髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35~55肽段诱导C57BL/6小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎疾病表型

目的利用6~8周龄雌性C57BL/6小鼠建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型,并对其疾病表型进行探讨,以期建立更接近多发性硬化(MS)的动物模型。方法通过皮内注射髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)35~55肽段免疫50只雌性C57BL/6小鼠,建立EAE模型。每日按15分评分评估其疾病进展情况,观察90d,进一步通过病理学观察小鼠脑组织病变情况。结果EAE模型小鼠疾病表现为慢性病程(3只)、复发缓解病程(7只)和单相病程(11只)。部分小鼠(28只)虽然神经功能评分为0,但它们的毛色、精神和活动都发生了变化,在其脑组织中也观察到了炎性脱髓鞘病变。结论用C57BL/6雌性小鼠建立的EAE模型表现出与MS相似的疾病表型,可作为研究MS的良好动物模型。

黄芪甲苷对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠T细胞免疫调节的影响

背景:多发性硬化初始阶段,中枢免疫细胞激活并释放大量炎症因子,引起白质脱髓鞘甚至累及灰质神经元。CD4^(+)T细胞不同亚群之间的分化平衡在实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的病程进展中发挥着重要作用。课题组前期研究结果表明黄芪内有效成分黄芪甲苷能够调节EAE小鼠体内免疫反应,其是否对T细胞亚群分化具有调节作用尚未明确。目的:探究黄芪甲苷对EAE小鼠治疗效果及其对T细胞的免疫调控机制。方法:将C57BL/6雌性小鼠分为正常对照组、EAE疾病模型组和黄芪甲苷治疗组,每组8只,后2组使用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)制备EAE模型,免疫后第10-28天,黄芪甲苷治疗组以40 mg/(kg·d)灌胃给药。免疫当天至第28天,记录各组小鼠的体质量及临床评分;免疫后第28天取小鼠脊髓制成冰冻切片行苏木精-伊红染色、固蓝染色观察脊髓病理改变,流式细胞术检测脾脏T细胞亚群百分比,Western blot法检测脊髓组织中γ干扰素、白细胞介素17、白细胞介素6的蛋白表达,ELISA检测脾细胞上清液中γ干扰素、白细胞介素17、白细胞介素6、白细胞介素4水平。结果与结论:(1)与EAE疾病模型组相比,黄芪甲苷治疗能够减少EAE小鼠体质量丢失(P<0.05),缓解临床症状(P<0.05),减轻脊髓炎症细胞浸润及髓鞘脱失病理改变(分别为P<0.01和P<0.05);(2)与EAE疾病模型组相比,黄芪甲苷治疗可抑制表达γ干扰素和白细胞介素17的CD4^(+)T细胞亚群比例(分别为P<0.001和P<0.001),上调表达白细胞介素10和转化生长因子β的CD4^(+)T细胞亚群百分比(分别为P<0.001和P<0.01);(3)黄芪甲苷可下调脊髓和脾脏中γ干扰素(分别为P<0.05和P<0.01)、白细胞介素17(分别为P<0.05和P<0.05)、白细胞介素6(分别为P<0.05和P<0.05)的表达,上调脾脏中抑炎因子白细胞介素4的表达(P<0.01);(4)结果说明,黄芪甲苷可以减轻EAE小鼠的临床症状,其机制与调节脾脏免疫细胞亚群进而抑制炎症细胞向中枢浸润、减少髓鞘脱失有关。

少突胶质细胞髓鞘糖蛋白在难治性癫痫中的表达

目的研究难治性癫痫(IE)患者致痫灶脑组织中少突胶质细胞髓鞘糖蛋白(OMgp)的表达,探讨IE发病的可能机制。方法选择2011年6月至2012年6月行"致痫灶切除术"的30例IE患者为研究对象,以实时荧光定量PCR检测OMgp mRNA的转录水平,以Western blot检测OMgp蛋白的表达水平,并与正常对照组相比较。结果 IE患者致痫灶脑组织与正常对照组OMgp mRNA的转录水平为(0.722±0.485vs1.529±0.908,P<0.01),OMgp蛋白表达为(0.895±0.167vs1.285±0.160,P<0.01)。结论 IE患者致痫灶中,OMgp表达明显降低,可能是IE的发病机制之一。

