Pereira髓过氧化物酶（MPO）染色原理探讨

Ｐｅｒｅｉｒａ髓过氧化物酶（ＭＰＯ）染色原理探讨南京军区福州总医院（３５０００１）何菊英，朱忠勇１９８４年，Ｐｅｒｅｉｒａ报道了一种安全、简便、价廉的碘化钾髓过氧化物酶（ＭＰＯ）染色法［１］，１９８５年作者曾对该法进行了应用和改良，并对某些主要影响因...

电针不同腧穴对急慢性结肠炎大鼠髓过氧化物酶(MPO)含量的影响

目的:观察电针不同腧穴对急、慢性结肠炎模型大鼠结肠组织中髓过氧化物酶(MPO)含量的影响。方法:急性实验取60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、大肠俞组、天枢组、足三里组、上巨虚组,每组10只,雌雄各半,用6%冰醋酸灌肠造模,造模后治疗3 d,麻醉取病变结肠组织,用ELISA法测定MPO含量。慢性实验SD大鼠分组同急性实验,用免疫学加局部刺激法造模,治疗3 d后各组处死一半检测MPO含量,其余继续治疗7 d后取材测定MPO含量。结果:急性实验中,与空白组比较,模型组MPO含量升高(P<0.01);与模型组比较,腧穴组MPO含量均下降(P<0.01);天枢组较其他腧穴组MPO含量下降(P<0.05)。慢性实验治疗3 d后,天枢和上巨虚两组较大肠俞和足三里两组MPO含量下降(P<0.05);治疗10 d后,天枢组较其他腧穴组MPO含量下降(P<0.01)。结论:电针大肠俞、天枢、足三里、上巨虚均可降低急慢性结肠炎大鼠结肠组织中MPO含量,其中天枢组效果较佳。

改良Pereira髓过氧化物酶快速染色法及应用

目的 为了使髓过氧化物酶 (MPO)染色快速准确、安全可靠 ,对Pereira碘化钾MPO染色方法做了进一步改进。方法 采用将碘化钾溶于Wright Giemsa染色液中的新配方 ,使试剂更稳定、保存时间长 ,并简化了操作、缩短了染色时间。结果 此法与Washburn联苯胺法比较 ,两者阳性率十分相近 ,差异无显著性意义 (P >0 0 5 )。结论 改良Pereira髓过氧化物酶法阳性反应标本存放多年不褪色 ,是目前众多碘化钾法中较理想的MPO染色方法之一。

不同的标本保存条件、溶血情况对髓过氧化物酶检测的影响

目的 探讨同一患者不同的标本保存方式、保存时间、溶血情况对血液标本中髓过氧化物酶（MPO）含量的影响.方法 30例患者每人采集3管肝素钠抗凝静脉血,第一管30min内分离血浆,检验MPO含量做为基准值,其余两管分两组放常温（22℃）和2 ～8℃冰箱4h后检验,计算变化率（％）,组间采用配对t检验,评价常温和冰箱短时间内保存样本对MPO含量的影响;同时筛选不同MPO含量的15例患者,将其第一管血浆,分装保存于2～8℃和-20℃冰箱,分别于1天后、3天后、5天后测定MPO含量,计算下降率（％）,组间采用配对t检验,评价长时间内冰箱保存样本,冷藏和冷冻保存对MPO含量的影响.另外,对做完基准值的血样,人为造成溶血后测其MPO值,计算溶血的干扰偏差.结果 常温和冰箱短时间内保存4h,样本中MPO含量变化呈上升趋势,但差异无统计学意义（P＞0.05）.冷藏和冷冻的新鲜血浆样本长时间保存,MPO含量变化呈下降趋势,组间差异具有统计学意义（P＜0.01）,随着保存时间延长,含量下降越明显.标本不同程度的溶血均对测定MPO造成严重干扰.结论 MPO血浆样本采集后,要及时检验,在常温和2～8℃冰箱保存4h分离检测,对结果有影响,但影响较小,差异无统计学意义.分离新鲜血浆长时间冰箱保存,对结果影响差异有统计学意义,冷冻优于冷藏保存.不同程度的标本溶血均对测定MPO造成严重干扰.

