基于PARMS标记辅助选择鲜食玉米高叶酸种质

提升鲜食玉米叶酸含量是营养强化育种的重要课题之一。为高效创制高叶酸鲜食玉米新种质,本研究根据叶酸代谢关键基因ZmGFT1的目标变异位点,设计基于碱煮法DNA提取的3对PARMS标记并对应用效果进行评估。结果表明,三对引物识别基因型与测序结果一致,引物2无法识别杂合基因型,引物1识别率高、针对性强、效果最好;通过PARMS识别到的GGG基因型材料平均叶酸含量显著高于GAA、CAA两种基因型。该方法为未来鲜食玉米营养强化育种及高通量分子标记辅助选择育种提供实用手段。

亚甲基四氢叶酸还原酶基因及甲硫氨酸合成酶基因多态性与口服叶酸治疗高同型半胱氨酸血症疗效的关系研究

目的分析亚甲基四氢叶酸还原酶基因(MTHFR)和甲硫氨酸合成酶基因(MTR)多态性与口服叶酸治疗高同型半胱氨酸血症(HHcy)疗效的关系及基因与环境在治疗效果中的交互作用。方法选取2014年6—9月于郑州大学第五附属医院神经内科检查血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平的住院HHcy患者515例为研究对象。常规治疗基础上给予口服叶酸(5 mg/d)治疗90 d。治疗中期(叶酸补充45 d)行第1次电话随访,治疗结束(叶酸补充90 d)行第2次电话随访,督促患者遵循医嘱服药,并在治疗结束后到医院复查血浆Hcy水平。按照复查血浆Hcy水平将患者分为失败组(Hcy≥15.0μmol/L)和成功组(Hcy<15.0μmol/L)。收集患者的基线资料,选取MTHFR上2个单核苷酸多态性(SNP)位点和MTR上1个SNP位点,分别为:rs1801133、rs1801131和rs1805087;采用Sequenom公司的时间飞行质谱生物芯片系统(Mass Array系统)检测基因分型和等位基因,采用多因素降维法(MDR)分析基因-环境交互作用。结果随访结束后,剔除服药依从性差或者失访患者131例,剔除两次服药依从性均一般的患者125例,剩余259例。其中失败组115例,成功组144例。失败组患者糖尿病病史发生率、高血压病史发生率、冠心病病史发生率、基线血浆Hcy水平均高于成功组(P<0.05)。成功组3个SNP位点的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡(rs1801133:χ2=0.11,P=0.170;rs1801131:χ2=0.00,P=1.000;rs1805087:χ2=0.01,P=0.860)。单因素非条件Logistic回归分析结果显示,rs1801133位点的TT基因型、T等位基因,rs1801131位点的AC基因型、AC+CC基因型、C等位基因与叶酸治疗HHcy疗效有回归关系(P<0.05)。MDR软件结果显示,最优模型为高血压病史、冠心病病史和rs1801133的三因素交互模型(P<0.05)。结论 MTHFR rs1801133位点的TT基因型和等位基因T可增加叶酸治疗HHcy失败的风险;rs1801131位点的AC基因型、AC+CC基因型和等位基因C可降低叶酸治疗HHcy失败的风险。MTR rs1805087位点基因型及等位基因与叶酸治疗HHcy疗效无回归关系。高血压病史、冠心病病史、rs1801133位点对叶酸治疗HHcy的疗效具有交互作用。

每月二次高剂量CF/5-FU/OXA方案治疗晚期难治性胃肠道癌

目的 观察每月二次高剂量CF/ 5 FU/草酸铂 (OXA)方案治疗晚期难治性胃肠道癌的临床疗效。方法 采用高剂量CF/ 5 FU/OXA深静脉输注方案 ,化疗方案以 14天为 1周期 ,重复 4周期后间隔 1个月评定疗效。结果 全组 32例 ,总有效率为 5 6 2 5 %。 2 0例晚期胃癌中 ,CR2例 ,PR11例 ,NC4例 ,PD3例 ,有效率为 6 5 0 0 %。其中肝脏转移灶的缓解率达 78 5 7% (11/ 14)。 12例晚期大肠癌中 ,CR0例 ,PR5例 ,NC2例 ,PD5例 ,有效率为 41 6 7%。胃癌和大肠癌的中位缓解期分别为 5个月、8 5个月。Ⅱ、Ⅲ度口腔炎发生率为 2 5 0 0 % ,2例出现手足综合征 ,血液学毒性轻微。结论 每月二次高剂量CF/ 5

