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发酵α—2α干扰素的高密度表达
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作者 石艳丽 刘景君 《山东医药工业》 2000年第1期2-2,共1页
干扰素是一种糖蛋白,按其抗原性不同分α、β、γ三种类型,干扰素不仅有广谱抑制病毒和抑制某些细胞分裂的作用,还有免疫调节的效应,动物实验证明,干扰素能抑制多种致癌性DNA病毒和RNA病毒,从而抑制病毒诱发的肿瘤生长。干扰素制剂可用... 干扰素是一种糖蛋白,按其抗原性不同分α、β、γ三种类型,干扰素不仅有广谱抑制病毒和抑制某些细胞分裂的作用,还有免疫调节的效应,动物实验证明,干扰素能抑制多种致癌性DNA病毒和RNA病毒,从而抑制病毒诱发的肿瘤生长。干扰素制剂可用于治疗某些病毒性感染以及用于治疗多种肿瘤。 展开更多
关键词 a-2a干扰素 发酵 高密度表达
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糖基化终产物促进U937巨噬细胞高密度脂蛋白受体的表达 被引量:3
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作者 彭扬 张锦 +4 位作者 李莉 孟馨 王涤非 周一军 侯率 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2005年第2期151-154,共4页
目的 研究糖基化终产物对U937巨噬细胞高密度脂蛋白受体表达的影响。方法 将糖基化终产物与诱导分化4 8h后的U937细胞共同孵育,用免疫细胞化学法和半定量逆转录聚合酶链反应检测细胞清道夫受体BI蛋白及mRNA的表达。结果 免疫细胞化... 目的 研究糖基化终产物对U937巨噬细胞高密度脂蛋白受体表达的影响。方法 将糖基化终产物与诱导分化4 8h后的U937细胞共同孵育,用免疫细胞化学法和半定量逆转录聚合酶链反应检测细胞清道夫受体BI蛋白及mRNA的表达。结果 免疫细胞化学法检测10 0、2 0 0和4 0 0mg/L糖基化终产物刺激后U937巨噬细胞清道夫受体BI蛋白表达的平均积分光密度值分别为18.94±3.5 6、2 7.86±4 .39及35 .0 8±2 .37,较牛血清白蛋白组明显升高(13.76±3.74 ,P <0 .0 5 ) ;4 0 0mg/L糖基化终产物作用6、12、2 4及4 8h后,细胞清道夫受体BI表达的平均积分光密度值分别为16 .87±5 .6 5、2 5 .6 8±6 .97、35 .0 8±8.37及39.6 8±9.37,较0h组明显升高(12 .0 2±3.4 7,P <0 .0 5 )。半定量逆转录聚合酶链反应结果显示,4 0 0mg/L牛血清白蛋白及10 0、2 0 0和4 0 0mg/L糖基化终产物刺激后细胞清道夫受体BImRNA相对表达量分别是0 .32±0 .0 3、0 .5 3±0 .0 5、0 .6 4±0 .0 4和0 .89±0 .0 5 ;4 0 0mg/L糖基化终产物作用0、6、12、2 4及4 8h后,U937巨噬细胞清道夫受体BImRNA相对表达量分别为0 .4 1±0 .0 1、0 .6 2±0 .0 5、0 .80±0 .0 8、0 .87±0 .0 5、1.2 4±0 .13。 展开更多
关键词 病理学与病理生理学 糖基化终产物促进高密度脂蛋白受体表达 半定量逆转录聚合酶链反应 糖基化终产物 高密度脂蛋白受体 巨噬细胞 动脉粥样硬化
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基于组合优化策略在毕赤酵母中高效表达杜邦嗜热菌脂肪酶 被引量:1
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作者 汪步青 陈洲 +4 位作者 王亚森 许向阳 高晓冬 藤田盛久 李子杰 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期125-131,共7页
杜邦嗜热菌脂肪酶(LIP1)是一种在洗涤行业、生物柴油制备、油脂改性等领域具有良好应用潜力的碱性脂肪酶,然而其天然产量极低,难以满足产业化需求。采用组合优化策略筛选出高效表达LIP1的毕赤酵母重组菌株。首先,构建毕赤酵母密码子偏... 杜邦嗜热菌脂肪酶(LIP1)是一种在洗涤行业、生物柴油制备、油脂改性等领域具有良好应用潜力的碱性脂肪酶,然而其天然产量极低,难以满足产业化需求。采用组合优化策略筛选出高效表达LIP1的毕赤酵母重组菌株。首先,构建毕赤酵母密码子偏好性优化的LIP1基因,通过高浓度G418抗性平板和BMMY-罗丹明B定性平板筛选出脂肪酶活性较高的重组菌株;其次,利用信号肽优化和分子伴侣共表达优化筛选得到一株高效表达的重组毕赤酵母菌株GS115/pPIC9K-Mss-SSA4-LIP1,采用碱滴定法测定其酶活,采用比色法测定其底物特异性。结果表明,经组合优化策略筛选出的菌株在摇瓶和5 L发酵罐中发酵最高分泌酶活分别达到1 136 U/mL和12 150 U/mL。底物特异性结果显示重组脂肪酶LIP1最适底物为C8链长的对硝基苯酚酯。综上所述,基于组合优化策略实现了LIP1在毕赤酵母中的高效表达,为未来LIP1的产业化奠定基础。 展开更多
关键词 杜邦嗜热菌脂肪酶(LIP1) 组合优化策略 毕赤酵母 高密度表达 底物特异性
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共表达透明颤菌血红蛋白对毕赤酵母产β-甘露聚糖酶发酵过程的影响 被引量:3
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作者 张晓龙 肖静 +3 位作者 王瑞明 汪俊卿 王兴吉 王正祥 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期193-199,共7页
为了改善高密度发酵生产β-甘露聚糖酶过程中的溶氧限制,提高β-甘露聚糖酶产量,将VHb和β-甘露聚糖酶基因置于AOX1启动子调控之下,进行VHb和β-甘露聚糖酶基因在毕赤酵母中的共表达。经密码子优化合成VHb基因,插入表达载体p PICZαA,... 为了改善高密度发酵生产β-甘露聚糖酶过程中的溶氧限制,提高β-甘露聚糖酶产量,将VHb和β-甘露聚糖酶基因置于AOX1启动子调控之下,进行VHb和β-甘露聚糖酶基因在毕赤酵母中的共表达。经密码子优化合成VHb基因,插入表达载体p PICZαA,整合到β-甘露聚糖酶工程菌中,通过G418和Zeocin抗性筛选共表达VHb基因的重组酵母工程菌。在30 L发酵罐水平上分析共表达VHb菌株(VHb+)与初始菌株(VHb-)对β-甘露聚糖酶表达的差异。结果显示,限氧条件下,VHb+菌株的β-甘露聚糖酶的表达量比对照菌株VH b-高90%,且透明颤菌血红蛋白提高了甲醇耐受性,缩短发酵周期约40 h。 展开更多
