河北省磁县食管癌高发区食管鳞状细胞癌组织HPV检测及FHIT表达的研究

背景与目的:河北省磁县是食管癌高发区,有关人乳头状瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)感染和当地食管癌发生的关系尚无研究报道。本研究旨在探讨HPV感染在当地食管癌发生中的病因学意义,同时分析与环境致癌物密切相关的脆性组氨酸三联体基因(fragilehistidinetriad,FHIT)表达与HPV感染的关系。方法:收集河北省磁县食管癌高发区128例和非高发区24例食管鳞状细胞癌石蜡包埋组织,用PCR进行HPV检测,用免疫组化方法分析FHIT在蛋白水平上的表达情况,同时分析HPV感染和FHIT异常表达的关系。结果:PCR检测结果表明,河北省食管癌高发区食管鳞状细胞癌组织中HPV检出率为20.3%,略高于非高发区(8.3%),但两者差别无显著性(P>0.05)。免疫组化结果显示,食管癌高发区食管鳞癌组织中FHIT基因异常表达率(75.6%)明显高于非高发区食管鳞癌组织(54.2%,P<0.05)。食管癌组织中HPV感染和FHIT的异常表达之间无明显相关性。结论:河北省食管癌高发区食管癌组织FHIT的异常表达率明显高于非高发区病例。

miR-223-3p与ECT2表达在食管鳞状细胞癌组织中的相关性及与其预后的关系

目的探讨miR-223-3p与ECT2表达在食管鳞状细胞癌中的相关性及与其预后的关系。方法纳入85例食管鳞状细胞癌的石蜡包埋食管鳞状细胞癌组织、相应的正常食管黏膜组织。实时荧光定量PCR检测miR-223-3p与ECT2 mRNA水平,Pearson相关系数分析miR-223-3p与ECT2 mRNA表达水平的相关性。Kaplan-Meier生存分析和Cox比例风险模型分析miR-223-3p、ECT2表达对食管鳞状细胞癌预后的影响。结果ECT2高表达食管鳞状细胞癌患者46例,ECT2低表达食管鳞状细胞癌患者39例。ECT2 mRNA表达水平食管鳞状细胞癌组织高于正常食管黏膜组织,miR-223-3p表达水平食管鳞状细胞癌组织低于正常食管黏膜组织。ECT2表达水平与肿瘤大小、分化程度、TNM分期、血管侵犯相关。miR-223-3p表达水平与肿瘤大小、分化程度、TNM分期、血管侵犯相关。此外,食管鳞状细胞癌中miR-223-3p与ECT2 mRNA表达存在相关性(ρ=-0.5223,P<0.0001),miR-223-3p与ECT2蛋白表达存在相关性(χ^(2)=21.56,P<0.0001)。Kaplan-Meier生存分析显示:TNM分期、淋巴结转移、神经侵犯、miR-223-3p表达水平、ECT2表达水平对食管鳞状细胞癌患者的总生存期有影响。Cox比例风险模型发现TNM分期、淋巴结转移、神经侵犯、miR-223-3p表达水平、ECT2表达水平对总生存期有影响。结论miR-223-3p与ECT2的表达水平在食管鳞状细胞癌中存在相关性。TNM分期、淋巴结转移、神经侵犯、miR-223-3p表达水平、ECT2表达水平可作为ESCC的独立预后因素。

