快速高分离液相色谱-串联质谱法测定植物组织中雌激素玉米赤霉醇类化合物

应用快速高分离液相色谱-串联质谱仪(RRLC-MS/MS),建立了植物组织中玉米赤霉醇类化合物(α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮、玉米赤霉烯酮)的检测方法。植物组织样品采用乙腈提取,碱性水溶液反萃取,经混合阴离子(MAX)固相萃取柱进行净化和富集后,用RRLC-MS/MS检测,多反应监测(MRM)模式下进行定性与定量分析。结果表明:玉米赤霉醇类化合物在0～20μg/kg的线性范围内均具有良好的线性关系,方法检出限(LOD)为0.5μg/kg,定量限(LOQ)为1.0μg/kg,6种玉米赤霉醇类化合物的平均回收率为75.8%～105.4%,相对标准偏差为2.4%～12.1%。本方法可用于植物组织中玉米赤霉醇类化合物含量的测定。

快速高分离度液相色谱-质谱联用方法筛选Tau蛋白激酶2抑制剂

建立了测定Tau蛋白激酶2(Tau protein kinase 2,TPK2)催化反应产物磷酸化十肽(PKpTPKKAKKL)的快速高分离度液相色谱-质谱方法(RRLC/MS)用于筛选TPK2抑制剂.反应溶液总体积为50μL,将终浓度为20 nmol/L的TPK2与终浓度为5μmol/L的底物十肽(PKTPKKAKKL)于30℃反应30 min,用等体积乙腈终止反应并加入终浓度为1μmol/L的磷酸化十肽(PKpTPKKAKKV)作为内标,采用Agilent SB-C18色谱柱,以乙腈-水为流动相梯度洗脱分离后,用RRLC/MS进行定性及定量分析.该方法可通过精确定量一定时间内的酶促反应产物来反映酶活性被抑制的程度,作为TPK2抑制剂的筛选方法,本方法具有简单、灵敏、快速的优点,能够避免光谱法筛选可能产生的假阳性结果,可用于TPK2的先导化合物的高通量筛选.

快速高分离液相色谱-串联质谱法检测化妆品中马来酸二乙酯含量

建立了化妆品中马来酸二乙酯的快速高分离液相色谱-串联质谱（RRLC-MS/MS）的定性定量检测方法.试样经乙腈60℃超声提取,RRLC-MS/MS多反应监测模式（MRM）定性、定量分析.马来酸二乙酯在2.1 min快速出峰,0.06～20.0 mg/L上机溶液浓度范围内呈线性（相关系数R＞0.996）;方法检出限为0.1mg/kg,最低定量浓度为0.3 mg/kg;在0.5 mg/kg和5.0 mg/kg添加水平时,加标回收率86.2％～96.4％;日内精密度3.19％～8.18％,日间精密度3.72％～7.64％（n=6）.该方法适用于防晒乳（霜）、香水、指甲油中马来酸二乙酯的标准化检测.

高分离快速液相色谱-四极杆飞行时间质谱法检测人参皂苷Re在大鼠体内的分布

建立了高分离快速液相色谱-四极杆飞行时间质谱（RRLC-Q-TOF MS）法检测大鼠尾静脉注射人参皂苷Re（G-Re）后,不同组织（心、肝、脾、肺、肾、脑）中G-Re的分布情况。样本经蛋白沉淀处理,Supelco AscentisExpress C18色谱柱（50mm×3.0mm×2.7μm）分离,采用含0.1%甲酸的水溶液（A）-乙腈（B）为流动相,梯度洗脱,以人参皂苷Rc（G-Rc）作为内标,在电喷雾负离子模式下检测。结果表明：组织匀浆标准曲线的线性范围为10-20 000μg/L,线性关系良好（r〉0.99）,最低检出限（S/N=3）为3μg/L,最小定量限为10μg/L;准确度、日内和日间精密度、提取回收率均符合生物样品的分析要求。大鼠尾静脉注射20mg/kg G-Re溶液后,在大鼠体内不同组织中均能检测到G-Re,主要分布在肺、脾、肾、心、脑、肝等器官,其中在肺中分布最多,在肝中分布最少。该方法简单、灵敏、快速、检出限低,适用于检测人参皂苷Re在生物体内的分布。