关键词 透明颤菌血红蛋白 Β-甘露聚糖酶 毕赤酵母 高密度发酵表达
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重组人血清白蛋白在汉逊酵母中的高密度发酵表达 被引量:1
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作者 杨喆 刘红岩 +3 位作者 马波 郭仁 代云波 谢飞 《云南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第S3期446-450,共5页
考察了不同甲醇流加策略对重组汉逊酵母(Hansenula polymorpha)高密度发酵表达重组人血清白蛋白的影响.溶氧控制法不能有效地防止甲醇的过量流加,气相色谱离线检测法虽然控制了甲醇流加过量,但甲醇浓度的波动较大,利用甲醇传感器在线检... 考察了不同甲醇流加策略对重组汉逊酵母(Hansenula polymorpha)高密度发酵表达重组人血清白蛋白的影响.溶氧控制法不能有效地防止甲醇的过量流加,气相色谱离线检测法虽然控制了甲醇流加过量,但甲醇浓度的波动较大,利用甲醇传感器在线检测控制甲醇的流加可维持较恒定的甲醇浓度.在重组汉逊酵母表达人血清白蛋白的诱导阶段,采用甘油-甲醇混合补料的培养方式,限制性速率流加甘油以增加表达期间的能量供应,以溶氧水平作为甘油代谢指针来控制甘油限制性流加既维持菌体生长,又不会因发酵液中残余甘油及有害代谢产物阻遏蛋白表达.经甲醇甘油混合流加优化后,表达阶段细胞平均比生长速率控制于0.012 h^(-1)时,细胞干重达到150g/L,重组人血清白蛋白表达量达3.5g/L. 展开更多
关键词 汉逊酵母 高密度发酵表达 人血清白蛋白
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脱氧新羟曲霉酸的分离纯化和结构鉴定
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作者 刘伟 黄明玉 +7 位作者 田德峰 杨媛 白硕可 巫晔翔 余利岩 洪斌 姜威 司书毅 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期11-13,29,共4页
目的研究曲霉菌2101发酵液中上调高密度脂蛋白受体表达的活性成分。方法利用大孔吸附树脂对发酵液中活性成分进行吸附和分步洗脱,用制备高效液相色谱进行精制,紫外、红外、高分辨质谱和核磁共振进行波谱分析。结果分离得到一个纯化合物2... 目的研究曲霉菌2101发酵液中上调高密度脂蛋白受体表达的活性成分。方法利用大孔吸附树脂对发酵液中活性成分进行吸附和分步洗脱,用制备高效液相色谱进行精制,紫外、红外、高分辨质谱和核磁共振进行波谱分析。结果分离得到一个纯化合物2101C。结论经波谱分析,2101C为一新结构的化合物脱氧新羟曲霉酸。 展开更多
关键词 高密度脂蛋白受体表达上调剂 曲霉菌2101 2101C 脱氧新羟曲霉酸
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Sleeve gastrectomy prevents lipoprotein receptor-1 expression in aortas of obese rats 被引量:1
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作者 Jie Bai Yong Wang Yuan Liu Dong-Hua Geng Jin-Gang Liu 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2011年第32期3739-3744,共6页
AIM: To investigate the effects of sleeve gastrectomy on adipose tissue infiltration and lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1 (LOX-1) expression in rat aortas. METHODS: Twenty-four rats were randomi... AIM: To investigate the effects of sleeve gastrectomy on adipose tissue infiltration and lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1 (LOX-1) expression in rat aortas. METHODS: Twenty-four rats were randomized into three groups: normal chow (control), high fat diet (HD) and high fat diet with sleeve gastrectomy (SG). After surgery, the HD and SG groups were fed a high fat diet. Animals were sacrificed and plasma high density lipoprotein (HDL) and low density lipoprotein (LDL) levels were determined. LOX-1 protein and LOX-1 mRNA expression was also measured. Aortas were stained with Nile red to visualize adipose tissue. RESULT: Body weights were higher in the HD group compared to the other groups. HDL levels in control,HD, and SG groups were 32.9 ± 6.2 mg/dL, 43.4 ± 4.0 mg/dL and 37.5 ± 4.3 mg/dL, respectively. LDL levels in control, HD, and SG groups were 31.8 ± 4.5 mg/dL, 53.3 ± 5.1 mg/dL and 40.5 ± 3.7 mg/dL, respectively. LOX-1 protein and LOX-1 mRNA expression was greater in the HD group versus the other groups. Staining for adipose tissue in aortas was greater in the HD group in comparison to the other groups. Thus, a high fat diet elevates LOX-1 protein and mRNA expression in aorta. CONCLUSION: Sleeve gastrectomy decreases plasma LDL levels, and downregulates LOX-1 protein and mRNA expression. 展开更多