三七多糖对2型糖尿病大鼠高同型半胱氨酸信号通路的影响

目的:探讨三七多糖对2型糖尿病大鼠肝脏高同型半胱氨酸代谢信号通路3个关键分子亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)、胱硫醚β-合酶(CBS)、5-甲基四氢叶酸高半胱氨酸甲基转移酶(MTR)表达的影响。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组以及三七多糖治疗组,每组20只,模型组以及三七多糖治疗组给予高脂高糖饮食6个月建立2型糖尿病模型,模型建立成功后三七多糖治疗组给予三七多糖57 mg/(kg·d)灌胃治疗,模型组给予同体积生理盐水灌胃,分别在治疗4周和8周后处死大鼠各半,收集血清和肝脏进行相关指标的检测。结果:治疗4周后大鼠血糖以及胰岛素抵抗指数三七多糖治疗组较模型组降低(P<0.05),8周后进一步降低,胰岛素水平治疗4周后三七多糖治疗组较模型组降低(P<0.05),8周后较4周无进一步改善;三七多糖治疗后,大鼠叶酸较模型组有一定升高,但差异无统计学意义(P>0.05),维生素B12在治疗4周后较模型组明显升高(P<0.05),治疗8周后进一步升高;同型半胱氨酸在治疗4周后明显降低(P<0.05),但在8周后无进一步改善;治疗4周后,与模型对照组比较,三七多糖治疗组MTHFR、MTR以及CBSm RNA及蛋白表达升高(P<0.05),治疗8周后进一步升高,但未达到空白组水平。结论:三七多糖可显著降低模型大鼠血清中同型半胱氨酸含量,其可能是通过调控高同型半胱氨酸信号通路相关蛋白MTHFR、CBS、MTR的表达来实现。

亚甲基四氢叶酸还原酶及甲硫氨酸合成酶基因多态性与男性不育

易感基因、环境及营养等因素在疾病发生过程中起到了重要作用。亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)、甲硫氨酸合成酶(MS)是叶酸和同型半胱氨酸(Hcy)代谢中的重要酶,其活性缺陷可能引起体内高同型半胱氨酸血症和DNA甲基化异常而导致多种疾病。目前对MTHFR基因单核苷酸多态性C677T与男性不育的相关性报道结论不一,而对另两种单核苷酸多态性(MTHFR A1298C、MS A2756G)与男性不育的相关性报道鲜见。就MTHFR及MS基因多态性与男性不育的研究进展作一综述。

卒中后认知障碍与亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性关系研究

目的:探索卒中后认知障碍(PSCI)与亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性的关系。方法:选取急性卒中患者200例,其中6个月内发生认知障碍的患者100例作为痴呆组,6个月内未发生认知障碍的患者100例作为未痴呆组,另选取同期体检结果呈健康的健康体检者200例为正常对照组。采集所有研究对象外周血检测MTHFR及5-甲基四氢叶酸高半胱氨酸甲基转移酶还原酶(MTRR)基因型多态性,全自动化学发光免疫分析仪检测血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平。结果:痴呆组患者血浆Hcy水平明显高于未痴呆组(P<0.05);未痴呆组患者血浆Hcy水平明显高于对照组(P<0.05);痴呆组A1298C位点基因型AA、AC和CC、C677T位点基因型TT、CT和CC和A66G位点基因型AA、AG和GG的分布频数与未痴呆组和对照组比较具有统计学差异(均P<0.05);既往卒中史(OR=1.721,P=0.040)、卒中部位(OR=1.828,P=0.047)和血浆Hcy水平(OR=1.839,P=0.042)为卒中后发生PSCI的独立影响因素。结论:MTHFR及MTRR基因多态性与卒中后认知障碍的易感性和临床特症存在相关性,可作为筛选标志物。

高剂量甲酰四氢叶酸解救甲氨蝶呤化疗延迟排泄2例分析

目的：探讨分析骨肉瘤患者使用高剂量甲氨蝶呤（MTX）发生严重延迟排泄的解救措施。方法：通过控制在MTX化疗结束后24～72h有效的解救时机。采取有效剂量的甲酰四氢叶酸钙及给药时机、采取有效的血液净化措施和及时的支持治疗可以很大程度地增加解救成功的机会。结果：成功救治2例骨肉瘤高剂量MTX化疗延迟排泄的患者。结论：应制订高剂量MTX延迟排泄解救的临床路径，加强治疗的规范化。

