高尔基体糖蛋白73及过氧化物酶3与慢性乙肝相关性肝癌患者预后的关系

【目的】探讨高尔基体糖蛋白73(GP73)及过氧化物酶3(MPO3)与慢性乙肝(CHB)相关性肝癌预后的关系。【方法】以101例CHB相关性肝癌患者为观察组,90例健康志愿者为对照组。比较两组血清GP73、MPO3水平。随访2年,统计观察组患者生存情况,并据此分为死亡组(21例)和存活组(80例),比较死亡组和存活组患者的临床资料,分析影响患者预后的危险因素GP73、MPO3及两者联合检测对患者预后的预测效能。【结果】观察组GP73水平高于对照组,MPO3水平低于对照组(P<0.05)。CHB相关性肝癌患者病死率为20.79%(21/101)。死亡组患者Ⅲ~Ⅳ期占比、低分化占比、肿瘤最大直径>5 cm占比、肿瘤数目>2个占比、淋巴结转移占比、GP73均高于存活组,MPO3低于存活组(P<0.05)。Logistic回归分析显示,临床分期、GP73及MPO3均为患者预后的影响因素(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,GP73、MPO3及两者联合检测预测患者预后的曲线下面积(AUC)分别为0.803、0.717和0.913。【结论】血清GP73、MPO3与CHB相关性肝癌患者的预后存在一定的相关性,且两者联合对患者预后的预测效能较高。

高尔基体蛋白73(GP73)对慢性肝病的诊断价值

早期诊断并准确评估肝脏炎症和纤维化程度对慢性肝病的治疗干预及预后尤为重要。本文通过回顾高尔基体蛋白73(GP73)与肝癌、肝纤维化及肝脏炎症的诊断、预后方面的研究,归纳总结了目前GP73对于慢性肝病的诊断效能。分析表明除了与肝癌有关外,GP73与肝纤维化程度及预后密切相关,也可较好地反映肝脏炎症损伤。GP73与其他血清标志物联合,可提高慢性肝病的无创诊断效能。

蛋白质指纹图谱技术在肺结核、肺癌鉴别诊断中的应用研究

目的探索应用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术于肺结核、肺癌的鉴别诊断。方法肺结核、肺癌患者及正常人各65例,收集其血清标本,采用WCX2芯片技术对血清蛋白进行捕获,用蛋白芯片阅读器PBSⅡ对芯片进行扫描、分析。结果 65例活动性肺结核与65例肺癌患者血清蛋白质谱数据的比较,4个蛋白峰(5335 m/z、8048 m/z、11700 m/z、11683 m/z)倾向于肺结核,以此鉴别肺癌差异有统计学意义(P<0.01)。该诊断模型判别的总准确率为74.6%(97/130),灵敏度80.0%(52/65),特异度69.2%(45/65)。结论此方法简便、快速,标本用量少,为肺结核、肺癌患者提供了1种新的无创诊断和鉴别诊断方法。

创伤性脑损伤大鼠海马蛋白质差异表达研究

目的应用蛋白质组学方法分析研究大鼠创伤性脑损伤后海马组织差异表达蛋白质．为筛选脑损伤早期诊断的生物学标志物提供理论依据。方法采用双向凝胶电泳分离总蛋白．硝酸银染色，PDQuest7．0图像分析软件分析获得的差异蛋白质点，基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDITOF—MS）对检测到的差异蛋白质点进行鉴定，获得肽质量指纹图谱，查阅蛋白质数据库得到所需蛋白质相关信息，分析大鼠创伤性脑损伤后4h、8h、12h、24h和48h海马组织中差异表达蛋白质．每组样品电泳重复3次，每帧图谱检测到1800余个蛋白质点；选择2个背景清晰、重复性及分辨力良好、在各组表达差异明显并呈现时序性变化的蛋白质点进行质谱分析。结果经双向凝胶电泳分离共获得18帧图．每组3帧，其中对照组及损伤后12h组蛋白质图谱显示分离效果良好，蛋白质点清晰，点染色程度较深，数目较多，横纹和纵纹较少，图谱平均匹配率〉80％。采用PDQuest7．0图像分析软件对蛋白质图谱进行定量分析证实，相对分子质量为58．00×10^3的差异蛋白质为葡萄糖调节蛋白（葡萄糖调节蛋白58），在损伤后4h、8h和12h表达水平上调；相对分子质量为28．40×10^3的差异蛋白质为蛋白酶体α亚单位3型，在损伤后4h、8h、12h、24h和48h表达水平均上调。结论葡萄糖调节蛋白58和蛋白酶体α亚单位3型可能与创伤性脑损伤的发生、发展密切相关，此为探讨脑损伤的发病机制提供了重要线索。

