应用原生质体融合技术选育克拉维酸高产菌株

采用棒状链霉菌种内原生质体融合技术,选育克拉维酸高产菌株.该实验选用舒巴坦钠耐受性高产菌株Streptomyces clavuligerus B71-3-10和甘油耐受性高产菌株Streptomyces clavuligerus B71-14为亲株,优化了原生质体制备条件和融合条件,最终得到遗传稳定性良好的融合子F14.该融合子的克拉维酸产量提高到650.35 mg/L,分别比亲株S.clavuligerus B71-3-10和S.clavuligerus B17-14的克拉维酸产量高36.77%和20.84%.将原生质体融合技术应用到棒状链霉菌克拉维酸高产菌株的选育中,证明了其可行性、高效性及成效显著性.

RpoN和FlgM失活对大肠杆菌克拉酸合成的影响

本文针对大肠杆菌W3110菌株,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术失活全局转录因子RpoN和FlgM,研究其对克拉酸(colanic acid,CA)合成的影响,并对发酵培养条件进行优化。结果显示,ΔrpoNΔflgM菌株的CA产量最高,在M9发酵培养基,28℃发酵条件下发酵瓶的CA产量最高达3387.29 mg/L,比相同条件W3110产量提高了约234倍。本文显示转录因子RpoN和FlgM的共同失活对CA合成具有显著促进作用。