干性相关分子Nanog在食管鳞状细胞癌组织中高表达并促进食管鳞癌细胞的侵袭转移:基于激活TGF-β信号通路

目的 探讨食管鳞状细胞癌(鳞癌)中干性相关分子胚胎干细胞关键因子(Nanog)和侵袭迁移相关分子基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白的表达及其之间的调控关系。方法 运用免疫组织化学技术检测127例食管鳞癌组织和82例癌旁正常组织中Nanog和MMP-2/MMP-9蛋白的表达情况,分析Nanog和MMP-2/MMP-9蛋白的表达水平、相关性及与食管鳞癌患者的临床病理参数和预后之间的关系;采用GEO数据库分析Nanog等干性相关分子主要富集通路;应用TIMER在线网站分析食管癌中TβR1和MMP-2及MMP-9的相关性。在体外运用siRNA转染的方式将食管鳞癌细胞株分为正常对照组、Nanog低表达组,采用划痕实验分析其对食管鳞癌细胞迁移的影响,qRT-PCR及Western blotting检测两组之间TβR1、p-Smad2/3、MMP-2/MMP-9的表达情况。结果 Nanog和MMP-2/MMP-9蛋白在食管鳞癌组织中表达均上调(χ^(2)=70.475,P<0.01;χ^(2)=34.415,P<0.01;χ^(2)=46.605,P<0.01),且呈正相关(r=0.205,P=0.045;r=0.307,P<0.001)。Nanog和MMP-2/MMP-9蛋白表达水平与食管鳞癌的浸润深度相关(χ^(2)=23.9,P<0.01;χ^(2)=6.029,P<0.05;χ^(2)=11.89,P<0.05),有淋巴结转移的样本中,MMP-2/MMP-9蛋白表达水平高于无淋巴结转移的样本(χ^(2)=10.08,P<0.01;χ^(2)=5.731,P<0.05)。MMP-2/MMP-9蛋白表达与食管鳞癌患者的年龄、性别和肿瘤分化程度无相关性(P>0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,Nanog和MMP-2/MMP-9蛋白高表达组的食管鳞癌患者生存时间短于低表达组(P<0.001;P=0.004;P=0.017);生物信息学分析显示,Nanog等干性相关分子主要富集在转化生长因子-β(TGF-β)信号通路,MMP-2/MMP-9与TβR1表达在食管癌中呈正相关关系。体外划痕实验结果显示,Nanog促进食管鳞癌细胞系的迁移;qRT-PCR及Western blotting结果显示,敲低Nanog后,TβR1、p-Smad2/3、MMP-2/MMP-9的表达水平明显降低。结论 Nanog和MMP-2/MMP-9蛋白在食管鳞癌患者组织中高表达且呈正相关,其与食管鳞癌患者的肿瘤浸润深度、淋巴结转移及预后密切相关,且Nanog通过TGF-β信号通路影响MMP-2/MMP-9蛋白的表达。

circPDE3B在食管鳞状细胞癌组织中的表达及对癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨circPDE3B在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达及对癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:收集ESCC及相应癌旁正常食管组织各30例,采用qRT-PCR法检测circPDE3B的表达。将KYSE150细胞分组,分别转染si-NC、si-circPDE3B#1、si-circPDE3B#1+inhibitor NC、si-circPDE3B#1+miR-1294 inhibitor。采用CCK-8法、克隆形成实验、划痕实验、Transwell实验检测细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力。采用双荧光素酶报告实验验证circPDE3B和miR-1294的靶向关系。结果:ESCC组织中circPDE3B的表达高于癌旁正常食管组织(P<0.05)。与si-NC组比较,si-circPDE3B#1和si-circPDE3B#1+inhibitor NC组KYSE150细胞增殖抑制,克隆形成数、迁移细胞数和侵袭细胞数减少,划痕愈合率降低(P<0.05);miR-1294 inhibitor可部分逆转以上变化(P<0.05)。双荧光素酶报告实验结果显示circPDE3B和miR-1294 mimic存在靶向关系。结论:ESCC中circPDE3B的表达上调,circPDE3B可能通过竞争性结合miR-1294影响ESCC细胞的增殖、迁移和侵袭。