精神分裂症与急性应激障碍及抑郁症患者血清蛋白质谱初步分析

目的研究精神分裂症、急性应激障碍、抑郁症患者血清蛋白质谱的表达情况,筛选差异表达的标志蛋白并探讨其临床价值。方法采用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)对122例精神分裂症、急性应激障碍、抑郁症患者及健康患者血清蛋白质谱图进行检测,用Biomarker Wizard3.1版本软件分析质谱数据,筛选血清差异表达的标志蛋白并评价其临床价值。结果精神分裂症患者与健康者血清有56个差异蛋白质峰,其中5个蛋白质峰作为标志蛋白具有潜在的临床价值;精神分裂症与急性应激障碍者之间差异表达的蛋白质峰有15个;精神分裂症与抑郁症患者血清有21个差异蛋白质峰。结论精神分裂症、急性应激障碍、抑郁症患者血清中具有差异表达的标志蛋白,可能对其鉴别诊断和病因学研究,以及进一步研究蛋白质组学改变及其临床应用具有重要意义。

结核病患者与健康人血清蛋白质谱的比较研究

目的 比较结核病患者与健康人血清蛋白质谱,寻找结核病相关特异血清蛋白质,以期发现新型结核病血清学诊断标志物.方法 应用弱阳离子交换蛋白质芯片(WCX)和表面增强激光解吸-电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术对包括54例菌阳肺结核(菌阳组)、45例菌阴肺结核(菌阴组)、18例肺外结核(肺外组)共117例结核病患者(结核组)及62例健康对照者(对照组)进行了血清蛋白质谱检测,并应用ClinProTools分析软件进行分析,找出差异蛋白质.结果 菌阳组-对照组、菌阴组-对照组、肺外组-对照组和结核组-对照组间分别存在19、14、26和30个差异血清蛋白质,其中分别有11、9、15和15个蛋白质在患者血清中表达上调；相对分子质量分别为1060、1944、2081和3954的4个血清蛋白质为各患者组与对照组间共同存在的差异血清蛋白质,其中相对分子质量为1060的蛋白质在患者血清中表达下调.结论 结核病患者与健康人之间血清蛋白质谱存在差异,有望通过血清蛋白质谱的比较分析,寻找到结核病相关特异血清蛋白质而发现新型结核病血清学诊断标志物.但尚需大样本量、多对照系的进一步研究予以确证.

血清蛋白质质谱与支持向量机模型在胰腺癌检测上的应用

目的:为提高胰腺癌的早期检测率筛选新的标志物,应用蛋白芯片结合表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术建立胰腺癌的血清蛋白质质谱模型。方法:用弱阳离子交换芯片(CM10)结合SELDI-TOF-MS技术检测了73例血清样本,其中31例胰腺癌,22例胰腺炎,20例健康人。用支持向量机方法建立胰腺癌和健康人以及胰腺癌和胰腺炎的辨别模型。结果:胰腺癌和健康人辨别模型用了3个蛋白质峰,辨别的敏感性和特异性均为100%,而胰腺癌和胰腺炎辨别模型用了5个蛋白质峰,辨别的特异性和敏感性分别为95.5%和93.5%。结论:SELDI-TOF-MS技术结合生物信息学方法检测胰腺癌具有较高的敏感性和特异性。

蛋白质转导域在医学中的研究与应用

细胞膜脂质双分子层的非渗透特性阻止了一些肽类、蛋白质、核酸等生物活性物质进入细胞内,而血脑屏障也使大分子蛋白类药物难以到达中枢神经系统发挥疗效.这些天然屏障的存在为一些生物学机制研究和疾病基因治疗的应用带来了困难.而近来一种被称为蛋白质转导域(protein transduction domains,PTDS)的短肽由于其能携带生物活性物质有效的穿过细胞膜甚至血脑屏障,引起了众多学者的极大的关注.

