAP组和SISAP组均明显高于C组(P<0.05),且SISAP组较SAP组增高(P<0.05);Real-timePCR和WesternBlot分别检测肺组织TREM-1mRNA及蛋白表达,结果与血清TREM-1ELISA检测相似。结论:SISAP引起的早期肺损伤中TREM-1表达明显增高。

转人类胰岛素样生长因子-Ⅰ基因成肌细胞对骨骼肌急性钝挫伤后Ⅱb型肌球蛋白重链及波形蛋白mRNA表达的影响

目的:观察转人类胰岛素样生长因子-Ⅰ(HumanInsulin -likeGrowthFactor-Ⅰ,hIGF -Ⅰ)基因成肌细胞回输小鼠骨骼肌钝挫伤局部后,对小鼠骨骼肌愈合过程中Ⅱb型肌球蛋白重链(MyosinHeavyChain -Ⅱb ,MHC -Ⅱb)及波形蛋白(Vimentin)mRNA表达的影响。方法:将90只7～12周雄性C3H小鼠右下肢腓肠肌中段内侧实施急性钝挫伤后,随机分为自然愈合组、单纯成肌细胞注射组和转基因成肌细胞注射组。挫伤后第3天,对单纯成肌细胞注射组、转基因成肌细胞注射组损伤局部分别注射等量单纯成肌细胞和转基因成肌细胞,并于损伤后第1、5、10、2 0、30天取材。检测不同时间点MHC -Ⅱb和VimentinmRNA表达水平,观察比较各组骨骼肌修复情况。结果:(1)在急性骨骼肌钝挫伤修复期,3组小鼠骨骼肌MHC -ⅡbmRNA均明显升高,第2 0天达到峰值。转基因成肌细胞注射组MHC -ⅡbmRNA表达水平最高,其次为单纯成肌细胞注射组。(2 )急性骨骼肌钝挫伤修复过程中,转基因成肌细胞注射组VimentinmRNA的表达水平始终在3组中表达最低。结论:急性骨骼肌钝挫伤修复过程中,注射转基因成肌细胞能提高损伤后MHC -IIbmR NA表达水平,促进肌纤维的增生,加速骨骼肌愈合进程。同时,损伤局部注射转hIGF -Ⅰ基因的成肌细胞后,使得损伤局部VimentinmRNA表达低于另两组。

瘢痕疙瘩成纤维细胞中转化生长因子-βⅠ、Ⅱ型受体的表达及调控

目的 :了解瘢痕疙瘩成纤维细胞中转化生长因子 (Transforminggrowthfactor ,TGF) βⅠ、Ⅱ型受体的表达及TGF β1 、β3对其的影响。方法 :体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞 (KFB)和正常皮肤成纤维细胞 (NFB) ,利用免疫组化及计算机图象分析系统测定TGF βⅠ、Ⅱ型受体含量。 结果 :KFB胞浆内阳性信号明显强于NFB (P <0 0 5 ) ;经TGF β1 、β3处理组胞浆内阳性信号差别均不明显 (P >0 0 5 )。结论 :KFB存在高表达的TGF βⅠ、Ⅱ型受体 ;TGF β1 、β3均能促进KFBTGF βⅠ。

人胰岛素样生长因子Ⅱ型受体反义基因对肝癌细胞恶性表型的影响

目的 研究人胰岛素样生长因子Ⅱ型受体 (IGF ⅡR)反义基因对SMMC 772 1人肝癌细胞恶性表型的逆转作用。方法构建IGF ⅡR正、反义基因真核表达质粒 ,用磷酸钙 DNA共沉淀的方法 ,导入SMMC 772 1人肝癌细胞株 ,经G41 8培养基筛选稳定的抗性细胞。采用Northern杂交检测对转染细胞内源性IGF ⅡR基因转录的抑制 ,观察转染细胞克隆形成率 ,细胞生长曲线 ,软琼脂生长及裸鼠致瘤能力的变化。结果 IGF ⅡR反义基因转染肝癌细胞的内源性IGF ⅡR基因转录受到有效抑制 ,转染细胞克隆形成率明显降低 ,并失去在软琼脂上生长的能力 ,裸鼠致瘤性明显降低 ,但细胞生长曲线无明显变化。结论 IGF ⅡR反义基因可以有效阻断IGF Ⅱ至IGF ⅡR的自泌 旁泌生长刺激信号环路 ,一定程度地抑制肝癌细胞的恶性表型。

