髓系细胞触发受体2及其信号通路在恶性肿瘤中作用的研究进展

髓系细胞触发受体2(triggering receptors expressed on myeloid cells,TREM2)属于免疫球蛋白超家族成员,是一种跨膜受体,主要在髓系细胞和小胶质细胞中表达。TREM2与相应配体结合后,通过胞内接头蛋白DAP12/DAP10激活下游信号通路,起到重要的免疫信号传递作用。TREM2参与调节多种生物学过程,包括细胞吞噬、炎症反应和代谢过程等,在多种疾病的发生发展中发挥重要作用。近年研究表明,TREM2在恶性肿瘤的发生和发展过程中扮演重要角色。除了调控肿瘤细胞自身的生物学行为外,TREM2还能够调节肿瘤微环境内免疫细胞的活性和功能,参与抑制性免疫微环境的形成。本文着重概述TREM2对不同类型恶性肿瘤的调控作用,并对未来TREM2的靶向治疗相关研究进行展望,旨在为肿瘤防治领域的研究提供新的思路和观点。

髓系细胞触发受体2在高糖处理的小胶质细胞中的表达及作用

目的 探索高糖条件下小胶质细胞中髓系细胞触发受体2(triggering receptor expressed on myeloid cells 2, TREM2)的表达情况,以及TREM2在高糖条件下小胶质细胞增殖、迁移和吞噬中的作用。方法 小胶质细胞分为对照组、高糖处理组(67.5 mmol/L葡萄糖,24 h),检测小胶质细胞数量、Iba1和TREM2的表达水平;转染TREM2的siRNA,检测小胶质细胞增殖和迁移能力的变化;加入带有荧光标签的淀粉样蛋白β(Aβ),观察小胶质细胞对Aβ吞噬能力的影响。结果 与正常小胶质细胞相比,高糖处理后小胶质细胞的数量明显下降(P<0.001),而TREM2和Iba1表达显著升高(P<0.001)。高糖和TREM2均不影响小胶质细胞的增殖能力。与正常组相比,高糖处理后小胶质细胞迁移能力下降(P<0.05),而TREM2对高糖小胶质细胞的迁移能力无显著影响。与正常小胶质细胞相比,高糖处理组小胶质细胞对Aβ的吞噬能力显著下降(P<0.001),TREM2 siRNA敲减后高糖小胶质细胞对Aβ的吞噬能力进一步下降(P<0.001)。结论 高糖处理后小胶质细胞TREM2表达明显升高,其主要影响小胶质细胞对Aβ的吞噬能力。

髓系细胞触发受体2在缺氧缺血性脑室周围白质软化新生大鼠中的表达及对少突胶质细胞髓鞘化的影响

目的 探讨髓系细胞触发受体2(TREM2)在缺血缺氧性脑室周围白质软化(PVL)新生大鼠中的表达及其对少突胶质细胞髓鞘化的影响。方法 28只SD新生大鼠随机分为假手术组及模型组,每组14只。模型组大鼠行双侧颈总动脉结扎术,术后置于缺氧箱中构建缺血缺氧PVL模型,假手术组仅进行颈动脉分离术。分别于建模后3 d、7 d采用HE染色观察大鼠脑组织形态学变化,透射电镜观察脑部胼胝体少突胶质细胞形态学变化及髓鞘超微结构,ELISA法测定大鼠脑组织TNF-α、IL-1β水平,Western blotting法检测大鼠脑组织TREM2、髓鞘碱性蛋白(MBP)表达情况,PCR法检测大鼠脑组织TREM2、MBP mRNA表达情况。结果 假手术组大鼠生长发育状态良好,肤色正常,脑组织形态结构正常,少突胶质细胞结构完整、数量较多且排列紧密而均匀;与假手术组相比,模型组大鼠肤色苍白,发育迟缓,大鼠脑室周围白质细胞形态变形,白质纤维结构紊乱、坏死、软灶化,少突胶质细胞形态不完整、数量显著减少,出现髓鞘变薄、分布稀疏等现象。模型组大鼠脑组织TNF-α、IL-1β、TREM2蛋白及mRNA、MBP蛋白及mRNA表达水平均随时间的延长而上升(均P<0.05)。与假手术组相比,模型组大鼠造模后7 d脑组织TNF-α、IL-1β表达水平显著升高,TREM2蛋白及mRNA、MBP蛋白及mRNA表达水平显著降低(均P<0.05)。结论 缺氧缺血性PVL新生大鼠脑组织中TREM2呈现低表达,可能与少突胶质细胞发生髓鞘化障碍存在某种关联。