中国甘肃人群髓过氧化物酶基因多态性与急性白血病易感性的关系

本研究旨在探讨甘肃汉族人群髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)基因多态性和急性白血病易感性的关系。用1∶1配对病例-对照方法及LDR-PCR方法,对100例急性白血病(AL)患者和100例非血液病、非肿瘤者作为对照进行mpo基因G463A突变分析。结果发现,AL病例组mpo基因a等位基因频率(19%)和ga/aa基因型频率(31%)均低于对照组(28%和54%)。携带ga/aa基因型的个体发生AL的相对风险度为其野生型(gg)的0.383倍(95%CI=0.215-0.682)。进一步分层分析显示,急性髓系白血病(AML)病例组ga/aa基因型频率(28.2%)低于对照组(54%)(p<0.01)。携带ga/aa基因型的个体发生AML的相对风险度为其野生型(gg)的0.346倍(95%CI=0.157-0.546)。急性淋巴细胞白血病(ALL)病例组mpo基因a等位基因频率和ga/aa基因型频率均与对照组无统计学差异(p>0.05)。结论:本研究人群mpo基因多态性与AML遗传易感性相关,等位基因a对AML易感性有保护作用,但与ALL易感性无关联。

糖尿病肾病早期髓过氧化物酶与尿微量白蛋白、胱抑素C的相关性研究及临床意义

目的探讨髓过氧化物酶(MPO)对早期糖尿病肾病的诊断价值。方法分别选择69例糖尿病肾病(DN)和57例糖尿病初期未发生微血管病变的住院糖尿病病人(DM)为观察组,53例健康体检者为正常对照组,分别检测观察组及正常对照组的MPO、尿微量白蛋白(mALB)及胱抑素C(CysC)的含量,然后对结果进行统计分析。结果 DN组血清MPO与尿微量白蛋白、胱抑素C均呈正相关(r=0.478;0.367),有统计学意义(P<0.01);DM组MPO与尿微量白蛋白、胱抑素C相关性低(r=0.171,0.134),无统计学意义(P>0.05);正常对照组MPO与尿微量白蛋白、胱抑素C相关性低(r=0.127,0.129),无统计学意义(P>0.05)。结论 MPO在糖尿病微血管病变机制中起着十分重要的作用,是除尿微量白蛋白外的另一个糖尿病肾病早期病变的诊断指标。MPO与尿微量白蛋白联合检测对于早期糖尿病肾病诊断,糖尿病并发微血管病变的预防和治疗,减少微血管病变的发病率,提高DM患者的生活质量具有重要的临床价值。

血清髓过氧化物酶水平与心肺复苏术后自主循环恢复患者预后关系的研究

目的：观察心脏骤停经心肺复苏术（CPR）后自主循环恢复（ROSC）的患者血清髓过氧化物酶（MPO）水平变化，探讨MPO与疾病预后的关系。方法在急诊科收集心脏骤停经CPR后ROSC的患者作为研究对象，观察其存活及诊治情况，详细记录临床资料，从CPR开始选取6个时间点，抽取外周静脉血，用酶联免疫法检测血清中MPO水平。结果共收集临床病例248例，其中134例患者在ROSC后3 h内死亡；32例患者在ROSC后3 h以上，6 h以内死亡；12例患者在ROSC后6 h以上，12 h以内死亡；5例患者在ROSC后12 h以上，24 h以内死亡；35例患者在ROSC后24 h以上，20 d以内死亡；30例患者存活在ROSC后20 d以上。ROSC后3 h内死亡的134例患者血清MPO水平与其他114例患者血清MPO水平差异有统计学意义（P＜0.05）；ROSC后存活24 h以上，但在20 d以内死亡的35例患者与ROSC后存活20 d以上的30例患者比较各时间点血清MPO水平差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论血清MPO水平可能与CPR后ROSC的患者近期预后有关，血清MPO水平越高，预后越差；但血清MPO水平可能不能用来判断此类患者的远期预后。