4种自身抗体检测在中枢神经系统脱髓鞘疾病中的鉴别诊断价值

目的探讨血清中水通道蛋白-4(AQP4)抗体、髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)抗体、髓鞘碱性蛋白(MBP)抗体和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体在中枢神经系统脱髓鞘疾病中的鉴别诊断价值。方法选取1368例进行中枢神经系统脱髓鞘疾病鉴别诊断套餐检测的患者为研究对象,采用细胞转染的间接免疫荧光法检测血清标本中4种抗体,并分析检测结果。结果1368例进行中枢神经系统脱髓鞘疾病鉴别诊断套餐检测的患者抗体总阳性率为24.93%。男性和女性阳性率比为1.00∶1.66;平均发病年龄为(41.10±20.61)岁。4种抗体在阳性患者中有5种阳性组合模式,分别为GFAP抗体阳性、MOG抗体阳性、AQP4抗体阳性、GFAP+MOG抗体阳性和GFAP+AQP4抗体阳性,未见MBP抗体阳性。男性GFAP抗体阳性率明显高于女性,差异有统计学意义(P=0.04),女性AQP4抗体阳性率明显高于男性,差异有统计学意义(P<0.05)。不同抗体阳性患者平均发病年龄由低到高依次为MOG抗体阳性、GFAP抗体阳性、AQP4抗体阳性患者,分别为(27.49±19.53)、(39.66±19.93)、(48.38±15.23)岁。视神经脊髓炎4种抗体的总阳性率最高,为46.77%,其次是脊髓炎(32.90%),再次是脑炎(23.35%)。结论AQP4抗体、MOG抗体和GFAP抗体3种自身抗体在中枢神经系统脱髓鞘疾病的鉴别诊断中有重要意义,MBP抗体对该类疾病的鉴别诊断意义不大。

MOG抗体阳性和AQP4抗体阳性视神经炎治疗方法的研究进展

视神经炎是一种主要累及青年,以视神经各种炎性病变为特征的致盲性眼科疾病。近些年随着水通道蛋白-4抗体和髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体在部分患者血清中的发现,越来越多的学者认为这两种抗体介导的视神经炎区别于多发性硬化相关性视神经炎,且分别具有独特的临床特征。本文对目前这两种特异性抗体相关视神经炎的治疗方法的相关研究进行综述,以期为临床工作提供帮助。

中枢神经系统炎性脱髓鞘疾病相关抗体及其致病机制的研究进展

CNS炎性脱髓鞘疾病是免疫介导的,可引起视神经、大脑、小脑、脑干、脊髓等部位脱髓鞘病变;包括多发性硬化、视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)、抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白免疫球蛋白G抗体(MOG-IgG)相关疾病(MOGAD)、胶质纤维酸性蛋白星形细胞病等。特异性诊断生物标志物水通道蛋白4抗体的发现使得NMOSD的病理机制、诊断、鉴别诊断、治疗上取得显著的进步;抗MOG-IgG是MOGAD的致病性抗体;髓鞘碱性蛋白抗体、胶质纤维酸性蛋白抗体等在CNS炎性脱髓鞘疾病诊断与鉴别诊断中均发挥了重要作用。本文综述上述各CNS炎性脱髓鞘疾病相关抗体的研究进展。

