髓磷脂蛋白零样蛋白1对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨髓磷脂蛋白零样蛋白1(MPZL1)对膀胱癌T24细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法通过siRNA转染敲低膀胱癌T24细胞中MPZL1的表达,构建抑制MPZL1表达的膀胱癌细胞实验模型,将细胞分成si-NC的对照组和si-MPZL1实验组。通过ualcan数据库在线分析MPZL1基因在TCGA数据库膀胱癌患者中表达情况。CCK-8实验和平板克隆实验检测膀胱癌细胞增殖的变化,划痕实验和Transwell实验检测膀胱癌细胞迁移和侵袭的变化。结果MPZL1基因在膀胱癌患者中高表达,且随着临床分期的进展,其表达量呈现上升趋势,MPZL1基因高表达与膀胱癌的生存时间缩短有明显相关性。抑制MPZL1表达可抑制膀胱癌T24细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结论敲低膀胱癌T24细胞中MPZL1表达,可抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

嗅鞘细胞移植后脊髓损伤区髓磷脂相关糖蛋白表达的动态变化

目的:观察嗅鞘细胞移植对脊髓损伤区轴突生长抑制因子髓磷脂相关糖蛋白的影响。方法:实验于2005-08/2006-02在西安交通大学教育部环境与疾病相关基因研究重点实验室完成。①选取成年SD大鼠40只,随机数字表法分为正常组、模型组、DF12对照组、嗅鞘细胞组,10只/组。②除正常组外,其余各组均建立脊髓全横断损伤模型。术后嗅鞘细胞组在距损伤缘上下各1mm处注射原代培养12d的成年大鼠嗅鞘细胞悬液,浓度调整为1×1011L-1,深度均为1.0mm,每处各注射细胞悬液1μL。DF12对照组注射DF12培养液,方法与剂量同上。模型组、正常组均不进行任何移植处理。③分别于移植后1,4,8周采用组织学、行为学方法和免疫印迹技术检测各组动物脊髓损伤区髓磷脂相关糖蛋白表达的变化。结果:实验选取40只SD大鼠均进入结果分析。①组织学检查嗜银染色结果:移植8周后除正常组外,其余各组均可见明显的神经纤维再生,但模型组、DF12对照组大部分纤维排列紊乱如乱发状,明显迂曲;而嗅鞘细胞组新生轴突明显,无论数量还是质量都优于模型组及DF12对照组。②移植后不同时间点各组下肢运动功能检测BBB评分结果的比较:移植1,4,8周,嗅鞘细胞组BBB评分均明显高于模型组、DF12对照组,且移植4,8周时差异有显著性意义[(5.25±1.28),(1.62±1.50),(2.25±1.03)分;(11.5±2.20),(4.37±1.84),(3.75±1.03)分;F=18.090～47.635,P均<0.01]。③髓磷脂相关糖蛋白westernblot检测结果:模型组、DF12对照组、嗅鞘细胞组脊髓损伤后髓磷脂相关糖蛋白的表达明显增强,均明显高于正常组(P<0.05);但嗅鞘细胞组明显低于模型组、DF12对照组(P<0.05)。结论:嗅鞘细胞移植可能通过降低脊髓损伤后损伤区髓磷脂相关糖蛋白的表达,从而促进损伤脊髓的修复。