血清基质交感分子1、视黄醇结合蛋白4水平对高血压肾病患者的诊断价值研究

目的探讨基质交感分子1(matrix sympathetic molecule 1,STIM1)、视黄醇结合蛋白4(retinol binding protein 4,RBP4)在高血压肾病患者血清中的表达水平,分析其诊断价值。方法选取2020年3月至2021年3月三二〇一医院收治的高血压肾病患者88例为高血压肾病组,单纯高血压患者88例为高血压组,另外选取同期体检健康者88名为健康组。采用酶联免疫法检测血清STIM1和RBP4水平;Pearson法分析血清STIM1和RBP4水平的相关性及其与血压、肾功能指标的相关性;Logistic回归分析高血压肾病的影响因素;受试者工作特征曲线分析血清STIM1、RBP4水平对高血压肾病的诊断价值。结果高血压肾病组尿素氮[(8.26±3.37)mmol/L比(5.46±2.31)mmol/L、(5.63±2.54)mmol/L]、尿酸[(375.53±71.41)μmol/L比(342.80±59.75)μmol/L、(352.68±65.24)μmol/L]、血肌酐[(105.34±34.19)μmol/L比(68.31±20.19)μmol/L、(71.63±22.55)μmol/L]显著高于健康组和高血压组(P<0.05),估算肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,eGFR)显著低于健康组和高血压组(P<0.05);健康组、高血压组、高血压肾病组血清STIM1[(30.61±6.25)μg/L、(36.63±8.27)μg/L、(48.10±11.06)μg/L]、RBP4[(42.26±5.23)ng/mL、(51.98±8.70)ng/mL、(66.61±13.79)ng/mL]水平显著依次增高,两两比较差异有统计学意义(P<0.05);高血压肾病组血清中STIM1、RBP4的水平呈正相关;高血压肾病组血清STIM1、RBP4水平与尿素氮、尿酸、血肌酐呈正相关,与eGFR呈负相关(P均<0.05);Logistic多因素回归分析得知STIM1高表达、RBP4高表达、血肌酐、eGFR是影响高血压患者发生高血压肾病的独立危险因素(P<0.05);血清STIM1、RBP4诊断高血压患者发生高血压肾病的曲线下面积为0.798、0.744,二者联合诊断高血压肾病的曲线下面积为0.852,灵敏度为75.29%,特异度为88.21%,二者联合优于血清STIM1、RBP4各自单独诊断(Z联合vsSTIM1=2.219、Z联合vsRBP4=3.385,P均<0.05)。结论血清STIM1、RBP4水平在高血压肾病患者中呈现高表达,二者联合对于高血压肾病具有一定诊断价值。

原核生物的蛋白质翻译后修饰

蛋白质翻译后修饰是调节蛋白质生物学功能的关键步骤之一,是蛋白质动态反应和相互作用的一个重要分子基础,同时,它也是细胞信号网络调控的重要靶点.目前,蛋白质翻译后修饰已经成为国际上蛋白质研究的一个极其重要的热点.在原核生物生命活动中,蛋白质的翻译后修饰具有十分重要的作用,如参与细胞信号传导、物质的代谢、蛋白质的降解、致病微生物的致病过程等.综述了经典原核生物蛋白质翻译后修饰的种类、机制和功能,同时介绍了最近发现的原核生物的全局性乙酰化修饰以及结核分枝杆菌中类泛素化修饰.

