全髓细胞型白血病急变一例

全髓细胞型白血病急变一例李萍（马钢总公司医院血液科２４３０００）全髓细胞型白血病罕见，在２０天中骨髓象由全髓细胞型白血病演变成急性单核细胞型白血病则更罕见。现将本人在南京鼓楼医院进修时遇到一例报道如下。朱某，女，３３岁，农民。因不规则发热３月余，于１...

可溶性2型髓系细胞触发受体对老年自发性脑出血患者血肿早期扩大的评估价值

目的 探讨基线血浆可溶性2型髓系细胞触发受体(sTREM2)对老年自发性脑出血患者血肿早期扩大的评估价值。方法 回顾性分析2020年1月至2022年8月唐山工人医院神经外二科收治的急性自发性脑出血患者240例,根据血肿体积扩大情况分为血肿无扩大组172例和血肿扩大组68例。所有患者于发病24 h内行基线头颅CT平扫,分析临床资料及影像学资料,计算脑血肿体积;并于入院后立刻采集血液,测定sTREM2、半乳糖凝集素3(galectin-3)水平。结果 与血肿无扩大组比较,血肿扩大组入院时脑血肿体积、sTREM2、galectin-3、高敏C反应蛋白、肿瘤坏死因子α水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。Pearson相关性分析显示,入院时血浆sTREM2、galectin-3水平与脑血肿呈正相关(r=0.784,P=0.012;r=0.815,P=0.004)。ROC曲线分析显示,血浆sTREM2+galectin-3联合检测的敏感性明显高于sTREM2、galectin-3单独检测(85.59%vs 73.73%、64.41%,P<0.05),曲线下面积为0.896(95%CI:0.741~0.932)。结论 老年自发性脑出血患者发生血肿早期扩大后,基线血浆sTREM2水平显著升高,可作为血肿早期扩大的风险标志物,且其与galectin-3联合检测具有较高的诊断价值。

G4型髓母细胞瘤患儿预后影响因素及生存状况分析

目的探讨儿童G 4型髓母细胞瘤(MB)患者的生存状况及其预后影响因素。方法回顾性分析2016年5月至2020年8月儿科收治的G4型MB患儿(随访至2022年8月)的临床资料,采用Kaplan-Meier法计算总体生存(OS)率和无进展生存(PFS)率,采用Log-rank检验比较组间生存率差异,采用Cox回归模型分析影响预后的因素。结果纳入145例G4型MB患儿,男106例、女39例,中位确诊年龄7.5(5.7~9.6)岁。M0期91例,M+期54例(M1期1例、M2期12例、M3期41例);病理分型为经典型127例、促纤维增生/结节型(DN)8例、大细胞/间变型(LC/A)8例、广泛结节型(EN)1例、未分型1例。中位随访时间为47.9(36.5~59.3)月,复发37例。患儿5年OS率和PFS率分别为(80.8±3.4)%和(55.4±4.7)%。Cox回归分析结果提示M+期、MYCN扩增、Chr12 p+变异是影响预后的独立危险因素(P<0.05)。结论M+期、MYCN扩增的G4型MB患儿预后相对较差。Chr12 p+可能与患儿预后相关,但仍有待更大样本的临床研究进行证实。

基于肿瘤干细胞诱导多核型髓源抑制性细胞形成介导免疫逃逸探讨中医扶正解毒法防治肿瘤转移的可能机制

多核型髓源抑制性细胞(PMN-MDSCs)在肿瘤的免疫逃逸中扮演重要角色,尤其体现在逃逸T淋巴细胞免疫监视方面。肿瘤干细胞具有病理性活化中性粒细胞(PMNs)诱导PMN-MDSCs形成的能力,进而在PMN-MDSCs的帮助下实现免疫逃逸发生转移。中医扶正解毒法对PMN-MDSCs的活化形成及肿瘤干细胞的生物学行为均具有一定的调控作用,这可能为中医药防治肿瘤转移提供了新的依据。基于肿瘤干细胞诱导PMN-MDSCs形成而逃避免疫监视,探讨中医扶正解毒法干预肿瘤转移的可能机制,以期为中医药防治肿瘤转移提供新思路。

