弥散张量成像联合血清白细胞介素-1β、磷酸化高分子量神经微丝蛋白诊断脊髓损伤

目的观察弥散张量成像(DTI)联合血清白细胞介素-1β(IL-1β)、磷酸化高分子量神经微丝蛋白(pNF-H)诊断脊髓损伤的价值。方法回顾性分析69例脊髓损伤(C1~T1水平损伤)患者(观察组)和100名健康体检者(对照组)DTI资料,记录其表观弥散系数(ADC)、各向异性分数(FA)值,以及血清IL-1β、pNF-H水平。根据美国脊髓损伤协会(ASIA)残损分级法对观察组脊髓损伤程度进行分级(D/C/B/A级);比较组间及观察组内不同脊髓损伤分级患者DTI参数及血清指标的差异,分析DTI参数及血清指标与脊髓损伤严重程度的相关性。以受试者工作特征(ROC)曲线及曲线下面积(AUC)评估ADC、FA、IL-1β、pNF-H值单独及联合诊断脊髓损伤的效能。结果相比对照组,观察组FA值降低,ADC值及血清IL-1β、pNF-H水平升高(P均=0.001)。随ASIA分级由D级至A级,观察组FA值逐渐降低,ADC值及血清IL-1β、pNF-H水平逐渐升高(P均<0.05);脊髓损伤严重程度与FA值呈负相关(r=-0.489,P<0.001),与ADC值及血清IL-1β、pNF-H水平呈正相关(r=0.542、0.599、0.596,P均<0.001)。FA值、ADC值及血清IL-1β、pNF-H单独诊断脊髓损伤的AUC分别为0.747、0.809、0.794、0.741,联合诊断为0.845(P均=0.01)。结论DTI联合血清IL-1β、pNF-H有助于诊断脊髓损伤。

磷酸化高分子量神经微丝蛋白在脊髓损伤评定中的研究进展

目前脊髓损伤诊断方法主要包括神经功能学评价、影像学评价、组织形态学观察、神经电生理检查等宏观评价方法 ,而研究表明在脊髓损伤早期,特别是在脊髓损伤休克期,脊髓损伤的基础损伤程度及治疗效果很难评价。分子生化标志物研究为目前脊髓损伤评价领域新兴的方法 ,特别是磷酸化的高分子量神经微丝蛋白(pNF-H)具有更明显的优势。本文比较了脊髓损伤传统评价方法 ,并介绍了目前国际上pNF-H在脊髓损伤领域的研究进展。

血清磷酸化高分子量神经微丝蛋白与大鼠脊髓损伤程度的相关性

目的研究血清磷酸化高分子量神经微丝蛋白(p NF-H)在脊髓损伤动物模型中的动态变化规律及其与脊髓损伤程度的相关性。方法 20只Sprague-Dawley大鼠等分为空白对照(A)组及脊髓损伤轻(B)、中(C)、重(D)度组,检测大鼠血清p NF-H水平、BBB评分及残存白质面积百分比。结果 B、C、D组大鼠血清p NF-H在术后12 h及3 d出现两个高峰;3组间有显著性差异(P<0.05);损伤后3 d血清p NF-H水平与14 d时BBB评分、残存白质面积百分比呈负相关性(r=-0.987,r=-0.978)。结论脊髓损伤后大鼠血清p NF-H水平存在双峰现象;脊髓损伤程度越重,大鼠p NF-H水平越高;p NF-H水平可以预测脊髓损伤严重程度。

血清高迁移率族蛋白Bl、白细胞介素-6与高血压性脑出血患者神经内镜微创术后神经功能及预后的关系

目的探讨血清高迁移率族蛋白Bl(HMGB1)、白细胞介素-6(IL-6)水平与高血压性脑出血(HICH)患者神经内镜微创术后神经功能及预后的关系。方法选取2018年6月至2022年12月许昌市中心医院收治的336例HICH患者作为研究对象,根据神经内镜微创术后神经功能缺损程度分为轻型组、中型组及重型组,并根据术后预后状态分为预后良好组和预后不良组。分析HICH患者血清HMGB1、IL-6水平与美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分的相关性及对预后的预测效能,探讨影响HICH患者预后的因素。结果HICH患者术后血清HMGB1、IL-6水平及NIHSS评分均低于术前,且二者与NIHSS评分均呈正相关;血清HMGB1和IL-6水平均随神经功能缺损程度的增加而升高,预后不良组患者术后血清HMGB1和IL-6水平均高于预后良好组;术中出血量、出血部位、出血破入脑室、术前格拉斯哥昏迷(GCS)评分、血肿清除率、NIHSS评分、HMGB1和IL-6均为HICH患者预后不良的危险因素;术后血清HMGB1和IL-6二者联合检测对患者预后的预测效能优于各自单独检测(Z_(二者联合-HMGB1)=2.236、Z_(二者联合-IL-6)=1.974,P=0.034、0.017)。结论HICH患者行神经内镜微创术后血清HMGB1、IL-6水平与其神经功能康复密切相关,二者联合检测对患者的预后状态具有预测效能。