快速高分离液相色谱/四级杆串联飞行时间质谱分析山楂籽中的主要黄酮成分

采用快速高分离液相色谱/四级杆串联飞行时间质谱(RRLC/Q-TOF MS)联用技术进行山楂籽中的黄酮类化合物分析方法研究.山楂籽黄酮经超声辅助提取后,选用Welch Materials C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相组成分别为0.1%甲酸水溶液和乙腈,梯度洗脱.在正离子模式下,经飞行时间质谱分离并检测了15种黄酮成分.结果表明,快速分离液相-四级杆串联飞行时间质谱联用技术可以快速准确鉴定样品中的黄酮成分.

高分离度液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用法检测不同种类茶叶对人参皂苷的影响

目的明确不同种类茶叶对人参中主要化学成分人参皂苷的影响。方法利用高分离度液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用(RRLC-Q-Tof MS)法进行检测分析。结果人参茶叶配伍合煎液中,人参乌龙茶合用对人参皂苷影响最大,人参绿茶合用对人参皂苷的影响最小。结论不同种类茶叶对人参的影响不同,服用人参后饮茶可能影响人参的药效。

基于快速高分辨液相色谱串联质谱技术的代谢组学尿液分析方法的建立

采用快速高分辨液相色谱(RRLC)分离系统与QTRAP型及QTOF型MS/MS仪联用技术,通过考察尿液样本前处理方法,优化液相色谱条件和质谱检测参数,建立了用于尿液中代谢物分析的RRLC-MS方法。采用本方法对尿液浓度下的20种代表性代谢物进行了检测,考察了方法的灵敏度和精密度,证明本方法适用于尿液代谢组学的研究。对穿插在检测序列中的生物质控样本的监测结果表明,本方法的可重复性及获得的数据的可靠性良好。本方法已成功地应用于乳腺癌和宫颈癌的尿液代谢组学研究以及可能生物标志物的检测。

高分辨快速液相色谱-串联质谱法测定肉制品中的刚果红

建立了肉制品中刚果红的高分辨快速液相色谱-串联质谱(RRLC-MS/MS)测定方法。均质后的样品经乙腈与正己烷混合溶剂(1∶1)提取,乙腈提取层离心后直接上机测试。使用Agilent XDB C18色谱柱,以乙腈和10 mmol/L甲酸铵水溶液为流动相梯度洗脱,采用多反应监测方式(MRM)负离子模式检测,定量离子对与定性离子对分别为m/z 325.0/416.0与m/z 651.0/152.0,外标法定量。结果表明,刚果红在0.1～10mg/L范围内线性关系良好(r2>0.999),加标回收率为91%～102%,RSD为1.2%～4.0%,检出限与定量下限分别为0.07 mg/kg和0.18 mg/kg。该方法准确、高效,可用于肉制品中刚果红染料的快速检测。

基于液相色谱-质谱联用系统的系统性红斑狼疮患者血浆代谢组学分析

应用快速分离液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(RRLC-Q-TOF/MS)系统对系统性红斑狼疮(SLE)患者血浆样本进行代谢指纹图谱的分析。分别应用监督模式识别方法正交信号校正结合偏最小二乘法-判别分析(OSC-PLS-DA)对代谢组数据进行处理,结果显示SLE患者与健康人群对照组的代谢指纹存在明显差异;进一步从SLE患者血清代谢图谱中筛选出10个对分类有显著贡献的离子,定性鉴定出7种代谢标志物,发现SLE患者存在异常的氨基酸、磷脂和卟啉的代谢状态。本研究可为SLE的监测和诊断以及SLE发病的分子基础研究提供科学依据。