1株髓细胞瘤型J亚群禽白血病病毒感染性克隆的构建与病毒拯救

为构建髓细胞瘤型J亚群禽白血病病毒(avian leukosis virus,ALV-J)SCGS-1株前病毒cDNA分子标记感染性克隆,根据SCGS-1全基因测序结果,分3段进行全序列PCR扩增,顺次连接至pUC19,构建SCGS-1株前病毒cDNA感染性克隆pUC-SCGS;通过重叠PCR方法对SCGS-1基因组进行沉默突变,在4 684位点引入SalⅠ位点,构建SCGS-1株分子标记感染性克隆pUC-△SCGS;以pUC-SCGS和pUC-△SCGS重组质粒转染CEF进行病毒拯救,并通过PCR、间接免疫荧光与双抗体夹心ELISA进行拯救病毒检测。结果显示,成功构建pUC-SCGS与pUC-△SCGS重组质粒,转染后盲传第3代、第4代细胞与上清中均检测到拯救病毒;间接免疫荧光与抗原ELISA方法分别在CEF细胞和上清中检测到ALV-J抗原。成功拯救获得分子标记ALV-J。

HAG和HA方案治疗老年初诊急性髓系细胞白血病M2型疗效对比

目的对比分析HAG和HA方案治疗老年初诊急性髓系细胞白血病部分分化(M2)型疗效。方法 94例老年初诊急性髓系细胞白血病M2型患者根据随机分组法分为A组(n=47)和B组(n=47)。A组采用HAG方案治疗,B组采用HA方案治疗。2组患者均于2个疗程后评价疗效、生存时间及不良反应。结果A组总有效率明显高于B组,差异有统计学意义(χ~2=3.898 6,P<0.05);A组中位生存时间明显长于B组,差异有统计学意义(t=23.270 2,P<0.05);A组白细胞最低值和中性粒细胞最低值明显高于B组,差异有统计学意义(P<0.05);A组中性粒细胞缺乏持续时间明显短于B组,差异有统计学意义(P<0.05);A组非血液学不良反应发生率明显低于B组,差异有统计学意义(χ~2=4.039 3,P<0.05)。结论老年初诊急性髓系细胞白血病M2型患者应用HAG方案治疗效果明显优于HA方案。

载脂蛋白E和Ⅱ型髓系细胞受体在脂多糖诱导的小胶质细胞炎症反应中的作用

目的探讨载脂蛋白E(ApoE)、Ⅱ型髓系细胞受体(TREM2)在脂多糖(LPS)诱导的小胶质细胞炎症反应中的作用。方法原代培养野生型小鼠及基因敲除(ApoE-/-、TREM2-/-、ApoE-/-TREM2-/-)小鼠的小胶质细胞。用0 ng/ml、100 ng/ml、500 ng/ml LPS刺激野生型小鼠小胶质细胞,用0 ng/ml、500 ng/ml LPS刺激ApoE-/-小鼠、TREM2-/-小鼠、ApoE-/-TREM2-/-小鼠小胶质细胞。采用RT-PCR及Western blotting法检测ApoE、TREM2 mRNA和蛋白水平;应用RT-PCR检测TNF-α、IL-1βmRNA水平。结果与0 ng/ml LPS组比较,100 ng/ml LPS组及500 ng/ml LPS组野生型小鼠小胶质细胞ApoE、TREM2 mRNA及蛋白水平均明显降低(均P<0.05)。与100 ng/ml LPS组比较,500 ng/ml LPS组野生型小鼠小胶质细胞ApoE、TREM2 mRNA及蛋白水平均明显降低(均P<0.05)。用500 ng/ml LPS刺激后,野生型、ApoE-/-、TREM2-/-、ApoE-/-TREM2-/-小鼠小胶质细胞的TNF-α、IL-1βmRNA水平明显升高(均P<0.05)。ApoE-/-、TREM2-/-、ApoE-/-TREM2-/-小鼠小胶质细胞的TNF-α、IL-1βmRNA水平显著高于野生型小鼠(均P<0.05)。结论 ApoE和TREM2能够协同抑制LPS诱导小胶质细胞的炎症反应,在调节CNS炎症中起着重要作用。这些基因可能与AD的发生密切相关。

