髓细胞白血病1抑制剂在多发性骨髓瘤治疗中的研究进展

多发性骨髓瘤(MM)是一种不可治愈的B细胞恶性肿瘤,治疗方案包括化疗和自体干细胞移植。然而,目前药物在控制肿瘤进展和延长MM缓解时间方面作用有限,也并非所有患者都能够接受自体干细胞移植。多结构域B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)家族蛋白,特别是髓细胞白血病1(MCL-1)的过度表达在MM的发病机制中起着关键作用。MCL-1过度表达与MM患者耐药和总体不良预后相关。因此,抑制MCL-1蛋白是杀死骨髓瘤细胞的一种治疗策略。在过去的十年中,选择性MCL-1抑制剂的开发取得了显著进展。现对MCL-1抑制剂在MM治疗中的研究进展进行介绍。

紫檀芪调控微小RNA-340-5p/髓细胞白血病-1轴对胆囊癌SD细胞生物学行为的影响实验研究

目的:探究紫檀芪(PTS)调控微小RNA-340-5p(miR-340-5p)/髓细胞白血病-1(MCL-1)轴对胆囊癌SD(GBC-SD)细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法:体外培养人GBC-SD细胞,使用不同浓度PTS(0、5、10、20、40、80μmol/L)处理GBC-SD细胞,然后检测细胞存活率。将GBC-SD细胞分为对照组(DMEM培养基常规培养GBC-SD细胞)、PTS组(加入80μmol/L的PTS培养GBC-SD细胞)、PTS+空载质粒组(加入80μmol/L的PTS培养GBC-SD细胞,并转染空载质粒)、PTS+miR-340-5p沉默组[加入80μmol/L的PTS培养GBC-SD细胞,并转染miR-340-5p小干扰RNA(siRNA)质粒]。分别检测各组GBC-SD细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-340-5p和MCL-1 mRNA表达。蛋白印迹法检测MCL-1及增殖凋亡相关蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验检测miR-340-5p与MCL-1的靶向关系。裸鼠移植瘤实验检测PTS对裸鼠肿瘤生长及miR-340-5p/MCL-1轴的影响。结果:随着PTS浓度的升高,GBC-SD细胞存活率逐渐降低(均P<0.05)。与对照组比较,PTS组细胞存活率、集落形成数、细胞迁移率、细胞侵袭数、MCL-1 mRNA和蛋白、Ki67、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达降低,细胞凋亡率、miR-340-5p、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)蛋白表达升高(均P<0.05)。沉默miR-340-5p可逆转PTS对GBC-SD细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及miR-340-5p/MCL-1轴的作用效果(均P<0.05)。miR-340-5p与MCL-1存在靶向调控关系。PTS能抑制裸鼠肿瘤生长和MCL-1 mRNA和蛋白表达,促进miR-340-5p表达(均P<0.05)。结论:PTS可通过上调miR-340-5p表达下调MCL-1表达,抑制GBC-SD细胞增殖、迁移和侵袭,促进GBC-SD细胞凋亡。

RNA结合蛋白RBPMS调控急性髓系白血病细胞系THP-1增殖与迁移

目的研究具有多重剪接功能的RNA结合蛋白(RBPMS)对携带MLL-AF9融合基因的急性髓系白血病细胞系THP-1功能的影响。方法使用GEO数据库分析造血系统中RBPMS的表达情况;通过慢病毒感染THP-1细胞,RT-qPCR和Western blot检测RBPMS过表达效率;通过高通量测序检测RBPMS过表达后对THP-1细胞转录组的影响。分别用CCK-8法和流式细胞仪检测RBPMS过表达对白血病细胞增殖以及迁移能力的影响。结果RBPMS在携带MLL-AF9融合基因的急性髓系白血病干细胞中异常低表达。RBPMS过表达后THP-1细胞的增殖和迁移能力显著降低(P<0.0001,P<0.05)。结论RBPMS可以抑制携带MLL-AF9融合基因的急性髓系白血病细胞系的细胞增殖与迁移。