CXCL5在食管鳞状细胞癌组织中的表达及与临床特征及预后的关系

目的探讨C-X-C趋化因子5(CXCL5)在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达及与临床特征及预后的关系。方法选取2020年1月至2021年12月于西南医科大学附属医院确诊的ESCC患者74例,采用免疫组化经典EnVision法检测经手术切除的ESCC组织和癌旁正常食管组织中CXCL5表达的差异,分析ESCC组织中CXCL5表达与临床病理特征的关系。结果CXCL5在ESCC组织中的表达水平(85.1%)显著高于癌旁正常食管组织(43.2%),差异有统计学意义(P<0.05)。ESCC组织中CXCL5表达水平与患者性别、年龄、肿瘤直径及神经侵犯均无关(P>0.05),而与肿瘤部位、病理分化程度、浸润深度、脉管瘤栓及淋巴结转移有关(P<0.05)。生物信息分析显示CXCL5高表达与ESCC的预后不良相关(P<0.05)。结论ESCC组织中CXCL5表达上调,CXCL5高表达与ESCC转移和预后不良相关。

肿瘤组织Ki-67、NEK2表达对食管鳞状细胞癌患者预后的影响分析

目的探讨肿瘤组织Ki-67、细胞周期相关蛋白激酶2(NEK2)表达对食管鳞状细胞癌患者预后的影响。方法选取156例食管鳞状细胞癌患者,采用免疫组化染色法检测Ki-67、NEK2表达,分析Ki-67、NEK2表达与临床病理特征的关系,以及与患者无进展生存期的关系。结果低分化组织Ki-67和NEK2阳性表达率为97.78%和93.33%,明显高于中高分化组织(P<0.05);TNM分期Ⅲ期组织Ki-67和NEK2阳性表达率分别为97.73%和73.21%,明显高于Ⅰ~Ⅱ期组织(P<0.05);有淋巴结转移组织Ki-67和NEK2阳性表达率为94.12%和86.27%,明显高于无淋巴结转移组织(P<0.05);肿瘤直径≥2 cm组织NEK2阳性表达量为76.12%,明显高于肿瘤直径<2 cm组织(P<0.05);食管鳞状细胞癌组织Ki-67与NEK2表达呈正相关(r=0.372,P<0.05);Ki-67和NEK2阳性表达、Ki-67或NEK2单一阳性表达患者无进展生存期分别为33个月(95%CI:31.29~34.71)和32个月(95%CI:30.14~33.86),明显少于Ki-67和NEK2阴性表达患者48个月(95%CI:45.60~51.75),差异比较有统计学意义(P<0.05)。结论食管鳞状细胞癌组织Ki-67、NEK2表达与临床病理特征以及患者无进展生存期有一定关系,值得进一步研究。

表皮生长因子受体在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的分析食管鳞状细胞癌组织中表皮生长因子受体(EGFR)的表达及临床意义。方法选取2022年1月至2023年3月收治食管鳞状细胞癌76例为研究对象,并且以癌旁正常组织为对照,免疫组织化学法测定EGFR,分析不同组织EGFR阳性表达情况及与患者病理特征和预后的关系。结果食管鳞状细胞癌组织EGFR阳性率72.4%(55/76)较癌旁正常组织27.6%(21/76)高(P<0.05)。不同浸润深度、TNM分期和淋巴结转移食管鳞状细胞癌组织EGFR阳性表达有差异(P<0.05,P<0.01)。EGFR高表达患者的总生存期和无病生存期均低于低表达患者(P<0.05)。结论在食管鳞状细胞癌组织中,EGFR阳性率较高,且与肿瘤浸润深度、TNM分期、淋巴结转移及预后生存等密切相关。