细胞外基质对大鼠卵巢颗粒细胞分泌激素和合成蛋白质功能的影响

为了探讨细胞外基质对卵巢颗粒细胞功能的影响。从未成熟ＳＤ大鼠分离出卵巢颗粒细胞，以３×１０５细胞／孔的密度，培养在铺有不同浓度的层粘连蛋白（ＬＮ）或纤粘连蛋白（ＦＮ）的培养板上，观察细胞贴壁情况。４８小时后加入卵泡刺激素和睾酮，再培养４８小时，收集培养液，测定雌二醇和孕酮。另外在双池培养系统中，在铺有和未铺ｍａｔｒｉｇｅｌ的上池中分别加入不同浓度的颗粒细胞，利用３５硫标记蛋氨酸掺入法观察ｍａｔｒｉｇｅｌ对颗粒细胞合成蛋白的影响，并利用免疫印迹法鉴定颗粒细胞膜蛋白中ＬＮ结合蛋白的分子量。结果显示，４μｇＬＮ即可使颗粒细胞在４小时内贴壁及展开，雌二醇和孕酮的产量增加。ＦＮ却无显著影响。从ｍａｔｒｉｇｅｌ双池培养系统中取上池培养液，测定放射活性，铺有ｍａｔｒｉｇｅｌ组显著高于对照组。放射自显影图象显示ｍａｔｒｉｇｅｌ显著刺激颗粒细胞合成功能。免疫印迹结果显示颗粒细胞膜蛋白存在着ＬＮ的多结合位点。本实验证实：ＬＮ对卵巢颗粒细胞的附着、伸展。

联合检测尿核基质蛋白22和尿脱落细胞在监测膀胱癌术后复发中的临床价值

目的探究联合检测尿脱落细胞和尿核基质蛋白22(NMP22)在监测膀胱癌术后复发中的临床应用价值。方法对我院2017年10月至2022年3月收治的106例膀胱癌手术后患者行荧光膀胱镜检查,检查前分别留取尿液样本行NMP22和尿脱落细胞检测;以荧光膀胱镜检查和病理结果为金标准,评价单独检测与联合检测NMP22和尿脱落细胞在诊断膀胱癌复发中的敏感性、特异性、准确性、阳性率和癌检出率,以及在不同分期、分级肿瘤中的阳性检出率。结果单独检测NMP22和尿脱落细胞诊断膀胱癌复发的敏感性分别为60.78%和50.98%,特异性分别为78.18%和87.27%,准确性均为69.81%,而联合检测的敏感性高达92.16%、特异性为74.55%、准确性升至83.02%。联合检测NMP22和尿脱落细胞的阳性率(57.55%)、癌检出率(44.34%)均高于单独检测NMP22的阳性率(40.57%)、癌检出率(29.25%)以及单独检测尿脱落细胞的阳性率(31.13%)、癌检出率(24.53%)。在Ta期和G1级肿瘤中,联合检测的阳性率明显高于单独检测尿脱落细胞的阳性率(P<0.05);在T1期肿瘤中,联合检测的阳性率明显高于单独检测NMP22的阳性率(P<0.05);在G2级肿瘤中,联合检测的阳性率明显高于单独检测NMP22和单独检测尿脱落细胞的阳性率(P<0.05)。结论联合检测NMP22和尿脱落细胞可以明显提高诊断膀胱癌复发的敏感性、准确性、阳性率和癌检出率,提高在Ta、T1期和G1、G2级肿瘤中的检出阳性率,可在行膀胱镜复查前为膀胱癌患者提供更充分、全面及准确的评估,具有一定的临床意义。

LED光质影响微藻生长和代谢产物积累的研究进展

光质是影响微藻生理代谢的重要环境因子之一,它会影响微藻的生长发育、光合作用及代谢产物的积累等。发光二极管(light emitting diode,LED)作为一种新型冷光源,因具有能耗低、稳定性强、颜色多变、安全环保等优点而被广泛应用,且能按需求获得单色光与复合光谱,是一种非常适合于微藻培养的人工光源。已经有越来越多的研究者和企业关注LED光质在调节微藻生长和代谢产物积累方面的优势。该文对现有文献进行整理,重点综述了LED不同光质对微藻生长及代谢产物积累的影响。在LED单色光(红光、蓝光、绿光、黄光和橙光)中以红光和蓝光对不同类群微藻生物量和代谢产物积累的提升最为显著;而LED混合光,特别是红蓝光往往比单色光更能增加微藻生物量和代谢产物的积累。然而,微藻的光合作用、生长及代谢产物积累的最佳光质在不同类群和同一物种的不同藻株中通常有很大差异。未来,LED光质在微藻生产中的应用应该着重从光质影响微藻代谢产物积累的分子机制、开发新型高效LED光源、开发基于LED光质调节的高效光生物反应器、LED光质应用于微藻大规模培养等几个方面开展。