可溶性2型髓系细胞触发受体对老年自发性脑出血患者血肿早期扩大的评估价值

目的 探讨基线血浆可溶性2型髓系细胞触发受体(sTREM2)对老年自发性脑出血患者血肿早期扩大的评估价值。方法 回顾性分析2020年1月至2022年8月唐山工人医院神经外二科收治的急性自发性脑出血患者240例,根据血肿体积扩大情况分为血肿无扩大组172例和血肿扩大组68例。所有患者于发病24 h内行基线头颅CT平扫,分析临床资料及影像学资料,计算脑血肿体积;并于入院后立刻采集血液,测定sTREM2、半乳糖凝集素3(galectin-3)水平。结果 与血肿无扩大组比较,血肿扩大组入院时脑血肿体积、sTREM2、galectin-3、高敏C反应蛋白、肿瘤坏死因子α水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。Pearson相关性分析显示,入院时血浆sTREM2、galectin-3水平与脑血肿呈正相关(r=0.784,P=0.012;r=0.815,P=0.004)。ROC曲线分析显示,血浆sTREM2+galectin-3联合检测的敏感性明显高于sTREM2、galectin-3单独检测(85.59%vs 73.73%、64.41%,P<0.05),曲线下面积为0.896(95%CI:0.741~0.932)。结论 老年自发性脑出血患者发生血肿早期扩大后,基线血浆sTREM2水平显著升高,可作为血肿早期扩大的风险标志物,且其与galectin-3联合检测具有较高的诊断价值。

生物信息学分析髓系细胞触发受体-2对低级别胶质瘤的影响

目的通过生物信息学手段探究髓系细胞触发受体-2(TREM-2)在低级别胶质瘤(LGG)中的表达情况及对患者生存率的影响,为LGG的早期发现、早期诊断及治疗提供潜在的靶点。方法运用在线网站GEPIA2和UALCAN分析TREM-2在LGG肿瘤组织和正常组织中的表达差异;与年龄、性别、种族、肿瘤分级等临床病理特征之间的关系;以及TREM-2的LGG肿瘤组织中的异常表达对LGG患者总体生存率的影响。DAVID6.8软件对TREM-2相关基因进行KEGG通路富集分析;使用TIMER数据库分析TREM-2表达与肿瘤纯度和免疫细胞浸润程度之间的相关性。结果与正常组织相比,TREM-2在LGG肿瘤组织中的表达较正常组明显升高(P<0.05),并且与肿瘤分级和组织学分型相关(P<0.001),而与患者的年龄、性别及种族不相关(P>0.05),生存分析表明TREM-2与LGG预后密切相关,LGG表达越高,患者的总体生存率越低(P=0.00025和P=0.0029),同时无病生存率也降低(P=0.015);通路富集结果表明与TREM-2正相关基因通路主要涉及结核、癌症通路、吞噬体等,负相关基因通路主要涉及MAPK信号通路、神经活性配体-受体相互作用等;TREM-2的表达与肿瘤微环境中6种免疫细胞的浸润水平呈正相关。结论TREM-2在LGG肿瘤组织中表达明显升高,并且与患者生存率相关,是LGG诊断和治疗的潜在靶点。

