16S核糖体RNA基因测序评估高原红细胞增多症患者血液菌群特征

目的探讨高原红细胞增多症(high altitude polycythemia,HAPC)患者血液菌群变化特征及其与HAPC发病风险的相关性。方法采用横断面研究设计方案,以2021年在西藏日喀则陆军第九五三医院健康管理科参加体检的41名HAPC患者(HAPC组)和41名高原健康人员(对照组)为研究对象。通过高通量测序技术对血液细菌16 S核糖体RNA(16S rRNA)基因的V3-V4可变区进行检测,比较分析HAPC组和对照组血液菌群组成情况和差异。结果2组人员均为汉族男性,年龄、体质量指数及高原移居时间等基线数据比较差异无统计学意义(P>0.05)。菌群多样性分析显示,HAPC组中反映血液菌群α-多样性的Simpson指数[(0.931±0.005)vs(0.907±0.008),P<0.05]、Goods Coverage指数[(0.998±0.001)vs(0.997±0.001),P<0.001]和Pielou指数[(0.597±0.011)vs(0.567±0.009),P<0.05]显著高于对照组。2组间β多样性差异有统计学意义(P<0.01)。菌群相对丰度分析显示,HAPC组血液嗜糖假单胞菌属(Pelomonas)[(0.046±0.004)vs(0.033±0.003),P<0.05]、固氮螺菌属(Azospirillum)[(0.046±0.006)vs(0.021±0.003),P<0.01]、食酸菌属(Acidovorax)[(0.032±0.003)vs(0.019±0.002),P<0.05]的相对丰度均显著高于对照组。特征性细菌LEfSe分析显示,HAPC组标志菌群是α-变形菌纲,对照组标志菌群是毛螺菌科。结论HAPC患者较高原健康人群的血液菌群在多样性、相对丰度及特征性菌类方面发生显著变化,这类变化可能与HAPC的发生发展密切关联。

高原红细胞增多症患者24小时动脉血氧饱和度昼夜变化特征

目的 探讨高原红细胞增多症(HAPC)患者24小时动脉血氧饱和度昼夜变化特征。方法 选取藏族男性HAPC患者(51例)设为HAPC组,同时间选取健康男性50例设为对照组(HC),回顾全部患者24小时动态血氧饱和度检查数据,并进行分析。结果 两组24小时动态S_(a)O_(2)均小于90%,且HAPC组明显低于HC组(78.35%vs 84.85%),有显著差异(P<0.001);两组动态S_(a)O_(2)变化规律相似:(1).夜间S_(a)O_(2)显著低于白天,均于0:00~3:00最低(HAPC组73.33%~73.48%vs HC组82.8~82.86%),(2).白天S_(a)O_(2)均较平稳,夜间波动幅度大;HAPC组动态变化幅度明显较HC组大,于22:00~4:00下降明显(HAPC组降幅5.9%vs HC组3.9%)。结论 HAPC患者夜间S_(a)O_(2)变化呈“勺形”特征,夜间极低S_(a)O_(2)水平可能对HAPC的发生和发展起了重要作用,改善夜间缺氧状态可能是预防或改善HAPC预后的重要手段。

肝泡型棘球蚴病合并高原红细胞增多症的临床诊断特点及手术进展

肝泡型棘球蚴病(HAE)是高原牧场地区常见的寄生虫类感染性疾病,困扰并威胁着高原地区农牧民的身体健康。由于肝泡型棘球蚴病感染进展缓慢,早期临床表现及体征不明显,常在因其他疾病就诊时才发现,大多数患者已是中晚期,甚至有些患者病灶已通过淋巴管或血管向肺、脑、脾或其他部位转移,引起相应并发症,预后较差。生活在高原地区的农牧民一个明显的特征是血液中血红蛋白升高,临床上称之为高原红细胞增多症(HAPC),当高原农牧民患HAE时,相对于低海拔地区的患者,手术风险更大,术后恢复差,更易发生术后并发症。因此,本文就肝泡型棘球蚴病合并高原红细胞增多的临床诊断、治疗作一综述,旨在为其诊疗提供参考。