CD-1遗传背景小鼠EAE模型:遗传背景对临床表现的影响

目的:制作不同基因背景小鼠自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)模型,比较不同遗传背景小鼠发病、神经功能评分和病理变化的差异。方法:用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗原(MOG35-55)免疫C57BL/6和CD-1基因背景小鼠,用完全弗氏佐剂作为抗原载体,并在不同时间点用精制百日咳毒素增强免疫效果,建立自身免疫性脑脊髓炎模型;记录小鼠发病时间与表现,每天进行神经功能评分,并取其脑和脊髓组织进行病理学检查和以CD4、IL-17为靶标的免疫组化染色。结果:C57BL/6组小鼠发病高峰期出现于初次免疫后17～25 d,表现典型的拖尾、单侧或双侧后肢瘫痪等改变,神经功能评分在3分左右;CD-1组小鼠发病高峰期较C57BL/6组推迟,出现于免疫后35～40 d,可见相似的拖尾及偏瘫表现,神经功能评分在2.8分左右。病理检查可见C57BL/6模型小鼠脑、脊髓出现炎症性细胞浸润,而CD-1小鼠的炎性改变相对较轻、且主要出现于脊髓;罗克沙尔固蓝染色法鉴定显示,模型小鼠脑脊髓组织出现脱髓鞘病变,以C57BL/6小鼠更为严重。免疫组织化学法显示2种模型小鼠发病高峰期均存在不同程度的CD4+及IL-17+炎性细胞的浸润。结论:不同的遗传背景对EAE模型发病、临床表现和病理改变有明显影响;CD-1小鼠亦可运用于制作慢性迁延性EAE模型,更符合人类多发性硬化的特点。

NG2^+胶质细胞在Th1-EAE和Th17-EAE中的不同作用

NG2^+胶质细胞在EAE中的作用还不清楚。课题组应用PDGFRα-CreER特异地诱导白喉毒素在NG2^+胶质细胞中表达,成功地在小鼠中枢神经系统中部分剔除NG2^+胶质细胞。研究发现部分剔除NG2^+胶质细胞的小鼠CNS中在诱导Active-EAE和Th1-EAE的发病过程中,表现为临床症状减轻、髓鞘蛋白脱落减少以及炎症细胞浸润减少,说明NG2^+胶质细胞能够增强胶质细胞的作用以加重Active-EAE和Th1-EAE的发病程度。与此相反,在Th17-EAE小鼠中,NG2^+胶质细胞能够抑制EAE的发生。这些结果提示NG2^+胶质细胞在不同诱导方式EAE发生中的作用是不同的,因此在治疗方法上也应该区别对待。这一结果将帮助多发性硬化患者的治疗提供新的靶点。

单克隆抗体治疗视神经脊髓炎谱系疾病的研究进展

视神经脊髓炎谱系疾病(neuromyelitis optic spectrum disorder,NMOSD)是一种罕见的中枢神经系统自身免疫性炎性脱髓鞘疾病,临床上多以严重的视神经炎和纵向延伸的长节段横贯性脊髓炎为主,复发率和致残率高。目前无特效药物预防其复发,近几年单克隆抗体治疗NMOSD已取得重大突破。本文基于白细胞介素-6受体、B淋巴细胞、末端补体等,针对不同免疫靶点治疗NMOSD的单克隆抗体以及AQP4-IgG阴性患者潜在的治疗靶点进行综述。

EAE小鼠模型的构建及其免疫学机制的探讨

目的用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)多肽免疫C57BL/6小鼠建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型并初步探讨EAE发病的免疫学机制。方法用MOG35-55抗原免疫C57BL/6小鼠,观察实验动物的症状及中枢神经系统的病理改变;应用MTT法测定EAE小鼠脾脏T淋巴细胞活化增殖程度;应用ELISA技术测定EAE小鼠血清IFN-γ浓度和抗MOG35-55抗体水平。结果EAE组发病率为100%,HE染色观察到脑脊髓炎性细胞浸润,白质脱髓鞘等病理改变;EAE小鼠脾脏MOG35-55反应性T淋巴细胞增殖活化,血清IFN-γ浓度和抗MOG35-55抗体随病情的加重而升高。结论用MOG35-55多肽成功诱导了C57BL/6小鼠EAE模型;并推断EAE的发生可能与MOG35-55反应性T淋巴细胞的活化、抗MOG35-55抗体和IFN-γ升高有关。

视神经脊髓炎生物标志物的研究进展

视神经脊髓炎(NMO)是一种免疫介导的、以视神经和脊髓受累为主的中枢神经系统炎性脱髓鞘疾病,多以视神经炎和长节段横贯性脊髓炎为特征表现。目前,水通道蛋白4(AQP4)抗体被认为是NMO特异性生物标志物;然而,仍有10%~25%的NMO患者血清AQP4抗体为阴性,提示NMO免疫发病中还有其他因子参与。本文拟从AQP4、髓鞘少突胶质细胞糖蛋白、AQP1和胶质纤维酸性蛋白抗体4个方面综述目前NMO生物标志物,为NMO的早期临床诊断、鉴别及治疗诊断提供帮助。