Auer小体对初诊非M3型急性髓细胞白血病患者预后的影响

目的:分析Auer小体对初诊非M3型急性髓细胞白血病(AML)患者预后的影响。方法:回顾性选取2017年1月至2022年1月池州市人民医院124例初诊非M3型AML患者作为研究对象,依据骨髓原始细胞有无Auer小体将患者分为Auer小体阳性组与Auer小体阴性组,记录患者的年龄、性别、疾病危险度分级、实验室指标、诱导缓解成功率等临床特征,随访患者临床结局及预后情况,绘制Kaplan-Meier生存曲线,对比两组患者总生存期(OS)。结果:124例非M3型AML患者中,54例为Auer小体阳性,70例Auer小体阴性。两组患者在年龄、性别构成比、病史、发热、出血、疼痛、贫血、疾病危险度分级方面比较,差异无统计学意义(P>0.05),在合并心血管疾病及消化系统疾病占比方面比较,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者实验室指标WBC、PLT、Hb、LDH水平差异无统计学意义(P>0.05),融合基因占比情况比较,差异无统计学意义(P>0.05);随访患者预后,结果显示两组完全缓解率、复发率差异无统计学意义(P>0.05),但Auer小体阳性组死亡率明显低于Auer小体阴性组,差异有统计学意义(P<0.05);Kaplan-Meier生存曲线显示,两组患者无进展生存期(DFS)差异无统计学意义(P>0.05),但Auer小体阳性组OS明显高于Auer小体阴性组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Auer小体与初诊非M3型AML患者预后密切相关,Auer小体阳性者少有心血管疾病,易合并消化系统症状,死亡率低,总生存期及预后优于Auer小体阴性者,应予以重视。

急性髓细胞性白血病微分化型(ANLL-M_0)的临床研究

目的 :探讨ANLL -M0 的细胞形态学、细胞化学、细胞免疫学特性和治疗 .方法 :骨髓涂片用Wright-Giemsa染色、POX染色、PAS染色、NES染色及NaF抑制试验 .骨髓液用流式细胞单克隆抗体直接免疫标记技术检测白血病细胞表面相关抗原分化群 ,TPA试验 .短期培养法直接法G显带分析白血病细胞染色体组型 .化疗、异基因外周血干细胞移植 (allo -PBSCT) .结果 :骨髓早期微分化细胞 (NEC)均 >90 % .POX均阴性 .PAS染色 2例弱阳性 ,2例阴性 .NES染色 2例阳性 ,均不受NaF抑制 .4例TPA强阳性 .免疫表型 2例CD+ 13 ,1例CD+ 15,1例CD+ 3 8,1例CD+ 11b,MPO 3例阳性 ,CD+ 19,CD+ 2 均阴性 ,2例CD+ 7.2例化疗达完全缓解 ,其中 1例作allo -PBSCT ,已存活 2 8月CCR和 19月 .结论 :细胞形态学、细胞化学、细胞免疫表型是诊断急性髓细胞性白血病微分化型的重要依据 ,用AML的治疗方案治疗ANLL -M0 有效 .

菊粉增加非酒精性脂肪肝病小鼠外周血、肝脏及脾脏单核细胞型髓源性抑制细胞比例并调节炎症因子的分泌

目的探讨菊粉(INU)对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠单核细胞型髓源性抑制细胞(M-MDSC)和血浆炎症因子的影响。方法C57BL/6小鼠随机分为正常饮食组、INU对照组、NAFLD模型组和INU处理的NAFLD模型组。正常饮食组和INU对照组给予普通饲料,NAFLD模型组和INU处理的NAFLD模型组给予高脂饲料(含60%脂肪)。同时INU对照组和INU处理的NAFLD模型组给予INU(5 g/kg),喂养14周后,处死小鼠并收集小鼠外周血、肝脏和脾脏细胞。采用流式细胞术检测外周血、肝脏和脾脏中M-MDSC比例。细胞因子流式微球阵列检测技术(CBA)检测血浆中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素10(IL-10)表达水平。Pearson统计分析各组织M-MDSC比例和血浆炎症因子水平的相关性。结果与正常饮食组相比,NAFLD模型组外周血、肝脏和脾脏中M-MDSC的比例明显增加,血浆中TNF-α水平显著升高,IL-10水平变化不明显。与NAFLD模型组相比,INU处理的NAFLD模型组外周血、肝脏和脾脏中M-MDSC的比例明显增加,TNF-α水平显著降低、IL-10水平显著升高。NAFLD小鼠外周血、肝脏及脾脏中M-MDSC分别与TNF-α呈负相关,与IL-10呈正相关。结论INU可募集NAFLD小鼠外周血、肝脏及脾脏中M-MDSC,发挥抗炎作用,延缓NAFLD的发生发展。

