半制备高压液相色谱法制备罗汉果苷Ⅴ标准品

目的:通过半制备高压液相色谱分离技术,建立一种快速、稳定、高效制备高纯度罗汉果苷Ⅴ标准品的方法。方法:先采用树脂吸附脱色技术进行前处理,再通过半制备高压液相色谱分离制备罗汉果苷Ⅴ,色谱条件为Eclipse XDB-C18色谱柱(9.4mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-水,采用梯度洗脱,流速4mL/min,检测波长210nm,进样量36mg,柱温38℃。结果:分离得到的罗汉果苷Ⅴ的纯度为99.1%。结论:本方法具有操作简单、快速、稳定和产品纯度高等优点,可应用于实际样品的检测。

半制备高效液相色谱-离子色谱法检测婴幼儿配方食品中低聚半乳糖的含量

目的优化并建立半制备高效液相色谱法-离子色谱法测定婴幼儿配方食品中低聚半乳糖含量的方法。方法以乳粉、特殊医学配方奶粉和液态奶为实验对象,利用半制备高效液相色谱法分别收集婴幼儿配方食品中的二糖和三糖及聚合度(degree of polymerization,DP)3以上的糖,再利用β-半乳糖苷酶水解收集聚合度3及3以上的糖组分,利用离子色谱法测定酶解后的半乳糖和葡萄糖的含量,通过计算得到样品中低聚半乳糖的含量。结果异乳糖、葡萄糖、半乳糖、1,6-β-D-半乳二糖和1,3(4)-β-D-半乳二糖在1.0~30.0μg/mL范围内线性关系良好,相关系数为0.9985~0.9999,回收率为82.80%~87.67%,相对标准偏差≤5%。结论该方法结果准确,能够满足检测要求,且前处理操作简单,便于大批量样品的检测。

半制备高效液相色谱法同时分离制备肉桂中5种苯丙素类化合物及其免疫抑制活性考察

目的:建立一种从肉桂中同时分离5种苯丙素类化合物的制备分析方法,并对化合物的免疫抑制活性进行了评价。方法:肉桂经乙醇提取后,取乙酸乙酯部位经高效液相色谱仪分离制备化合物,制备色谱条件:采用Ultimate XB-C18(250 mm×10 mm,5μm)半制备柱,流动相为乙腈-水,进行梯度洗脱,检测波长为330 nm,柱温为30℃,流速为2.5 ml·min-1,进样量为0.3 ml。采用MS及NMR对化合物进行结构鉴定。采用CCK-8法对分离出的化合物进行免疫抑制活性考察。结果:同时分离得到5种苯丙素类化合物,分别为赤式-愈创木甘油、(7R,8S)-syringoylglycerol、(7S,8S)-syringoylglycerol、3-甲氧基苯基-丙烯醛、邻甲氧基肉桂醛。CCK-8法证明化合物3在浓度800μmol·L-1时对T细胞及B细胞的抑制率均大于20%,有一定免疫抑制作用。结论:苯丙素分离方法简便,分离效果好,能同时制备肉桂中5种苯丙素类化合物,其中化合物3有一定的免疫抑制活性。

半制备高效液相色谱法分离制备香鳞毛蕨中间苯三酚类衍生物

目的:采用半制备液相色谱法从香鳞毛蕨中分离制备间苯三酚类衍生物的对照品。方法:用石油醚回流提取香鳞毛蕨,提取液浓缩后经硅胶柱色谱分离,再用半制备高效液相制备,以纯乙腈为流动相进行等度洗脱(3 ml·min-1),进样量为0.5 ml,得到2个间苯三酚类衍生物。结果:2个化合物结构分别为绵马素BB和绵马素PB,经超高效液相色谱法(UPLC)测定纯度,分别为绵马素BB(98.81%)、绵马素PB(98.57%)。结论:该方法制备的绵马素BB和绵马素PB纯度较高都在98%以上,简单,快速,可用于对照品的制备。