非小细胞肺癌患者髓细胞白血病1表达及其与肿瘤进展的关系

目的 分析髓细胞白血病1(MCL-1)的表达与非小细胞肺癌(NSCLC)患者生存的关系,探讨过表达MCL-1对NSCLC细胞生物学行为的影响和在NSCLC进展中的作用。方法 分别利用GEPIA、Kaplan-Meier Plotter和HPA数据库分析MCL-1在肺癌、肺腺癌(LUAD)和肺鳞状细胞癌(LUSC)各分期的表达及其与患者生存预后的关系。通过STRING数据库绘制与MCL-1相互关联蛋白网络图,并进行GO和KEGG富集分析。采用慢病毒转染,构建MCL-1过表达HCC827^(MCL-1)以及空载对照HCC827^(NC)的NSCLC模型。平板克隆形成实验分析细胞的增殖及克隆形成能力;Transwell和划痕实验检测细胞侵袭、迁移能力;MTT法测定细胞生长情况、倍增时间及对顺铂(DDP)和多西他赛(TXT)的敏感性。结果 MCL-1在LUAD和LUSC各分期中均呈高表达,且随着肿瘤的恶化,MCL-1表达有升高的趋势。Kaplan-Meier Plotter数据库分析结果显示,MCL-1高表达患者中位总生存期分别为64.1、62.0和64.1个月,MCL-1低表达患者中位生存期分别为76.0、79.3和75.4个月,P值分别为0.003、<0.001和0.041。HPA数据库分析结果显示,肺癌、LUAD和LUSC MCL-1高表达患者的5年生存率分别为38%、30%和41%,低表达患者分别为51%、42%和51%,P值分别为0.024、0.029和0.031。GO和KEGG分析结果显示,MCL-1主要与细胞凋亡和耐药性等生物学过程有关。成功构建了过表达MCL-1的HCC827细胞模型。克隆形成实验结果显示,在培养10 d后,HCC827^(NC)和HCC827^(MCL-1)组克隆细胞数分别为(274±10)和(315±9)个,t=5.203,P=0.007。HCC827^(NC)细胞和HCC827^(MCL-1)细胞的倍增时间分别为(26.38±2.17)和(17.15±1.63) h,t=5.887,P=0.004。Transwell实验结果显示,48 h后HCC827^(NC)和HCC827^(MCL-1)组穿过小室的细胞数分别为(225±6)和(389±34)个,t=7.269,P=0.002。划痕实验结果显示,HCC827^(NC)组和HCC827^(MCL-1)组48 h划痕愈合率分别为(20.46±0.10)%和(30.55±0.29)%,t=56.820,P<0.001。MTT实验结果显示,DDP作用于HCC827^(NC)细胞72 h的抑制率为(69.74±0.80)%,HCC827^(MCL-1)细胞为(58.59±3.16)%,t=5.940,P=0.004;TXT作用于HCC827^(NC)细胞72 h的抑制率为(54.15±0.42)%,HCC827^(MCL-1)细胞为(43.88±0.55)%,t=25.870,P<0.001。结论 MCL-1表达水平上调和NSCLC预后不良有关,MCL-1高表达可促进NSCLC的恶性进程,降低其对化疗药物的敏感性,MCL-1或可作为NSCLC新的潜在预后生物标志物。