髓系细胞触发受体2基因与肺腺癌免疫微环境及化疗耐药的关系分析

目的基于生物信息学研究髓系细胞触发受体2(TREM2)基因与肺腺癌(LUAD)免疫微环境及化疗耐药的关系并对免疫治疗进行预测。方法通过癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析TREM2基因在泛癌组织与正常组织的表达差异,用基因集富集分析研究TREM2基因可能富集的相关通路,用Cibersoft反卷积算法估算TREM2基因表达情况与肿瘤微环境免疫细胞浸润的关系,分析TREM2基因表达与化疗药物敏感性关系,并对LUAD患者免疫治疗进行预测。用Kaplan-Meier分析TREM2基因对患者预后的影响。结果TREM2在大多数肿瘤组织和正常组织的表达均存在统计学差异,且在LUAD组织中的表达要低于正常组织。TREM2对炎症反应、干扰素α反应、白介素6/非受体型酪氨酸蛋白激酶等通路有一定激活作用。免疫浸润显示:M2型巨噬细胞、未活化树突状细胞与TREM2表达呈一定的正相关性,初始B细胞、浆细胞、滤泡辅助性T细胞等与TREM2表达呈一定的负相关性。根据对TREM2的表达将LUAD队列分为高低表达组后,结果发现,对于初始B细胞、记忆性B细胞、浆细胞、单核细胞、M2巨噬细胞等细胞的免疫浸润均存在统计学差异(均P<0.05)。对于厄洛替尼、吉非替尼、紫杉醇和依托泊苷等化疗药物,低表达TREM2的LUAD患者可能对上述药物产生耐药且不能从免疫检查点治疗中获益,因而患者预后相对较差。结论TREM2与LUAD患者良好预后及免疫治疗相关,有望成为判断预后的潜在标志物及未来LUAD临床免疫治疗中有意义的靶点。

髓系细胞触发受体在肺泡巨噬细胞上的表达

目的研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM)后,在不同的时间点髓系细胞触发受体1(triggering receptors expressed on myeloid cells1,TREM1)、髓系细胞触发受体2(TREM2)蛋白的表达情况,并探讨其在AM介导的炎症反应中的作用及机制。方法体外培养肺泡巨噬细胞,分为正常对照组和LPS干预组。对照组不予处理,干预组给予100ng/ml LPS。之后对照组在0h,LPS干预组分别在3h,6h,12h,24h用ELISA检测AM培养上清液中TNF-α表达水平,流式细胞术检测上述不同时间点TREM1,TREM2蛋白的表达水平。结果LPS干预AM后,TNF-α的表达在3h达到最高[(36.58±2.14)pg/ml],之后下降,24h时接近正常。TREM1的表达在3h上升到最高(113.19±10.14),之后下降,24h时接近正常。TREM2的表达3h下降到最低(119.74±2.58)。TREM1与TNF-α的表达高度正相关(r=0.825,P<0.001);TREM2与TNF-α的表达高度负相关(r=-0.779,P<0.001)。结论TREM1,TREM2可能在LPS致AM介导的炎症反应中起重要作用。

TREM2依赖性小胶质细胞功能对于髓鞘再生及其神经保护至关重要

多发性硬化症(MS)的残疾在一定程度上是由髓鞘再生失败和进行性神经变性引起的。小胶质细胞和髓系细胞触发受体2(TREM2)(一种在小胶质细胞中高度表达的因子)已被证明在髓鞘再生中发挥重要作用。本研究使用大脑局灶性脱髓鞘模型,证明脱髓鞘在TREM2敲除小鼠中持续存在;脱髓鞘在注射溶血卵磷脂后持续超过6周,并导致严重的神经变性。我们还发现TREM2敲除小鼠在脱髓鞘后表现出神经胶质反应的改变。TREM2敲除小胶质细胞表现出迁移和吞噬髓磷脂碎片的缺陷。此外,来自携带人类疾病中普遍存在的TREM2突变的受试者的人类单核细胞衍生的巨噬细胞也显示出髓磷脂碎片吞噬作用的缺陷。综上所述,我们强调了TREM2信号在髓鞘再生和神经保护中的核心作用。这些发现揭示了慢性脱髓鞘如何导致轴突损伤,并有助于确定多发性硬化症的新型神经保护治疗靶点。