肝硬化患者血清总胆汁酸、高尔基体蛋白73及糖类抗原19-9的水平变化及其临床意义

背景与目的:既往研究表明,肝硬化患者血清总胆汁酸(TBA)、高尔基体蛋白73(GP73)及糖类抗原19-9(CA19-9)的水平均有升高,但其血清水平与肝硬化严重程度之间的相关性,及三个指标彼此之间的关系尚未见文献报道。因此,本研究就此方面进行探讨,以期对临床上肝硬化患者的病情判断及预后评估提供新的思路。方法:回顾性收集2021年1月—2022年12月在山西白求恩医院完成治疗和随访的80例肝硬化患者资料,根据肝功能Child-Pugh分级标准,其中A级20例、B级30例、C级30例;选择同期健康体检者80例为对照组。比较肝硬化组与对照组血清TBA、GP73、CA19-9及肝功能指标的差异,以及不同肝功能Child-Pugh分级肝硬化患者治疗前后以上指标的变化,并分析三个指标之间的相关性及其各自与肝硬化严重程度之间的相关性。结果:肝硬化患者血清TBA、GP73及CA19-9水平及其他常规肝生化指标均高于对照组(均P<0.05);在肝硬化患者中,三项指标水平均随着肝功能Child-Pugh分级的递增而升高(均P<0.05),且与其他常规肝生化指标相比,升高幅度更明显;肝硬化患者治疗后血清TBA、GP73、CA19-9水平均较治疗前明显降低(均P<0.05),但肝功能Child-Pugh分级无明显变化。肝硬化组患者血清TBA、GP73、CA19-9之间两两呈正相关,且与肝功能Child-Pugh分级也均呈正相关(均P<0.05)。结论:肝硬化患者血清TBA、GP73、CA19-9水平升高,且升高程度与肝功能损害程度及治疗效果密切相关。因此,它们有望用于指导临床上肝硬化患者临床诊疗和预后评估。

人高尔基体蛋白73免疫放射分析及化学发光免疫分析试剂盒制备及其对原发性肝癌及肝硬化的临床诊断价值

目的制备人高尔基体蛋白73(GP73)免疫放射分析(IRMA)和化学发光免疫分析(CLIA)试剂盒,探讨两者在原发性肝癌及肝硬化中的诊断价值。方法将一株GP73单抗连接到羧基磁微粒表面作为固相载体,另一株单抗分别用125I及吖啶酯标记作为示踪剂,研制GP73 IRMA和CLIA试剂盒,对其灵敏度、精密度和回收率等指标进行分析。应用这2种试剂盒检测临床血清样本,评价其对正常健康者(正常组:n=60)、原发性肝癌患者(原发肝癌组:n=52)、肝硬化患者(肝硬化组:n=51)的诊断价值。组间的比较采用独立样本t检验。结果IRMA和CLIA试剂盒对GP73的分析灵敏度分别为0.91、0.32 ng/ml。IRMA和CLIA试剂盒的批内变异性分别为4.26%、3.52%,批间变异性分别为6.84%、6.38%。IRMA和CLIA试剂盒的平均回收率分别为98.21%、98.69%。IRMA和CLIA试剂盒对肝硬化组的测定均值分别为80.85、82.73 ng/ml;原发性肝癌组的测定均值分别为219.34、226.31 ng/ml,而正常组的测定均值分别为11.23、11.68 ng/ml。前2组与正常组相比,差异均有统计学意义(t=-11.765~-11.539,均P<0.05)。结论本研究制备的GP73 IRMA和CLIA试剂盒各项技术指标良好,可用于原发性肝癌及肝硬化疾病的筛查以及临床辅助诊断。