高分离度快速液相色谱-三重串联四极杆质谱快速检查半夏和虎掌南星中水麦冬酸

目的建立半夏及其伪品虎掌南星中水麦冬酸的专属性检测方法。方法样品经水超声提取,利用高分离度快速液相色谱-三重四极杆质谱(rapid resolution liquid chromatography coupled with triple quadrupole electrospray tandem mass spectrometry,RRLC-QQQ/MS)检测水麦冬酸。采用Agilent SB-C18(2.1 mm×50 mm,1.8μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸(5∶95)为流动相。柱温30℃,体积流量0.2 m L/min,进样量1μL。离子化模式为ESI-,选择m/z187→143和m/z187→99作为检测离子对,进行多反应监测。结果检出限为4.6μg/L。11批半夏中有3批检出水麦冬酸,7批虎掌南星均检出水麦冬酸,半夏中水麦冬酸含量低于虎掌南星。结论所建方法专属、准确、快速、简便,可为半夏的质量控制提供参考。

高分离度快速液相色谱-三重串联四极杆质谱快速检查消渴灵片中山麦冬

目的:建立消渴灵片中山麦冬的专属性检测方法。方法:样品经甲醇-氨水超声提取,利用高分离度快速液相色谱-三重串联四极杆质谱(RRLC-QQQ/MS)检测山麦冬。采用Thermo Accla imTM RSLC120 C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),以乙腈(A)-20 mmol·L^(-1)乙酸铵溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~20 min,5%A→90%A),流速0.2 m L·min^(-1),柱温30℃,进样量2μL。离子化模式为ESI^(+),选择m/z723.4→251.2和m/z 723.4→269.2作为山麦冬皂苷B检测离子对,m/z 893.5→463.1和m/z 893.5→481.2作为短葶山麦冬皂苷C检测离子对,进行多反应监测。结果:山麦冬皂苷B和短葶山麦冬皂苷C的检测下限分别为0.28μg·片^(-1)和0.20μg·片^(-1)。111批次消渴灵片中有8家企业的25批样品掺伪,其中6批次样品同时掺入湖北麦冬和短葶山麦冬,4批次样品为湖北麦冬掺伪,15批次样品为短葶山麦冬掺伪。结论:所建方法专属、准确、快速、简便,可为消渴灵片的专项治理提供有力的技术支持。

高分离度快速液相色谱质谱联用同时测定不同部位和不同加工方法的萝藦中氨基酸和核苷类成分含量

目的高分离度快速液相色谱质谱联用(UFLC-QTRAP-MS/MS)同时测定不同组织部位和加工方法萝藦中15种氨基酸和12种核苷类成分的方法。方法采用Waters XBridge Amide色谱柱(2.1 mm×100 mm,3.5μm),以0.2%甲酸乙腈-0.2%甲酸水为流动相,梯度洗脱,流速0.6 m L·min^(-1),柱温为30℃,正离子多反应监测(MRM)模式测定。用灰色关联度分析(GRA)和TOPSIS分析进行综合性评价。结果 15种氨基酸成分和12种核苷成分在一定范围内线性关系良好,相关系数均大于0.997 3,平均加样回收率为98.17%~100.75%,相对标准偏差在0.90%~2.49%之间。不同部位和加工方法有一定的差异性,低温烘干的叶中氨基酸和核苷综合质量较好。结论该方法准确可靠,为选择最优处理方法提供可靠的方案。

