人外周血淋巴细胞高分辨染色体制备技术的研究

目的：建立一种具有分裂指数高和染色体分散好等优点的550～850条带纹高分辨染色体的制备方法。方法：取10例健康人外周血为样本制备淋巴细胞高分辨染色体。固定5-氟尿嘧啶核苷、尿嘧啶核苷、胸腺嘧啶核苷、溴化乙锭、秋水仙胺的剂量，进行5个因素3个水平的正交设计15种实验方案。5个因素分别为培养时间、胸腺嘧啶核苷、溴化乙锭、秋水仙胺作用时间以及低渗时间。3个水平分别为培养时间64、72、80h；胸腺嘧啶核苷作用时间16、17、18h；溴化乙锭作用时间3、4、5h；秋水仙胺作用时间10、15、20min以及低渗时间30、40、50min。每例样本同时采用15种方案进行实验，比较各方案带纹在550条以上时染色体分裂指数和分裂相分散的情况。结果：在15种方案中培养时间以及秋水仙胺作用时间对分裂指数有显著影响俨〈0．01），其中培养72h后加5-氟尿嘧啶核苷和尿嘧啶核苷进行同步化和秋水仙胺作用15min高分辨染色体分裂指数最大。37℃低渗40min高分辨染色体分散效果最佳。结论：本实验方案的高分辨染色体制备方法，具有分裂指数高和染色体分散好等优点，具有较好的推广价值。

骨髓增生异常综合征患者骨髓高分辨染色体的制备与分析

目的:了解高分辨染色体的制备方法在骨髓增生异常综合征(MDS)患者染色体核型分析中的应用价值。方法:随机选择160例MDS患者,同时应用常规方法和高分辨染色体的制备方法制备骨髓染色体。常规染色体的制备:患者骨髓经短期(24h)培养后,加入秋水仙胺,37℃孵育1h后收获细胞。骨髓高分辨染色体的制备:取初诊MDS患者骨髓,按有核细胞(1.5～2.0)×106mL-1接种于RPMI1640培养基中,置37℃恒温箱中,培养48h。在收获前2h加溴化乙锭(EB),再于收获前1h加入秋水仙胺,按常规方法制片,G-显带。以同期住院的40例非恶性血液系统疾病患者为对照。结果:应用高分辨染色体制备方法制备出的骨髓染色体,每一单倍体带达550条左右。在160例MDS患者中,共发现90例骨髓染色体数目或结构异常,其中-5/5q-17例,-7/7q-31例,-Y11例,t(9,22)15例,其余16例为4、6、10、11号染色体异常。应用常规染色体制备方法制备的骨髓染色体核型分析结果与高分辨染色体方法制备的骨髓染色体相同,但每一单倍体带在400条左右。40例非恶性血液病患者骨髓染色体未发现数目和结构异常。结论:骨髓高分辨染色体可检出更多的异常染色体,并可确定精细的断裂点。

用低温诱导法制备人高分辨染色体

目的 :探讨非药物作用获得人高分辨染色体。方法 :外周血淋巴细胞在 37℃中培养 66h ,入 4℃冰箱4h ,再分别入 37℃恢复培养 0、1 0、2 0、30、4 0、50、60min ,终止培养前以低浓度 ( 0 0 8μg/ml)秋水仙素处理培养物 30min。结果 :不恢复培养 ( 0min)或短时恢复培养 ( 1 0、2 0min)组分裂指数最高 ,晚前期、前中期和早中期染色体数目最多。结论 :该法简便 ,不需药物诱导 ,便于推广。

一例22q和11q部分三体患者家系的高分辨染色体研究

本文采用染色体高分辨技术完成了一例核型为47,XY,+der(22),t(11;22)(22pter→22q11.2∶∶11q23.3→11qter)患者及其家系的细胞遗传学研究。其母亲核型为46,XX,t(11;22)(q23.3;q11.2)的平衡易位携带者。并通过对患者母亲第二次妊娠胎儿羊水细胞的染色体分析确认胎儿核型为46,XX,t(11;22)(q23;q11)mat,即为一个表型正常的携带者,并经出生后证实。