类风湿关节炎患者可溶性髓样细胞表达的触发因子受体-1的表达及意义

目的 研究可溶性髓样细胞表达的触发因子受体-1（sTREM-1）在类风湿关节炎（RA）患者血清中的表达及其与临床指标的相关性,探讨TREM-1及其sTREM-1在RA发病中的意义.方法 选自2010年10月～2012年10月就诊于邯郸市第一医院风湿免疫科的RA患者80例为RA组,同时选取健康体检者74例为健康对照组.比较两组的关节肿胀数、DAS28评分、血沉（ESR）、类风湿因子（RF）、X线分期差异.结果 RA组血清sTREM-1水平为（3.19±1.28）ng/mL,健康对照组为（2.55±1.41）ng/mL,两组比较差异有统计学意义（t=2.94,P＜0.05）；两组按性别划分的血清sTREM-1水平差异无统计学意义（P＞0.05）；血清sTREM-1和RA患者的关节肿胀数、X线分期、ESR、RF和抗CCP抗体呈正相关,而与病程、年龄、晨僵时间、关节压痛数、超敏CRP和关节功能状态不相关；在RA患者中,稳定期组和活动期组的血清sTREM-1水平差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 sTREM-1与RA患者关节肿胀数、DAS28评分、ES、类RF、X线分期正相关.sTREM-1与RA患者发病年龄、晨僵时间、病程长短、压痛关节数、超敏CRP和关节功能状态无明显关系.病程的不同阶段,血清中sTREM-1水平亦不同.

载脂蛋白E和Ⅱ型髓系细胞受体在脂多糖诱导的小胶质细胞炎症反应中的作用

目的探讨载脂蛋白E(ApoE)、Ⅱ型髓系细胞受体(TREM2)在脂多糖(LPS)诱导的小胶质细胞炎症反应中的作用。方法原代培养野生型小鼠及基因敲除(ApoE-/-、TREM2-/-、ApoE-/-TREM2-/-)小鼠的小胶质细胞。用0 ng/ml、100 ng/ml、500 ng/ml LPS刺激野生型小鼠小胶质细胞,用0 ng/ml、500 ng/ml LPS刺激ApoE-/-小鼠、TREM2-/-小鼠、ApoE-/-TREM2-/-小鼠小胶质细胞。采用RT-PCR及Western blotting法检测ApoE、TREM2 mRNA和蛋白水平;应用RT-PCR检测TNF-α、IL-1βmRNA水平。结果与0 ng/ml LPS组比较,100 ng/ml LPS组及500 ng/ml LPS组野生型小鼠小胶质细胞ApoE、TREM2 mRNA及蛋白水平均明显降低(均P<0.05)。与100 ng/ml LPS组比较,500 ng/ml LPS组野生型小鼠小胶质细胞ApoE、TREM2 mRNA及蛋白水平均明显降低(均P<0.05)。用500 ng/ml LPS刺激后,野生型、ApoE-/-、TREM2-/-、ApoE-/-TREM2-/-小鼠小胶质细胞的TNF-α、IL-1βmRNA水平明显升高(均P<0.05)。ApoE-/-、TREM2-/-、ApoE-/-TREM2-/-小鼠小胶质细胞的TNF-α、IL-1βmRNA水平显著高于野生型小鼠(均P<0.05)。结论 ApoE和TREM2能够协同抑制LPS诱导小胶质细胞的炎症反应,在调节CNS炎症中起着重要作用。这些基因可能与AD的发生密切相关。

炎症相关疾病中髓样细胞表达的激发受体-1研究进展

髓样细胞表达的激发受体-1(triggering receptors expressed by myeloidcells-1,TREM-1)是新近发现的参与单核细胞作用和炎症反应的分子,是自然杀伤细胞受体家族成员,表达于中性粒细胞、成熟单核细胞及巨噬细胞,能增强由Toll样受体(TLR)-2和-4启动的炎症反应,扩大急、慢炎症反应。细菌或真菌感染患者体液中可检测到可溶性TREM-1(sTREM-1),提示其可作为感染的诊断指标;针对TREM-1的靶标治疗是值得深入探讨的抗炎治疗新方法。本文就炎症相关疾病中TREM-1的研究进展作一综述。