上皮细胞转化序列2通过调控p33生长抑制因子1表达影响食管鳞状细胞癌细胞的体外转移活性

目的探讨上皮细胞转化序列2(ECT2)与p33生长抑制因子1(p33ING1)的表达水平对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞转移活性的影响。方法采用免疫组织化学法和免疫印迹法检测食管鳞癌组织和癌旁组织中ECT2和p33ING1的表达情况。将人食管鳞癌细胞系KYSE140细胞分为4组:空白组、阴性对照组(pcDNA 3.1 NC)组、过表达组(pcDNA 3.1 ECT2)和抑制表达组(si ECT2)。采用MTT法和细胞集落形成实验研究细胞的增殖和生长能力,Transwell实验和划痕实验研究细胞的侵袭和迁移能力,并用流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期,Western blotting检测ECT2对p33ING1蛋白的影响。结果在食管鳞癌组织中ECT2表达增加,p33ING1表达降低。过表达ECT2能够显著增加KYSE140细胞的生长、集落形成、迁移以及侵袭能力,并能降低KYSE140细胞的凋亡率和p33ING1的表达;此外,抑制ECT2表达后能够逆转上述变化。结论ECT2高表达能够促进食管鳞癌KYSE140细胞的生长、转移,并抑制其凋亡,其机制可能与ECT2能够抑制p33ING1表达相关。

术前调强放疗联合新辅助治疗可切除局部晚期食管鳞状细胞癌的疗效分析

目的探讨调强放疗(IMRT)联合特瑞普利单抗和铂类方案治疗可切除局部晚期食管鳞状细胞癌(ESCC)的疗效与安全性。方法收集2019年12月—2022年11月在厦门大学附属中山医院接受新辅助治疗的局部晚期ESCC患者120例,根据治疗方法的不同将120例ESCC患者分为对照组(n=60)和观察组(n=60)。对照组接受特瑞普利单抗联合紫衫醇和卡铂治疗,观察组在此基础上应用IMRT治疗。治疗后评价是否可进行手术,比较两组的R0切除率、病理完全缓解(pCR)率、主要病理反应(MPR)率、客观缓解率(ORR)及疾病控制率(DCR)。观察两组围术期相关指标,术后随访24个月比较两组远期疗效及安全性。结果两组患者的新辅助治疗完成率均达100%,观察组的R0切除率为91.67%,pCR率为40.00%,MPR率为61.67%,ORR为86.67%,DCR为96.67%,均显著高于对照组(P<0.05)。两组在手术时间、术中出血量及术后并发症方面比较差异无统计学意义(P>0.05)。随访24个月后,两组的无进展生存率和总生存率比较差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者发生贫血、恶心、呕吐、白细胞减少等不良反应情况比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论IMRT联合特瑞普利单抗加紫杉醇加卡铂的新辅助治疗模式可提高局部晚期可切除ESCC的临床疗效,且安全性良好。

Smac多肽对食管鳞状细胞癌耐药性调节机制的研究

目的探究Smac多肽(Smac-N7)对食管癌鳞状细胞系Eca-109和紫杉醇(PTX)耐药株(Eca-109/PTX)耐药性的影响和作用机制。方法采用小剂量间歇诱导法建立Eca-109/PTX细胞株,CCK-8法检测PTX对Eca-109和Eca-109/PTX的半数抑制浓度(IC_(50))。使用PTX和Smac-N7分别或联合处理Eca-109或Eca-109/PTX细胞,并将细胞分为:Eca-109组、Eca-109+PTX组、Eca-109+Smac-N7组、Eca-109+PTX+Smac-N7组;Eca-109/PTX组、Eca-109/PTX+PTX组、Eca-109/PTX+Smac-N7组、Eca-109/PTX+PTX+Smac-N7组。采用流式细胞术、试剂盒和Western blot法分别检测各组Eca-109和Eca-109/PTX细胞的凋亡率和细胞中caspase-3活性与Bcl-2、Bax蛋白的表达水平。结果CCK-8法检测结果显示,随浓度的增加,PTX对Eca-109与Eca-109/PTX的生长抑制率均明显增加(P<0.05),且PTX对Eca-109的IC_(50)[(0.08±0.01)μg/mL]显著低于其对Eca-109/PTX的IC_(50)[(2.47±0.11μg/mL)](P<0.01)。与Eca-109组或Eca-109/PTX组相比,Eca-109+PTX组、Eca-109+PTX+Smac-N7组和Eca-109/PTX+Smac-N7组、Eca-109/PTX+PTX+Smac-N7组细胞中Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05),但细胞凋亡率、细胞中caspase-3活性和Bax蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与Eca-109+PTX组或Eca-109/PTX+PTX组相比,Eca-109+PTX+Smac-N7组和Eca-109/PTX+PTX+Smac-N7组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05),而细胞凋亡率、细胞中caspase-3活性和Bax蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论Smac-N7可在体外通过促进细胞凋亡来改善Eca-109细胞及其耐药株对PTX的敏感度。