温肾通督方促进小鼠脊髓损伤的修复

背景:前期研究证实,温肾通督方可通过抑制脾脏B细胞焦亡、促进微血管内皮细胞吞噬髓鞘碎片、影响小胶质细胞迁移和浸润、促进受损神经元恢复、降低脊髓损伤后神经元凋亡等促进脊髓损伤恢复,但其机制尚不明确。目的:探讨温肾通督方对脊髓损伤小鼠髓系细胞触发受体2(triggering receptor expressed on myeloid cells 2,TREM2)及PI3K/Akt信号通路的影响。方法:取36只C57BL/6小鼠,采用随机数字表法分为假手术组、模型组、温肾通督方组,每组12只。模型组与温肾通督方组采用改良Allen’s法制备小鼠T10脊髓损伤模型,造模后第1天,温肾通督方组灌胃给予温肾通督方,假手术组、模型组灌胃给予生理盐水,每天1次,连续给药28 d。给药期间,通过BMS评分和斜板实验评价各组小鼠运动功能;造模后第7,28天,采用苏木精-伊红染色观察各组小鼠脊髓组织病理变化,免疫荧光染色双标法检测脊髓组织离子化钙结合适配分子1(ionized calcium binding adaptor molecule 1,IBA1)、TREM2蛋白表达,Western blot检测脊髓组织TREM2、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、Bcl2、Bax、Caspase3蛋白表达。结果与结论:①BMS评分和斜板实验结果表明,脊髓损伤造模后小鼠后肢运动功能下降,而经过温肾通督方治疗后,脊髓损伤小鼠后肢运动功能明显提升。②苏木精-伊红染色结果显示,与模型组比较,温肾通督方小鼠脊髓组织病理结构明显改善,表现为背侧白质和神经元萎缩程度、细胞质空泡化降低及炎性细胞浸润减少等。③免疫荧光染色结果显示,造模后第7天,模型组IBA1、TREM2蛋白表达均低于假手术组(P<0.05),温肾通督方组IBA1、TREM2蛋白表达均高于模型组(P<0.05);造模后第28天,模型组TREM2蛋白表达低于假手术组(P<0.05),温肾通督方组小鼠脊髓组织中的TREM2蛋白表达高于模型组(P<0.05)。④Western blot检测结果表明,造模后第7天,与假手术组相比,模型组TREM2、Akt蛋白表达及Bcl2/Bax比值降低(P<0.05),p-Akt、Bax蛋白表达及p-Akt/Akt比值升高(P<0.05);与模型组相比,温肾通督方组TREM2、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、Bcl2蛋白表达及p-PI3K/PI3K、p-Akt/Ak、Bcl2/Bax比值升高(P<0.05),Bax、Caspase3蛋白表达降低(P<0.05)。造模后第28天,与假手术组相比,模型组TREM2、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、Bcl2蛋白表达及Bcl2/Bax比值降低(P<0.05),Bax蛋白表达升高(P<0.05);与模型组相比,温肾通督方组TREM2、PI3K、Akt、p-Akt、Bcl2蛋白表达及Bcl2/Bax比值升高(P<0.05),Bax蛋白表达降低(P<0.05)。⑤结果表明,温肾通督方可能通过上调小胶质细胞TREM2激活PI3K/Akt信号通路,抑制神经元凋亡发挥神经保护作用,进而促进脊髓损伤的修复。

抗TREM2抗体的制备及生物学活性的初步研究

目的制备抗髓系细胞触发受体2(TREM2)抗体并初步探究其生物学活性。方法采用杂交瘤筛选的方法,获得稳定分泌抗TREM2抗体的杂交瘤细胞株,并对杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体进行筛选,选择结合效果最佳的单克隆抗体进行人源化改造得到嵌合抗体;对嵌合抗体进行进一步的人源化改造,采用酶联免疫吸附法(ELISA)及流式细胞术(FACS)检测人源化抗体的抗原抗体结合活性;采用生物膜干涉技术(BLI)检测人源化抗体与人TREM2结合动力学;通过基于报告基因的抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)生物学活性测定方法,检测人源化抗体的依赖细胞介导的细胞毒效应;使用免疫缺陷小鼠对人源化抗体进行体内药效实验。结果利用杂交瘤技术成功筛选到稳定表达抗TREM2抗体的杂交瘤细胞株,对杂交瘤细胞株进行进一步人源化改造,获得纯度高于95%的人源化抗体h7B6-11,抗体h7B6-11与TREM2-His蛋白具有高度亲和性,且对293T-TREM2细胞的ADCC活性明显强于对照抗体。体内药效实验结果显示,h7B6-11与程序性死亡受体1(PD1)抗体联合用药抑制肿瘤生长效果明显。结论抗体h7B6-11具有高度亲和力和良好的生物学活性,有望开发成为新一代肿瘤免疫治疗的抗体药物。