超声提取-高压液相色谱法制备高纯度獐牙菜苦苷

目的:建立一种从青叶胆(Swertia mileensis)中快速、高效分离制备獐牙菜苦苷的方法。方法 :首先对青叶胆原料进行前处理,然后采用超声波提取法制备青叶胆提取物,再使用高压制备液相色谱法(HPPLC)对所得的青叶胆提取物进行分离纯化,将所得富含獐牙菜苦苷的流分冷冻干燥后,用高效液相色谱法(HPLC)进行纯度分析。结果:前处理方式为去根茎取花叶;最佳超声提取工艺:20倍量75%乙醇,超声提取3次,每次10 min;高压制备液相色谱纯化工艺:反相C18填料,压力10 MPa,以30%甲醇-水为流动相洗脱,所得獐牙菜苦苷纯度经HPLC法分析质量分数为98.17%(峰面积归一化法)。结论:该方法制备獐牙菜苦苷简便、快捷,所得产物的纯度高,适合青叶胆中獐牙菜苦苷的快速制备,同时工艺放大验证其也适用于工业生产。

半制备反相高效液相色谱法分离珍珠菜中木脂素类成分

对珍珠菜(Lysimachia clethroideDuby)中的木脂素类化学成分,采用Sephadex LH-20和半制备反相高效液相色谱法联用分离化合物,从中分离并鉴定了两个化合物,通过波谱技术鉴定其化合物的结构分别是:(+)-Isolar-ic iresinol-9′-β-D-glucopyranoside(1).Urolignoside(2).化合物1和2均为首次从该属植物中分离得到.

反相高效液相色谱法半制备分离［T（4－MOP）PS_4］卟啉的研究

本文研究了新水溶性５，１０，１５，２０－四（４－甲氧基－３－磺酸苯基）卟啉［Ｔ（４－ＭＯＰ）ＰＳ４］的反相高效液相色谱（ＨＰＬＣ）分离条件。采用ＳｈｉｍｐａｃｋＰＲＥＰ－ＯＤＳ半制备色谱柱，用含有１０ｍｍｏｌ／Ｌ四乙基碘化铵的乙腈－水（体积比２５：７５）为流动相，流速１８ｍＬ／ｍｉｎ，于４１８ｎｍ波长下检测。［Ｔ（４－ＭＯＰ）ＰＳ４］与合成中生成的杂质组分完全分离。经此制备的卟啉纯度高，已成功地应用于自来水样中微量钴、锌、铜离子的ＨＰＬＣ测定中。

曲克芦丁原料药中三羟乙基芦丁及相关物质的半制备液相色谱法分离纯化

通过半制备液相色谱法对曲克芦丁原料药中三羟乙基芦丁及相关物质进行分离纯化。采用C18色谱柱,分别以乙腈-水(17∶83,V/V)和甲醇-水(60∶40,V/V)为流动相,流速为1.0mL·min-1,检测波长254nm。经高效液相色谱法分离分析,制备的3个化合物的纯度均在98%以上,经核磁共振、质谱等分析检测,推断它们分别为三羟乙基芦丁、四羟乙基芦丁和四羟乙基槲皮素。该制备方法简便高效,重现性好,对进一步提高和监控曲克芦丁产品的质量具有重要意义。

半制备高效液相色谱法分离纯化川木通中齐墩果酸

采用半制备高效液相色谱法对川木通中有效成分齐墩果酸进行分离纯化,纯化齐墩果酸的制备色谱条件:半制备型色谱柱ZORBAX SB-C18(9.4 mm×150 mm,5μm),流动相乙腈-水=87∶13,流速3 mL/min,柱温室温,检测器VWD检测器,波长210 nm,进样量20μL。对制备出的馏分进行定性分析。该法具有纯化效果好、操作高效、快速的特点。

半制备-高效液相色谱法测定乳粉中维生素D_(2)和D_(3)含量

目的:为了准确测定乳粉中的维生素D含量,简化国标方法的前处理过程,建立了乳粉中维生素D_(2)和D_(3)含量的测定方法。样品经皂化—正己烷提取—浓缩后,与标准溶液均用正相半制备-高效液相色谱法净化、反相高效液相色谱法分析、外标法定量。结果:维生素D_(2)和D_(3)在0.01~0.50μg/mL范围内具有良好的线性关系,检出限为0.7μg/100 g,定量限为2.0μg/100 g;维生素D_(2)和D_(3)的6次测定结果均在特征值范围内,重现性RSD分别为1.07%和2.38%;维生素D_(2)的加标回收率为89.50%~98.70%,维生素D_(3)的加标回收率为88.17%~95.90%,相对标准偏差均不高于8.81%。结论:经测定多种市售乳粉的维生素D含量,表明该方法操作简单、测定结果准确,可以为乳粉中维生素D_(2)和D_(3)含量的测定提供依据。