连续多发性流产夫妇的高分辨染色体研究——附6例世界首报异常核型

选择407对连续流产2-8次的夫妇进行染色体G显带分析,发现异常核型23例。407对夫妇中,采用高分辨技术精细定位46例,发现的15例异常核型中有6例鉴定为世界首报,对其中4例进行了绒毛染色体检查,均发现与父(母)相同的异常核型,说明非同源染色体相互易位和倒位携带者的后代必须接受宫内诊断,智力低下或生育力降低可能与易位染色体有关。

家畜及实验动物高分辨染色体研究进展

高分辨染色体(High Resolution chromosome HRC)是指通过某种处理,获得有丝分裂早期染色体分裂相,早期染色体较中中期染色体长,显带后可以得到更多更细的带纹,从而提高人们对染色体的分辨力.Yuns, J. J(1976)首先以氨甲喋呤使细胞同步化法,建立了人类高分辨染色体技术.随之国内外许多学者对人类高分辨染色体进行了广泛而深入的研究.近几年,关于家畜和实验动物的高分辨染色体研究陆续亦有一些报道,但理论和应用方面的进展依然有限.本文试图就家畜和实验动物高分辨染色体研究的方法、进展以及意义进行阐述,同时提出值得探讨的几个问题.

直接制备绒毛高分辨染色体的简易方法

应用妊娠6～10周绒毛进行细胞遗传学检查,是诊断胎儿有无染色体病的有效方法。1983年Simoni等首先用直接法制备绒毛染色体进行产前诊断。此法较培养法简便易行且成功率高,因此越来越为临床所广泛应用。而用直接法制备绒毛高分辨染色体,国内文献报道尚少。我们采用大剂量秋水仙素超短时间处理新鲜绒毛标本。

银屑病患者染色体和高分辨染色体的研究

目的 探讨染色体的变化与银屑病的关系。方法 外周静脉血培养制备淋巴细胞G显带染色体和高分辨染色体 ,核型分析观察其数目和结构在寻常性银屑病中的表现 ,并与对照组比较。结果 银屑病患者染色体裂隙和断裂的检出率显著高于对照组 ,急性发作期显著高于恢复期 ,恢复期与对照组差异无显著性 ;D、G组染色体花形联合率显著高于对照组 ,同时见随体联合。结论 银屑病患者染色体上的裂隙和断裂可能是不稳定损伤的表现 ,这与该病不治自愈又时常反复发作有关 ;花形联合与随体联合可能是染色体生物化学和生物物理学性状改变的结果 ,它与rDNA含量有关 。

溴化乙锭及放线菌素D对高分辨染色体的作用

应用胸苷同步化方法,对比分析了染色体凝缩抑制剂溴化乙锭及放线菌素D对高分辨染色体的影响。结果表明,溴化乙锭组高分辨分裂细胞比例高,染色体带纹稳定,染色体断裂率低。放线菌素D组染色体带纹出现不均匀凝缩现象,染色体断裂率增高。提示溴化乙锭是一种稳定的染色体凝缩抑制剂,优于放线菌素D。

人体外周血高分辨染色体技术研究及其应用

作者行人体外周血高分辨染色体研究,结果发现胸苷(TdR)同步结合放线菌素-D(AMD)掺入法较为理想,经77例临床应用成功64例,成功率为83.2%,分裂指数为4.68%。高分辨染色体所占的比例为54%。该法所制备的染色体及其带纹与1981年国际体制相符。检出异常染色体核型17例,检出率为25.56%,变异染色体5例。经查证12例异常染色体核型为国际首报。

吖啶橙(AO)丙酮法直接制备绒毛高分辨染色体的研究

1983年Simoni等直接制备绒毛染色体的方法的成功将产前诊断染色体病的时间提早到早孕时期,为患者减轻了极大的痛苦,成为产前诊断的一突破性进展,不过这种方法制备的染色体多为中期分裂相,一般只有320条左右的带纹,对染色体的细微结构异常难以发现,绒毛高分辨染色体能使染色体呈现更多的带纹,从而进一步扩大了染色体疾病的诊断范围和提高其诊断率。 获得绒毛高分辨染色体有两种途径。一。