IGHG1对人急性髓系白血病THP-1细胞增殖、凋亡的影响

目的:探讨免疫球蛋白G1重链恒定区(IGHG1)对急性髓系白血病(AML)细胞系THP-1细胞增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制。方法:体外培养人AML THP-1细胞,分为对照(正常培养的THP-1细胞)、pcDNA3.1[转染IGHG1过表达(pcDNA3.1-IGHG1)阴性对照质粒的THP-1细胞]、pcDNA3.1-IGHG1(转染pcDNA3.1-IGHG1的THP-1细胞)、LY364947[转化生长因子-β(TGF-β)/信号转导蛋白(Smad)抑制剂LY36494720μmol/L处理THP-1细胞)]、si-NC[转染IGHG1小干扰RNA(IGHG1-siRNA)阴性对照的THP-1细胞]、si-IGHG1(转染IGHG1-siRNA的THP-1细胞)和si-IGHG1+LY364947(IGHG1-siRNA和LY364947共同处理THP-1细胞)共7组。荧光定量PCR法检测各组THP-1细胞中IGHG1和免疫球蛋白G(IgG)mRNA的表达;CCK-8法检测各组THP-1细胞增殖活力;流式细胞术检测各组THP-1细胞凋亡率和细胞周期变化;蛋白印迹法检测各组THP-1细胞增殖、凋亡及TGF-β/Smad信号通路相关蛋白的表达。结果:与对照组相比,过表达IGHG1后THP-1细胞中IGHG1和IgG mRNA表达、细胞增殖活力、S期的细胞比例、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、IgG、TGF-β1、磷酸化Smad3(p-Smad3)/Smad3蛋白表达均显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、G_(0)/G_(1)期的细胞比例、p21、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达均显著降低(P<0.05)。抑制TGF-β/Smad信号通路或沉默IGHG1后THP-1细胞中IGHG1和IgG mRNA表达、细胞增殖活力、S期的细胞比例、Cyclin D1、Bcl-2、IgG、TGF-β1、p-Smad3/Smad3蛋白表达均显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、G_(0)/G_(1)期的细胞比例、p21、Bax、Caspase-3蛋白表达均显著升高(P<0.05);且与沉默IGHG1相比,IGHG1基因沉默和TGF-β/Smad通路抑制共同处理的THP-1细胞中IGHG1和IgG mRNA表达、细胞增殖活力、S期的细胞比例、Cyclin D1、Bcl-2、IgG、TGF-β1、p-Smad3/Smad3蛋白表达均显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、G_(0)/G_(1)期的细胞比例、p21、Bax、Caspase-3蛋白表达均显著升高(P<0.05)。结论:沉默IGHG1基因可下调IgG的表达,抑制人AML THP-1细胞增殖,阻滞细胞周期进程,并诱导细胞凋亡;其作用机制可能与抑制TGF-β/Smad通路的激活有关。

髓样细胞白血病基因-1在胰腺癌组织和胰腺癌细胞株中的表达和意义

目的研究人胰腺癌组织中髓样细胞白血病基因-1(Mcl-1)的表达情况,并分析其与临床病理特征的关系及在不同胰腺癌细胞株中表达的情况。方法应用免疫组织化学SP法检测50例胰腺癌组织和14例正常胰腺组织中Mcl-1的表达,分析其与临床病理特征的关系。应用Western blot法检测Mcl-1在不同胰腺癌细胞株中的表达情况。结果胰腺癌标本50例中有34例出现Mcl-1阳性表达,阳性率为68.0%;而正常胰腺组织中均未检测到Mcl-1表达。Mcl-1蛋白的表达与肿瘤分化程度、临床分期有关(P<0.05),与患者性别、肿瘤部位及有无淋巴结转移无显著相关性(P>0.05)。PANC1和Bx PC3两种细胞中均有Mcl-1表达,表达强度为PANC1>Bx PC3,但差异无统计学意义。结论抗凋亡蛋白Mcl-1在胰腺癌组织中的呈高表达,提示其对胰腺肿瘤的发生、发展可能起重要作用,Mcl-1的表达情况可作为胰腺癌预后不良的重要生物学指标。

热休克蛋白gp96、髓样细胞白血病-1和阻抑蛋白在肝硬化和肝癌组织中的表达

目的:分析热休克蛋白gp96、髓样细胞白血病-1(MCL-1)和阻抑蛋白(PHB)在LC和HCC组织中的表达及其临床意义.方法:免疫组化二步法分别检测19例LC,32例HCC和21例对照组肝组织中gp96,MCL-1和PHB的表达,并分析其与肝癌临床病理学特征的关系.结果:gp96在对照组、LC组和HCC组的表达逐渐增强(P<0.05);HCC无包膜、有坏死和门静脉有癌栓者gp96表达较高;gp96表达与HCC分化程度呈负相关(r=-0.4655,P=0.0073),与TNM分期呈正相关(r=0.5157,P=0.0025).MCL-1和PHB在HCC组织中过表达,HCC有坏死者MCL-1表达高于无坏死者,HCC无包膜者PHB表达高于有包膜者(P<0.05).结论:gp96,MCL-1和PHB的过表达可能与HCC的发生、发展有关.gp96可能参与LC的发生、发展及向HCC的恶性转化,有助于判断HCC患者的预后.