从分子免疫病理学的角度看视神经脊髓炎谱系疾病诊断标准的演变

视神经脊髓炎(optic nerve myelitis,NMO)是区别于多发性硬化(multiple sclerosis,MS)的神经系统炎性脱髓鞘性疾病。由于特异性水通道蛋白-4(aquaporin-4,AQP4)抗体的发现,人们对NMO有了崭新的认识和理解,并提出了视神经脊髓炎谱系疾病(neuromyelitis optica spectrum disorders,NMOSDs)的概念。最近研究发现髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(myelin oligodendrocyte glycoprotein,MOG)作为新的靶抗原,在血清AQP4抗体阴性患者中有很大意义。本研究根据分子免疫病理学的新发现、专家共识结合临床经验解读NMOSDs国际诊断标准,对NMOSDs的诊断和治疗提出一些意见。

110例视神经脊髓炎患者血清及脑脊液中AQP4、MOG、GFAP抗体检测结果分析

目的探讨血清和脑脊液中水通道蛋白-4(AQP4)抗体、髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)抗体和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体,在视神经脊髓炎中诊断与鉴别价值。方法选取110例视神经脊髓炎患者血清(Serue)及脑脊液(CSF),采用细胞转染的间接免疫荧光法(CBA)检测血清中AQP4、MOG和GFAP抗体,并分析检测结果。结果(1)AQP4抗体、MOG抗体和GFAP抗体均可在血清和脑脊液中检测到,在110例NMO患者血清及脑脊液中,62例患者检测出阳性抗体,总阳性率为56.36%,血清和脑脊液阳性率分别为51.82%(57/110)和44.55%(49/110)。62例抗体阳性患者血清和脑脊液抗体同时阳性的占70.97%,单独血清抗体阳性的占比为19.35%,单独脑脊液抗体阳性的占比为9.68%。血清和脑脊液同时检测出AQP4抗体阳性的占比最高56.45%,其次是单独血清AQP4抗体阳性占比12.90%。110例NMO患者中52例检测出AQP4抗体,58例为AQP4阴性,在58例患者中检测出MOG抗体的占12.07%(7/58),检测出GFAP抗体的占5.17%(3/58)AQP4和MOG可与GFAP抗体重叠阳性,但未见AQP4和MOG抗体同时阳性的情况。(2)3种抗体中AQP4抗体阳性率最高47.27%(52/110),与MOG抗体6.36%(7/110)和GFAP抗体9.09%(10/110)比较差异有统计学意义(均P<0.01),MOG抗体和GFAP抗体比较差异无统计学意义(均P=0.45)。AQP4抗体男女比为1∶4.2(10∶42),MOG抗体男女比为2.5∶1(5∶2),GFAP抗体男女比为1.5∶1,3种抗体男女间阳性率比较差异有统计学意义(均P<0.01)。(3)不同年龄组阳性率比较,阳性率最高的是51~60岁组73.68%,第二是31~40岁组69.57%,第三是>70岁组57.14%。阳性率比较,<18岁组与31~40岁组、51~60岁组比较差异有统计学意义(P<0.05),18~30岁组与51~60岁组比较有差异统计学意义(P=0.05),其他组两两比较差异无统计学意义(均P>0.05)。(4)62例抗体阳性NMO患者平均(44.45±16.61)岁,其中AQP4抗体阳性患者平均(46.52±14.60)岁,MOG抗体阳性患者平均(29±11.88)岁,GFAP抗体阳性患者平均(47±17.82)岁。结论本研究表明AQP4抗体、MOG抗体和GFAP抗体3种抗体为NMO的诊断与鉴别有重要意义。