卵巢肿瘤组织MTRR蛋白表达检测及其临床意义

目的探讨卵巢恶性肿瘤组织中亚甲基四氢叶酸—高半胱氨酸甲基转移还原酶(MTRR)的表达及其临床意义。方法采用Western blot检测80例卵巢恶性肿瘤组织、50例卵巢良性肿瘤组织及40例正常卵巢组织中的MTRR表达情况,分析其与卵巢恶性肿瘤临床病理及多药耐药的相关性。结果 (1)MTRR在卵巢正常组织、卵巢良性肿瘤和卵巢恶性肿瘤中的表达量依次增高(P<0.05)。(2)MTRR在卵巢恶性肿瘤临床分期中Ⅰ～Ⅱ期的表达量低于Ⅲ～Ⅳ期,在组织分级高分化中的表达量低于中低分化(P<0.05)。(3)MTRR在铂类药物耐药型卵巢恶性肿瘤中的表达量高于铂类药物敏感型(P<0.05);在治疗后肿瘤进展者中的表达量高于缓解者(P<0.01)。(4)MTRR在黏液性肿瘤中的表达量低于浆液性肿瘤(P<0.05),在远处器官转移的恶性卵巢肿瘤中高于未有转移者(P<0.01),与患者是否有大网膜转移和腹水量多少无明显相关(P>0.05)。(5)MTRR表达量判断卵巢肿瘤性质的ROC曲线Youden指数最大值为0.681,卵巢恶性肿瘤MTRR表达量的高低与中位生存时间长短差别无明显相关(P>0.05),Cox模型多因素分析显示MTRR表达量不是影响患者生存预后的独立因素。结论 MTRR蛋白过表达与卵巢恶性肿瘤的发生发展相关,MTRR蛋白过表达可作为判断肿瘤性质和铂类多药耐药潜在标志物之一。

甲硫氨酸合成酶基因A2756G多态性与2型糖尿病合并脑梗死的相关性

目的研究甲硫氨酸合成酶(MS)基因A2756G多态性与2型糖尿病合并脑梗死的相关性。方法采用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法鉴定安徽地区562例汉族人MS基因A2756G多态性基因型,比较对照组、2型糖尿病组、2型糖尿病合并脑梗死组各组间不同基因型及等位基因频率。结果安徽地区汉族人群存在MS基因A2756G多态性,其G等位基因频率与西方人群比较明显降低,2型糖尿病合并脑梗死组的MS不同基因型及等位基因频率与对照组比较,差异无显著性(P>0.05)。结论MS基因A2756G多态性与安徽地区汉族人群2型糖尿病合并脑梗死的遗传易感性无关。

MTR基因Rs1805087多态性与非综合征性唇腭裂的相关性研究

目的研究5-甲基四氢叶酸-高半胱氨酸甲基转移酶(5-methyltetrahydrofolate-homocysteine methyltransferase,MTR)SNPs位点Rs1805087多态性与非综合征性唇腭裂的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法,检测174例非综合征性唇腭裂患者和169例正常对照组的MTR基因Rs1805087的多态性。结果 MTR基因Rs1805087位点基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡;MTR基因Rs1805087位点基因型及等位基因的分布在NSCL/P组与对照组之间均无统计学意义(P>0.05)。结论结果未显示MTR基因Rs1805087多态性与非综合征性唇腭裂的发生有关。