胶质瘤细胞中上皮剪接调控蛋白1(ESRP1)对人髓细胞白血病基因(MCL1)剪接的调控

目的研究胶质瘤细胞系U251中上皮剪接调控蛋白1(ESRP1)对人髓细胞白血病基因1(MCL1)转录本剪接的调控作用。方法对胶质瘤患者数据库中MCL1的测序结果进行数据挖掘,寻找关键位点。构建pc DNA-ESRP1外源表达载体并在U251细胞中进行过表达,通过反转录PCR和Western blot法检测MCL1不同异构体的表达情况。结果 ESRP1在U251细胞中的蛋白表达水平较正常胶质细胞低,MCL1异构体1在U251细胞中的表达高于正常胶质细胞,而异构体2和异构体3的表达则低于正常胶质细胞;在U251细胞中过表达ESRP1以后,发现异构体1表达较未转染组下降,而异构体3表达则显著升高,异构体2表达无明显变化。此外,第801G、802A缺失的MCL1无法被ESRP1正确剪切,异构体1和异构体3的表达与ESRP1转染前后无显著差异。结论抑制ESRP1表达或RNA识别位点突变可以引起肿瘤中癌基因转录本剪接异常。

微小RNA-101及髓细胞白血病因子-1在子痫前期中的表达及对胎盘滋养层细胞的影响

目的:探讨微小RNA-101(miR-101)和髓细胞白血病因子-1(MCL1)在子痫前期(PE)中的表达及对胎盘滋养层细胞增殖、凋亡及侵袭的影响。方法:收集2018年6月至2020年12月在郑州大学第二附属医院妇产科就诊的56例PE孕妇(PE组)和60例正常孕妇(对照组)的相关资料,采用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测其胎盘组织中miR-101的相对表达水平,蛋白免疫印迹法及免疫组织化学法检测MCL1的表达,分析二者表达的相关性;采用双荧光素酶报告基因实验验证人滋养层细胞HTR8/SVneo中miR-101与MCL1的靶向关系;通过转染分别抑制HTR8/SVneo细胞中miR-101和MCL1的表达,并采用CCK8法、流式细胞仪及细胞侵袭实验检测细胞增殖、凋亡及侵袭能力的变化。结果:PE组胎盘组织中miR-101水平明显高于对照组,MCL1蛋白水平明显低于对照组(P<0.05),且二者表达呈负相关(r<0,P<0.05);miR-101与MCL1之间存在靶向关系,体外抑制miR-101后HTR8/SVneo细胞的增殖和侵袭活性升高,凋亡率下降(P<0.05),与单独抑制miR-101相比,共抑制miR-101和MCL1的表达后细胞的增殖和迁移能力降低,凋亡率升高(P<0.05)。结论:miR-101在PE胎盘组织中高表达,并通过靶向MCL1引起滋养层细胞增殖、浸润不足和异常凋亡,参与PE的发生进展。

白藜芦醇增强TRAIL对人髓系白血病KG-1a细胞的细胞毒作用

目的：观察白藜芦醇作用前后TRAIL对人髓系白血病KG-1a细胞的细胞毒作用的变化。方法：流式细胞仪检测KG-1a细胞表面CD34和CD38的表达,二甲氧唑黄（XTT）细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒检测白藜芦醇作用前后TRAIL对KG-1a细胞增殖的影响,AnnexinV-FITC/PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡变化。流式细胞仪检测白藜芦醇作用前后KG-1a细胞表面TRAIL死亡受体表达变化。结果：人髓系白血病KG-1a细胞CD34＋CD38-占（58.67±2.87）%,101 000 ng/ml的TRAIL对KG-1a细胞增殖无明显影响,但对白藜芦醇作用后的KG-1a细胞的增殖有明显抑制作用,白藜芦醇能促进TRAIL诱导KG-1a细胞凋亡,并能上调KG-1a细胞表面TRAIL死亡受体DR5的表达。结论：白藜芦醇能增强TRAIL对人髓系白血病KG-1a细胞的细胞毒作用,其机制可能与白藜芦醇上调KG-1a细胞表面TRAIL死亡受体DR5的表达有关。