低氧通过HIF-1α介导Hepcidin mRNA的去甲基化修饰促进高原红细胞增多症的分子机制研究

目的:探讨HIF-1α和Hepcidin在高原红细胞增多症致病机制中的作用。方法:招募和测定高原红细胞增多症(HAE组)和同一高海拔地区健康个体(HH组),以及出生于同一高海拔地区并在超过2年的时间段居住于低海拔地区的健康个体(LH组)外周血血红蛋白浓度[Hb]、血红蛋白质量(Hbmass)、血容量和外周血O_(2)饱和度(SpO_(2))。ELISA法测定上述个体外周血清HIF-1α和Hepcidin的水平。体外低氧诱导HepG2细胞,实验分组为Control组和Hypoxia组,测定细胞中HIF-1α和Hepcidin mRNA和蛋白质表达水平。m6A含量分析、RNA免疫共沉淀法(RIP)、双荧光素酶报告基因分析法,mRNA稳定性分析法深入探讨HIF-1α对Hepcidin mRNA的m6A去甲基化修饰的分子机制。结果:与LH组相比,HH组[Hb]、Hbmass水平和血容量升高,SpO_(2)降低;与HH组相比,HAE组[Hb]、Hbmass水平和血容量升高,SpO_(2)降低(P<0.05)。与Control组相比,Hypoxia组HIF-1αmRNA和蛋白质相对表达水平升高,Hepcidin mRNA和蛋白质相对表达水平降低(P<0.05)。与Control组相比,Hypoxia组HepG2细胞的m6A(%)水平降低(P<0.05)。mRNA稳定性分析HepG2细胞中Hepcidin mRNA水平,与Control组相比,Hypoxia组Hepcidin mRNA相对表达水平降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因分析结果显示,与共转染了Hepcidin 3'-UTR和shRNA NT组的HepG2细胞相比,共转染了Hepcidin 3'-UTR和HIF-1αshRNA组的HepG2细胞相对荧光素酶活性升高(P<0.05)。RIP结果显示,与IgG组相比,FTO Ab组Hepcidin 3'-UTR富集水平升高(P<0.05)。结论:低氧上调HIF-1α介导Hepcidin mRNA的去甲基化修饰参与高原红细胞增多症疾病进展。

基于网络药理学与分子对接探究藏药鬼箭锦鸡儿治疗高原红细胞增多症的分子机制

目的基于网络药理学、分子对接探讨藏药鬼箭锦鸡儿治疗高原红细胞增多症(high altitude polycythemia,HAPC)的分子机制。方法通过文献检索寻找鬼箭锦鸡儿的活性成分,采用SwissTargetPrediction数据库预测其潜在靶点,采用OMIM和GeneCards数据库筛选HAPC靶点,并将药物作用靶点和疾病靶点取交集,构建蛋白质互作网络(protein-protein interaction networks,PPI networks),借助DAVID数据库进行基因功能和通路富集分析,并采用AutoDock软件对关键活性成分和核心靶点进行分子对接,筛选鬼箭锦鸡儿活性成分潜在的作用靶点及相关信号通路。结果得到鬼箭锦鸡儿的有效活性成分25种,成分对应的靶点401个。连接度最高的前8种化学成分为7,3',4'-Trihgdroxy flavone、Geraldone、Quercetin、biochanin A、lsorhamnetin、7,4'-Dihydroxyflavone、Formononetin、Afrormosin。HAPC的疾病靶点共261个;药物成分与HAPC的交集靶点共41个,作用核心靶点包含VEGFA、AKT1、TNF、HAP90AA1、ESR1、MMP9、ACE、F2、CYP3A4、REN;参与的生物过程、细胞复合物、分子功能主要有缺氧反应生物过程、蛋白质磷酸化正调控过程、细胞表面、大分子复合体、类固醇结合、酶结合等;关键信号通路主要涉及Pathways in cancer、Chemical carcinogenesis-receptor activation、Fluid shear stress and atherosclerosis等。分子对接结果显示,8种主要活性成分与ACE、CYP3A4的结合情况很好,结合能均小于-8.5 kcal·mol^(-1)。结论鬼箭锦鸡儿的活性成分可以通过多通路作用于多靶点来治疗HAPC,为基础实验研究和临床应用提供一定的科学依据。