呈典型双峰脑炎表型的单纯疱疹病毒脑炎继发自身免疫性脑炎

目的探讨单纯疱疹病毒脑炎(herpes simplex virus encephalitis,HSE)继发自身免疫性脑炎(autoimmune encephalitis,AE)的临床特征。方法收集7例HSE继发AE患者的临床资料,回顾性分析HSE和AE两病程阶段临床表现、脑脊液检查、AE相关抗体检测、影像学表现,治疗及转归。结果7例患者中男5例,女2例,中位发病年龄27(范围16~45)岁。HSE症状首发距AE症状出现的时间间隔为27(范围18~55)d。AE期症状包括精神行为异常5例(5/7),认知功能障碍3例(3/7),癫痫发作3例(3/7),记忆力减退2例(2/7),意识障碍1例(1/7),语言障碍1例(1/7),肢体运动障碍1例(1/7)。AE期7例(7/7)抗N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptor,NMDAR)抗体均阳性;1例(1/7)合并抗γ-氨基丁酸B受体(γ-aminobutyric acid-A/B receptor,GABABR)抗体阳性;2例(2/4)合并髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(myelin oligodendrocyte glycoprotein,MOG)抗体阳性。AE期3例(3/7)出现新发病灶,4例(4/7)无新发病灶。AE期7例均给予一线免疫治疗,1例加用长程免疫治疗。随访5(范围3~8)个月间,7例均预后良好,2例部分遗留HSE期出现的功能障碍。结论HSE继发AE呈现双相病程。AE期抗体由阴性转为阳性,抗NMDAR抗体最常见,还可见抗GABABR、MOG抗体,头颅MRI可见新发病灶,新病灶的出现可能与MOG抗体介导的免疫损伤有关。继发AE对免疫治疗反应良好,但患者可遗留HSE造成的神经功能损伤。

AQP4、MOG抗体阳性视神经脊髓炎谱系疾病的OCT评价

目的探讨水通道蛋白4(AQP4)抗体、髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体(MOG)抗体阳性NMOSD患者的视网膜微观结构损伤的特点。方法收集新疆维吾尔自治区人民医院诊治的27例NMOSD患者,同时选择20例年龄、性别相匹配的健康志愿者作为对照组。采用光学相干断层成像(OCT)检测NMOSD组及健康对照组视网膜神经纤维层(RNFL)12个钟点位的厚度,对AQP-4抗体阳性NMOSD、MOG抗体阳性NMOSD各钟点位RNFL进行比较分析。结果与健康对照组比较,NMOSD病例组RNFL层厚度在1点钟位、6点钟位、7点钟位、8点钟点位、9点钟位、10点钟位、11点钟位、12点钟位,8个钟点位显著变薄(均P<0.01);与MOG抗体阳性NMOSD组比较,AQP4抗体阳性NMOSD组RNFL层厚度在9点钟位、12点钟位变薄(P<0.05)。结论 AQP4、MOG两种抗体阳性NMOSD患者存在明显的视网膜微观结构的损伤,RNFL层厚度在超过半数象限区域显著变薄;MOG抗体阳性NMOSD较AQP4抗体阳性NMOSD视网膜微观损伤轻。

视神经脊髓炎谱系疾病发病相关抗体的研究进展

视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)是一种亚裔人群高发的获得性、异质性神经眼科交叉性疾病,与视神经脊髓炎(NMO)相关的视神经炎在临床上具有较高致盲率,给患者的生活、学习、工作带来沉重的负担。特异性诊断生物标志物水通道蛋白-4抗体(AQP4-IgG)的发现与确认,使得NMOSD在发病机制、诊断及治疗上取得显著的进步,但AQP4-IgG并非NMOSD完全通用的生物标志物,还需要在NMOSD早期开发诊断标记物。随着临床和基础研究的不断进展,髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体(MOG-IgG)、水通道蛋白-1抗体(AQP1-IgG)、胶质纤维酸性蛋白抗体(GFAP-IgG)等在NMOSD发病中的地位逐渐受到重视。本文回顾近些年来与NMOSD发病相关的抗体研究成果,试图分析、综述各抗体在NMOSD发病机制中的作用现状及未来发展前景。