miR-21在食管鳞状细胞癌中的作用机制研究进展

食管癌是一种发病率和死亡率均较高的消化道疾病,且早期难以发现。微RNA(miRNA/miR)-21广泛存在于人体各种细胞和组织中,并与人体的生长和发育、细胞周期及组织分化过程紧密相关,其作为miRNA家族的重要成员,也是一种内源性调控序列,在食管癌组织中的表达量异常升高,但目前miR-21的相关研究成果有限,还不足以将其单独作为靶点用于食管癌治疗。基于此,miR-21的早期准确检测、其各类调控基因的调控机制及其是否可作为新靶点治疗食管癌成为研究热点。

血清NY-ESO-1自身抗体和MMP1联合检测对食管鳞状细胞癌的诊断价值

目的:探讨血清基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP1)和纽约食管鳞状细胞癌抗原-1(New York esophageal squamous cell carcinoma 1,NY-ESO-1)自身抗体联合检测在食管鳞状细胞癌中的诊断意义。方法:应用酶联免疫吸附实验检测120例食管鳞状细胞癌患者和120例正常对照血清中MMP1和NY-ESO-1自身抗体的表达水平,采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评价诊断效能。结果:血清MMP1和NY-ESO-1自身抗体在食管鳞状细胞癌患者中的表达均明显高于正常对照[(8.070±5.738)ng/mL vs(4.331±3.137)ng/mL,Z=6.214,P<0.001;0.463±0.571 vs 0.156±0.086,Z=5.210,P<0.001]。ROC曲线显示,当血清MMP1为最佳诊断临界值10.586 ng/mL时,其在诊断食管鳞状细胞癌的曲线下面积(area under the ROC curve,AUC)为0.732(95%CI:0.671~0.787),敏感度为24.2%,特异度为95.0%。NY-ESO-1自身抗体诊断食管鳞状细胞癌AUC为0.695(95%CI:0.632~0.752),敏感度为33.0%,特异度为95.0%。MMP1和NY-ESO-1自身抗体联合检测诊断食管鳞状细胞癌的AUC为0.800(95%CI:0.744~0.849),敏感度为47.5%,特异度为95.0%。结论:血清MMP1和NY-ESO-1自身抗体联合检测可能有助于提高食管鳞状细胞癌的诊断效能。

食管鳞状细胞癌术后生存状况及预后影响因素分析

目的 通过分析食管鳞状细胞癌的临床和组织病理学特点,了解影响食管鳞状细胞癌患者术后预后的影响因素。方法 采用病例回顾的调查方法登录医院病案管理系统,调阅病案,以病案信息为依据,收集2011年1月—2015年12月期间在某三甲医院收治的721例食管癌患者。根据病例纳入标准,对306例食管鳞状细胞癌术后患者进行随访,共得到有效随访261例,分析生存状况及预后影响因素。结果 本研究261例食管鳞癌术后患者,直至随访截止日期,结局死亡144例(55.17%);生存时间0~84个月,中位生存时间33.00月,平均生存时间36.55月。食管鳞状细胞癌术后预后单因素分析结果显示:年龄、治疗方式、定期复查、淋巴结转移率、TNM分期、病理形态、血红蛋白和血清白蛋白对预后有影响(P<0.05)。多因素分析结果显示年龄、治疗方式、TNM分期和病理形态影响食管鳞状细胞癌术后预后。结论 食管鳞状细胞癌术后生存的影响因素为:年龄、治疗方式、TNM分期和病理形态。年龄越小、进行化疗、病理形态未分化、TNM分期越小的患者具有更长的生存时间。