基于深度测序和生信分析挖掘高原汉族人群红细胞增多症变异的研究

目的通过小样本外显子测序与公用数据库比对进行生物信息挖掘,探寻汉族人群高原红细胞增多症(high altitude polycythemia,HAPC)变异与发病的相关性。方法纳入汉族高原红细胞增多症男性患者4例和高原健康男性5例,采集静脉血并提取DNA进行全外显子组测序;将测序数据进行功能学富集分析(gene ontology,GO&kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)构建突变基因蛋白质互作网络(protein protein interaction,PPI),选择显著性最高的基因,筛选潜在关键HAPC相关变异位点,初步探究相关变异与HAPC发病可能的机制。结果通过全外显子测序,发现HAPC相关的突变基因216个,其中表皮生长因子(epidemal growth farctor,EGF)基因在功能学富集分析(GO&KEGG),蛋白质互作网络(PPI)中具有高度显著性,初步筛选出5个潜在关键HAPC相关变异位点,通过生物信息学预测及分析,最终筛选出EGF基因上3个可能的变异c.2124G>A(p.Met708Ile)、c.2351A>T(p.Asp784Val)以及c.2759A>T(p.Glu920Val),可能是HAPC的突变位点,与HAPC发病相关。结论本研究表明汉族EGF基因的变异与HAPC发病存在相关性。EGF基因的变异可能通过干扰RNA剪接,改变RNA二级结构,影响蛋白质结构,进而影响EGF的生成及HAPC的发生发展。

高原红细胞增多症颅脑CT表现与血红蛋白含量的相关性分析

目的:利用CT检查探讨高原红细胞增多症(high altitude polycythemia, HAPC)患者颅内动脉管径、密度的变化,以及二者与血红蛋白(hemoglobin, Hb)含量的相关性,增加对HAPC患者颅脑CT表现的认识、提高HAPC的诊断能力。方法:选取2021年7月至2022年7月在青海省玉树藏族自治州第三人民医院确诊为HAPC患者及生活在同海拔高度的健康对照者各17例。回顾性分析两组患者颅脑CT表现,分析颅内动脉管径大小、密度高低以及二者与Hb的相关性。结果:HAPC患者大脑前动脉(anterior cerebral artery, ACA)、大脑中动脉(middle cerebral artery, MCA)及大脑后动脉(posterior cerebral artery, PCA)管径、密度均大于健康对照者,具有统计学差异(P<0.05)。HAPC患者血红蛋白含量大于健康对照者,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:HAPC患者颅脑CT主要表现为颅内动脉管径代偿性增粗,密度显著增加,二者表现与Hb呈正相关。结合患者临床表现、实验室检查及颅脑CT表现能够有效提高诊断准确率,减少误诊。

藏医放血疗法治疗150例高原红细胞增多症临床效果观察

探究高原红细胞增多症(HAPC)采用藏医放血疗法治疗的临床效果。方法 选择150例HAPC患者,随机分析观察组(75例藏医放血疗法)、对照组(75例常规西医治疗),比较两组治疗效果。结果 治疗后观察组血象指标、临床症状改善率均优于对照组,两组不良反应发生率对比无显著差异。结论 藏医放血疗法治疗HAPC效果显著,适合在医疗机构中推广应用。

基于因子分析的高原红细胞增多症中医证候量化诊断研究

目的:初步确定高原红细胞增多症中医基本证型及证候量化诊断要点。方法:对专家问卷调查获得的四诊信息资料进行因子分析。结果:气虚血瘀证KMO=0.816,Bartlett球型检验结果为992.402(P<0.001),本组四诊资料经6次迭代后收敛,结果统计为4个公因子,总贡献率为62.336%;气滞血瘀证KMO=0.868,Bartlett球型检验结果为1055.700(P<0.001),本组四诊资料经5次迭代后收敛,结果统计为3个公因子,总贡献率为59.294%;气血两虚证KMO=0.856,Bartlett球型检验结果为859.138(P<0.001),本组四诊资料经8次迭代后收敛,结果统计为3个公因子,总贡献率为62.120%;痰湿阻肺证KMO=0.879,Bartlett球型检验结果为870.371(P<0.001),本组四诊资料经8次迭代后收敛,结果统计为3个公因子,总贡献率为58.537%;气阴两虚证KMO=0.838,Bartlett球型检验结果为884.874(P<0.001),本组四诊资料经5次迭代后收敛,结果统计为3个公因子,总贡献率为66.877%。结论:获得高原红细胞增多症气虚血瘀、气滞血瘀、气血两虚、痰湿阻肺、气阴两虚5个基本证型及各证量化诊断要点。