MEF2C调控大鼠脊髓背根节感觉神经元P物质和低分子量神经丝微管蛋白的表达

目的:研究肌细胞增强因子2C(MEF2C)在大鼠脊髓背根神经节神经元细胞内的表达及其与P物质和低分子量神经丝微管蛋白合成的关系。方法:分离培养背根神经节神经元细胞,然后暴露于不同浓度的神经生长因子下24h,最后用实时聚合酶链反应技术检测P物质与低分子量神经丝微管蛋白基因在背根神经节神经元细胞内的表达。通过化学转染方法将合成的3条siRNA-MEF2C分别转染PC12细胞株,并用实时聚合酶链反应技术筛选干扰效率最高的siRNA。采用化学转染方法干扰背根神经节神经元细胞内MEF2C的表达,在高浓度神经生长因子刺激背根神经节神经元细胞后采用实时聚合酶链反应技术检测干扰后背根神经节神经元细胞内P物质与低分子量神经丝微管蛋白基因的表达。结果:P物质及低分子量神经丝微管蛋白基因表达随刺激用神经生长因子浓度的升高而升高。使用化学转染方法成功地干扰背根神经节神经元细胞内MEF2C的表达,MEF2C较对照组下降52%,同时没有检测到对cAMP反应元件结合蛋白表达的影响。实验组背根神经节神经元细胞内P物质在RNA水平较对照组下降了39%,而低分子量神经丝微管蛋白在RNA水平较对照组下降了62%。结论:神经生长因子促进大鼠脊髓背根节感觉神经元内P物质与低分子量神经丝微管蛋白的合成。大鼠背根神经节神经元细胞内P物质及低分子量神经丝微管蛋白基因表达受MEF2C调控。

蒙药黑苏嘎-25促进神经元骨架蛋白表达提高神经递质含量改善阿尔茨海默病小鼠症状

目的探讨蒙药黑苏嘎-25治疗阿尔茨海默(AD)小鼠的效果及机制。方法6月龄快速老化模型SAMP8小鼠分为模型组、[360 mg/(kg·d)]黑苏嘎-25处理组、[90 mg/(kg·d)]黑苏嘎-25处理组、多奈哌齐对照组[0.92 mg/(kg·d)],每组15只,另选择15只6月龄正常衰老SAMR1小鼠作为空白对照组。模型组和空白对照组小鼠常规喂养,生理盐水灌胃,其他给药组按照给药剂量灌胃,所有组灌胃均每天1次,共15 d。给药完成后第1天~第5天,各组取3只小鼠采用Morris水迷宫试验检测各组小鼠逃避潜伏期,穿越平台次数和停留时间。尼氏染色观察尼氏体数量,免疫组织化学染色法检测微管相关蛋白2(MAP-2)、低分子量神经丝蛋白(NF-L)表达和分布,Western blot法检测MAP-2、NF-L蛋白水平。ELISA检测小鼠脑组织(皮层、海马)中神经递质乙酰胆碱(ACh)、五羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)的含量。结果与空白对照组相比,模型组逃避潜伏期延长,穿越平台次数和停留时间减少,尼氏体减少,MAP2和NF-L蛋白表达减少;与模型组比较,黑苏嘎-25给药组逃避潜伏期缩短,穿越平台次数和停留时间增加,尼氏体数量增加,MAP-2和NF-L蛋白表达增加。[360 mg/(kg·d)]黑苏嘎-25处理对上述指标的影响更明显。与空白对照组比较,模型组海马及皮层中ACh、NE、DA及5-HT的含量明显减少,与模型组比较,低剂量组、高剂量组、多奈哌齐对照组ACh、NE、DA及5-HT含量显著增加。结论蒙药黑苏嘎-25治疗可改善AD模型小鼠学习记忆能力,保护小鼠神经功能,可能与促进神经元骨架蛋白表达并提高递质含量有关。