TREM2促进心肌梗死后心肌细胞再生的机制研究

目的:探究髓系细胞触发受体2(TREM2)促进心肌梗死(MI)后心肌细胞再生的机制。方法:收集健康对照者和MI患者血浆样本,检测血浆TREM2浓度。构建C57BL/6和TREM2基因敲除(TREM2-/-)小鼠左前降支结扎MI模型。免疫蛋白印迹(Western blot)和荧光定量PCR检测梗死区和梗死边缘区TREM2和细胞周期素A2(CyclinA2)蛋白和mRNA表达水平,HE染色和Masson染色评估心肌损伤程度和梗死面积。结果:MI患者血浆TREM2的表达较健康对照者升高(P<0.05)。野生型小鼠MI后心脏中TREM2和CyclinA2 mRNA表达水平增加(P<0.05),TREM2在MI后1、2、3 d逐渐增加(P<0.05),而CyclinA2在MI后第2天心脏表达达到高峰(P<0.05)。TREM2基因敲除后梗死区和梗死边缘区CyclinA2的蛋白表达水平减少(P<0.05)。HE染色和Masson染色显示TREM2-/-小鼠心肌损伤程度较野生型小鼠加重,梗死面积增加(P<0.05)。结论:MI患者血浆TREM2表达水平增加。MI后TREM2可能会通过CyclinA2促进心肌再生,减轻心肌损伤,减小梗死面积。

基于TREM2介导的炎症信号通路观察电针缓解2型糖尿病干眼大鼠眼表感觉异常的作用机制

目的 揭示电针调控2型糖尿病干眼大鼠三叉神经节(TG)和三叉神经脊核尾状核(SpⅤc)中髓系细胞触发受体2(TREM2)介导的神经炎症信号通路缓解眼表感觉异常的潜在机制。方法 健康雄性SD大鼠高糖高脂饮食4周后,腹腔注射10 g·L^(-1)链脲佐菌素诱导建立2型糖尿病干眼大鼠模型。实验第12周造模成功的大鼠随机分为模型组、电针组、假针组、氟米龙组,并选择普通饲料喂养的健康雄性SD大鼠设为空白组,各组干预2周。造模前、造模后及干预后各组大鼠均行角膜荧光素钠染色(FL)、酚红棉线试验(PRT)、泪膜破裂时间(BUT)和角膜机械知觉(CTT)检查,观察各组大鼠TG和SpⅤc组织形态变化及TREM2阳性表达部位,检测在各组大鼠TG和SpⅤc中TREM2、白细胞介素-18(IL-18)和白细胞介素-1β(IL-1β)的mRNA表达。结果 造模后,与空白组比较,其余各组大鼠FL评分显著升高,PRT、BUT、CTT显著降低,差异均有统计学意义(均为P<0.01)。干预后,与模型组比较,电针组、氟米龙组大鼠FL评分显著降低,PRT、BUT、CTT显著升高,差异均有统计学意义(均为P<0.01),假针组以上指标差异均无统计学意义(均为P>0.05)。与电针组比较,氟米龙组、假针组大鼠PRT、CTT显著降低,假针组大鼠FL评分显著升高、BUT显著降低,差异均有统计学意义(均为P<0.01),氟米龙组大鼠FL评分、BUT差异无统计学意义(均为P>0.05)。与假针组比较,氟米龙组大鼠FL评分降低,PRT、BUT、CTT升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光双标染色结果显示,TREM2在模型组大鼠TG和SpⅤc中激活的小胶质细胞上阳性表达。TG和SpⅤc的RT-PCR检测结果显示,与空白组比较,模型组、电针组、氟米龙组、假针组TG和SpⅤc中TREM2 mRNA表达降低,模型组TG和SpⅤc及假针组TG中IL-18和IL-1β mRNA,以及假针组SpⅤc中IL-18 mRNA表达增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与模型组比较,电针组、氟米龙组TG和SpⅤc中TREM2 mRNA表达增加,IL-18和IL-1β mRNA表达降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与电针组比较,假针组TG和SpⅤc中TREM2 mRNA表达降低,IL-18和IL-1β mRNA表达增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05),氟米龙组TG和SpⅤc中TREM2、IL-18及IL-1β mRNA表达差异均无统计学意义(均为P>0.05)。与假针组比较,氟米龙组TG、SpⅤc中TREM2 mRNA表达增加,SpⅤc中IL-18 mRNA表达降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05),氟米龙组TG、SpⅤc中IL-1β mRNA及TG中IL-18 mRNA表达差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论 电针通过调控TG和SpⅤc中TREM2介导的炎症信号通路,可有效缓解2型糖尿病干眼大鼠眼表感觉异常。