红景天苷对高原红细胞增多症模型大鼠骨髓CD71+有核红细胞凋亡的影响

目的:探讨红景天苷对高原红细胞增多症(HAPC)模型大鼠骨髓CD71+有核红细胞(RBC)凋亡的影响,并阐明其作用机制。方法:45只SD雄性大鼠随机分为对照组(海拔1500 m条件+NaCl溶液)、模型组(海拔5000m条件+NaCl溶液)和药物组(海拔5000 m条件+0.15 g·kg^(-1)·d^(-1)红景天苷),每组15只。检测各组大鼠血常规中RBC数、血红蛋白(Hb)水平和红细胞比容(HCT)水平,流式细胞术检测各组大鼠骨髓CD71+有核RBC百分率、骨髓CD71+有核RBC凋亡率、骨髓CD71+有核RBC中线粒体膜电位(MMP)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)蛋白表达水平,Western blotting法检测各组大鼠骨髓CD71+有核RBC中B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Caspase-9)蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠外周血中RBC数、Hb水平和HCT水平均升高(P<0.01),骨髓CD71+有核RBC百分率和骨髓CD71+有核RBC凋亡率升高(P<0.01),骨髓CD71+有核RBC中Bax、Caspase-9和Caspase-3蛋白表达水平升高(P<0.05)。与模型组比较,药物组大鼠外周血中骨髓CD71+有核RBC百分率均明显降低(P<0.01),骨髓CD71+有核RBC百分率和骨髓CD71+有核RBC凋亡率降低(P<0.01),骨髓CD71+有核RBC中MMP水平升高(P<0.05),Caspase-3、Bax和Caspase-9蛋白表达水平降低(P<0.01)。结论:红景天苷可有效抑制HAPC大鼠骨髓有核RBC凋亡增加,并改善低氧引起的RBC过度积累,可能在大鼠HAPC发病过程起预防和保护作用。

多模态影像技术在高原红细胞增多症中的研究进展

高原红细胞增多症(high altitude polycythemia, HAPC)是指长期生活在海拔2500米以上的高原世居者或移居者,对高原低氧环境逐渐失去习服而导致的临床综合征,以红细胞过度增生、低氧血症为特征。由于红细胞过度增生导致血液黏稠度升高、血流阻力增加,引起一系列症状和体征,累及全身多个系统和器官。随着影像技术的不断发展,多模态影像技术对于HAPC各方面的研究作出了贡献。本文就多模态影像技术在HAPC中的研究进展进行综述,重点阐述多模态影像技术在研究HAPC的病理生理机制、评估治疗效果和预测病情进展方面的作用。