ORAOV1与ERK在食管鳞状细胞癌中的表达及与临床特征、预后的关系

目的探讨口腔癌过表达蛋白1(oral cancer overexpressed 1,ORAOV1)与ERK在食管鳞状细胞癌中表达的临床病理意义及预后评估价值。方法采用RT-PCR检测140例食管鳞状细胞癌、39例鳞状上皮异型增生和140例癌旁正常食管黏膜中ORAOV1、ERK1、ERK2的mRNA表达,分析三者表达与食管鳞状细胞癌临床病理特征的关系。采用Spearman相关性分析ORAOV1与ERK1、ERK2的表达相关性。结果食管鳞状细胞癌中ORAOV1 mRNA的相对表达量(13.158±2.246)显著高于低级别异型增生(4.974±1.317)、高级别异型增生(7.398±1.891)和正常食管黏膜组织(1.000±0),差异有显著性(P<0.01)。ORAOV1 mRNA表达与食管鳞状细胞癌临床分期和淋巴结转移呈正相关(P均<0.05)。Spearman分析结果显示,在食管鳞状细胞癌中ORAOV1 mRNA表达水平与ERK1 mRNA、ERK2 mRNA的表达水平呈正相关。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,ORAOV1高表达的食管鳞状细胞癌患者总生存期明显低于ORAOV1低表达患者,差异有显著性(P<0.05)。结论ORAOV1的表达水平在食管鳞状细胞癌发生、发展过程中呈逐渐增高趋势,是食管鳞状细胞癌的独立预后因素,其有望成为早期诊断和早期治疗的新分子靶标。

miR-146b-5p调控CD82介导食管鳞状细胞癌恶性表型

目的探究miR-146b-5p促进食管鳞状细胞癌恶性表型的分子机制。方法选取2020年10月-2021年12月在四川省西南医科大学附属医院行食管癌根治术治疗的38名食管鳞状细胞癌患者的癌组织和癌旁正常组织(NAT)样本,核酸原位杂交法检测miR-146b-5p在食管鳞癌及癌旁正常组织中的表达水平;通过siRNA敲低miR-146b-5p的表达水平,细胞增殖实验、划痕实验检测敲低miR-146b-5p后细胞行为学表型变化;生物信息学分析预测miR-146b-5p的下游靶基因为CD82;免疫印迹法(Western-blot)检测靶基因CD82的表达水平,双荧光素酶报告基因实验确定miR-146b-5p与CD82之间的调控关系。结果核酸原位杂交法检测结果显示,与NAT组织病理评分比较,miR-146b-5p在ESCC组织中的病理评分较高(P<0.05);EdU细胞增殖实验结果显示,与NC组比较,KD组EdU阳性细胞比例显著降低(P<0.05)。细胞划痕实验结果显示,与NC组比较,KD组划痕愈合比例显著下降(P<0.05)。ENCORI数据库预测CD82是miR-146b-5p的下游靶基因;Western-blot实验结果显示,相比NC组,KD组CD82在蛋白水平显著性上调;双荧光素酶报告基因实验结果显示,wt+mimic组荧光强度较mut+mimic组显著性下降(P<0.05)。结论miR-146b-5p通过靶向调控CD82促进食管鳞状细胞癌细胞的迁移,为食管鳞状细胞癌的治疗提供新的靶点。