高压液相色谱法测定蜜饯食品中色素、防腐剂和甜味剂

在蜜饯生产中常需要添加色素、甜味剂和防腐剂,国家标准理化检验方法中测定这三类添加剂的首选方法是薄层色谱法,但薄层色谱法仅是半定量方法,加之蜜饯食品往往因高糖、高果胶、高淀粉,检测添加剂时提取困难,使测定结果不准确。我们参考有关资料,提出分别适用于蜜饯食品色素。

高效液相色谱法测定川芎不同炮制品中游离阿魏酸和总阿魏酸的含量

【目的】测定并比较川芎不同炮制品中游离阿魏酸、总阿魏酸的含量。【方法】采用超声提取法,以甲醇—甲酸(95∶5,V/V)为游离阿魏酸的提取溶剂,以甲醇—20 g/L NaHCO3(95∶5,V/V)为总阿魏酸的提取溶剂;采用高效液相色谱(HPLC)法测定,色谱条件为:Diamonsil C18分析柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈—体积分数1%冰醋酸(20∶80,V/V);检测波长:320 nm;流速:1.0 mL/min;柱温:室温。【结果】酒炙川芎的游离阿魏酸和总阿魏酸含量均高于生品及制川芎。川芎生品与不同制品水煎液中阿魏酸含量均高于其游离阿魏酸含量。【结论】本研究含量测定方法简便、准确,可用于川芎及其炮制品中阿魏酸含量的测定研究;测定川芎中总阿魏酸的含量更能反映川芎的质量。

利用半制备型HPLC分离捆仙七中的非生物碱成分

目的采用半制备型高效液相色谱法(Semi-preparative HPLC)从捆仙七中分离纯化非生物碱成分。方法捆仙七经乙醇提取和20mL·L-1的盐酸酸解后得到非生物碱粗提物,用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取后得到不同的极性部位。取乙酸乙酯部位,用硅胶色谱柱进行分离,用石油醚-乙酸乙酯进行洗脱,得到极性不同的馏分,最后用Semi-preparative HPLC分离纯化制备化合物。采用1 H-NMR和13 C-NMR对化合物进行结构鉴定。结果最终从捆仙七乙酸乙酯非生物碱部位共得到5个化合物,分别为东莨菪亭、异秦皮定、松脂醇、原儿茶酸和槲皮素。结论所建立的Semi-preparative HPLC法具有高效、重复性好且分离组分纯度高等特点,适用于从捆仙七中快速制备非生物碱成分。

石菖蒲中高纯度β-细辛醚和α-细辛醚的制备

建立了采用高压半制备液相色谱制备石菖蒲中β-细辛醚和α-细辛醚高纯单体化合物的方法。首先以石菖蒲为原料制备石菖蒲挥发油,然后采用高压半制备液相色谱,设定流动相为甲醇∶水=65∶35(v/v),对β-细辛醚和α-细辛醚进行精制纯化。产物的结构采用EI-MS、1H-NMR和13C-NMR进行鉴定,而且它们的纯度分别达到99.43%和99.08%。该方法操作简单、制备量大、产物纯度高,可用于石菖蒲中高纯度β-细辛醚和α-细辛醚对照品的制备。

老年脑梗死患者血浆同型半胱氨酸水平及相关因素研究

目的分析316例老年脑梗死患者血浆同型半胱氨酸(Hcy)的水平及特点,探讨其相关的因素。方法高效液相色谱检测316例老年脑梗死患者(老年脑梗死组),184例非老年脑梗死患者(非老年脑梗死组)和61例健康老年对照者(健康老年对照组)血浆中Hcy的水平,对老年脑梗死组Hcy的分布特征及相关因素进行统计学分析。结果老年脑梗死组患者血浆Hcy水平(17.91μmol/L)高于健康老年对照组(12.69μmol/L),差异有显著性意义(P<0.001);老年脑梗死组血浆Hcy水平高于非老年脑梗死组(15.72μmol/L),差异无显著性意义(P=0.089);老年脑梗死组患者Hcy水平存在性别差异(t=3.628,P<0.001);Hcy水平与叶酸水平、年龄、性别相关,回归系数分别是-0.137,0.008,-0.086。结论老年脑梗死组患者血浆Hcy水平高于健康老年对照组,男性高于女性,Hcy水平与年龄呈正相关,与叶酸水平呈负相关。