抗神经丝重链抗体相关脑炎一例并文献复习

目的 报告国内首例抗神经丝重链抗体相关脑炎病例,并复习相关文献,总结抗神经丝重链抗体相关脑炎的临床特征。方法与结果 1例63岁女性抗神经丝重链抗体相关脑炎患者临床表现为认知功能障碍、反复癫痫发作、失语;头部MRI显示双侧额顶叶多发异常信号,部分脑回略肿胀,幕上脑室系统扩张,脑萎缩以双侧颞叶、海马为甚;18F-DPA714 PET/MRI显示额颞顶枕叶多脑区局灶性摄取异常增高,提示神经炎症;脑电图呈频繁痫样放电;脑脊液白细胞计数和葡萄糖升高,血清和脑脊液自身免疫性脑炎相关抗体阴性,血清TBA法显示小脑神经丝样荧光包绕浦肯野细胞,进一步检测抗神经丝蛋白抗体,血清抗神经丝重链抗体强阳性(1∶1000)。临床诊断为抗神经丝重链抗体相关脑炎,予静脉注射免疫球蛋白和甲泼尼龙治疗,预后改善。结论 抗神经丝重链抗体相关脑炎临床罕见,临床表现多样,早期诊断与鉴别诊断困难,早期予以免疫治疗对预后至关重要。

睡眠剥夺后大鼠皮质、海马和杏仁核微管相关蛋白-2及神经丝蛋白的表达变化

目的探讨睡眠剥夺后大鼠皮质、海马和杏仁核微管相关蛋白-2(MAP-2)及神经丝蛋白(NF-200)表达的变化。方法采用改良小平台水环境法制作大鼠睡眠剥夺模型,大鼠随机分为睡眠剥夺组(SD组)、环境对照组(TC组)和空白对照组(CC组)。SD组包括睡眠剥夺6h、12h、1d、2d、3d、5d、7d共7个时点,每个时间点5只大鼠,CC组5只。免疫组织化学法观察MAP-2和NF-200阳性表达。结果睡眠剥夺5d和7d时,皮质、CA1、CA2、CA3、齿状回和杏仁核MAP-2和NF-200阳性表达减少(P<0.05,P<0.01)。结论睡眠剥夺可导致脑组织MAP-2和NF-200表达减少。

外周神经系统中神经微丝蛋白研究现状

神经微丝蛋白（Neurofilaments，NFs）作为神经细胞骨架系统成员的结构和功能在视神经损伤及中枢神经系统（Central nervous system，CNS）疾病中已经有很多研究。现将NFs在外周神经系统（Pefiph—eral nervous system，PNS）中作用的研究进展综述如下。

急、慢性吗啡处理对大鼠大脑皮层tau蛋白和神经微丝磷酸化水平的影响

目的:观察急、慢性吗啡处理对大鼠大脑皮质细胞骨架蛋白磷酸化水平的影响,探讨吗啡导致细胞周期依赖性蛋白激酶-5(cyclin dependent kinase-5,CDK5)过度表达与细胞骨架蛋白过度磷酸化的关系。方法:雄性SD大鼠40只,随机均分为急性对照组、急性吗啡处理组、慢性对照组、慢性吗啡处理组。急性吗啡处理组腹腔注射吗啡30mg/kg1次,慢性吗啡处理组腹腔注射吗啡10mg/kg,每天2次(时间8:00、20:00)共10d。采用免疫印迹法测定大鼠大脑皮质tau蛋白和神经微丝的磷酸化水平及CDK5、p35表达水平。结果:(1)与急性对照组比较,急性吗啡处理组tau蛋白和神经微丝磷酸化水平升高,CDK5的表达增加;(2)与慢性对照组比较,慢性吗啡处理组tau蛋白和神经微丝磷酸化水平升高,CDK5的表达无明显变化;(3)与急性吗啡处理组比较,慢性吗啡处理组tau蛋白和神经微丝蛋白磷酸化水平降低;(4)各组间p35表达水平无明显改变。结论:急、慢性吗啡处理可导致大鼠大脑皮质tau蛋白和神经微丝的异常过度磷酸化,但这种变化可能与CDK5的过度表达无关。