利用数据库解析高原红细胞增多症与肺动脉高压基因表达差异的关联性

目的利用数据库解析高原红细胞增多症(HAPC)与肺动脉高压(PH)基因表达差异的关联性。方法在GEO数据库中对两种疾病的人类数据集进行检索,利用DAVID数据库进行基因的富集分析和功能注释,并进行基因本体(GO)分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析、基因富集(GSEA)分析。结果对GSE29977数据集标准化后进行富集分析,得到1627个差异基因,校正后符合筛选阈值的基因有396个,其中188个上调基因和208个下调基因。对GSE53408数据集标准化后进行富集分析,得到3455个基因,校正后符合筛选阈值的基因有791个,其中695个上调基因和96个下调基因。对两个数据集共同差异基因进行重叠后获得138个共同差异基因,将差异基因与校正后得到的11个差异基因分别进行GO分析、KEGG分析、GSEA分析。生物学过程差异基因主要富集在:中胚层形态生成、初级胚层形成、原肠胚形成;细胞成分差异基因主要富集在:黏附连接、细胞与细胞连接、蛋白酶体调控颗粒碱基亚复合物、主要组织相容性复合体(MHC)Ⅱ类蛋白复合物、复杂炎性体等;分子功能差异基因主要富集在:激活转录因子、MHCⅡ类受体活性、UDP葡萄糖基转移酶活性、腺苷脱氨酶活性、磷酸酪氨酸残基结合、半胱氨酸型内肽酶活性参与凋亡信号通路、胰岛素样生长因子Ⅰ结合等。该次分析结果与人类PH疾病所有基因重合的基因有60个,与PH高度相关的基因有血管紧张素转换酶、微小RNA、SMAD通路蛋白、纤维母细胞生长因子(FGF)、血小板衍生生长因子。校正后获得的11个差异基因与之重合的有5个相同基因:FGF18、人类白细胞抗原DQB1、AT结合基序锌指蛋白1、基质金属肽酶8、H因子。结论目前关于HAPC与PH分子机制的研究较少,现有数据分析发现HAPC与PH间具有一些高度相关的差异基因,也呈现出各自疾病所具有的一些特殊基因表达,提示进行更多相关研究和功能验证的必要性。

益气活血方治疗高原红细胞增多症的作用机制及关键microRNA筛选研究

目的基于网络药理学及分子对接技术,预测益气活血方治疗高原红细胞增多症的核心物质和作用机制,筛选出其关键的microRNA,为中医药治疗高原红细胞增多症提供数据与方向。方法通过TCMSP和ETCM数据库筛选益气活血方潜在活性成分及作用靶点;GeneCards数据库、NCBI数据库、OMIM数据库获取HAPC疾病靶点;Venny在线平台进行交集靶点分析;利用STRING数据库及R语言、Cytoscape软件对交集靶点进行蛋白相互作用分析、GO功能和KEGG通路富集分析,采用Cytoscape构建“靶点-通路”网络模型,借助Autodock Vina进行有效成分与核心靶点的分子对接验证;采用TargetScan和miRDB数据库对核心基因进行microRNA预测。结果共筛选出方药潜在活性成分143个和330个药物靶点;得到方药治疗高原红细胞增多症的潜在作用靶点34个;核心靶点为AKT1、ALB、VEGFA、IL6、NOS3,主要参与的关键通路为HIF-1信号通路、VEGF信号通路、p53信号通路;分子对接显示baicalein-NOS3的对接分值最低,结合效果好;进一步得出miR-15b-5p、miR-4307、miR-29a-3p等关键调控microRNA。结论初步揭示了益气活血方干预高原红细胞增多症可能是通过多成分、多靶点、多途径发挥防治作用。

红细胞凋亡在高原红细胞增多症中的作用研究进展

高原红细胞增多症(HAPC)是一种常见的慢性高原病。当人体处于正常状态时,红细胞的增殖和凋亡保持相对平衡,既往大量研究认为红细胞的增殖增强在HAPC的发病中发挥着重要作用,但对于红细胞凋亡方面的作用还需要进一步的研究。现总结HAPC红细胞凋亡的临床研究和动物实验结果,进一步探讨红细胞凋亡在HAPC红细胞过度积累发病机制中的作用。

从红系发育角度探讨高原红细胞增多症发病机制

高原红细胞增多症(HAPC, high altitude polycythemia)是由高原低氧引起的以红细胞过度生成为主要表现的病症,该病发病机制复杂,现代医学、藏医学及中医学对HAPC有大量的研究,主要围绕流行病学,细胞生物学及分子生物学方面,但研究方向比较分散,且药物方面的研究明显不足,所以目前对该病的治疗仍然没有系统的认识,因此本文对HAPC的现代研究进行系统的归纳总结,主要包括影响红细胞生成过程中的影响因子,信号通路及低氧条件下红细胞的损伤,为HAPC的机制研究提供方向,以期为中西医的治疗方案提供理论基础。

高原红细胞增多症的研究进展

高原红细胞增多症是慢性高原病的常见类型之一,全球均有报道,多发生于高海拔等低氧地区。目前,国内外对高原红细胞增多症病理生理过程及诊疗已有广泛的研究,现就其病理机制及最新诊疗现状等阐述如下。