髓过氧化物酶与急性冠脉综合征

髓过氧化物酶（MPO）是一种由中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞分泌的白细胞酶。与白血病、肾炎、小血管炎、肿瘤及动脉粥样硬化等发病有关。MPO有促进动脉粥样硬化病变形成的作用．并影响粥样斑块的稳定性．可以通过增大氧化应激而引起急性冠脉综合征（ACS）。最近有研究认为。MPO可用来判断ACS的预后。我们对MPO与ACS的关系综述如下．

64排螺旋CT检测冠状动脉病变与髓过氧化物酶的相关性研究

目的探索64排螺旋CT检测冠状动脉(冠脉)病变与血浆髓过氧化物酶(MPO)水平的相关性。方法选择以胸痛为主要症状的患者254例,根据冠脉CT造影结果,分为正常对照(NC)组89例、稳定型心绞痛(SAP)组98例、急性冠脉综合征(ACS)组67例。所有患者均测定血糖、血脂、血压等指标。采用酶联免疫吸附法测定所有入选者血浆MPO浓度,用Gensini积分评价冠脉病变严重程度,比较组间血浆MPO浓度水平差异及血浆MPO浓度与Gensini积分的相关性。结果 ACS组血浆MPO平均浓度高于SAP组,SAP组血浆MPO平均浓度高于正常对照组,差异均有显著统计学意义(P<0.01)。在冠心病患者中,血浆MPO水平随着Gensini积分增加而升高(P<0.01),MPO浓度与Gensini积分呈显著正相关(r=0.51,P<0.01)。结论 64排螺旋CT冠脉检查进行Gensini积分与血浆MPO水平密切相关,两者联合评估冠脉病变严重程度有一定临床意义。

髓过氧化物酶基因多态性研究进展

髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）存在于髓系细胞（主要是中性粒细胞和单核细胞）的嗜苯胺蓝颗粒中,是中性粒细胞活化的标志物。MPO可影响机体的免疫功能。近年来研究发现：许多疾病,如肺癌、冠心病、白血病、胃癌、大肠癌、哮喘等的易感性与MPO基因多态性有关[1-2]。

血细胞髓过氧化物酶染色——吡啰红G-过氧化氢-碘化钾法及其应用

目的 为了使髓过氧化物酶 (MPO)染色快速准确、安全可靠 ,对Pereira碘化钾 (KI)MPO染色方法做了进一步改进。方法 采用吡红G(pyronineG)为显色剂取代Pereira原法中的Leishman染料 ,以加H2 O2 的方式显示MPO ,经正交试验确定了染色工作液中各试剂的最佳浓度及含量。结果 本法MPO阳性产物呈棕黄色至棕黑色颗粒状 ,细胞核为浅红色。与煌焦油蓝 KI法 (BCB KI)及Washburn联苯胺法比较 ,阳性率十分相近 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 本法所显示的MPO阳性反应对比鲜明、易于判断 ,试剂稳定、保存时间长 ,操作简单、染色时间短 。

冠心病患者检测髓过氧化物酶和脂蛋白相关磷脂酶A2的临床意义

目的探讨冠心病患者检测髓过氧化物酶（MPO）和脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp—PLA2）对于诊断患者冠心病病变程度和冠脉狭窄支数的意义。方法对健康对照组50例、急性心肌梗死（AMI）组43例、稳定型心绞痛（SAP）组37例和不稳定型心绞痛（UAP）组40例的生化指标（主要是MP0和Lp-PLA2水平）测定并进行统计学分析。同一病变人群依据冠脉造影分为单支冠脉狭窄（Ⅰ组）45例、双支冠脉狭窄（Ⅱ组）40例、三支冠脉狭窄（Ⅲ组）35例，并进行MPO和LpPLA2水平分析。结果AMI组、UAP组和SAP组的TG水平明显比对照组高（t=4．912～6．984，P均〈0．05），HDL明显比对照组低（t=3．987～4．512，P均〈0．05），三组相比差异有统计学意义（t=4．032～4．687，P均〈0．05）。MPO和LpPLA2在冠心病各亚型患者中的水平明显比对照组高，且AMI组分别和SAP，UAP组相比，SAP和UAP组相比，差异均有统计学意义（t=9．654～11．065，t=10．954～12．005，P均〈0．011）。Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组间MPO水平比较差异无统计学意义（P〉0．05），而Lp—PLA2指标三组间水平差别有统计学意义（P〈0．01）。MPO和Lp—PLA2指标之间呈正相关关系（r=0．814，P〈0．01）。结论冠心病不同病变患者检测MPO和LpPLA2两个指标可反映患者病变程度和冠脉狭窄支数情况．