关键词 Sleeve gastrectomy Morbid obesity High fat diet AORTA Lipoprotein receptor-1 expression
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共表达伴侣蛋白对毕赤酵母产β-甘露聚糖酶发酵过程的影响
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作者 张晓龙 肖静 +2 位作者 王瑞明 王兴吉 王正祥 《食品工业》 CAS 北大核心 2015年第11期189-193,共5页
通过分别共表达伴侣蛋白PDI和Bip获得β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中的高效表达。根据Gen Bank公布的毕赤酵母PDI和Bip序列设计引物,以酵母基因组为模板PCR扩增目的基因片段,插入表达载体p PICZαA,分别整合到β-甘露聚糖酶工程菌中,筛选共... 通过分别共表达伴侣蛋白PDI和Bip获得β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中的高效表达。根据Gen Bank公布的毕赤酵母PDI和Bip序列设计引物,以酵母基因组为模板PCR扩增目的基因片段,插入表达载体p PICZαA,分别整合到β-甘露聚糖酶工程菌中,筛选共表达二硫键异构酶的重组酵母(PM115)和共表达免疫球重链结合蛋白的重组酵母(BM115),在30 L发酵罐水平上分析两种共表达伴侣蛋白菌株与初始菌株(GM115)对β-甘露聚糖酶表达的差异。相同工艺下,PM115与原始菌株相比未有提高,而BM115发酵产酶能力高于原始菌株,最高酶活达到40 900 U/m L,最高总蛋白表达量13.22 g/L,最高比酶活达到3 150 U/mg,分别比初始菌株提高38%,22%和18%。毕赤酵母基因工程菌GM115通过共表达伴侣蛋白Bip,提高了β-甘露聚糖酶的产量和比活力,达到工业化生产水平。 展开更多
关键词 二硫键异构酶 免疫球重链结合蛋白 Β-甘露聚糖酶 毕赤酵母 高密度发酵表达
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Angular momentum density of a Gaussian vortex beam 被引量:1
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作者 ZHOU GuoQuan WANG XiaoGang +1 位作者 DAI ChaoQing CHU XiuXiang 《Science China(Physics,Mechanics & Astronomy)》 SCIE EI CAS 2014年第4期619-627,共9页
The Gaussian vortex beam is assumed to be linearly polarized.The analytical expression of the electric field of a linearly polarized Gaussian vortex beam propagating in free space is derived by using the vectorial Ray... The Gaussian vortex beam is assumed to be linearly polarized.The analytical expression of the electric field of a linearly polarized Gaussian vortex beam propagating in free space is derived by using the vectorial Rayleigh-Sommerfeld integral formulae.The propagating magnetic field of the linearly polarized Gaussian vortex beam is presented by taking the curl of the electric field.By employing the electromagnetic field of the linearly polarized Gaussian vortex beam beyond the paraxial approximation,the analytical expression of the angular momentum density of the linearly polarized Gaussian vortex beam is derived.The three components of the angular momentum density of a linearly polarized Gaussian vortex beam are demonstrated in the reference plane.The effects of the linearly polarized angle and the topological charge on the three components of the angular momentum density are investigated.To acquire the more longitudinal angular momentum density requires such an optimal choice that the linearly polarized angle is set to be zero and the topological charge increases.This research is useful to the optical trapping,the optical guiding,and the optical manipulation. 展开更多
关键词 Gaussian vortex beam angular momentum density linearly polarized angle topological charge
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