雌激素介导骨桥蛋白/基质金属蛋白酶9通路调节子宫内膜异位症腺上皮细胞侵袭性的研究

目的探讨子宫内膜异位症腺上皮细胞骨桥蛋白(OPN)与基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达与子宫内膜腺上皮细胞迁移的关系。方法选取2013年8月—2014年3月于宁夏医科大学总医院因"卵巢巧克力囊肿"行剥除术或患侧附件切除术的9例患者异位子宫内膜,同期取行输卵管绝育术的10例患者的正常子宫内膜。子宫内膜组织培养,分离子宫内膜腺上皮细胞。检测子宫内膜异位症及正常子宫内膜OPN、MMP-9蛋白及mRNA表达水平。加入最适宜浓度的17β-雌二醇,培养最适宜时间,检测子宫内膜异位症腺上皮细胞OPN、MMP-9蛋白表达水平。子宫内膜异位症腺上皮细胞分别进行无意义链siRNA转染和siRNA-OPN转染,以无意义链siRNA转染作为对照,检测转染后子宫内膜异位症腺上皮细胞OPN、MMP-9蛋白表达水平。原代培养的子宫内膜腺上皮细胞达到90%融合时,配置成1×106/ml细胞悬液。侵袭小室下室分别加入500μl的17β-雌二醇(10.0 nmol/L)、siRNA-OPN及无意义链siRNA,培养后在显微镜下取16个固定位置的视野计数穿膜细胞数。结果通过原代培养技术成功分离子宫内膜腺上皮细胞,腺上皮细胞成团生长,呈铺路石样,均在细胞胞质检测到OPN及MMP-9的表达。子宫内膜异位症腺上皮细胞OPN、MMP-9蛋白相对表达量分别为(2.53±0.57)、(3.12±0.69),高于正常子宫内膜腺上皮细胞,差异有统计学意义(tOPN=-2.310,tMMP-9=-1.375,P<0.05)。子宫内膜异位症腺上皮细胞OPN、MMP-9 mRNA相对表达量分别为(2.91±0.73)和(3.33±0.54),高于正常子宫内膜腺上皮细胞,差异有统计学意义(tOPN=1.681,tMMP-9=-2.362;P<0.05)。OPN及MMP-9 mRNA均在17β-雌二醇浓度为10.0 nmol/L,培养时间为48 h时达到高峰。培养48 h后,10.0 nmol/L 17β-雌二醇干预的子宫内膜异位症腺上皮细胞OPN及MMP-9蛋白表达高于未加药干预,差异有统计学意义(P<0.05)。子宫内膜异位症腺上皮细胞经siRNA-OPN干扰后,OPN、MMP-9蛋白表达水平低于经无意义siRNA干扰,差异有统计学意义(P<0.05)。不同干预措施处理后,子宫内膜异位症腺上皮细胞穿膜细胞数比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中,17β-雌二醇干预的子宫内膜异位症腺上皮细胞穿膜细胞数高于未处理干预,siRNA-OPN干预的子宫内膜异位症腺上皮细胞穿膜细胞数多于未处理干预,差异有统计学意义(P<0.05)。结论雌激素诱导的OPN蛋白表达增加导致MMP-9的表达上调,可能与子宫内膜异位症患者子宫内膜腺上皮细胞的迁移有关。

骨桥蛋白与基质金属蛋白酶9在子宫内膜异位症患者内膜中的表达情况及孕激素对其表达的影响

目的探究子宫内膜异位症(EMs)患者内膜中骨桥蛋白(OPN)及基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达情况及二者的相关性,以及不同剂量孕激素对其表达的影响。方法选取2006—2015年在宁夏医科大学总医院住院治疗的符合纳入标准的EMs患者105例,术前1 d行诊刮术获得在位内膜(EMs在位内膜组),由卵巢囊肿剥除术或患侧附件切除术切除组织获得异位内膜(EMs异位内膜组)。另选取同期行输卵管绝育手术的患者90例作为对照,绝育手术前1 d行诊刮术获取子宫内膜(正常子宫内膜组)。采用免疫组化法检测3组内膜中OPN及MMP-9表达情况,并分析EMs在位内膜组、EMs异位内膜组OPN与MMP-9的相关性。2013年1—3月,从105例患者中随机选取9例患者的在位内膜组织进行后续试验,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测不同剂量(0、1、10、100、1 000nmol/L)孕激素干预后在位内膜腺上皮细胞中OPN、MMP-9 mRNA表达水平。结果免疫组化法染色结果显示,正常子宫内膜组在位内膜DAB染色后腺上皮细胞呈淡黄色,OPN、MMP-9均主要表达于内膜腺上皮细胞中;EMs在位内膜组DAB染色后腺上皮细胞染色加深,呈棕黄色;EMs异位内膜组腺上皮细胞染色进一步加深,呈棕黑色,OPN和MMP-9主要表达于EMs腺上皮细胞中。EMs异位内膜组OPN、MMP-9表达情况强于EMs在位内膜组、正常子宫内膜组(u值分别为7.553、-6.153、-9.754、-10.240,P<0.001);EMs在位内膜组OPN、MMP-9表达情况强于正常子宫内膜组(u值分别为7.164,8.816,P<0.001)。Spearman相关分析结果显示,EMs在位内膜组、EMs异位内膜组中OPN与MMP-9表达水平均呈正相关(rs值分别为0.657、0.745,P<0.05)。0、1、10、100、1 000 nmol/L孕激素分别干预EMs腺上皮细胞后,其OPN及MMP-9表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 OPN、MMP-9在EMs患者在位、异位内膜中表达均增强,但不同剂量孕激素对EMs患者在位内膜腺上皮细胞OPN、MMP-9表达水平影响不明显。