丝胶对2型糖尿病大鼠坐骨神经神经微丝蛋白表达的影响

目的观察丝胶对2型糖尿病大鼠坐骨神经神经微丝蛋白(NFP)表达的作用。方法 36只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组和丝胶治疗组,每组12只。链脲佐菌素腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型并给予丝胶(2.4 g/kg)灌胃。SP免疫组织化学染色法观察大鼠坐骨神经NFP的表达。结果 NFP免疫阳性产物为棕黄色,位于坐骨神经的轴索。与正常对照组大鼠比较,糖尿病模型组大鼠坐骨神经NFP的表达明显降低(P<0.01);丝胶治疗组大鼠坐骨神经NFP的表达明显高于糖尿病模型组大鼠(P<0.05)。结论丝胶可通过上调糖尿病模型大鼠坐骨神经NFP的表达,发挥对糖尿病坐骨神经损伤的保护作用。

经颅磁刺激对脑梗死大鼠神经功能恢复及神经微丝蛋白表达的影响

目的研究经颅磁刺激(TMS)对脑梗死大鼠神经功能恢复和神经微丝蛋白(NFP)-200表达的影响。方法SD大鼠60只,采用线栓法制作脑缺血模型,随机分为TMS组与假刺激组(各30只),两组又分为1d、3d、7d、14d和21d组(每组6只)。TMS组大鼠给予TMS共200个脉冲,每天2次,按不同时间组持续相应天数。治疗后给两组大鼠进行神经功能缺损评分,采用免疫组化法检测梗死灶周围区域NFP-200的光密度值。结果治疗14d和21d时,TMS组的神经功能缺损评分(2.67±0.82,1.50±0.55)显著低于假刺激组(3.67±0.52,3.17±0.75)(P<0.05,P<0.01);TMS组大鼠脑梗死灶周围NFP-200的光密度值(1.363±0.045,1.581±0.037)显著高于假刺激组(1.290±0.026,1.473±0.037)(均P<0.01)。结论TMS可以促进脑梗死大鼠神经功能的恢复及脑梗死周围区域NFP-200表达上调。

右-苯丙胺对脑缺血大鼠神经丝蛋白和微管相关蛋白表达的影响

目的:研究右-苯丙胺对大鼠大脑中动脉闭塞MCAO后神经丝蛋白(NF)、微管相关蛋白(MAP2)表达的影响,并在分子水平上探讨其加速神经康复的机制。方法:应用Koizumi线栓法建立单侧MCAO模型,用免疫组织化学方法及RT-PCR检测缺血周围区MAP2、NF表达的变化。结果:在MCAO1周末MAP2、NF的表达明显低于假手术组,以后逐渐增高,在第6周末其表达高于假手术组,模型+右-苯丙胺组在各时间点其表达均明显高于模型组。结论:右-苯丙胺可促进脑缺血后动物的MAP2、NF的表达,提高神经可塑性,可能为其加速神经康复的分子机制之一。

脑出血周围组织神经微丝和胶质纤维酸性蛋白的变化

目的 通过对人脑出血周围组织神经微丝(NF)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)计数与计量观察,研究其病理发展过程。方法用58例脑出血解剖标本,在血肿周围多方位自血肿壁向外连续取材1.0-2.0cm。采取免疫组化方法观察NF和GFAP的变化。结果NF损伤程度在血肿周围、双侧皮层、双侧海马区随血肿形成时间延长而加重;GFAP染色强度随血肿形成时间延长而减弱。结论 血肿周围神经元和星形胶质细胞的细胞骨架损伤在脑出血后1周内进行性加重。

CCI大鼠坐骨神经损伤区内中终球与重链神经微丝蛋白的检测

为探寻CCI大鼠坐骨神经损伤区内终球的存在,了解其与重链神经微丝蛋白(heavy neurofilaments,NF-H)分布、表达的联系.通过对雄性SD大鼠的坐骨神经慢性压迫损伤(chronic constriction injury,CCI)组与对照组(对侧正常坐骨神经)进行不同时间点电镜、免疫组化及Western-blotting等方法的观察与检测.研究发现,与对照组相比,CCI模型组大鼠术后4 d损伤坐骨神经中NF的分布较非手术侧有明显变化,术后7、14 d电镜观察到损伤区中枢侧终球样结构,术后4、7、14、28 d CCI模型组大鼠坐骨神经中NF-H表达水平有动态变化(P<0.01).结果表明CCI大鼠模型损伤坐骨神经中NF-H其分布有明显变化,且分布于终球样结构中,其表达随损伤时间有动态变化,这些变化可能参与终球的形成以及与病理性疼痛机制相关联.