烟草中甲霜灵的手性分离方法差异研究

对比反相液相色谱-串联质谱(RPLC-MS/MS)和超临界流体色谱-串联质谱(SFC-MS/MS)手性分离烟草中甲霜灵的差异。烟草样品经乙腈提取、盐析分层、快速滤过型净化(multi-Plug Filtration Cleanup,m-PFC)柱净化后,分别采用RPLC-MS/MS和SFC-MS/MS进行手性分离。从多个性能参数(分离效率、线性、选择性、回收率、重复性、灵敏度、基质效应等)对两种方法进行了全面比较。采用不同的分离方法,在10~500 ng/mL范围内,甲霜灵的不同异构体均可呈现良好的线性关系(R^(2)≥0.9993)。在各异构体加标浓度为0.1、0.5、2.0 mg/kg水平下,采用不同的分离方法均可获得满意的回收率(88.7%~96.2%)和良好的重复性(RSD<7.0%)。结果表明:RPLC-MS/MS和SFC-MS/MS具有互补性,均适用于手性分离和测定烟草基质中的甲霜灵。

SPE-RRLC-MS/MS测定河水和沉积物中14种典型抗生素

针对磺胺类、喹诺酮类、四环素类、大环内酯类共14种典型抗生素,建立了水和沉积物中固相萃取-高分离快速液相色谱-串联质谱(SPE-RRLC-MS/MS)前处理方法和仪器检测方法.14种抗生素在5-100μg·L^-1范围内线性良好,相关系数r≥0.990.优化后的前处理方法采用乙腈/0.1 mol·L^-1 EDTA-Mcllvaine(1∶1,V/V)作为沉积物样品中目标抗生素的提取剂,甲醇/丙酮(85∶15,V/V)作为固相萃取柱的洗脱液.表层水中14种抗生素的加标回收率为56%-117%,相对标准偏差(n=3)为0.10%-12%;沉积物中14种抗生素的加标回收率为57%-127%,相对标准偏差(n=3)为0.10%-25%.表层水和沉积物中抗生素的方法检出限分别为0.18-5.88 ng·L^-1和0.25-2.94 ng·g^-1.该方法用于检测合肥市南淝河表层水和沉积物中的抗生素,5种抗生素被检出,浓度范围分别为32-308 ng·L^-1和2.70-329 ng·g^-1.

快速高分离液相色谱-电喷雾质谱联用法测定市售蛇酒中5种糖皮质激素的含量

目的:建立同时测定蛇酒中醋酸泼尼松、醋酸氢化可的松、醋酸地塞米松、布地奈德和甲泼尼龙的快速高分离液相色谱-电喷雾质谱联用方法。方法:采用Agilent Poroshell 120 EC-C18色谱柱(100mm×3mm,2.7μm),乙腈(含0.1%甲酸)-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.3m L/min;采用电喷雾离子源,以正离子、多反应监测扫描模式对蛇酒中的5种糖皮质激素进行定性定量检测,并对其裂解方式进行解析。结果:醋酸泼尼松、醋酸氢化可的松、醋酸地塞米松、布地奈德和甲泼尼龙线性关系良好,R2均>0.99,8种蛇酒中检测到糖皮质激素。结论:本研究建立的快速高分离液相色谱-电喷雾质谱联用法方便快捷、灵敏度好、准确度高,适用于蛇酒中非法添加成分的定性定量检测。

RRLC-MS/MS同时测定食品接触材料中9种双酚类化合物迁移量

建立了高分离度快速液相色谱-串联质谱(RRLC-MS/MS)法同时测定食品接触材料中9种双酚类化合物的迁移量。样品经不同类型食品模拟物浸泡后,用Oasis HLB固相萃取柱净化,Agilent poroshell 120 SB-C18柱(2.1 mm×100 mm×2.7μm)分离,以甲醇和0.1 mmol/L乙酸铵水溶液为流动相进行梯度洗脱,在电喷雾负离子模式(ESI^-)和多反应监测(MRM)模式下进行分析。结果表明,在优化的实验条件下,9种双酚类化合物的线性关系良好,相关系数(R^2)均大于0.99,检出限为0.01～0.2μg/kg,定量限为0.05～1.0μg/kg,在低、中、高3个加标水平下的回收率为76.9%～113.1%,相对标准偏差为1.9%～6.7%。本方法灵敏、准确、可靠、快速,能满足食品接触材料中9种双酚类化合物迁移量的检测需求。