间断鞘内注射罗哌卡因后大鼠血清髓磷脂碱性蛋白变化与脊髓超微结构改变

目的:观察大鼠不同浓度罗哌卡因间断鞘内注射后血清髓磷脂碱性蛋白(myelinbasicpro-tein,MBP)变化与脊髓超微结构改变。方法:雄性SD大鼠96只,随机分为对照组(N组)和注药组R1,R2,R3,每组24只,每组大鼠又随机分为4个亚组,每个亚组6只。N组经microspinal导管鞘内注入0.9%氯化钠40μL,每间隔1.5h注入1次,共3次。R1,R2,R3注药方式同N组,分别注入0.5%,0.75%,1%罗哌卡因40μL。4组所有大鼠检测的时相为置管前即刻(T0)、第1次注药前即刻(T1),各亚组检测时相分别为最后1次注药后6h(T2),12h(T3),24h(T4)和48h(T5)。6个时相均从股动脉采血约0.5mL,测量MBP含量的变化。每亚组动物在采血后,取腰膨大处1mm×1mm×1mm脊髓,电镜下观察其超微结构改变。结果:N组、R1组、R2组在5个时相中的MBP浓度保持较为稳定,R3组与N组、R1组、R2组之间存在组间差别(P<0.05);跟T0比较,R3组在T2,T3,T4和T5时相测定的MBP浓度明显升高(P<0.01)。R3组同期超微结构变化主要表现大多数神经元固缩,大多数粗面内质网扩张,线粒体及内质网结构模糊,有少数神经元完全变性失去正常的神经元结构,线粒体嵴空泡变性,甚至部分丢失。结论:1%罗哌卡因鞘内注射后脊髓结构出现选择性易损,可能是局麻药神经毒性重要的神经病理学基础之一;MBP测定是一个反映鞘内注射罗哌卡因脊髓应激受损较特异、敏感的监测指标。

不同穴位电针对大鼠脊髓损伤植入脐血干细胞后生长相关蛋白-43、髓磷脂碱性蛋白表达的影响

目的探讨不同电针对大鼠脊髓损伤植入脐血干细胞后生长相关蛋白(GAP)-43、髓磷脂碱性蛋白(MBP)表达的影响。方法将192只清洁级SD大鼠用NYU打击器采用Allen's法制成T10-11段脊髓损伤模型,造模成功后查随机表分为:①A组:运动区头皮表面投影区电刺激组,又分为A1组(电刺激+脐血干细胞移植)和A2组(只进行电刺激);②B组:损伤局部电刺激组,又分为B1组(电刺激+脐血干细胞移植)和B2组(只进行电刺激);③C组:运动区头皮表面投影区电刺激+局部电刺激组,又分为C1组(电刺激+脐血干细胞移植)和C2组(只进行电刺激);④D组:损伤模型组,以分为D1组(移植脐血干细胞不进行电刺激)和D2组(不移植不进行电刺激)。各组分别于1、2、3、4、8、12周时取材,采用生物素葡聚糖胺(BDA)皮质脊髓束顺行示踪,观察损伤区残存或再生的神经纤维的分布情况;通过免疫组织化学荧光染色检测GAP-43、MBP及MAB1281抗人核抗体的阳性表达。结果①NYU是一种用于Allen's法制备大鼠脊髓撞击损伤模型的撞击器,具有可使撞击势能量化的特点,获得的模型稳定、可重复性好、成功率高。②在本组研究各时间点上,电刺激对干细胞移植后微环境中GAP-43、MBP水平均有显著的正向干预作用,均较单纯电刺激有显著的正向协同干预作用,头针加体针的影响大于单纯头针或体针。③在本组研究各时间点上,电刺激对损伤后GAP-43、MBP水平均有显著的正向干预作用,不依赖于是否进行干细胞移植。结论①干细胞移植后,微环境的变化朝有利于神经功能恢复方向发展,说明干细胞移植能促进神经功能恢复以及本研究中干细胞移植成功。②电刺激对干细胞移植后微环境中GAP-43、MBP有显著的正向干预作用;头针加体针的影响优于单纯头针或体针;电刺激对损伤后微环境显著正向干预作用是独立的,不依赖于是否进行干细胞移植;电刺激与干细胞移植对微环境影响有显著的协同作用。