血清肌肽、GDF-15、sTREM2检测在抑郁症临床诊断及病情评估中的作用

目的 探讨血清肌肽、生长分化因子15(GDF-15)、可溶性髓系细胞触发受体2(sTREM2)水平在抑郁症临床诊断及病情评估中的价值。方法 回顾性纳入2021年9月2023年9月期间绍兴市第七人民医院接诊的160例抑郁症患者为抑郁症组,根据病情严重程度将患者分为轻症亚组(62例)、中症亚组(60例)和重症亚组(38例);纳入同期162例健康体检人群为对照组。采用ELISA法检测研究对象血清肌肽、GDF-15、sTREM2水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析各指标诊断抑郁症的临床价值;采用Logistic回归分析影响抑郁症发病的因素;分析各指标与抑郁症病情程度相关性。结果 抑郁症组血清肌肽、GDF-15水平高于对照组,血清sTREM2水平低于对照组(均P <0.05)。血清肌肽、GDF-15、sTREM2诊断抑郁症的曲线下面积(A UC)分别为0.78、0.78、0.80,低于联合诊断AUC为0.90 (Z=3.95、3.95、3.37,均P <0.05)。血清肌肽(OR=2.98,95%CI:1.63~5.42)、GDF-15(OR=2.76,95%CI:1.44~5.29)、sTREM2 (OR=0.78,95%CI:0.66~0.92)均是抑郁症发病的影响因素(均P <0.05)。轻症亚组、中症亚组、重症亚组血清肌肽、GDF-15水平依此升高,血清sTREM2水平依此降低(均P<0.05)。抑郁症患者病情程度与血清肌肽、GDF-15水平均呈正相关(r=0.54、0.54,均P<0.05),与血清sTREM2水平呈负相关(r=-0.51,P <0.05)。结论 联合检测血清肌肽、GDF-15、sTREM2水平可作为临床诊断抑郁症的参考依据,且各指标对病情程度评估同样具有重要指导作用。

糖尿病合并TREM2突变相关认知功能障碍的生物信息学分析

目的通过生物信息学分析探寻糖尿病(DM)合并髓系细胞触发受体-2(TREM2)突变相关认知功能障碍的核心基因及可能的治疗靶点。方法利用微阵列数据分析,分别得到糖尿病合并TREM2突变相关认知功能障碍2个疾病的差异基因并交集得到共同的差异基因。对其进行GO分析、KEGG和Reactome通路分析,利用在线数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用网络(PPI);最后利用水迷宫检测糖尿病和TREM2对小鼠空间学习记忆能力的影响;利用蛋白质免疫印迹检测SNAP25表达的变化。结果在这2个数据集中,有19个基因变化相同,这些基因主要在与神经元和代谢相关的生物过程和通路富集。根据PPI分析结果,确定DNER、GFAP、GRM5、SNAP25为核心基因。Trem2敲除加重糖尿病模型小鼠空间学习记忆障碍,糖尿病小鼠海马SNAP25表达明显增加,Trem2敲除后SNAP25表达显著降低。结论本研究发现19个糖尿病合并认知功能障碍中TREM2相关基因,得到4个核心基因。这些结果为治疗糖尿病合并认知功能障碍患者提供新的实验依据。