不同病因脱髓鞘性视神经炎患者视盘及黄斑区结构的定量研究

观察初次发病且病程在3个月即以内的DON患者,并探讨AQP4-ON患者、MOG-ON患者及血清抗体阴性患者之间相关指标差异性,其中包括:视盘区、黄斑区结构等。方法 将苏北人民医院眼科确诊为初次发病且病程在3个月及以内的患有脱髓鞘性视神经炎患者(n=32)分为各组内分别含有9例、8例、15例患者的AQP4-ON组、MOG-ON组、抗体阴性组(时间:2021年12月至2022年12月),眼睛例数分别为9只、12只、15只。以上研究对象均需要接受眼科常规检查的同时,再加入光学相干扫描成像检查(OCT),收集入组对象的视网膜结构相关指标,包括RNFL(retinal nerve fiber layer, 视网膜神经纤维层)及GCC(ganglion cell complex,神经节细胞复合体)/GCIPL(ganglion cell and inner plexiform layer,神经节细胞内丛状层)的厚度、FAZ(foveal avascular zone,中心凹无血管区)的面积和周长等,比较三组之间视网膜结构指标的差异。结果 (1)MOG-ON组患者平均RNFL厚度及下半侧分区RNFL的厚度较抗体阴性组更大。(2)MOG-ON组患者颞侧分区的RNFL厚度较AQP4-ON组患者更大。(3)AQP4-ON组患者RNFL颞侧分区厚度与抗体阴性组患者相比更薄。(4)三组之间GCC厚度、FLV、GLV及FAZ的周长、面积均未见明显差异。结论 不同病因脱髓鞘性视神经炎患者之间视盘区及黄斑区视网膜结构具有一定差异。

C57BL／6小鼠EAE模型的建立及Foxp3、CD4＋CD25＋调节性T细胞检测

目的以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白细胞外免疫球蛋白样结构域（MOG驯）为抗原免疫C57BL／6小鼠，建立实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）模型，并检测CIM＋CD25＋T细胞、Foxp3mRNA等指标的表达。方法采用分子克隆技术诱导表达MOGlgd-TrxA融合蛋白，纯化后以此融合蛋白为抗原于侧腹壁皮下多点注射免疫C57BL／6小鼠作为实验组（MOG组）；同时以硫氧还蛋白（TrxA）、豚鼠脊髓匀浆（GPSCH）、生理盐水免疫小鼠分别作为阴性、阳性及正常对照组。双盲法连续早晚观察30d，通过评估动物的临床神经功能、组织病理（HE染色和Kltiver．Barrera法髓鞘染色、免疫组化法）情况，评价模型的质量。流式细胞仪（FACS）检测小鼠脾脏中CD4＋CD25＋调节性T细胞；real—timePCR检测Foxp3mRNA的相对表达水平，并分析两者相关性。结果MOG组及GPSCH组小鼠均呈慢性非缓解型病程，两组在发病时问、达峰时间、临床神经功能评分等方面差异均无统计学意义（P〉0．05）。TrxA组及正常对照组无一动物发病。模型组（包括MOG组和GPSCH组）动物HE染色可见血管周围炎性细胞浸润，胶质结节形成，髓鞘染色可见斑片状髓鞘脱失，大脑、小脑、脑干和脊髓均有不同程度受累。免疫组化定性和半定量分析显示MOG组和GPSCH组病灶周围炎症浸润处AQP-4表达与TrxA组相比明显增高（P〈0．05）；MOG组CIM＋CD25＋T细胞占CIM＋T细胞比例为（4．71±1．61）％，GPSCH组为（1．44±0．65）％，均明显低于TrxA组和正常对照组（P〈0．01），且MOG组和GPSCH组之间的差异亦具有统计学意义（P〈0．01）。MOG组标准化Foxp3mRNA的表达量为2．26±1．97，GPSCH组为1．44±1．20，均低于TrxA组的8．58±3．34（P〈0．01）；但MOG组和GPSCH组间的差异无统计学意义（P〉0．05）。相关性分析显示，模型组小鼠CIM＋CD25＋调节性T细胞与roxp3mRNA表达水平间存在相关性（r=0．849，P〈0．05）。结论用MOGlgd免疫C57BL／6小鼠诱导EAE模型稳定，发病率高，为今后进一步研究多发性硬化的免疫发病机制和采取有效治疗措施打下基础。