高原红细胞增多症骨髓造血的影像学研究进展

高原红细胞增多症是指在高原低氧环境下以红细胞过度增生为特征的疾病,是高原常见病之一。高原红细胞增多症常引起多个系统、器官的损害,尤其是骨髓造血系统,造血功能异常活跃,以红系细胞过度增殖为主。随着影像技术的不断发展,为高原红细胞增多症的发生、发展及治疗提供了重要的参考依据。本文就高原红细胞增多症骨髓造血的MRI研究进行综述。

EPAS1基因rs1868092位点多态性与中国藏族人群高原红细胞增多症的相关性研究

探讨EPAS1基因rs1868092位点多态性与藏族人群高原红细胞增多症(HAPC)的相关性。方法:用TaqMan探针法对80例藏族HAPC患者和85例藏族健康受试者EPAS1基因SNP rs1868092位点进行检测,分析SNP rs1868092位点与HAPC发生的相关性。结果:HAPC患者EPAS1基因rs1868092位点GG基因型的频率(11.250%vs.2.353%,P=0.005,OR=7.375,95%CI=1.508~36.066)和等位基因G的频率(33.125%vs.16.471%,P<0.001,OR=2.512,95%CI=1.490~4.234)显著高于健康受试者,差异有统计学意义;显性模式下HAPC患者的GG+AG基因型频率(P=0.002,OR=2.774,95%CI=1.466~5.249)显著高于健康受试者,差异有统计学意义。结论:EPAS1基因SNP rs1868092位点的G等位基因是西藏地区藏族人群发生HAPC的风险因子。

高原红细胞增多症并发下肢动脉硬化闭塞症综合治疗一例

目的:探讨高原红细胞增多症患者发生下肢动脉硬化闭塞症的发病机制、临床特征及诊疗预后。方法:回顾性分析1例高原红细胞增多症并发下肢动脉硬化闭塞症患者的临床资料。该患者久居高原地区,因右下肢足趾皮肤溃烂2个月在阿坝州藏医医院就诊,根据病史、体征、辅助检查被诊断为高原红细胞增多症并下肢动脉硬化闭塞症,病情复杂危重,若治疗不当有截肢的风险。予以个体化的中西医结合联合藏医药综合治疗方案。结果:治疗后患者的缺氧症状明显改善,右下肢足趾皮肤创面愈合。结论:高原红细胞增多症合并下肢动脉硬化闭塞症是由多种机制的参与导致的。中西医结合联合藏医药的个体化综合治疗方案可有效缓解患者的缺氧症状,遏制并发症,改善患者的生活质量。

不同海拔地区世居藏族人群高原红细胞增多症患病率的流行病学调查

目的了解拉萨和阿里地区人群高原红细胞增多症（high altitude polycythemia,HAPC）的患病率和相关影响因素。方法采用多阶段整群抽样方法对拉萨（海拔3 680-3 800 m）和阿里（海拔4 400-4 700 m）2个地区的2 757例世居藏族人口进行问卷调查和实验室血液学检查,采用SPSS 13.0统计软件完成统计分析。结果 2 757例中HAPC患者共72例,总患病率为2.6%。单因素分析结果显示,阿里地区HAPC患病率明显高于拉萨地区（5.2%vs 1.9%,P〈0.05）;男性患病率明显高于女性（3.4%vs 1.9%,P〈0.05）;吸烟人群的患病率明显高于非吸烟人群（4.7%vs 2.1%,P〈0.05）;不同职业者中患病率最高的是牧民（9.2%）,其次是个体户者（7.3%）,家庭月收入最低组HAPC患病率最低（2.1%）。HAPC患病率与饮酒、文化程度和各年龄段的差异均无统计学意义（P〉0.05）。经Logistic逐步回归分析发现海拔（P〈0.01）、性别（P〈0.01）和职业（P〈0.01）是高原红细胞增多症的影响因素。结论拉萨和阿里地区人群高原红细胞增多症的总患病率较低,海拔、性别和职业是影响其发生的因素。