高密度Oligo基因芯片检测榄香烯对胶质瘤U251细胞凋亡相关基因的影响

目的应用高密度Oligo基因芯片技术检测榄香烯对胶质瘤U251细胞凋亡相关基因的影响。方法实验分2组,实验组用含有终浓度为0.062mg/ml榄香烯作用于U251细胞24h,对照组为未行任何处理的U251细胞。抽提2组U251细胞的总RNA并逆转录合成Cy5、Cy3标记的cDNA,混合后杂交含22000个人类基因的人类高密度Oligo基因芯片,经过洗片和扫描,获得荧光信号图像并用计算机分析,随机抽取4种差异表达基因用PCR验证。结果按差异显著性标准,从22000条基因中筛选出差异表达基因179条,其中11个凋亡相关基因表达上调,15个凋亡相关基因表达下调。主要包括细胞周期蛋白、细胞凋亡、细胞骨架和运动蛋白等相关基因。结论榄香烯能够影响胶质瘤细胞相关凋亡基因的改变,而基因芯片技术有效分析其基因表达谱,有助于认识胶质瘤药物治疗的机制。

槲皮素对缺血缺氧损伤星形胶质细胞基因表达的影响

目的应用高密度寡核苷酸（Oligo）基因芯片技术研究槲皮素对缺血缺氧损伤的星形胶质细胞基因表达的影响。方法体外原代培养星形胶质细胞分为缺血缺氧组和缺血缺氧＋槲皮素处理组。2组细胞厌氧培养4h后缺血缺氧＋槲皮素处理组加入含50μmol／L槲皮素的培养液，缺血缺氧组加入等量培养液，培养24h后应用基因表达谱芯片筛选2组细胞表达差异的基因并用实时荧光定量PCR检测进行验证。结果基因表达谱芯片分析显示缺血缺氧＋槲皮素处理组与缺血缺氧组比较表达差异的基因共180个，其中上调基因49个，下调基因131个：实时荧光定量PCR结果显示缺血缺氧＋槲皮素处理组细胞与缺血缺氧组比较148个基因的表达发生变化．差异均有统计学意义（P〈0．05），其中上调基因34个，下调基因114个。实时荧光定量PCR与基因表达谱芯片结果的符合率为82．2％（148／180）。结论基因表达谱芯片分析有助于从分子水平全面了解槲皮素对缺血缺氧的星形胶质细胞的作用机制，也为进一步研究槲皮素和星形胶质细胞在缺血缺氧脑损伤中的作用奠定了基础。