脑缺血-再灌注损伤对大鼠脑组织髓磷脂相关糖蛋白表达的影响

目的探讨脑缺血-再灌注损伤对大鼠脑组织髓磷脂相关糖蛋白(MAG)表达的影响。方法应用线栓法制作大鼠脑缺血-再灌注损伤模型;采用免疫荧光化学和免疫印迹法研究大鼠脑缺血-再灌注损伤后MAG表达的定位和定量的变化。结果脑缺血-再灌注后4 h和24 h大鼠皮质区MAG的表达有增高趋势,但是差异无统计学意义;基底核区MAG的表达4 h即开始升高,但差异亦无统计学意义。缺血组基底核区MAG 24 h的表达与无缺血组比较,差异有统计学意义,(P<0.05)。免疫荧光实验显示,阳性表达在基底核的向质区域,与细胞核的复染发现,主要表达在细胞间。结论大鼠腑缺血再灌注后MAG的表达在皮质区有增加趋势,在基底核区的表达明显增高,24 h缺血组显著高于无缺血组。提示脑缺血-再灌注损伤不仅损伤神经元,其白质也存在损伤,干预白质损伤可能是脑缺血-再灌注损伤新的治疗靶点。

亚洲型和西方型多发性硬化髓磷脂少突胶质细胞糖蛋白微卫星等位基因多态性的比较

目的 :比较亚洲型和西方型髓磷脂少突胶质细胞糖蛋白 (MOG)基因的多态性与比较亚洲型和西方型多发性硬化 (MS)患者。方法 :将 85例MS患者分为亚洲型 (4 0例 )和西方型 (4 5例 ) ,用微卫星法测定其MOG等位基因的多态性 ,并与 87例健康者 (对照组 )相比。结果 :MOG11/ 12等位基因与各型MS无关 (P >0 .0 5 ) ;亚洲型MSMOG5 1/ 5 2的 2 18bp等位基因频率显著高于西方型 ,西方型MS患者 2 18bp等位基因的频率显著低于对照组(P均 <0 .0 0 1) ;西方型MSMOG5 1/ 5 2的 2 2 2bp等位基因频率显著高于亚洲型和对照组 (P <0 .0 0 1～ 0 .0 5 ) ;亚洲型、西方型MS患者MOG5 1/ 5 2的 2 2 6bp等位基因频率均显著高于对照组 (P <0 .0 0 1～ 0 .0 0 5 )。 结论 :亚洲型和西方型是MS不同的临床亚型 ;MOG5 1/ 5 2的 2 2 2bp等位基因与西方型MS相关 ,与亚洲型MS无关 ;MOG5 1/ 5 2的 2 2

髓磷脂碱性蛋白的提纯及其对PBMC产生TNF和IFN的影响

目的 探讨髓磷脂碱性蛋白 (MBP)诱导 EAE产生的可能原因。方法 通过酸抽提和 CM-Sephadex50层析 ,分离提取牛 MBP,观察其致 EAE活性 ,用生物活性法检测 MBP刺激的 PBMC上清中 TNF和 IFN的活性。结果 分离纯化得到电泳 1条主带的 MBP,证明其具有致 EAE活性 ,MBP刺激的 PBMC可产生 TNF和IFN。结论 MBP可通过在外周刺激 PBMC产生炎性因子 TNF和 IFN诱导

髓磷脂碱性蛋白在涎腺腺样囊性癌中的表达

目的:利用免疫组化方法研究雪旺氏细胞标记物髓磷脂碱性蛋白(MBP)在腺样囊性癌中的表达,探讨腺样囊性癌中肌上皮细胞向雪旺氏细胞分化与腺样囊性癌嗜神经侵袭之间的关系。方法:对17例腺样囊性癌标本进行MBP免疫组化染色,利用双重免疫荧光染色及激光共聚焦显微镜技术检测MBP和肌上皮标记物MA在腺样囊性癌中的共表达。结果:17例腺样囊性癌中有6例MBP免疫组化染色呈阳性反应,双重免疫荧光染色发现MBP与MA在同一腺样囊性癌细胞的胞浆中表达。结论:腺样囊性癌中的肌上皮细胞发生了雪旺氏分化,推测这种分化与腺样囊性癌嗜神经侵袭密切相关。