Nogo-OMgp/Rho-Rock信号通路在CO中毒急性脑损伤中的作用及盐酸法舒地尔治疗的可行性分析

目的探讨轴突生长抑制因子(Nogo)-少突胶质细胞髓鞘糖蛋白(Omgp)/Ras同源基因(Rho)-Rho相关螺旋卷曲蛋白激酶(Rock)信号通路在一氧化碳(CO)中毒急性脑损伤中的作用,以及Rock抑制剂盐酸法舒地尔对其治疗的可行性。方法将135只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、CO中毒组和盐酸法舒地尔组,每组45只。后2组大鼠采用高压氧舱吸入法建立急性重症CO中毒模型。各组大鼠均接受高压氧治疗2周,其中盐酸法舒地尔组大鼠同时给予腹腔注射盐酸法舒地尔[15 mg/(kg·d),1次/d,共2周],CO中毒组和正常对照组大鼠给予相同体积的生理盐水注射。于造模后1周时应用透射电镜观察各组大鼠海马组织超微结构的改变,于造模后1 d、1周、1个月、2个月时采用免疫组化染色或免疫荧光染色检测各组大鼠脑组织中Nogo、OMgp及Rock阳性细胞染色强度,采用Western blotting检测各组大鼠脑组织中Nogo、OMgp及Rock蛋白的表达水平。结果CO中毒组大鼠海马组织超微结构及血脑屏障损伤明显,以细胞核、线粒体及突触结构改变显著,而盐酸法舒地尔治疗能有效地维持海马组织超微结构及功能的完整性,减轻脑水肿。造模后1 d、1周、1个月、2个月时,CO中毒组大鼠脑组织中Nogo、OMgp、Rock阳性细胞染色强度及Nogo、OMgp、Rock蛋白表达水平均明显高于同一时间点的正常对照组,盐酸法舒地尔组大鼠脑组织中Nogo、OMgp、Rock阳性细胞染色强度及Nogo、OMgp、Rock蛋白表达水平均明显低于同一时间点的CO中毒组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论Nogo-OMgp/Rho-Rock信号通路相关分子的激活与CO中毒急性脑损伤密切相关,而盐酸法舒地尔能有效下调Nogo、OMgp和Rock蛋白的表达水平,从而明显减轻CO中毒后脑损伤程度。

外周血MOG或AQP4抗体阳性的急性视神经脊髓炎患者血脑屏障通透性分析

目的探讨外周血髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)抗体或水通道蛋白-4(AQP4)抗体阳性的急性视神经脊髓炎(NMO)患者血脑屏障(BBB)通透性情况。方法选取2016年1月至2022年12月来该院就诊的253例外周血MOG抗体或AQP4抗体阳性的急性NMO患者作为研究对象。其中外周血MOG抗体阳性患者86例,外周血AQP4抗体阳性患者167例。将86例外周血MOG抗体阳性患者中脑脊液MOG抗体阳性患者作为A组、阴性患者为B组,167例外周血AQP4抗体阳性患者中脑脊液AQP4抗体阳性患者为C组、阴性患者为D组。统计上述4组患者的脑脊液压力、蛋白、白细胞数、脑脊液/血清白蛋白比值(QALB)及血清酸性钙结合蛋白B(S100-B)、基质金属蛋白9(MMP-9)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体数据,采用SPSS25.0对4组患者数据进行统计学分析。结果A、B、C、D组患者例数分别为40、46、24、143例,急性NMO患者脑脊液MOG抗体阳性例数显著高于AQP4抗体阳性例数,差异有统计学意义(P<0.05)。A组与B组比较患者脑脊液压力、蛋白、白细胞数比较,差异无统计学意义(P>0.05),但QALB、S100-B、MMP-9、GFAP都均有显著性差异,A组显著高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。C组与D组比较患者脑脊液压力、蛋白、白细胞数、QALB、S100-B、MMP-9差异无统计学意义(P>0.05),但GFAP结果有显著性差异,C组显著高于D组(P<0.05)。A组与C组比较患者脑脊液压力、蛋白、白细胞数差异无统计学意义(P>0.05),但QALB、S100-B、MMP-9、GFAP均有显著性差异,A组显著高于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论外周血MOG抗体或AQP4抗体阳性的急性NMO患者中脑脊液MOG抗体阳性患者的血脑屏障通透性显著高于阴性患者,也显著高于脑脊液AQP4抗体阳性的患者。