OSAHS合并认知障碍患者肺泡巨噬细胞表达TREM2的研究

目的研究髓系细胞触发受体2(TREM2)在阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)合并不同程度认知功能障碍患者肺泡巨噬细胞(AM)上的表达水平,并探讨其临床意义。方法依据简明智能精神状态检查量表(MMSE)将79例OSAHS患者分成无认知障碍组21例(A组),轻度认知障碍组23例(B组),中度认知障碍组20例(C组),重度认知障碍组15例(D组),采用支气管肺泡灌洗方法对以上各组患者提取、纯化AM。分别采用实时荧光定量(RT-PCR)法和流式细胞仪(FCM)检测TREM2 mRNA和蛋白在AM上的表达水平,磁共振弥散张量成像(DTI)测定各组患者额叶白质FA值。结果 TREM2 mRNA及蛋白表达量A组<B组<C组<D组,4组间两两比较差异均具有统计学意义(P<0.05),各组额叶白质FA值分别为(0.713±0.062)、(0.698±0.053)、(0.437±0.051)、(0.238±0.032),除A、B组差异无统计学意义外,其余各组间两两比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。相关分析显示,TREM2 mRNA及蛋白表达均与额叶白质FA值呈负相关(r分别为-0.583、-0.472,P<0.05)。结论 TREM2在OSAHS合并认知障碍患者AM中表达增加,其可能在OSAHS患者发生认知障碍的过程中起重要调节作用。

TREM2缺失加重小鼠肺缺血再灌注损伤的机制研究

目的:探讨2型髓系细胞触发受体(TREM2)对肺缺血再灌注损伤(LIRI)的影响及其可能的调控机制。方法:将C57BL/6J雄性小鼠(WT)及TREM2敲除鼠(TREM2 KO)各12只,随机分成WT小鼠假手术组(WT组)、TREM2 KO小鼠假手术组(TREM2 KO组)、WT小鼠LIRI组(WT+LIRI组)、TREM2 KO小鼠LIRI组(TREM2 KO+LIRI组),每组6只。WT+LIRI组和TREM2 KO+LIRI组采用夹闭左肺肺门1 h,再灌注24 h的方法制备小鼠LIRI模型,WT组和TREM2 KO组仅开胸不夹闭肺门;通过蛋白免疫印迹(western blotting)、免疫荧光、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、苏木精—伊红(HE)染色、测定肺湿干质量比值(W/D)实验,评价敲除TREM2对小鼠肺缺血再灌注后组织损伤、炎症反应以及肺内巨噬细胞焦亡情况的影响。结果:TREM2敲除明显加重了LIRI后肺组织形态学改变,增加肺损伤评分(P<0.05),升高肺组织湿干质量比值(P<0.05),促进肺组织炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)表达(P<0.05),增加LIRI后肺组织巨噬细胞焦亡标志物天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)和成孔蛋白Gasdermin-D(GSDMD)表达(P<0.05)。结论:TREM2敲除加重LIRI,其机制可能与TREM2缺失引发caspase-1介导的肺内巨噬细胞焦亡有关。

TREM2与神经退行性疾病

2型髓系细胞触发受体(TREM2)是主要表达于小胶质细胞的激活受体,研究发现TREM2与DNAX相关蛋白12(DAP12)结合,可以调控小胶质细胞的激活与极化、降低炎症因子水平、减少神经元损伤。本文对TREM2及其在阿尔兹海默症、帕金森病、癫痫、缺血性脑卒中和多发性硬化症等多种神经退行性疾病中的作用进行了概述。

慢性阻塞性肺疾病合并认知功能障碍患者外周血单核细胞TREM2表达及意义

目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并不同程度认知功能障碍患者外周血单核细胞(PBMC)中髓系细胞触发受体2(TREM2)表达水平,并探讨其临床意义。方法选择COPD稳定期患者81例,其中无认知障碍19例(A组),轻度认知障碍22例(B组),中度认知障碍21例(C组),重度认知障碍19例(D组)。分别采用RT-PCR法和流式细胞仪检测PBMC中的TREM2 mRNA及蛋白,采用3.0 T超导磁共振成像系统测定双侧海马总体积。结果TREM2 mRNA及蛋白表达量A组<B组<C组<D组,除A、B组差异无统计学差异外,其余各组两两比较P均<0.05。A^D组双侧海马总体积分别为(8.36±0.63)、(7.23±0.56)、(4.02±0.34)、(3.86±0.35)cm3,C、D组与A、B组比较P均<0.05,A、B组间与C、D组间比较,P均>0.05。相关性分析显示,TREM2 mRNA及蛋白表达均与双侧海马总体积呈负相关(r分别为-0.582、-0.463,P均<0.05)。结论 COPD合并不同程度认知功能障碍患者PBMC中TREM2表达增加,其可能在COPD患者发生认知障碍的过程中起重要作用。

