MPZ突变致病的腓骨肌萎缩症临床表型与基因突变相关性分析

目的:探讨MPZ基因突变致腓骨肌萎缩症(CMT)2I/2J型的临床及神经电生理特点,分析其临床表型与突变的相关性。方法:收集3个MPZ基因突变导致CMT家系的临床表现、家系资料、神经传导检查及基因检测结果,结合文献分析讨论。结果:3个CMT家系分别携带MPZ基因Thr124Met、Asp121Asn和Asn208Tyr杂合突变,主要为中年起病,临床症状为下肢远端无力、萎缩伴感觉异常,其中2例伴听力减退、瞳孔异常、锥体束征等特殊临床表型。3例先证者的神经传导检查均提示主要累及下肢神经的长度依赖性、轴索性运动感觉周围神经病变。结论:MPZ基因Thr124Met、Asp121Asn和Asn208Tyr突变导致CMT 2I/2J型,Thr124Met是热点突变位点。MPZ基因突变相关的CMT患者特殊临床表型出现率较高。

P0蛋白免疫豚鼠的听力学研究

目的:探讨内耳纯化P0蛋白免疫豚鼠的听力学变化。方法:制备纯化内耳P0蛋白。分析20只经内耳纯化P0蛋白免疫后豚鼠的ABR、听神经动作电位(CAP)、畸变产物耳声发射(DPOAE)的检查结果。结果:20只动物经P0蛋白免疫后死亡4只,余16只(32耳)动物中,7耳(22%,7/32)出现ABR反应阈升高,波Ⅰ、Ⅲ潜伏期及Ⅰ-Ⅲ、Ⅰ-Ⅳ波间期明显延长(P<0.01),但Ⅲ-Ⅳ间期无明显变化;CAP(N1)幅值均有不同程度的下降,潜伏期延长(P<0.01);DPOAE各频率的幅值无明显改变,对侧白噪声抑制效应存在,有减弱的趋势,但与对照组无明显差异(P>0.05)。结论:纯化的内耳P0蛋白是内耳重要的自身抗原之一,可导致部分豚鼠的听神经和内耳出现自身免疫性疾病。

基于原核表达的P0蛋白抗体ELISA检测方法

目的建立基于原核表达的P0蛋白抗体ELIsA检测方法。方法用原核表达的P0蛋白作为包被抗原，制成固相载体。向微孔中分别加入待测样品，然后再加入辣根过氧化物酶标记抗人IgG或IgM进行反应，经过彻底洗涤后，用底物3，3’，5，5’-四甲基联苯胺（TMB）显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化生成黄色。方法。结果用本研究建立的P0蛋白抗体的EusA检测方法检测正己烷低浓度接触工人190人，阳性率18．9％；检测高浓度接触工人79人，阳性率27．8％。与104名不接触正己烷健康工人（阳性率2．9％）比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论基于原核表达的髓鞘R蛋白抗体ELIsA检测方法适用于大样本人群研究。

2,5-己二酮对大鼠坐骨神经P_0和NF表达影响

目的观察2,5-己二酮(2,5-HD)暴露对大鼠坐骨神经组织超微结构及P0(myelin protein zero)和神经丝(neurofilament,NF)表达影响,探讨它们之间的关联性。方法成年雄性SD大鼠40只,随机分成对照组(生理盐水)和低、中、高剂量染毒组(100、200、400 mg/kg腹腔注射2,5-HD),每组10只,每周连续5 d,1次/d。染毒5周后处死动物,取坐骨神经,电镜观察形态学改变,RT-PCR和Western blot检测P0、NF-L、NF-M和NF-H基因和蛋白表达水平。结果随染毒剂量升高,大鼠坐骨神经髓鞘形状渐不规则,并出现内折现象;轴索形状渐不规则,部分发生萎缩;神经丝数量渐少,排列稀疏。与对照组比较,400 mg/kg 2,5-HD组大鼠坐骨神经P0mRNA表达量(0.75±0.03)、NF-L、NF-M和NF-H mRNA表达量[分别为(0.35±0.07)、(0.25±0.04)、(0.37±0.05)]明显下降(P<0.05);与对照组比较,400 mg/kg 2,5-HD组大鼠坐骨神经P0蛋白表达量(0.79±0.04)、NF-L、NF-M和NF-H蛋白表达量[分别为(0.26±0.02)、(0.12±0.03)、(0.22±0.02)]明显降低(P<0.05)。结论亚慢性2,5-HD暴露导致的外周神经病变可能与P0和NF表达异常有关,这些蛋白可能是2,5-HD攻击外周神经系统的靶点。