亚甲基四氢叶酸还原酶基因677C〉T和5-甲基四氢叶酸高半胱氨酸甲基转移酶基因2756A〉G多态性与地方性砷中毒易感性的关系

目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因SNP位点rs1801133（677C〉T）、5-甲基四氢叶酸高半胱氨酸甲基转移酶（MTR）基因SNP位点rs1805087（2756A〉G）多态性与地方性砷中毒易感性的关系。方法采用病例．对照研究方法，以内蒙古自治区地方性砷中毒病区140名出现砷性皮肤病变患者作为病例组，以同地区157名体检健康居民作为对照组，采集静脉血，乙二胺四乙酸二钠（EDTA）抗凝，采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法（PCR-PFLP法），检测分析MTHFR677C〉T位点和MTR2756A〉G位点多态性。单因素Logistic回归分析年龄、性别、居住年限以及MTHFR677C〉T、MTR2756A〉G基因型对地方病砷中毒患病的影响。结果MTHFR677C〉T位点等位基因C出现频率在病例组和对照组分别为56.43％、52．55％，等位基因T出现频率分别为43．57％、47．45％，等位基因C、T出现频率两组比较差异无统计学意义（χ^2=0．90，P〉0．05）；MTR2756A〉G位点等位基因A出现频率在病例组和对照组分别为93．93％、95．54％，等位基因G出现频率分别为6．07％、4．46％，等位基因A、G出现频率两组比较差异无统计学意义（χ^2=0．84，P〉0．05）。MTHFR677C〉T位点CC基因型出现频率在病例组和对照组分别为22．86％、18．47％,CT基因型分别为67．14％、67．52％，TT基因型分别为10．00％、14．01％；将杂合型CT、突变型TT、杂合型CT和突变型TT合并与野生型CC比较差异无统计学意义（χ^2=0．56、0．81、0．87，P均〉0．05）。MTR2756A〉G位点AA基因型出现频率在病例组和对照组分别为87．86％、91．72％，AG基因型分别为12．14％、7．64％，GG基因型分别为0．00％、0．64％；将杂合型AG、突变型GG、杂合型AG和突变型GG合并与野生型AA比较差异无统计学意义（χ^2=1．65、1．35、1．22，P均〉0．05）。单因素Logistic回归分析显示，≥60岁组患地方性砷中毒的危险性是440岁组的2．78倍，居住年限≥40年患地方性砷中毒的危险性是居住年限〈40年的1．85倍。二者比较差异均有统计学意义[比值比（OR）=2．78，1．85，P〈0．01或〈0．05]；男性和女性患病率比较，差异无统计学意义（OR=1．56，P〉0．05）。MTHFR677C〉T杂合型CT、突变型TT分别与野生型CC患病率比较，差异无统计学意义（OR=1．53、1．63，P均〉0．05）；MTR2756A〉G杂合型AG、突变型GG分别与野生型AA患病率比较，差异无统计学意义（OR=1．04、1．20，P均〉0．05）。结论研究人群样本中MTHFR677C〉T位点和MTR2756A〉G位点多态性与地方性砷中毒的易感性不存在相关关系。

高半胱氨酸与眼缺血综合征相关性的研究进展

高半胱氨酸（Hcy）是一种含巯基的氨基酸,主要来源于饮食中摄取的蛋氨酸（甲硫氨酸）,是蛋氨酸与半胱氨酸代谢过程中的重要中间产物.Hcy可引起内皮细胞机能障碍与损伤,并加速凝血酶的形成,促进血管平滑肌增生,从而造成血管损伤并导致静脉血栓形成等改变.Hcy作为慢性缺血性脑卒中及心血管疾病的预测因子,其水平的增高与颈动脉阻力增高、颈动脉狭窄或闭塞、大血管粥样硬化相关,与眼缺血综合征（OIS）的发生发展存在相关性,可协助诊断颈动脉狭窄情况下的OIS.OIS患者血浆Hcy水平、高Hcy血症发病率均高于视网膜静脉阻塞、颈内动脉狭窄患者.降低患者的血浆Hcy浓度能否防治OIS及其心脑血管疾病等并发症的问题还需进一步证实.

孕妇叶酸代谢相关基因与胎儿先天缺陷的相关性研究

目的分析叶酸代谢相关基因的多态性与胎儿先天缺陷的相互关系，探讨遗传性因素对胎儿先天缺陷的影响。方法 回顾性分析132例不良妊娠孕妇（病例组）及同期就诊的150例正常妊娠孕妇（对照组）5，10-亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因的C677T、A1298C位点和甲硫氨酸合成酶还原酶（MTRR）基因A66G位点的基因型和基因频率，及其血清叶酸、维生素B12（Vit B12）和同型半胱胺氨酸（HCY）水平之间的差异。结果 病例组的血清叶酸与Vit B12呈正相关，与HCY呈负相关，仅有胎儿骨骼系统缺陷孕妇（6例）的HCY高于对照组（t＝3.409，P〈0.05）。病例组MTHFR基因C677T、A1298C位点和MTRR基因A66G位点的基因型频率与对照组比较，差异无统计学意义（P〉0.05）；以上三个基因位点的C/T、A/C、A/G基因频率与对照组比较，差异均无统计学意义（P〉0.05）。病例组和对照组MTHFR基因A1298C位点与C667T位点的不同基因型组合差异无统计学意义（P〉0.05），未见有协同作用。结论 孕妇的叶酸代谢相关MTHFR和MTRR基因的多态性对母体相应的代谢产物水平变化有一定影响，但其与胎儿先天缺陷发生的遗传学机制的相关性有待更多的大样本研究结果深入探讨。