髓过氧化物酶基因多态性与肺癌易感性的研究

目的研究内蒙古地区蒙汉族人群中髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)基因多态性分布频率差异及其与肺癌易感性的关系,同时探讨基因多态性与吸烟在肺癌易感性中的交互作用。方法PCR-RFLP技术检测内蒙古地区蒙古族和汉族人群MPO基因G463A位点的多态性,运用SPSS统计软件对数据分析,计数资料组间差异采用χ2检验及Binary Logistic回归分析进行统计处理,并探讨基因多态性与肺癌易感性的关系。结果 (1) MPO基因G463A位点G/G、G/A和A/A基因型在内蒙古地区汉族健康人群的分布频率分别为63.71%、30.57%和5.72%;在蒙古族健康人群中分布频率分别为64.86%、30.00%和5.14%,两组比较差异无统计学意义(P> 0.05)。(2)内蒙古地区蒙古族和汉族人群中MPOG/A和A/A基因型与MPO G/G基因型比较差异有统计学意义,有明显降低患肺癌风险性的作用(P<0.05)。(3)基因多态性联合吸烟分析发现,在内蒙古地区蒙古族和汉族人群中,吸烟能增加携带各种基因型个体患肺癌的风险性,其中携带MPO G/G、G/A基因型的非吸烟者以及携带G/A、A/A和G/G基因型的吸烟者与携带MPO A/A基因型的非吸烟者比较差异有统计学意义,患肺癌的危险性增加(P<0.05)。结论 (1) MPO基因G463A位点多态性在内蒙古地区蒙古族和汉族人群中的分布差异无统计学意义;(2) MPO G/A和A/A基因型能显著降低内蒙古地区蒙古族和汉族肺癌的易感性;(3) MPO G/G基因型显著增加吸烟者患肺癌的易感性,其与吸烟在肺癌发生中存在交互作用。

61名新生儿髓性过氧化物酶的测定

髓性过氧化物酶(Myeloperoxidase MPO)是中性粒细胞内一种重要杀菌物质。MPO缺乏时,白细胞杀菌功能减弱,临床上可出现反复的细菌感染。测定初生婴儿MPO活性,有助于了解围生期免疫特点和白细胞的发育规律。为此我们测定了61名初生婴儿粒细胞MPO活性,并以健康成人作为对照,以资比较。材料和方法测定对象:61名初生婴儿均为在我院产科出生后1～4天的足月顺产婴儿,出生体重为2.8～3.5kg,其中男婴30名,女婴31名;健康成人年龄在20～40岁之间,男34名,女27名,无新近感染及慢性病史。方法:采用Kaplon报告的简易MPO染色法,染色后在油镜下计数100个中性粒细胞。

髓过氧化物酶/对氧磷酶-1对高密度脂蛋白功能及冠心病危险评估的预测意义

动脉粥样硬化(AS)是冠心病的主要病因,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)作为动脉粥样硬化的保护因子,可使冠心病的发病率降低。然而,在炎症、糖尿病及其他氧化应激下,HDL的结构成分会发生变化而失去AS功能。髓过氧化物酶(MPO)可引起脂质和蛋白成分的化学改变和氧化修饰,而对氧磷酶-1(PON1)可保护LDL和HDL不受氧化应激损伤,因此,MPO/PON1对于预测HDL的功能,以及对冠心病的危险评估有着重要意义。

