RNA结合蛋白RBPMS调控急性髓系白血病细胞系THP-1增殖与迁移

目的研究具有多重剪接功能的RNA结合蛋白(RBPMS)对携带MLL-AF9融合基因的急性髓系白血病细胞系THP-1功能的影响。方法使用GEO数据库分析造血系统中RBPMS的表达情况;通过慢病毒感染THP-1细胞,RT-qPCR和Western blot检测RBPMS过表达效率;通过高通量测序检测RBPMS过表达后对THP-1细胞转录组的影响。分别用CCK-8法和流式细胞仪检测RBPMS过表达对白血病细胞增殖以及迁移能力的影响。结果RBPMS在携带MLL-AF9融合基因的急性髓系白血病干细胞中异常低表达。RBPMS过表达后THP-1细胞的增殖和迁移能力显著降低(P<0.0001,P<0.05)。结论RBPMS可以抑制携带MLL-AF9融合基因的急性髓系白血病细胞系的细胞增殖与迁移。

c-myc反义寡脱氧核苷酸诱导人髓系白血病细胞系HL-60细胞凋亡

为研究c myc硫代反义寡脱氧核苷酸对白血病细胞系HL 60诱导细胞凋亡的作用 ,将人工合成的长度分别为 18mer和 15mer的硫代反义寡脱氧核苷酸 (AspoⅠ和AspoⅡ )转染HL 60细胞 ,用流式细胞术检测c Myc蛋白及DNA倍体分析 ,RT PCR检测c mycmRNA水平 ,电镜观察凋亡细胞的超微结构 ,琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA降解片段。研究结果发现 ,经AspoⅠ 5 μmol L和 10 μmol L作用后c Myc蛋白分别降低 2 3.8%和 4 5 .4 % ,经AspoⅡ 10 μmol L作用后下降38.4 % ,RT PCR显示AspoⅠ和AspoⅡ组c mycmRNA表达明显减少。DNA倍体分析AspoⅠ 10μmol L作用 4 8和 72小时细胞凋亡率分别为 2 3.97%和 5 2 .6% ;AspoⅡ 10 μmol L作用 4 8和 72小时后细胞凋亡率分别为 2 8.8%和 4 5 .19% ;而空白对照和正义寡脱氧核苷酸组均未出现凋亡细胞。电镜观察两个反义寡脱氧核苷酸 10 μmol L作用后均出现细胞固缩 ,染色质边集 ,胞浆浓缩等凋亡细胞的改变。反义寡脱氧核苷酸 10 μmol L作用 4 8小时后均出现典型的DNA降解片段。本研究结果说明 ,c myc反义寡脱氧核苷酸是高特异性的基因药物 ,对HL 60细胞抑制c mycmRNA的表达 ,减少c Myc蛋白合成 ,并诱导HL

髓系白血病细胞系HLA-Ⅱ基因型的探讨

目的检测髓系白血病细胞系HLA-Ⅱ基因型。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术对4种髓系白血病细胞系(U937、K562、HEL、MEG)的HLA-Ⅱ基因型进行DNA分型。结果该4种白血病细胞系的HLA-Ⅱ基因型分别是,U937细胞:DRB1*0301/*0301,DQB1*0201/*0201,DPB1*0402/*0402;K562细胞:DRB1*0301/*0301,DQB1*0201/*0201,DPB1*0402/*0402;HEL细胞:DRB1*1302/*1302,DQB1*0201/*0201,DPB1*1401/*1401;MEG细胞:DRB1*1406/*0410,DQB1*0401/*0401,DPB1*0501/*0501。结论该4种细胞系虽然来源于不同个体,但均属于髓系肿瘤细胞,国际FAB分类均属于急性髓系白血病细胞。然而,分子免疫遗传学类型有所差异。通过本研究提高了髓系白血病细胞系HLA-Ⅱ基因型认识,对今后髓系白血病分子免疫遗传学的研究,提供了初步资料。

姜黄素诱导髓系白血病细胞凋亡的分子途径

目的研究姜黄素诱导白血病细胞系NB4、K562、THP-1凋亡的分子途径。方法培养上述3种细胞系,用不同浓度的姜黄素(25,12.5,6.25,3.125,0μmol/L)作用24 h和25μmol/L姜黄素作用不同时间(0,12,24,48 h),流式细胞仪测定细胞凋亡率及Fas抗原(CD95)表达,Western blot测定凋亡蛋白Caspase-8、Caspase-9的表达变化。结果①姜黄素以时间和浓度依赖的方式诱导白血病细胞系NB4、K562、THP-1凋亡,25μmol/L姜黄素作用48 h凋亡细胞超过50%。②25μmol/L姜黄素作用24 h后Fas抗原表达明显升高(P<0.01)。③25μmol/L姜黄素作用24 h后凋亡蛋白Caspase-8、Caspase-9的表达明显增高(P<0.01)。结论姜黄素诱导白血病细胞凋亡涉及死亡受体参与的外源性途径和线粒体参与的内源性凋亡途径。