2型髓系细胞触发受体在小鼠肺缺血/再灌注损伤中的作用及调控机制

目的探讨2型髓系细胞触发受体(TREM2)在小鼠肺缺血/再灌注损伤(LIRI)中的作用及其可能的调控机制。方法将36只健康雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分成正常对照组及LIRI 2、6、12、24、48 h组,每组6只。采用开胸夹闭左肺肺门法建立LIRI模型。取各组小鼠左肺组织,测定肺湿/干质量比值(W/D),苏木素-伊红(HE)染色后光镜下观察肺组织病理学改变,透射电镜下观察肺组织超微结构改变;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺组织白细胞介素(IL-1β、IL-18)水平;用聚合酶链反应(PCR)检测肺组织TREM2和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)的mRNA表达;用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测肺组织TREM2、caspase-1、细胞焦亡标志成孔蛋白Gasdermin-D(GSDMD)的蛋白表达。结果LIRI后2 h模型小鼠肺组织开始出现损伤,肺超微结构改变,肺组织病理学评分增加;6 h时肺损伤程度最为严重;12 h后肺损伤逐渐减轻,肺组织病理学评分逐渐降低。与正常对照组比较,LIRI 2、6、12、24、48 h组肺W/D比值和肺组织病理学评分均明显增高,差异均有统计学意义〔肺W/D比值:7.06±0.52、8.34±0.17、6.42±0.35、5.34±0.25、5.59±0.45比4.69±0.23,肺组织病理学评分(分):5.50±0.54、9.75±0.89、5.88±0.84、3.63±0.74、4.13±0.64比1.13±0.35,均P<0.05〕。与正常对照组比较,LIRI后2 h肺组织IL-1β、IL-18水平即明显升高,于6 h达峰值〔IL-1β(ng/L):502.76±12.25比56.50±8.07,IL-18(ng/L):414.02±10.75比81.63±5.29,均P<0.05〕,随后逐渐降低,48 h时仍显著高于正常对照组。PCR和Western blotting结果显示,LIRI后2 h模型小鼠TREM2表达即明显低于正常对照组,于6 h达谷值〔TREM2 mRNA(2^(-ΔΔCt)):0.47±0.05比1.02±0.05,TREM2/GAPDH:0.23±0.13比0.48±0.17,均P<0.05〕,随后逐渐升高,于24 h达峰值〔TREM2 mRNA(2^(-ΔΔCt)):3.98±0.15比1.02±0.05,TREM2/GAPDH:0.71±0.17比0.48±0.17,均P<0.05〕;而caspase-1和GSDMD的表达趋势与TREM2相反,呈先升高后降低趋势,均于再灌注后6 h达到高峰〔caspase-1 mRNA(2^(-ΔΔCt)):2.20±0.13比1.01±0.02,caspase-1/GAPDH:0.64±0.02比0.20±0.06,GSDMD/GAPDH:1.23±0.01比0.87±0.02,均P<0.05〕。结论TREM2可能参与了小鼠LIRI的发生,其机制可能与TREM2影响caspase-1介导的肺内细胞焦亡有关。

胃癌组织TREM2表达变化及其临床意义

目的观察胃癌组织髓系细胞触发受体2(TREM2)表达变化,并探讨其临床意义。方法选择胃癌患者78例,取手术切除的胃癌组织及其配对的癌旁正常组织,采用RT-PCR法和免疫组化法分别检测TREM2 mRNA和蛋白表达。分析TREM2蛋白表达与患者临床病理特征的关系。结果胃癌组织与癌旁正常组织TREM2mRNA相对表达量分别为3. 75±0. 27、2. 17±0. 15,二者比较P <0. 05。胃癌组织与癌旁正常组织TREM2蛋白阳性表达率分别为62. 8%(49/78)、39. 7%(31/78),二者比较P <0. 05。胃癌组织TREM2蛋白表达与肿瘤直径、组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关(P均<0. 05),而与患者性别、年龄无关(P均> 0. 05)。结论胃癌组织TREM2表达升高,其表达变化与胃癌的发生、发展密切相关。