p73基因在核型正常的急性髓细胞白血病中的表达与临床相关性的研究

目的:检测p73在核型正常的急性髓细胞白血病(cytogenetically normal acute myeloid leukemia,CN-AML)中的表达情况,探讨p73与CN-AML病情进展的关系及临床意义。方法:采用逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测68例CN-AML患者的骨髓单个核细胞中p73表达,根据核仁磷酸蛋白1(nucleophosmin 1,NPM1)突变(NPM1 mutation,NPM1mt)或FMS样的酪氨酸激酶3(FMS-like tyrosine kinase 3,FLT3)内部串联重复序列(FLT3 internal tandem duplication,FLT3ITD)将CN-AML患者分为3个不同的危险组:低危组(NPM1mt/no FLT3ITD内部串联重复),高危组(FLT3ITD),中危组(排除NPM1mt/no FLT3ITD和FLT3ITD的病例),并进行相关分析。对患者化疗的效果应用完全缓解(complete remission,CR)率进行评估。结果:68例CN-AML有29.4%患者p73过度表达,p73过度表达与CR率呈负相关。p73过度表达的CN-AML患者在低危组有更好的临床预后,有33.3%的患者获得CR;相反,p73过度表达者在高危组有更差的临床预后,均未获得CR。结论:p73过度表达可能是预测CR率的负性指标。p73过度表达与根据NPM1mt和FLT3ITD进行CN-AML危险分组相一致,可能对CN-AML的危险分组有意义。

小脑促纤维增生型髓母细胞瘤1例

患者男,24岁。1月前无明显诱因出现头晕,转动头时加重,四肢乏力,行走不稳,严重时伴呕吐胃内容物。入院查体：神志清,呼吸平稳,GCS=15分,双侧瞳孔等大等圆约2.5mm,对光反射敏感或面部无明显感觉障碍,口角无歪斜,伸舌居中。颈软。心肺、腹无明显异常。四肢肌力4级,病理征（-）。

丁苯酞联合美多芭对帕金森病伴抑郁模型小鼠黑质纹状体Ⅱ型髓系细胞触发受体及小胶质细胞炎症标志物表达的影响

目的:探讨丁苯酞联合美多芭对帕金森病伴抑郁模型小鼠黑质纹状体Ⅱ型髓系细胞触发受体(TREM2)及小胶质细胞M1型炎症标志物[白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]及M2型炎症标志物[IL-10和精氨酸酶-1(Arg-1)]表达的影响。方法:随机将40只C57BL/6成年雄性小鼠分正常对照组(对照组)、帕金森病伴抑郁模型组(模型组)、美多芭治疗组和丁苯酞联合美多芭治疗组,每组10只。腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP,30 mg/kg×7 d)制备帕金森病小鼠模型。建立帕金森病模型后,以慢性不可预知温和应激诱导产生帕金森病伴抑郁小鼠模型。美多芭治疗组给予美多芭6.25 mg/kg灌胃治疗,1次/d,持续7 d。丁苯酞联合美多芭治疗组给予丁苯酞120 mg/kg和美多芭6.25 mg/kg灌胃治疗,1次/d,持续7 d。采用免疫组化定性分析黑质纹状体内α-突触核蛋白的阳性表达情况。采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定5-羟色胺(5-HT)含量。采用蛋白免疫印迹法检测TREM2蛋白表达水平。采用蛋白免疫印迹和PCR检测小胶质细胞炎症标志物IL-1β、TNF-α、IL-10、Arg-1蛋白及mRNA表达水平。结果:模型组小鼠黑质纹状体部位可见大量α-突触核蛋白异常积聚;美多芭治疗组及丁苯酞联合美多芭治疗组α-突触核蛋白阳性表达明显减少,染色变浅,以丁苯酞联合美多芭治疗组减少更明显。与对照组比较,模型组5-HT含量明显减低(P<0.05);与模型组比较,美多芭治疗组及丁苯酞联合美多芭治疗组5-HT含量明显增加,以丁苯酞联合美多芭治疗组增加更明显(均P<0.05)。与对照组比较,模型组TREM2明显减低(P<0.05);与模型组比较,美多芭治疗组及丁苯酞联合美多芭治疗组TREM2明显增加,以丁苯酞联合美多芭治疗组增加更明显(均P<0.05)。与对照组比较,模型组小胶质细胞M1型炎症标志物IL-1β和TNF-α明显升高,M2型标炎症标志物IL-10和Arg-1明显下降(均P<0.05);与模型组比较,美多芭治疗组及丁苯酞联合美多芭治疗组IL-1β和TNF-α下降,IL-10和Arg-1增加,以丁苯酞联合美多芭治疗组更明显(均P<0.05)。结论:丁苯酞联合美多芭能促进帕金森病伴抑郁模型小鼠黑质纹状体TREM2表达增加,抑制炎症反应,对神经元具有保护作用。