二甲双胍抑制急性髓系白血病细胞增殖

目的探讨降糖药物二甲双胍对人急性髓系白血病细胞系U937细胞增殖的作用。方法将浓度梯度的二甲双胍(0、5、10、20、40、60 mmol·L^(-1))分别作用于U937细胞24、48 h,采用CCK-8试剂盒检测U937细胞活力,Annexin-V/PI assay试剂盒检测U937细胞凋亡率,JC-1检测U937细胞线粒体膜电位下降水平。同时基于细胞活力试验检测结果,将上述浓度梯度的二甲双胍分别作用于U937细胞48 h,采用Western blot检测Bcl-2蛋白表达水平。结果二甲双胍作用24 h对U937细胞增殖抑制作用较弱、无明显杀伤作用;作用48 h对U937细胞有抑制细胞生长、促进凋亡、降低线粒体膜电位作用,同时显著降低U937细胞Bcl-2蛋白水平。结论二甲双胍可杀伤人急性髓系白血病细胞系U937细胞。二甲双胍抗白血病作用可能与其下调线粒体膜电位、抑制Bcl-2蛋白表达有关。

复方中药制剂对急性髓系白血病细胞诱导分化与增殖的作用

目的:研究复方中药制剂对白血病细胞的作用及其机制。方法:用复方中药制剂处理体外培养的髓系白血病细胞株,用CCK8的方法观察中药制剂对白血病细胞增殖的影响,瑞氏染色法观察细胞形态学的变化,流式细胞术检测细胞凋亡并测定细胞表面分化抗原CD11b的表达水平。结果:与单纯的4种白血病细胞系HL-60,MOLM-13,MV4-11,AML-M5相比较,不同中药浓度处理的这4种白血病细胞增殖能力减弱(P<0.05)且其增殖抑制作用呈剂量依赖性(r=0.9236;r=0.7488;r=0.8889;r=0.8119);与单纯的HL-60和AML-M5白血病细胞系相比,药物处理的这2种白血病细胞有明显的分化形态改变;与单纯的HL-60白血病细胞系相比,IC50中药浓度处理的HL-60细胞表面抗原CD11B增加85%±7.13%;与单纯的AML-M5白血病细胞系相比,1.5μl和2μl剂量中药制剂处理的AML-M5细胞的凋亡率增加(P <0.05)。结论:复方中药制剂对白血病细胞具有抑制增值作用,其机制可能与诱导白血病细胞分化和凋亡作用相关。

汉黄芩苷或可治疗急性髓系白血病

中国药科大学药学院郭青龙教授带领的科研团队发现,中药黄芩的有效单体成分——汉黄芩苷,能抑制急性髓系白血病的细胞增殖,相关研究论文近日发表在国际杂志《血液》上。汉黄芩苷是从中药黄芩中提取的单体成分,是具有自主知识产权的国家抗肿瘤一类新药汉黄芩素的主要代谢产物之一。中国药科大学科研团队针对急性髓系白血病细胞系和来自患者的急性髓系白血病细胞展开了研究，发现汉黄芩苷在体外和体内都表现出了抗细胞增殖的特性，

维甲酸诱导HL-60细胞分化与细胞周期的关系

研究全反式维甲酸 (RA)在体外诱导人髓系白血病细胞系 (HL 60 )分化过程中细胞周期的改变。利用流式细胞术动态测定RA在体外诱导HL 60细胞分化过程中细胞周期的改变。结果发现 :①在RA与HL 60细胞共培养 4 8小时内 ,S +G2 /M期比例无明显变化 ,但S期细胞的比例改变与RA的浓度有关 ,在 10 - 6 mol/LRA浓度S期细胞比例先出现一过性升高 ,继而持续下降 ,在 10 - 5mol/L浓度S期细胞比例表现为持续性下降 ;②重培养试验证明 :S +G2 /M和S期细胞比例的下降与成熟分化细胞的增加相一致 ;③RA诱导HL 60细胞成熟分化并不是在一个时间点上同时进入分化状态 ,而一旦细胞开始进入成熟分化 ,即使在无RA存在的情况下 ,细胞仍能分化至成熟。结论提示 :RA与HL 60细胞必须相互作用一定时间后才能触发细胞成熟分化 ,S期细胞的比例改变与RA药物浓度有关 ,一旦细胞开始进入成熟分化 ,即使在无RA存在的情况下 。

二甲基亚砜诱导HL-60细胞分化的比较蛋白质组学研究

不同的诱导分化剂可诱导急性髓系白血病细胞系HL-60细胞向不同谱系的细胞分化。二甲基亚砜（DMSO）由于其溶解极性和非极性化合物能力极强而被广泛用作溶剂。