孕早期直接制备绒毛高分辨染色体产前诊断的研究

自外周血淋巴细胞染色体高分辨显带技术建立以来,已发现某些肿瘤和基因病具有染色体的微小改变。这在染色体病的诊断上是一个进展,但目前尚缺乏特效的治疗措施,这些患者只有伴随着染色体病遗憾终生。为了避免其出生,在孕早期诊断出胎儿的染色体异常是十分必要的。 1984年以来。

人类高分辨染色体制备方法的研究

本文分别对纺锤体抑制法、阴止凝缩法、同步拦截法三种方法,用于高分辨染色体的制备进行了探索。结果:选择第三种方法,即过量胸苷同步结合放线菌素D掺入法制备高分辨染色体,进行改进,获得比较理想的人类高分辨染色体,经临床应用77例,成功率为83.12％,分裂指数为4.68％,高分辨染色体占54.00％。

人类外周血及白血病骨髓细胞高分辨迟复制R-显带染色体技术的研究

本文集国内外的多家方法之所长,并参照本实验室经验,建立了外周血淋巴细胞及白血病骨髓细胞高分辨迟复制R-显带染色体显带技术。该技术稳定可靠,简便易行,便于临床应用。为白血病细胞遗传学研究开辟了一个新途径,也为羊水、绒毛及实体肿瘤细胞遗传学研究提供了新的诊断手段。

哺乳动物染色体高分辨显带研究现状

高分辨染色体(High Resolution Chromosome,HRC)是指通过某种处理,获得有丝分裂早期染色体(指晚前期、前中期、早中期染色体)分裂相,此时分裂相的染色体较中中期染色体长,显带后可得到更多更细的带纹,从而提高了人类对染色体的分辨力。Yunis(1976)首先以氨甲喋呤使细胞同步化。

羊水细胞高分辨染色体的新方法

我室在外周血高分辨染色体新方法研究成果的基础上,建立了一种简便易行的制备羊水胞细高分辨染色体的方法,现报告如下。一、材料和方法 1.羊水细胞的获得和培养:妊娠16～20周的孕妇在排空小便后,经B超对胎儿定位。

人类高分辨迟复制R显带染色体及其特征

自Camargo和Ronne等人先后建立迟复制R显带高分辨染色体技术以来,很快受到国内外一些学者的重视。但迟复制R带并非G带的完全反转带,有着自身的某些特征,因而对于应用这一技术进行核型分析和交流造成了障碍。我们以ISCN(1981)的G带模式图为标准。

1200条带阶段的人类染色体高分辨G带

在改良的850条带阶段的人类染色体高分辨显带技术基础上,对1200条带阶段的人类染色体高分辨G带进行了研究和识别,并按ISCN(1985)的规定对1200条带阶段的高分辨G带进行了命名和划分。

染色体、阈值—高分辨比较基因组杂交技术的质控关键

目的讨论高分辨比较基因组杂交(high resolution comparative genomic hybridization,HR-CGH)技术中高分辨染色体玻片的质量以及不同阈值分析方法对HR-CGH技术的结果影响。方法以正常男性外周血为材料,制备高分辨染色体玻片,分析滴片方案、后固定、预变性等技术环节对染色体玻片质量的影响,从而确立HR-CGH的染色体玻片制备及挑选标准。另以10名正常男、女性外周血为材料,进行HR-CGH检测,杂交结果分别以固定阈值及动态参考阈值(dynamic standard reference intervals,DSRI)进行判定,讨论不同判定方法对HR-CGH检测结果的影响。结果实验证实,过火、后固定及预变性的实施有利于稳定制备高质量的染色体玻片。另外10名正常人标本的杂交结果,以固定阈值法分析的结果均与核型分析结果一致;以ASI软件附带的DSRI法分析,9例结果与核型一致,1例女性结果出现假阳性,为46,XX,dup(15)(q2.2～2.6)。结论高分辨染色体玻片的背景、染色体分散度、抗变性能力是HR-CGH实验成功的关键。以固定阈值分析结果,不受人群差异限制,可在各实验室间广泛应用。而以DSRI分析结果,则受人群差异限制,该DSRI数据必须来自本地正常人群。