髓细胞白血病的分子遗传学监测

肿瘤发生是多种基因异常的共同结果,因而检测基因改变可用于肿瘤监测。约1/3急性髓细胞白血病(AML)可发生N-ras原癌基因点突变。随着简便、灵敏的半固相微测序法的建立,它将用于监测AML早期复发和定量检测残留白血病细胞;此外,髓细胞白血病患者降钙素基因高甲基化可作为判定疾病进展的分子标记,且特别有助于慢性髓细胞白血病(CML)分期。

CD_7阳性的急性髓细胞白血病

CD_7^+AML约占AML总数的10％～20％,多同时有CD_(34)^+和HLA-DR^+,而髓系较成熟表型CD_(11b)和CD_(15)阴性。染色体核型无特征性异常。IgH和TCR基因重排多处于胚系状态。白血病祖细胞对IL-3和SCF有较强的刺激增殖反应。主要分布于FAB分类中的M0、M1和M5亚型,部分M2和M4,M3未见。临床上年轻男性患者多见,肝肿大、DIC和CNSL的发生率、外周血平均WBC和原始细胞百分比高于CD_7^-AML。对现行AML化疗方案反应差,CR率低,CR期及生存期短,治疗无效时改用ALL方案可能有效。

CD11b激动剂leukadherin-1通过促进髓源性抑制细胞聚集和活化缓解小鼠内毒素休克发病

目的研究CD11b激动剂白细胞黏附素1(LA1)对髓源性抑制细胞(MDSC)的聚集和免疫抑制功能的影响,并检测其对脂多糖(LPS)诱导的内毒素休克模型小鼠的治疗效果。方法 C57BL/6雌性小鼠腹腔注射LA1 (40μg/g),12 h和48 h后,流式细胞术检测脾脏MDSC及其亚型粒细胞性髓源性抑制细胞(G-MDSC)和单核细胞性髓源性抑制细胞(M-MDSC)的比例。取C57BL/6雌性小鼠股骨及胫骨,体外诱导MDSC,通过实时定量PCR分析LA1处理对其免疫抑制相关因子白细胞介素10(IL-10)、NADPH氧化酶1 (NOX1)及诱导型一氧化氮合酶(i NOS) mRNA水平的影响。用C57BL/6雌性小鼠随机分为PBS组、LA1组、PBS联合LPS组和LA1联合LPS组,通过流式细胞术检测MDSC、G-MDSC及M-MDSC的比例及巨噬细胞表面CD86和CD40的表达,HE染色检测肝肺组织病理损伤,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测肝肺组织细胞凋亡情况,观察小鼠死亡率反映小鼠病情的严重程度。通过以上检测指标分析LA1对内毒素休克小鼠体内MDSC的聚集及对病情的影响。结果 LA1处理12、48 h,均显著上调小鼠脾脏中MDSC的比例。与对照组相比,LA1处理12 h可显著上调G-MDSC的比例;体外实验发现,LA1可诱导MDSC中IL-10、NOX1及i NOS高表达;体内实验中,与PBS联合LPS组相比,LA1联合LPS组脾脏MDSC及G-MDSC的比例显著增加,肝、肺组织损伤减轻,死亡率下降,巨噬细胞活化程度显著降低。结论 CD11b激动剂LA1可通过促进MDSC的聚集及其免疫抑制相关因子的表达缓解内毒素休克的发病。

维生素D缺乏患者血清25羟维生素D水平与M-MDSCs、TNF-α、IL-10的差异性分析

目的探讨维生素D缺乏患者血清25羟维生素D[25(OH)D]水平与单核细胞型髓源抑制性细胞(M-MDSCs)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)的相关性。方法选取2022年6—9月于银川市第一人民医院就诊的维生素D缺乏症患者24例(维生素D缺乏组)和同期健康体检者24例(正常对照组),收集基础临床指标,采集外周抗凝血,分离外周血浆和血细胞后,提取外周血单个核细胞(PBMCs),采用流式细胞术分析CD45+白细胞和CD45^(+)CD15^(-)CD11b^(+)HLA^(-)DR^(-)CD14^(+)M-MDSCs,采用ELISA法检测外周血清TNF-α、IL-10水平,采用Pearson相关分析探讨血清25(OH)D与M-MDSCs、TNF-α及IL-10的相关性。结果与正常对照组相比,维生素D缺乏组患者外周血白细胞增加、M-MDSCs增高(P均<0.05),血浆中TNF-α水平升高、IL-10降低(P均<0.05)。相关性分析结果显示,25(OH)D与CD45^(+)白细胞、M-MDSCs和TNF-α呈负相关,与IL-10呈正相关(P均<0.05)。结论维生素D缺乏患者25(OH)D水平降低后可促进炎症发生,并与M-MDSCs密切相关。