髓样细胞白血病-1基因在原发性肝癌组织中的表达及临床意义

目的探讨髓样细胞白血病-1（myeloid cell leukemia-1，Mcl-1）基因及蛋白在原发性肝癌和肝硬化组织中的表达及临床病理学意义。方法采用逆转录-聚合酶链反应（reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）法，蛋白质印迹法（western blot，WB）和免疫组织化学 ENVISION法分别检测20例肝癌组织，19例肝硬化组织和12例对照肝组织中 Mcl-1的表达，并分析其表达与肝癌临床病理学特征的关系。结果 Mcl-1 mRNA相对表达强度在对照组、肝硬化组和肝癌组中分别为0.52±0.17，3.46±1.7，3.65±2.93，其中肝癌组及肝硬化组分别与对照组间比较，差异均有统计学意义（t＝7.925，5.334，P＜0.05）。Mcl-1蛋白相对表达量在肝硬化组（0.51±0.35）和肝癌组（0.75±0.36）均显著高于对照组（0.21±0.19）（t＝5.526和6.355，P＜0.05）。肝癌组Mcl-1的阳性表达率为55.00％（11／20），显著高于对照组33.33％（4／12）（t＝7.835，P＜0.05），Mcl-1蛋白阳性表达与肿瘤有无坏死和TNM分期有关（χ2＝4.201，P＜0.05）。结论 Mcl-1基因及蛋白在肝癌组、肝硬化组和对照肝组织中的表达存在差异，可能参与了肝硬化的发生、发展及向肝癌的恶性转化。

髓样细胞白血病-1基因在多发性骨髓瘤发病中的分子机制

目的通过检测骨髓瘤细胞中依赖IL-6与否的髓样细胞白血病-1(mcl-1)基因的表达,阐明mcl-1基因在多发性骨髓瘤发病中的信号转导通路。方法应用JAK特异性抑制剂AG490、蛋白激酶抑制剂LY294002、ERK1/2信号通路的特异性阻断剂PD98059,分别研究了JAK/STAT通路、ras/MAPK通路及PI3K/Akt三大信号途径与mcl-1基因在多发性骨髓瘤中的关系。结果在骨髓瘤细胞8226和U266中,抑制ERK1/2活性不能改变mcl-1的表达;高浓度的AG490不能抑制STAT3的酪氨酸磷酸化;LY294002可抑制8226细胞和ANBL-6细胞的增殖,但不抑制mcl-1的表达。结论 Ras/MAPK通路以及PI3K通路在mcl-1基因的调节中无作用,但STAT的作用仍然需要进一步探讨。

鼻用激素治疗鼻息肉对髓样细胞白血病1基因和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3基因表达的影响

目的探讨鼻用激素治疗鼻息肉的机制及对其髓样细胞白血病1(MCL-1)基因和半胱氨酸天冬氨酸酶蛋白-3(Caspase-3)基因表达的影响。方法选取35例鼻息肉患者作为观察组,均在接受丙酸氟替卡松鼻喷剂治疗14 d后行内镜下鼻息肉切除术治疗,分别留取治疗前后鼻息肉组织,将激素治疗前采集的鼻息肉组织作为单纯鼻息肉组,将激素联合手术切除术后采集的鼻息肉组织作为鼻息肉激素组;另选取35例同期单纯鼻中隔偏曲患者作为对照组,采集其正常的中鼻甲组织作为鼻腔黏膜组。3组标本均行常规苏木精-伊红(HE)染色和免疫组化染色。记录10个高倍视野中的嗜酸性粒细胞(EOS)数量,比较3组MCL-1、Caspase-3表达水平。结果单纯鼻息肉组、鼻息肉激素组的EOS数量均多于鼻腔黏膜组,且单纯鼻息肉组的EOS数量多于鼻息肉激素组(P<0.05)。单纯鼻息肉组、鼻息肉激素组和鼻腔黏膜组的MCL-1阳性率依次降低(均P<0.05);单纯鼻息肉组、鼻息肉激素组和鼻腔黏膜组的Caspase-3阳性率依次升高(均P<0.05)。单纯鼻息肉组和鼻息肉激素组的MCL-1表达与EOS浸润程度呈正相关,Caspase-3表达与EOS浸润程度呈负相关(P<0.05)。结论丙酸氟替卡松鼻喷雾剂作为经典的鼻用人工合成类固醇激素,可有效治疗鼻息肉,其作用机制可能与下调MCL-1表达和促进Caspase-3活化有关。