补体C1s对食管鳞状细胞癌生物学行为的影响

目的:探究补体分子C1s对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖、迁移、黏附以及裸鼠移植瘤生长的影响。方法:利用NCBI-GEO数据库分析ESCC组织和癌旁正常组织(ANTs)中C1S mRNA的表达;采用RT-qPCR和Western blot检测ESCC细胞系中C1s的表达;利用C1s小干扰RNA(siRNA)、C1s短发夹RNA(shRNA)或C1s过表达慢病毒对ESCC细胞进行C1s的敲低或过表达,CCK-8法检测细胞增殖,细胞划痕实验检测细胞迁移,细胞-基质黏附实验检测细胞黏附能力;Western blot检测基质金属蛋白酶MMP1和MMP13表达;裸鼠皮下成瘤实验检测C1s对裸鼠移植瘤生长的影响,免疫组织化学法检测移植瘤中CD34表达,分析肿瘤微血管的形成。结果:ESCC组织中C1S mRNA表达明显高于ANTs,敲低C1s可明显抑制ESCC细胞的增殖、迁移、细胞-基质黏附以及裸鼠移植瘤的生长,而过表达C1S则具有相反的效果;C1s敲低的ESCC细胞TE-1中MMP1和MMP13的表达降低;与对照组相比,C1s过表达组移植瘤中的微血管更加丰富。结论:C1s在ESCC组织中显著上调,并促进ESCC细胞的增殖、迁移、细胞-基质黏附以及裸鼠移植瘤的生长。C1s可能在ESCC发生发展中发挥重要作用。

谷丙转氨酶2在食管鳞癌组织中表达变化及对癌细胞增殖迁移侵袭能力影响

目的 观察谷丙转氨酶2(GPT2)在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达变化,分析GPT2与患者临床病理特征、预后的关系以及对ESCC细胞增殖、迁移和侵袭的影响,以探讨其与ESCC进展的关系。方法 选取80例ESCC患者癌组织及癌旁正常组织,将其中3例份样本通过转录组测序筛选出差异表达基因GPT2,并在TCGA数据库中进行验证。采用Western blotting及免疫组化法检测ESCC组织中GPT2蛋白,分析癌组织中GPT2表达与患者临床病理特征的关系。采用多因素Cox比例风险分析影响ESCC患者生存的风险因素,Kaplan-Meier法对GPT2高、低表达的ESCC患者进行生存分析。构建p IRES2/GPT2(GPT2过表达)质粒,然后将空载质粒(p IRES2)及p IRES2/GPT2转染至人食管鳞癌细胞系KYSE150、KYSE30(转染的细胞分别命名为p IRES2、p IRES2/GPT2组),培养48 h后,采用CCK-8及Transwell实验观察ESCC细胞增殖、迁移和侵袭能力。结果 转录组测序结果及基于TCGA数据库数据分析结果显示,与癌旁正常组织相比,ESCC组织中GPT2表达水平降低(P均<0.05)。Western blotting及免疫组化结果显示,ESCC组织中GPT2蛋白水平下调(P均<0.05)。ESCC癌组织中GPT2表达与淋巴结转移相关(P<0.05)。淋巴结转移、高病理分期和低GPT2表达是ESCC患者的生存风险因素(P均<0.05)。GPT2低表达ESCC患者生存率较高表达患者低(P<0.05)。过表达GPT2的ESCC细胞增殖、迁移和侵袭能力均降低(P均<0.05)。结论 ESCC组织中GPT2表达下调,低表达GPT2的患者预后较差。过表达GPT2可抑制ESCC细胞增殖、迁移、侵袭。