特发性膜性肾病患者外周血髓系来源抑制性细胞水平研究

目的探究单核细胞型髓系来源抑制性细胞(monocytic myeloid-derived suppressor cells, M-MDSC)及相关细胞因子在特发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy, iMN)患者外周血中的表达水平以及与临床指标相关性。方法收集2018年1月至2022年12月于安徽医科大学第一附属医院和安徽省霍山县医院52例初诊iMN患者为实验组。另外, 收集40例健康志愿者作为对照组。采用流式细胞仪检测两组研究对象外周血中M-MDSC水平, 酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)方法检测白细胞介素(interleukin, IL)-6和磷脂酶A2受体(hospholipase A2 receptor, PLA2R)水平, 聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)方法检测精氨酸酶(arginase-1, Arg-1)mRNA水平。并分析M-MDSC与iMN病情活动度和治疗相关性。结果与对照组相比, 初诊iMN组患者外周血中M-MDSC表达水平明显升高, 差异具有统计学意义[(23.25±5.72)%比(9.12±4.23)%, t=18.85, P<0.001]。根据iMN患者病理分期, Ⅲ-Ⅳ组患者外周血中M-MDSC表达水平与Ⅰ-Ⅱ组相比明显升高, 差异具有统计学意义[(25.12±5.21)%比(19.35±4.71)%, t=4.85, P<0.01]。IL-6和Arg-1 mRNA在初诊iMN患者外周血中表达水平相比对照组明显升高, 差异具有统计学意义[(43.16±7.67)pg/mL比(6.31±2.23)pg/mL;(6.12±1.58)比(1.53±0.52);t值分别为11.58、7.22, P值均<0.05]。PLA2R以及24 h尿蛋白作为评估iMN患者疾病活动度的指标, 其在初诊iMN患者外周血中表达水平相比对照组亦明显升高, 差异具有统计学意义[PLA2R:(17.21±4.13) ng/L比(2.15±0.71) ng/L;尿蛋白:(4.81±1.26)g/24 h比(0.08±0.02)g/24 h;t值分别为18.86、50.82, P值均<0.001]。52例初诊iMN患者中, M-MDSC水平与IL-6、PLA2R以及24 h尿蛋白表达水平呈正相关(r值分别为0.613、0.502、0.637, P值均<0.05)。治疗前相后相比, M-MDSC水平显著下降, 差异具有统计学意义[(23.25±5.72)%比(10.18±3.27)%, t=6.84, P<0.01]。结论 iMN患者外周血中M-MDSC表达水平升高, 并可能成为疾病活动性的潜在生物标志物和治疗靶点。

YBX1截短体抑制髓母细胞瘤DAOY的迁移和干性增殖能力

[目的]利用CRISPR/Cas9技术构建YBX1基因截短的SHH型髓母细胞瘤DAOY细胞系,探讨截短的YBX1对DAOY细胞迁移和干性增殖的影响。[方法]设计针对YBX1基因的sgRNA序列,并将其插入pX330载体构建sgYBX1表达质粒。DAOY细胞经pX330-sgYBX1和耐青霉素质粒转染,药筛后采用极限稀释法挑取单克隆细胞系,使用测序及蛋白质印迹技术检测YBX1基因编辑的情况,利用免疫荧光实验检测YBX1截短体在DAOY细胞内的定位情况,并通过CCK8、Transwell、克隆形成实验、低黏附板成球实验检测YBX1截短体对DAOY细胞增殖、迁移及干性的影响。[结果]测序结果表明,在DAOYYBX1-trunc细胞系中,YBX1基因编码区缺失144个碱基,导致合成肽段的第21~68氨基酸(位于A/P domain和CSD结构域)缺失。免疫荧光实验结果表明截短的YBX1蛋白定位富集在细胞核内。与未编辑细胞相比,DAOYYBX1-trunc细胞的增殖能力基本不变,但迁移能力减弱了50%,克隆形成能力削减了54%,细胞成球能力削减了68%。[结论]成功构建YBX1蛋白在21~68氨基酸截短的DAOY细胞系,其削弱了DAOY细胞的迁移及干性增殖能力。