髓细胞白血病-1基因及其产物研究进展

髓细胞白血病 1 (myeloidcelllekemia 1 ,MCL 1 )基因是高度可调节的分化早期活化基因 ,属于抗凋亡基因家族成员 ,其编码产物Mcl 1蛋白与正常和异常造血细胞的生存及分化有密切关系。细胞外调节蛋白激酶通路、Janus激酶 信号转导与转录活化因子 (JAK STAT)通路、磷酸肌醇 3 激酶 (PI3 K) 丝氨酸 苏氨酸激酶Akt通路等多个信号转导途径参与了正常和异常造血细胞内MCL

髓样细胞白血病-1及染色质重塑A蛋白在卵巢上皮癌组织中的表达

目的:探讨髓样细胞白血病-1基因(Mcl-1)及染色质重塑基因A(ARIDIA)蛋白在卵巢上皮癌组织中的表达。方法:应用免疫组化Envision法检测113例卵巢上皮癌(Ⅰ期42例、Ⅱ期28例、Ⅲ期30例及Ⅳ期13例)组织、40例卵巢囊腺瘤组织及20例正常卵巢组织中的Mcl-1、ARIDIA蛋白表达,比较2种蛋白表达阳性率在3种组织和不同分期卵巢上皮癌组织的表达情况。结果:卵巢上皮癌组织中Mcl-1蛋白表达阳性率明显高于卵巢囊腺瘤和正常组织,而ARIDIA明显低于卵巢囊腺瘤和正常组织(P<0.05);Mcl-1蛋白在卵巢上皮性癌Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期及Ⅳ期的组织中表达阳性率逐渐升高,ARIDIA蛋白表达阳性率逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:卵巢上皮性癌的发生、发展与Mcl-1蛋白表达升高和ARIDIA蛋白表达降低有关。

人类宫颈癌中白细胞介素-6与髓样细胞白血病-1表达的相关性及临床意义

目的研究白细胞介素-6(IL-6)、髓样细胞白血病-1(MCL-1)蛋白及MCL-1mRNA在宫颈癌、癌前病变及正常宫颈组织中的表达情况及其相关性。方法采用免疫组化法检测30例宫颈鳞癌、10例宫颈上皮内瘤变(CIN)及10例正常宫颈组织中IL-6和MCL-1蛋白表达情况,采用逆转录PCR法检测组织中MCL-1 mRNA的表达情况。结果IL-6和MCL-1蛋白在宫颈癌组织中的表达高于正常宫颈组织及CIN组织(P<0.01),且IL-6和MCL-1蛋白的表达呈正相关性(r=0.566,P<0.01);MCL-1蛋白与MCL-1mRNA表达呈正相关性(r=0.772,P<0.01)。结论IL-6和MCL-1的表达在宫颈癌的发生、发展过程中起着共同调节作用,这一发现有助于对早期癌前病变的筛查,并为宫颈癌的治疗提供了一个细胞因子靶点。

髓样细胞白血病-1与消化系肿瘤关系的研究进展

髓样细胞白血病(Mcl-1)蛋白是Bcl-2家族的抗凋亡成员之一,是通过线粒体途径参与细胞凋亡和增殖过程的重要分子。Mcl-1的半衰期很短,生存刺激信号和细胞死亡信号能迅速调节其表达,说明Mcl-1在细胞周期和死亡程序中起重要作用。同时,mcl-1基因表达受多种信号转导通路调控。最近研究发现Mcl-1在多种消化系肿瘤中过表达,提示Mcl-1对肿瘤的发生、发展起重要作用,但具体机制尚未阐明。本文就Mcl-1与消化系肿瘤关系的研究进展作一综述。

