抗氧化型枯草杆菌碱性蛋白酶高产工程菌的构建及其酶学特性

通过基因重组、定点突变、基因整合和诱变等手段构建了一个抗氧化型枯草杆菌碱性蛋白酶高产工程菌株B135,试管及三角瓶发酵结果显示 ,酶产量是 10 0 4 8U /ml,是2 70 9碱性蛋白酶产量的 55% ,抗氧化型碱性蛋白酶浓度是 5.9mg/ml。该酶与 1mol/L过氧化氢作用 15min后 ,酶活保存 90 %以上 ,而 2 70 9则保存 12 % ,说明B135碱性蛋白酶是抗氧化的。

原生质体融合构建高产碱性蛋白酶工程菌

用原生质体融合的方法 ,将碱性蛋白酶生产菌 2 70 9与含有碱性蛋白酶基因克隆载体pDW2 的工程菌枯草杆菌BD10 5进行细胞融合 ,得到 1株高产碱性蛋白酶的工程菌A16 .菌落的原位杂交表明 ,该菌株携有双亲的遗传物质 .A16的表型与生长特征与 2 70 9相似 ,但同样条件下发酵酶活比 2 70 9高 5 0 %～ 10 0 % ,摇瓶发酵的产酶水平最高可达 300 0 0u/mL .A16发酵所产酶的最适pH与耐温性及发酵条件等特征均与 2 70 9相同 ,适用于工业生产 .图 3表 5参 2

微生物碱性蛋白酶研究进展

本文对微生物碱性蛋白酶的产生菌,碱性蛋白酶的应用、结构及性质,高产工程菌的选育技术等方面的研究进展进行了概述。