腺病毒介导神经生长因子和髓磷脂相关糖蛋白双基因在受损坐骨神经中的表达

背景:神经生长因子和髓磷脂相关糖蛋白能够促进损伤神经的结构与功能恢复,但目前未见通过转基因技术增加受损周围神经中神经生长因子与髓磷脂相关糖蛋白基因表达的报道。目的:探讨神经生长因子和髓磷脂相关糖蛋白双基因经腺病毒介导在大鼠损伤坐骨神经的共表达效果。方法:将40只SD大鼠随机分为正常对照组、坐骨神经损伤组、空病毒组、神经生长因子组和神经生长因子/髓磷脂相关糖蛋白组。后4组切断并缝合右侧坐骨神经建立坐骨神经损伤模型后,分别肌肉注射生理盐水、生理盐水、空腺病毒(1×108 PFU/次)、携带神经生长因子的腺病毒(1×108 PFU/次)和携带神经生长因子和髓磷脂相关糖蛋白的腺病毒(1×108 PFU/次),每2 d注射1次,连续注射3次。结果与结论:神经生长因子组和神经生长因子/髓磷脂相关糖蛋白组大鼠坐骨神经中神经生长因子表达水平显著高于空病毒组和正常对照组(P<0.05);神经生长因子/髓磷脂相关糖蛋白组大鼠坐骨神经中髓磷脂相关糖蛋白表达水平显著高于空病毒组、神经生长因子组和正常对照组(P<0.05)。提示腺病毒介导的神经生长因子/髓磷脂相关糖蛋白双基因可有效表达于大鼠损伤坐骨神经。

口服髓磷脂碱性蛋白治疗实验性自身免疫性神经炎的临床及神经病理观察

摘 要：目的 探讨口服髓磷脂碱性蛋白（MBP）治疗实验性自身免疫性神经炎（EAN）的效果。方法 应用牛周围神经 MBP免疫豚鼠建立 EAN动物模型。应用国际分级标准和临床评分对发病豚鼠进行临床评定；对 EAN豚鼠坐骨神经进行常规病理、免疫组化、半薄切片的光镜及电镜观察；剥离单神经纤维，评定其脱髓复髓情况。结果用 MBP建立豚鼠 EAN模型其发病率为 87．5％，免疫诱导的 12～16d出现典型瘫痪症状，高峰期在 14～21d，以后进入恢复阶段。发病高峰期坐骨神经病理为小血管周围大量的淋巴细胞、巨噬细胞浸润，神经纤维肿胀、变性，髓鞘脱失；恢复期神经组织内浸润的细胞明显减少，神经纤维肿胀、脱髓的现象明显减轻，施万细胞明显增生。在发病高峰时开始治疗，口服MBP和腹腔注射静脉用丙种球蛋白（IVIG）治疗均促使豚鼠临床得分提前下降，坐骨神经病理在21d时表现为浸润的淋巴细胞减少，肌髓鞘纤维减少，复髓纤维增多。结论 MBP口服治疗EAN，明显地促进其临床和病理提前恢复，其机制可能是大剂量MBP口服诱导机体免疫耐受的结果。

急性坏死性胰腺炎大鼠脑脊液髓磷脂碱性蛋白水平变化的初步研究

目的:研究急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠24h内脑脊液髓磷脂碱性蛋白(MBP)水平的动态变化。方法:应用5%和1%的牛磺胆酸钠分别诱导ANP和急性水肿性胰腺炎(AEP)大鼠模型,同时设立假手术对照组。分别于模型诱发后3、6、9、12及24h,经大鼠小脑延髓池抽取脑脊液。以酶联免疫吸附(ELISA)法测定标本中的MBP含量。结果:诱发ANP后3h,脑脊液MBP水平明显高于AEP组和假手术组(P<0.01);6h和9h时仍维持于较高水平(P<0.05),12h开始缓慢降低。而AEP组和假手术组的MBP水平无明显变化,在24h内维持于较低水平。结论:ANP大鼠早期时脑脊液MBP水平已异常升高,提示脑组织髓鞘结构已有损害。检测脑脊液MBP水平变化对临床胰腺炎病人并发脑功能障碍的诊断和预后评估具有重要意义。