吉西他滨和髓细胞白血病基因1小干扰RNA纳米药物的制备和表征

目的研究利用生物相容性的磷脂-阳离子聚合物(LENP)混合型纳米载体共同递送吉西他滨(Gem)和髓细胞白血病基因1(MCL-1)小干扰RNA(siRNA)(siMCL-1),制备治疗胰腺癌的纳米药物LENPGem-siMCL-1。方法用复乳法合成LENP-Gem-siMCL-1核心,Gem包裹在亲水性核心,表面正电荷通过静电吸附siRNA;核心外面的磷脂层通过超声薄膜法进行自组装。纳米粒度及Zeta电位分析仪测量纳米颗粒的粒径分布和表面电位;透射电镜观察纳米颗粒的内部结构;高效液相色谱测量纳米载体对Gem的包封率;激光共聚焦显微镜观察胰腺癌细胞PANC-1对LENP-羧基荧光素(FAM)-siMCL-1的摄取,Western印迹法检测PANC-1细胞中MCL-1蛋白表达水平。以LENP-Gem-siMCL-1(Gem终浓度为32μmol·L-1)与胰腺癌PANC-1和BxPC-3细胞培养48 h,MTT法测定细胞存活率。结果制备的纳米药物LENP-GemsiMCL-1为结构和大小分布均匀的球形粒子,具有典型的核壳结构,粒径约200 nm,表面电位为-22.6 mV。Gem的包封率达到24.6%。siMCL-1可以被LENP有效输送至PANC-1细胞。与LENP对照组相比,LENP包裹的siMCL-1在PANC-1细胞中将MCL-1蛋白表达显著降低至57.7%;与生理盐水对照组相比,裸siMCL-1组未发现明显下调。LENP-Gem-siMCL-1对PANC-1和BxPC-3细胞存活均具有明显的抑制作用,LENP-Gem-siMCL-1组和LENP-Gem-siControl组PANC-1细胞存活率分别为42.7%和58.9%(P<0.01),BxPC-3细胞存活率分别为34.0%和86.5%(P<0.01)。结论磷脂-聚合物混合型纳米载体LENP可同时递送Gem和siMCL-1。LENP-Gem-siMCL-1体外明显抑制胰腺癌细胞生长,显示出良好的抗肿瘤作用。

LncRNA NNT-AS1通过miR-582-5p/MCL1对肝癌细胞侵袭和转移的影响

目的探讨LncRNA NNT-AS1通过miR-582-5p/MCL1轴对肝癌的侵袭和转移的影响。方法培养正常肝L-02细胞和肝癌细胞MHCC97H、LM3、SMCC7721、Huh7、Hep3B,选取肝癌Huh7细胞系,将细胞进行分组与转染;采用qRT-PCR检测各组细胞中NNT-AS1、miR-582-5p表达,WB检测各组细胞MCL1蛋白表达,RIP检测LncRNA NNT-AS1和miR-582-5p的结合情况,双荧光素酶报告基因实验验证miR-582-5p和MCL1靶向关系,Transwell实验检测细胞侵袭和转移能力。结果与正常肝细胞L-02比较,NNT-AS1在肝癌细胞系中高表达,miR-582-5p在肝癌细胞系中低表达;NNT-AS1和miR-582-5p沉默后,细胞中NNT-AS1和miR-582-5p表达显著降低,细胞侵袭和转移能力也明显减弱;LncRNA NNT-AS1可结合吸附miR-582-5p,MCL1是miR-582-5p的下游靶基因、且MCL1在肝癌细胞系中高表达;干扰LncRNA NNT-AS1或过表达miR-582-5p表达可抑制肝癌细胞侵袭和迁移;同时沉默NNT-AS1和过表达miR-582-5p,可显著降低细胞侵袭和迁移能力;干扰MCL1也可抑制肝癌细胞侵袭和迁移能力增强的现象。结论沉默LncRNA NNT-AS1可通过miR-582-5p作用,抑制MCL1表达从而抑制肝癌细胞侵袭和转移。

急性髓系白血病患者AML1-ETO融合基因动态监测及分析

目的观察急性髓系白血病(AML)患者AML1-ETO融合基因表达水平及实时定量RT-PCR(RQ-PCR)动态监测的临床意义。方法对15例AML患者采用化疗药物进行诱导缓解、巩固和维持治疗,分别于初诊、诱导化疗结束及复发时采集骨髓标本,采用RQ-PCR法检测AML1-ETO融合基因表达水平,并采用Pearson相关分析法分析其与患者临床参数的关系。结果 15例患者初诊时AML1-ETO融合基因表达水平为168%～694%,其与患者骨髓幼稚细胞比例、年龄、性别等临床参数均无明显相关性(P>0.05);AML1-ETO融合基因表达水平在完全缓解时降低、复发时明显升高(并早于骨髓形态学复发)。结论 AML患者AML1-ETO融合基因表达水平与病情有关,采用RQ-PCR对其动态监测有利于发现分子水平复发及进行诊断、疗效判定、微小残留病(MRD)监测。