神经微丝蛋白免疫荧光染色法观察运动终板

目的:了解应用神经微丝蛋白免疫荧光染色法观察运动终板的效果。方法:取SPF级大鼠6只,麻醉状态下取材双侧比目鱼肌神经入肌点组织,以多聚甲醛固定,冰冻切片,行神经微丝蛋白免疫荧光染色,荧光显微镜和激光共聚焦显微镜下观察运动终板形态,并用激光共聚焦显微镜软件对运动终板形态进行三维重建。结果:染色切片在荧光显微镜和激光共聚焦显微镜下均可观察到运动终板爪形结构形态,激光共聚焦显微镜采集图像进行三维重建后,可以得到运动终板立体结构。结论:神经微丝蛋白免疫荧光染色法是一种较好的运动终板的观察方法。

人胶质纤维酸性蛋白和神经微丝各别纯化

细胞骨架的共同基本模型是以种属和组织的特异形式表达的。其核心结构蛋白中间丝是高度保守的，胶质纤维酸性蛋白和神经微丝是神经系统中的中间丝成份，它们在肿瘤组织来源的鉴别中有特殊价值。本文报道了从尸检人脑中各别纯化胶质纤维酸性蛋白和神经微丝的工艺流程，经匀浆、抽提人脑组织后，用ＤＥ５２层析、羟基磷灰石层析，收集经电泳证实的洗脱部分，以分子量、等电点等生化指标鉴定为胶质纤维酸性蛋白和神经微丝。该工艺得率较高。一次可得两个产品，纯度符合免疫组化抗原的要求，并可对分离工艺中降解产物进行纯化。

视明注射液对兔外伤性萎缩视神经组织中神经营养因子-3和神经微丝蛋白的影响

目的 观察中药制剂视明注射液对兔外伤性视神经萎缩的视神经组织中神经营养因子 -3 (neurotrophicfactor -3 ,NT -3 )和神经微丝蛋白 (neurofilamentprotein ,NFP)表达的影响。方法 在相对定量致伤的条件下建立兔外伤性视神经萎缩模型。用视明注射液治疗 3 0天后取视神经组织用免疫组化检测NT -3和NFP的表达。结果 高剂量视明注射液能极显著地增加NT -3的表达 (P <0 0 1) ;高低剂量视明注射液能极显著地增加NFP的表达 (P <0 0 1)。结论 视明注射液能增加外伤性萎缩视神经组织的NT -3和NFP表达。

胶质纤维酸性蛋白和神经微丝蛋白的纯化及其抗体的制备和鉴定

参考Ｅｎｇ和Ｌｉｅｍ两法予以改进。自牛脊髓中同时提取纯化胶质纤维酸性蛋白和神经微丝蛋白，用淋巴结内微量注射法免疫家兔获得相应抗体。用免疫转移电泳和免疫组织化学技术（ＰＡＰ法）对抗体进行鉴定。兔抗胶质纤维酸性蛋白与牛脊髓的相应蛋白组分以及中枢神经系统和视神经的星形胶质细胞呈阳性反应。兔抗神经微丝蛋白则和牛脊髓中的相应蛋白以及神经元和神经纤维呈阳性反应。

大鼠脊髓损伤后神经丝蛋白及胶质纤维酸性蛋白表达的变化及意义

[目的]研究脊髓损伤后神经元中神经丝蛋白(NF200)及星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的变化及其关系,探讨不同细胞在再生修复中的作用。[方法]SD大鼠30只,分为正常、伤后1 d,3 d,7 d,14 d,21 d6组,每组5只,用免疫组化染色及图象分析方法观察神经元NF200及星形胶质细胞GFAP的表达,并对二者进行相关性分析。[结果]脊髓损伤后NF200及GFAP的表达均呈进行性增高,二者有显著的相关性;GFAP表达的增高早于NF200的增高,而前角神经元NF200的表达早于后角神经元。[结论]脊髓损伤后,星形胶质细胞可能是刺激神经元功能活跃,促进神经纤维再生的一个重要因素,不同类型神经元对损伤的反应存在着差异。