D-GalN/LPS诱导大鼠急性肝衰竭中髓过氧化物酶和 Nrf2/HO-1信号通路的变化

目的 探讨D-氨基半乳糖(D-GalN)/脂多糖(LPS)诱导急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)大鼠中髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)和核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路的变化及ALF的发生机制。方法 SD大鼠随机分为对照组和ALF组。ALF组:将D-GalN 800 mg/kg和LPS 8μg/只同时腹腔注射,于注射后6、12和24 h检测血清总胆红素(TBiL)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量。ELISA法检测血清MPO、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平,比色法测定MPO活性,RT-PCR检测肝组织Nrf2和HO-1的mRNA水平,Western blot法检测肝组织MPO、Nrf2和HO-1蛋白水平。结果 与对照组比较,ALF组血清MPO水平于造模后6 h升高,12 h为最高,24 h开始下降(23.33±2.06 vs.33.00±3.16,65.75±7.02,53.92±5.63,P<0.05);血清TNF-α(11.30±3.26 vs.102.17±14.80,83.33±11.22,64.25±9.29,P<0.01)和IL-6(10.83±2.92 vs.89.25±10.86,77.33±8.02,65.58±7.31,P<0.01)于造模后6 h升高最明显,12 h后逐渐下降,差异均有统计学意义。ALF组6、12、24 h肝组织MPO活性高于对照组,差异均有统计学意义(15.5±1.51,28.08±4.65,22.92±1.93 vs.12.17±1.27,P<0.05);ALF组肝组织6、12、24 h Nrf2 mRNA(1.59±0.13,3.65±0.11,2.35±0.11 vs.1.04±1.01,P<0.01)和HO-1 mRNA(2.44±0.19,4.77±0.18,3.82±0.17 vs.1.12±0.06,P<0.01)水平高于对照组,差异均有统计学意义。ALF组肝组织MPO(4.10±0.70,9.77±1.15,7.23±0.40 vs.2.07±0.42,P<0.01)、Nrf2(4.03±0.80,9.03±0.50,6.07±0.47 vs.2.63±0.38,P<0.01)和HO-1(1.73±0.21,5.17±0.51,3.03±0.32 vs.0.97±0.21,P<0.01)蛋白表达于12 h达最高值,ALF组各时间点与对照组比较均差异有统计学意义。结论 MPO可能通过氧化应激和炎症反应影响Nrf2/HO-1信号通路,在ALF中发挥重要作用。

神经再生复合剂对大鼠急性脊髓损伤后其内MDA、SOD和MPO表达的影响

目的:观察促神经再生因子复合剂N6对大鼠急性脊髓损伤后脊髓及血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及脊髓内髓过氧化物酶(MPO)表达的影响,探讨其减轻继发性损伤的作用机制及保护受损脊髓作用的最佳介入时间。方法:用改良Allen’s打击法制备大鼠急性脊髓损伤模型,假手术组打开椎板不损伤脊髓,模型组造模后不予治疗,对照组分别于脊髓损伤后10、30和60 min向腹腔注射甲级强的松龙(30 mg/kg),实验组分别于脊髓损伤后10、30和60 min向蛛网膜下腔注射促神经再生因子复合剂N6(166μg/kg)。造模后24 h取材,于各时间点测得假手术组、模型组、实验组和对照组大鼠脊髓损伤组织及血清中MDA、SOD及损伤脊髓组织的MPO活性。结果:实验组损伤脊髓组织MDA含量随着药物介入时间的延迟而增高,各时间点间MDA含量无显著性差异(P>0.05);血清MDA含量随着药物介入时间的延迟而增高,60 min与10、30 min相比有显著性差异(P<0.05);实验组损伤脊髓组织SOD含量随着药物介入时间的延迟而降低,各时间点间SOD含量无显著性差异(P>0.05);血清SOD含量随着药物介入时间的延迟而降低,60 min与10 min相比有显著性差异(P<0.05);实验组损伤脊髓组织MPO含量随着药物介入时间的延迟而增高,60 min与10 min相比有显著性差异(P<0.05)。结论:促神经再生因子复合剂N6治疗可以提高急性脊髓损伤大鼠损伤脊髓及血清SOD含量,降低损伤脊髓及血清MDA、损伤脊髓MPO的含量,从而降低急性脊髓损伤后的继发性损伤,达到保护脊髓组织的目的,且介入治疗时间越早,疗效越好。