目的:研究高丽参水提物对神经母细胞瘤细胞增殖、迁移、侵袭的影响及机制。方法:将微小RNA(miRNA)-429抑制剂转染至SH-SY5Y细胞,随机分为miR-429下调组(常规培养)、高丽参+miR-429下调组(50 g/L高丽参水提物培养)。另取SH-SY5Y细胞,分...目的:研究高丽参水提物对神经母细胞瘤细胞增殖、迁移、侵袭的影响及机制。方法:将微小RNA(miRNA)-429抑制剂转染至SH-SY5Y细胞,随机分为miR-429下调组(常规培养)、高丽参+miR-429下调组(50 g/L高丽参水提物培养)。另取SH-SY5Y细胞,分为空白组(常规培养)和高丽参组(50 g/L高丽参水提物培养)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组细胞miR-429相对表达量;CCK-8法、划痕实验、Transwell实验检测各组细胞的增殖、迁移、侵袭能力;双荧光素酶实验验证miR-429与IκB激酶β(IKKβ)的靶系;蛋白质印迹法检测各组IKKβ蛋白表达。结果:与空白组对比,高丽参组miR-429表达量增加,24、48、72 h 3个时间点的细胞增殖能力、迁移率降低,侵袭细胞数量减少,IKKβ蛋白表达降低(P<0.05);miR-429下调组的miR-429表达量减少、3个时间点的细胞增殖能力增强,迁移率升高,侵袭细胞数量增加,IKKβ蛋白表达升高(P<0.05)。与高丽参组对比,高丽参+miR-429下调组miR-429表达量减少,24、48、72 h 3个时间点的细胞增殖能力增强,迁移率升高,侵袭细胞数增加,IKKβ蛋白表达升高(P<0.05)。与miR-429下调组对比,高丽参+miR-429下调组miR-429表达量增加,24、48、72 h 3个时间点细胞增殖能力增强,迁移率降低,侵袭细胞数减少,IKKβ蛋白表达量降低(P<0.05)。与转染IKKβ3′-UTR-WT和miR-429 mimic-NC的293T细胞对比,共转染IKKβ3′-UTR-MT与miR-429 mimic的293T细胞荧光素酶活性值升高(P<0.05)。结论:高丽参水提物可抑制神经母细胞瘤细胞的增殖、侵袭和迁移,可能与调控miR-429进一步靶向下调IKKβ表达有关。展开更多
文摘目的:研究高丽参水提物对神经母细胞瘤细胞增殖、迁移、侵袭的影响及机制。方法:将微小RNA(miRNA)-429抑制剂转染至SH-SY5Y细胞,随机分为miR-429下调组(常规培养)、高丽参+miR-429下调组(50 g/L高丽参水提物培养)。另取SH-SY5Y细胞,分为空白组(常规培养)和高丽参组(50 g/L高丽参水提物培养)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组细胞miR-429相对表达量;CCK-8法、划痕实验、Transwell实验检测各组细胞的增殖、迁移、侵袭能力;双荧光素酶实验验证miR-429与IκB激酶β(IKKβ)的靶系;蛋白质印迹法检测各组IKKβ蛋白表达。结果:与空白组对比,高丽参组miR-429表达量增加,24、48、72 h 3个时间点的细胞增殖能力、迁移率降低,侵袭细胞数量减少,IKKβ蛋白表达降低(P<0.05);miR-429下调组的miR-429表达量减少、3个时间点的细胞增殖能力增强,迁移率升高,侵袭细胞数量增加,IKKβ蛋白表达升高(P<0.05)。与高丽参组对比,高丽参+miR-429下调组miR-429表达量减少,24、48、72 h 3个时间点的细胞增殖能力增强,迁移率升高,侵袭细胞数增加,IKKβ蛋白表达升高(P<0.05)。与miR-429下调组对比,高丽参+miR-429下调组miR-429表达量增加,24、48、72 h 3个时间点细胞增殖能力增强,迁移率降低,侵袭细胞数减少,IKKβ蛋白表达量降低(P<0.05)。与转染IKKβ3′-UTR-WT和miR-429 mimic-NC的293T细胞对比,共转染IKKβ3′-UTR-MT与miR-429 mimic的293T细胞荧光素酶活性值升高(P<0.05)。结论:高丽参水提物可抑制神经母细胞瘤细胞的增殖、侵袭和迁移,可能与调控miR-429进一步靶向下调IKKβ表达有关。