CTAGE15与食管鳞状细胞癌(ESCC)患者预后相关并抑制ESCC细胞的恶性表型

目的:探讨皮肤T细胞淋巴瘤相关抗原15(cutaneous T cell lymphoma associated antigen 15,CTAGE15)在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中的表达与患者临床预后的关系及其对ESCC细胞增殖、迁移及侵袭等能力的影响。方法:Kaplan-Meier分析公共数据库中CTAGE15与ESCC患者预后的关系。qRT-PCR检测正常食管上皮细胞、ESCC细胞和临床120例随访信息完整的ESCC患者肿瘤组织及邻近正常组织中CTAGE15表达,COX生存风险分析方法研究ESCC患者的生存风险因素,多变量相关性分析CTAGE15表达与ESCC患者临床病理之间的关系,同时采用Kaplan-Meier分析CTAGE15对ESCC患者预后的影响。利用小干扰RNA沉默ESCC细胞中CTAGE15的表达,检测细胞增殖、迁移及侵袭能力的变化。结果:公共数据库中CTAGE15表达水平与患者总生存期(P<0.05)和疾病特异性生存期(P<0.05)显著相关,GTAGE15高表达患者生存期较好。qRT-PCR结果表明临床ESCC组织及ESCC细胞中CTAGE15表达显著高于正常食管上皮组织及正常食管上皮细胞,且CTAGE15表达水平与ESCC患者T分期与N分期显著相关(P<0.05),CTAGE15高表达患者T分期、N分期较GTAGE15低表达患者早。敲低CTAGE15后,ESCC细胞的增殖、迁移及侵袭能力显著增强(P<0.05)。结论:CTAGE15与ESCC患者预后成正相关,且能够抑制ESCC细胞的增殖、迁移及侵袭等能力。

浅表食管鳞状细胞癌浸润深度的内镜诊断进展

我国是世界上食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)发病率最高的国家。ESCC的早期诊断和治疗一直是临床研究的热点。浅表食管鳞状细胞癌(superficial esophageal squamous cell carcinoma,SESCC)属于较为早期的ESCC,临床上相当比例的SESCC可以行内镜下切除治疗。但在进行内镜治疗前,准确判断病变浸润深度,识别肿瘤边缘,评估淋巴结及远隔转移情况,进行精准分期是至关重要的,也是决定内镜治疗的可行性和选择治疗方式的关键;而ESCC浸润深度与淋巴结转移、分期及预后密切相关。其中内镜是临床上评估ESCC浸润深度的重要手段,不同类型内镜在诊断SESCC时各有优劣。本文综述SESCC浸润深度的内镜诊断进展,以期为临床研究提供参考。

SOX9活化Wnt/β-catenin信号通路对食管鳞状细胞癌细胞增殖的影响

目的探讨SOX9对食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)细胞增殖的影响和分子机制。方法采用免疫组化EnVision法检测ESCC组织和癌旁正常组织中SOX9的表达,并分析其与临床病理特征及预后的关系。对过表达SOX9的Eca109-SOX9细胞和Eca109-Vector进行全转录芯片检测。qRT-PCR技术检测TE-1和干扰SOX9表达的TE-1细胞中差异基因的表达。Western blot法检测干扰和过表达SOX9后活化/非磷酸化β-catenin蛋白表达。使用Wnt抑制剂LGK974处理不同ESCC细胞后,通过CCK-8法检测细胞增殖能力的变化。结果SOX9在ESCC组织(4.58±3.04)中的表达显著高于癌旁正常组织(1.56±2.08,P<0.001)。SOX9表达与ESCC分化程度和浸润深度有关(P<0.05)。生存分析显示,SOX9高表达患者的总生存率明显低于低表达者(P<0.05);生物信息学分析发现AXIN2、FZD7和WNT5A在Eca109-SOX9细胞中的表达明显高于对照组;使用siRNA干扰SOX9后,AXIN2、FZD7和WNT5A的mRNA表达水平及活化/非磷酸化β-catenin的蛋白表达水平均降低,过表达SOX9则活化/非磷酸化β-catenin表达增加;经不同浓度LGK974处理的TE-1和Eca109-SOX9细胞增殖能力均显著降低,而低表达SOX9的Eca109-Vector细胞增殖能力未见明显改变,且SOX9蛋白表达不受LGK974影响。结论SOX9在ESCC中高表达,并可通过活化Wnt/β-catenin信号通路促进ESCC增殖,提示SOX9有望成为ESCC的预后标志物和药物治疗靶点。