髓磷脂蛋白活化淋巴细胞对神经元的攻击作用及其亚型特点

目的:观察髓磷脂蛋白活化的淋巴细胞对神经元的直接攻击作用并进一步鉴别攻击神经元的淋巴细胞类型。方法:实验于2006-02/04在解放军第四军医大学唐都医院神经内科形态学实验室完成。将髓磷脂蛋白肽段活化的反应性淋巴细胞与人脑神经元混和培养,用扫描电镜和荧光显微镜观察淋巴细胞对神经元的攻击作用,并确定对神经元起攻击作用的淋巴细胞的亚型。结果:由髓磷脂蛋白活化的淋巴细胞对神经元有明显的黏附和攻击作用,可使神经元的细胞膜和髓鞘产生损伤,导致神经元变性。CD4+T细胞,CD8+T细胞和NK等细胞共同参与了对神经元及髓鞘的损伤过程。结论:髓磷脂蛋白活化的CD4+T细胞,CD8+T细胞和NK细胞等淋巴细胞对神经元有直接攻击作用,这种直接作用可能是多发性硬化症早期的发病机制之一。

髓磷脂相关糖蛋白对周围神经影响的研究进展

髓磷脂相关糖蛋白(myelin associated glycoprotein,MAG)是一种定位于髓鞘轴突旁的施万细胞和少突胶质细胞上的跨膜糖蛋白,并在胶质和轴突之间发挥作用。它属于免疫球蛋白超家族中的唾液酸亚群,包含着5个免疫球蛋白样区域。MAG分为大、小两个亚型,这两个亚型在髓鞘形成和维持的不同阶段有着不同的表达。MAG的信号转导通路发生在髓鞘形成的少突胶质细胞或施万细胞以及有髓鞘轴突的轴浆中。它是一个双功能蛋白,对大多数神经元有抑制作用而对发育早期的背根神经节神经元有促进作用,即在神经发育的不同时期发挥不同的作用。随着对MAG研究的不断深入,通过调节其信号转导通路来促进神经再生成为这个领域研究的一个重点。

脊髓损伤后髓磷脂抑制分子及作用机制的研究进展

脊髓损伤(SCI)常导致损伤平面以下运动、感觉以及括约肌永久性功能障碍。尽管国内外学者对此进行了不懈的探索,但是如何治愈SCI迄今仍是一全球性的医学难题。脊髓损伤后轴突不能再生的主要原因包括髓磷脂相关抑制分子的存在、含抑制分子的胶质瘢痕形成、硫酸软骨素蛋白多糖等。其中,髓磷脂相关神经生长抑制因子对中枢神经再生抑制起着关键作用,其相关抑制因子主要包括三种髓磷脂源性生长抑制蛋白:髓磷脂相关糖蛋白、少突胶质细胞髓磷脂糖蛋白、Nogo-A。所有这些生长抑制因子都结合共同抑制蛋白受体—Nogo-66(NgR)受体复合体,激活远端的Rho信号途径。激活Rho与其下游的效应器蛋白-Rho蛋白激酶Ⅱ(ROCKⅡ),激活的ROCKⅡ作用于多种蛋白质底物而产生级联瀑布信号传递,调节生长锥内细胞骨架的重组,改变神经的生长方向,影响肌球蛋白的收缩等,引起轴突生长锥的回缩及塌陷,介导脊髓损伤后轴突的再生抑制。本文简要综述SCI后几类髓磷脂相关抑制分子及其通过Rho-ROCKⅡ信号途径传递及机制的研究进展。

髓磷脂碱性蛋白促进单个核细胞对内皮细胞的粘附效应

目的 :探讨MBP对外周血单个核细胞 (PBMNC)与人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)粘附性的影响 ,以揭示中枢神经系统 (CNS)炎症时PBMNC进入CNS的可能原因。方法 :用细胞粘附试验 ,研究PBMNC与HUVEC的粘附性 ,用细胞免疫化学法、FACS分别观察VCAM 1和ICAM 1的表达。结果 :MBP活化的PBMNC与MBP刺激的PBMNC培养上清作用的HUVEC的粘附性较对照有显著提高。ICAM 1单抗和可溶性VCAM 1(sVCAM 1)可抑制二者间的粘附。进一步证明该上清可诱导HUVEC表达VCAM 1并可提高ICAM 1的表达量 ,MBP可刺激PBMNC产生TNF ,后者刺激HUVEC产生ICAM 1和VCAM 1,从而促进PBMNC与HUVEC的粘附。结论 :MBP可促进PBMNC与HUVEC的粘附 ,因此在CNS炎症时MBP对PBMNC进入CNS可能起重要作用。