高同型半胱氨酸血症及MTHFR基因与中青年脑梗死的研究

目的 :探讨高同型半胱氨酸血症 (HHC)及N5,N10-亚甲四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因型与中青年脑梗死的关系。方法 :采用高压液相色谱法及PCR -RFLP技术测定80例脑梗死患者和40例正常对照者的血浆总同型半胱氨酸水平 (tHcy)和MTHFR基因多态性。结果 :患者组中MTHFR基因T/T纯合型频率为33.75 % ,T等位基因频率为58.75 % ,显著高于对照组的20 %和36.25 % (P<0.05) ;患者组血浆tHcy均值为22.70μmol/L ,对照组仅为13.19μmol/L ,患者组HHC31例 ,对照组仅为2例 ,2组差别有统计学意义,且2组T/T型者血浆tHcy水平高于T/C型和C/C型者。结论 :MTHFR基因突变可能是脑梗死发生的一个遗传易感因素 。

足叶乙苷长循环脂质体的制备及血浆中稳定性研究

【目的】研究足叶乙苷长循环脂质体的制备方法并考察其在大鼠血浆中的稳定性。【方法】采用乙醇注入法制备足叶乙苷长循环脂质体,用聚乙二醇2000—二硬脂酰磷脂乙醇胺(PEG2000-DSPE)修饰脂质体膜,反相高效液相色谱(HPLC)法测定脂质体浓度,动态透析法考察其在大鼠血浆中的稳定性。【结果】足叶乙苷长循环脂质体的平均粒径为(180±26)nm,含量为(4.78±0.22)mg/mL,药物包封率为(88.71±8.2)%。在大鼠血浆中,普通脂质体和长循环脂质体24h累积释药率分别为(80.14±1.59)%和(46.72±2.61)%。【结论】乙醇注入法可制得包封率高、粒径小的足叶乙苷脂质体,PEG2000-DSPE修饰脂质体膜可增加脂质体的稳定性。

胸腺肽α_1微球的制备及其评价

目的:建立胸腺肽α1(Tα1)微球的制备及评价方法.方法:以聚乳酸-乙醇酸嵌段共聚物(PLGA)为载体材料,采用复乳法(w/o/w)制备Tα1长效注射微球,考察其粒径大小、外观、包封率等理化性质;采用RP-HPLC法测定微球中Tα1的含量.色谱柱为Kromasil柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈:0.1%三氟乙酸(20:80),流速1.0 mL/min,柱温为室温,进样量为50μL,检测波长210 nm.结果:Tα1微球球形圆整,包封率在80%以上.Tα1在5～100μg/mL浓度范围内线性关系良好(r=0.999 9),以Tα1的峰面积(A)对浓度(c)作线性回归,回归方程为A=24 179 c-10 967.结论:Tα1微球的制备工艺合理,评价方法简便、快速、准确.

延胡索中去氢紫堇碱对照品的制备及含量测定

目的研究中药延胡索中去氢紫堇碱对照品的制备及含量测定方法。方法采用硅胶柱色谱与半制备高效液相色谱组合分离技术，分离纯化去氢紫堇碱，采用薄层色谱法和高效液相色谱面积归一化法检测纯度，波谱法鉴定其结构，反相高效液相色谱法测定其含量。结果制备的化合物鉴定为去氢紫堇碱，纯度为98．7％；含量测定在0．0763～0．4576μg呈良好线性关系，r=0．9998，平均回收率为104．44％，RSD为2．36％（H=6）。结论该制备方法效率高，所得化合物纯度高，可用于大量制备。含量测定方法准确，简便，可靠，重复性好。

延胡索中紫堇碱标准品的制备及含量测定

目的研究延胡索中紫堇碱标准品的制备及含量测定方法。方法运用半制备高效液相色谱法分离纯化紫堇碱，采用薄层色谱法和高效液相色谱面积归一化法检测纯度，波谱法鉴定其结构，反相高效液相色谱法测定延胡索药材中紫堇碱的含量。结果制备的化合物鉴定为紫堇碱，纯度为99．5％；含量测定在0．1312～1．1312μg范围内呈良好线性关系，r=0．999997，平均回收率为97．19％，RSD为2．25％（n=9）。结论该制备方法效率高，所得化合物纯度高，可用于大量制备；含量测定方法准确，简便，可靠，重复性好。