髓样细胞表达的激发受体-1与急性胰腺炎的研究进展

髓样细胞表达的激发受体-1(TREM-1)是新近发现的一种在炎性反应的触发及放大过程中具有重要作用的蛋白;TREM-l通过特殊的细胞信号转导途径促进促炎介质的产生、抑制抗炎介质的表达而激活和放大炎症级联反应,因此在脓毒症、急性胰腺炎合并感染等炎症相关性疾病的发病过程中发挥着重要作用。

可溶性髓样细胞触发受体-1对2型糖尿病合并肺部感染早期诊断价值的研究

目的探讨可溶性髓样细胞触发受体-1(sTREM-1)对糖尿病合并肺部感染的早期诊断价值。方法以2008年7月至2013年6月收治的2型糖尿病并发肺部感染患者79例作为肺部感染组,单纯随机选取同期无并发肺部感染的2型糖尿病患者80例作为对照组,检测2组sTREM-1和降钙素原(PCT)水平。结果肺部感染组sTREM-1和PCT水平均明显高于对照组(P<0.01);sTREM-1和PCT在2型糖尿病患者中早期诊断肺部感染的受试者工作特征曲线(ROC曲线)下面积分别为0.932和0.921,sTREM-1的敏感性和特异性分别为92.4%和86.3%,PCT的敏感性和特异性分别为81.0%和85.0%。结论血清sTREM-1和PCT是2型糖尿病合并肺部感染早期诊断的较好指标,具有较高的敏感性和特异性,sTREM-1优于PCT。

Ⅱ型志贺样毒素B亚单位的重组表达及其受体结合活性

目的:在大肠杆菌中重组表达Ⅱ型志贺样毒素B亚单位(Stx2B),并对其表达形式和受体结合活性进行分析。方法:PCR方法从肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7中钓取Stx2B编码基因,利用基因克隆技术构建重组大肠杆菌pET-stx2B/BL21,IPTG诱导目的蛋白高效表达并对表达的包涵体进行变性和复性处理,离子交换层析纯化蛋白。通过SDS-PAGE变性和非变形蛋白电泳,分析重组Stx2B的表达形式,并利用Hela细胞结合模型,评价重组Stx2B与细胞受体的结合活性。结果:构建的重组大肠杆菌pET-stx2B/BL21能高效表达Stx2B,经变性、复性及离子交换层析操作,获得高纯度的目的蛋白。SDS-PAGE变性和非变形蛋白电泳分析显示,重组Stx2B以二聚体形式存在,单体之间通过二硫键相连。细胞结合试验显示,重组Stx2B与Hela细胞具有特异结合活性。结论:成功构建表达Stx2B的基因工程菌,Stx2B的受体结合活性不依赖于五聚体形式。

髓样细胞表达的触发受体-1分子的功能与信号转导机制研究进展

髓样细胞表达的触发受体-1(TREM-1)是新近发现的一种与炎症级联放大密切相关的免疫球蛋白超家族成员,主要表达于中性粒细胞及成熟的单核细胞、巨噬细胞表面。多种细菌性成分以及创伤等能使其表达增加,并能与其位于血小板表面的内源性配体一起激活该受体,从而激发炎症因子、趋化因子的产生及中性粒细胞的脱颗粒、呼吸暴发和吞噬作用。TREM-1分子在脂多糖(LPS)所致的内毒素血症中尤其具有显著放大炎症反应的作用,近年来对其信号转导机制的研究取得了大量新的进展。另外,TREM-1与Toll样受体-4(TLR4)在LPS所致炎症反应的放大中存在协同作用,但具体机制目前还不太明确。血浆中还存在TREM-1的可溶性形式,由金属蛋白酶使膜上TREM-1分子外功能区脱落而形成,可作为炎症性疾病早期诊断和预后判断的新指标。