髓磷脂相关抑制因子与脊髓损伤后轴突再生抑制的研究进展

发生损伤的脊髓内，大量神经元、神经胶质细胞因直接的机械损伤出现凋亡、坏死，继发性损伤则导致轴突受损和少突胶质细胞的凋亡、坏死，促使包绕轴突的髓鞘结构破坏严重，大量难以清除的髓磷脂相关抑制因子（Myelin-associated inhibitors）则在较长的时间内通过神经元表面受体的介导而抑制轴突的再生[1]。随着研究的深入，关于髓磷脂抑制性因子导致脊髓损伤后轴突再生抑制的机制已逐渐清晰，针对性的干预措施亦在动物模型和临床研究中逐步开展。作者就髓磷脂相关抑制性因子研究的进展、干预效果和研究趋势综述如下。

血清髓磷脂碱性蛋白、缺氧诱导因子-1α及S100B对脑损伤早产儿病情及预后的评估价值

目的探讨血清髓磷脂碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)、缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor,HIF-1α)及S100B对脑损伤早产儿病情及预后的评估价值。方法回顾分析2018年1月至2021年1月青海红十字医院收治的213例早产儿临床资料,依据颅脑磁共振成像和超声检查结果分为脑损伤组(74例)和无损伤组(139例)。同时将脑损伤患儿中45例轻度损伤患儿设为轻度损伤组,将29例重度损伤患儿设为重度损伤组;将脑损伤患儿中13例经治疗后预后不良患儿设为预后不良组,将61例预后良好患儿设为预后良好组。对比患儿血清MBP、HIF-1α及S100B水平差异,观察各指标与新生儿神经行为评定评分的相关性,分析MBP、HIF-1α及S100B对脑损伤早产儿预后的评估价值。结果脑损伤组血清MBP、HIF-1α及S100B水平明显高于无损伤组(P<0.05),且重度损伤组各指标水平又高于轻度损伤组(P<0.05)。脑损伤患儿血清MBP、HIF-1α、S100B水平与新生儿神经行为评定评分呈显著负相关(P<0.05)。预后不良组血清MBP、HIF-1α及S100B水平明显高于预后良好组(P<0.05)。血清MBP、HIF-1α及S100B对脑损伤患儿预后评估的ROC曲线下面积为0.841、0.792、0.817,诊断敏感度为84.6%、76.9%、76.9%,特异度为82.0%、73.8%、80.3%。结论血清MBP、HIF-1α及S100B水平对脑损伤早产儿病情密切相关,可作为评估脑损伤预后的参考指标。

中枢神经系统髓磷脂抑制信号传导机制研究进展

大量研究表明中枢神经损伤后早期轴突再生失败的主要原因是髓磷脂抑制因子的存在。目前在中枢神经系统(central nervous system,CNS)中,已知的抑制因子有勿动蛋白Nogo、髓鞘相关糖蛋白(myelin-associated glycoprotein,MAG)和少突胶质细胞髓鞘糖蛋白(oligodendrocyte-myelin glycoprotein,OMgP)。本文主要就这些因子所介导的中枢神经再生抑制信号的传导机制作一综述,以期为在分子水平阻断轴突再生抑制因素的治疗提供确切的干预靶点。

髓磷脂相关性轴突生长抑制因子与中枢神经再生

中枢神经系统(CNS)损伤后的再生情况一直是人们比较关注的问题,近几年来,随着髓磷脂(Nogo)等的发现,人们越来越认识到中枢神经髓磷脂中的一些成分在轴突再生中发挥着重要的抑制作用,笔者将与髓磷脂相关的几种轴突生长抑制因子(Nogo,MAG,OMgp,NgR)以及它们对中枢神经轴突再生的抑制作用的研究进展情况作如下综述。