RRLC-MS-MS对海水养殖水体中磺胺类残留量的检测

建立了快速高分离液相色谱-色谱串联质谱法同时测定海水养殖水体中16种磺胺类抗菌素的方法。水样经固相萃取小柱富集、洗脱、浓缩后用液相色谱串联质谱仪测定,采用多反应监测模式进行测定,内标法定量。方法的检出限在0.467-1.88 ng/L之间,加标回收率在80.1%114%之间,相对标准偏差（RSD）0.731%-8.79%;适用于海水养殖水体中磺胺类残留的定量检测。

RRLC-Q-TOF MS/MS法分析生晒参和大力参中的皂苷类成分

利用高分离度快速液相色谱与四极杆-飞行时间质谱(RRLC-Q-TOF MS/MS)联用,对生晒参和大力参中的人参皂苷类成分进行比较研究。基于人参皂苷Rd和Re、Rf和Rg1两组同分异构体在串联质谱中的裂解规律,以及mRd的串联质谱特征,通过标准品保留时间和精确分子质量鉴定了人参中的35种人参皂苷,进而比较了生晒参和大力参中人参皂苷的相对百分含量差异,并于大力参中检测到稀有人参皂苷,如人参皂苷Rg5、Rk1、F4、Rg6等。该方法对于大力参类传统中药炮制品的成分研究具有借鉴意义,研究结果能说明大力参区别于生晒参的物质基础,可以为大力参在临床上合理、有效地使用提供指导。

RRLC-Q-TOF-MS法研究人参皂苷Rh1对映异构体在大鼠体内的药代动力学行为

建立了高分离快速液相色谱-四极杆-飞行时间质谱（RRLC-Q-TOF-MS）法同时分离人参皂苷Rh1对映异构体,并研究其在大鼠体内的药代动力学行为.实验采用Agilent SB C18色谱柱,流动相A为水-乙腈（90∶10,V∶V）溶液,流动相B为水-乙腈（10∶90,V∶V）溶液,两种流动相内均含15 mmol/L甲酸铵,流速0.3 mL/min,进样量5μL,二元线性梯度洗脱分离,在电喷雾负离子模式下进行质谱检测.结果表明,20-（S）和20-（R）人参皂苷Rh1的定量线性范围分别为0.24～39.00 mg/L和0.035～7.80 mg/L,定量限分别为0.20和0.03 mg/L,方法的检测限（S/N=3）分别为0.10和0.02 mg/L.精确度与精密度结果显示：两者的日内精确度分别为89.54％～95.79％和88.76％～94.33％,相对偏差小于5％;日间精确度分别为88.16％～92.41％和88.49％～94.35％,相对偏差小于5％.低、中、高3个浓度的提取回收率均大于90％.该方法可用于分离测定20-（S）和20-（R）人参皂苷Rh1,从而进行人参皂苷Rh1对映异构体在大鼠体内的药代动力学研究.

半夏中水麦冬酸成分检测研究

构建半夏中水麦冬酸成分检测的方法。方法 半夏样品经水超声提取,利用高分离度快速液相色谱-三重四极杆质谱(rapid resolution liquid chromatography coupled with triple quadrupole electrospray tandem mass spectrometry,RRLC-QQQ/MS)检测方式对其进行检测。并使用 Agilent SB-C 18 (2.1 mm×50 mm,1.8 μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸(5∶95)为流动相。柱温 30℃,体积流量 0.2 mL/min,进样量 1 μL。离子化模式为 ESI - ,选择 m/z187→143 和 m/z187→99 作为检测离子对,进行多反应检测。结果 经检测后得出的结果显示,半夏中水麦冬酸成分检出限值为4.5μg/L,检测的10批半夏中水麦冬酸检出3份。结论 将高分离度快速液相色谱-三重四极杆质谱检测方式应用于半夏中水麦冬酸成分的检测中具有较好的效果,能够实现高效、快速、便捷、简便的检测目的,可为半夏质量控制提供指导。