2009年新型甲型H1N1流感病毒基质蛋白基因进化的新探讨

目的探讨甲型H1N1流感病毒基质蛋白(M)基因的进化规律及M2蛋白的氨基酸替代情况。方法从NCBI数据库下载甲型H1N1病毒M基因179条进行预分析,最终选取50条采用MEGA4.0软件对其进行比对,采用NJ法构建进化树,同时采用MEGA4.0软件对M2蛋白氨基酸序列进行比对。结果不同地区新型甲型H1N1流感病毒M基因同源性高,达99.6%～100.0%,但与历史上流行的H1N1和H3N2流感病毒M基因差异较大,仅与1999-2002年间香港地区流行的H3N2亚型猪流感病毒同源性较近,为96.7%～97.7%。2009年流行的新型甲型H1N1流感病毒与历年来流行的H1N1人流感病毒相比,在第11、13、14、16、20、28、31、43、54、57、77、78、82、86、89、93位氨基酸位点发生了变异;与历年来流行的H1N1禽流感病毒相比,在第13、14、16、31、43、55、77、89位氨基酸位点发生了变异;与H1N1猪流感病毒相比,在第13、14、19、43、55位氨基酸位点发生了变异。2009年流行的甲型H1N1流感病毒与历年来流行的H3N2人流感病毒相比,在第11、13、16、20、28、31、43、54、57、77、78、82、86、89、93位氨基酸位点发生了变异;与历年来在欧亚大陆流行的猪流感病毒相比,所比较的19个位点均有部分毒株发生变异;而与1999-2002年间在香港流行的H3N2猪流感病毒相比,仅在第13、14、21、43位氨基酸位点发生变异。结论此次新型甲型H1N1流感病毒M基因可能由香港地区流行的H3N2猪流感病毒重组而来。M2蛋白胞外编码区氨基酸位点发生变异,提示在疫苗研制方面应注意由此带来的影响。跨膜区的突变可能是导致此次新型甲型H1N1流感病毒对金刚烷胺类特异性抗病毒药物产生耐药性的原因,第43位氨基酸位点可能为引起此次耐药的主要位点。

腺相关病毒-1介导增强型绿色荧光蛋白基因在大鼠角膜基质细胞体内外转染的研究

目的：探讨血清1型腺相关病毒（rAAV1）介导增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因体内、外转染大鼠角膜基质细胞后绿色荧光蛋白（GFP）的表达及转染率。方法：采用携带绿色荧光蛋白报告基因的血清1型腺相关病毒（rAAV1-EGFP）感染原代培养的SD大鼠角膜基质细胞，通过荧光显微镜和流式细胞仪观察和检测EGFP的表达及阳性率。建立大鼠异体角膜移植模型，用含rAAV1-EGFP转染液的培养基在37℃孵育SD大鼠角膜植片同时浸泡缝线18h，再用此缝线间断缝合，将植片移植到大鼠角膜植床，术后通过荧光体视镜观察Wistar大鼠角膜出现EGFP荧光的起始时间及分布情况。结果：按rAAV1-EGFP不同转染倍数（MOI）转染角膜基质细胞。转染后3d，在倒置荧光显微镜下观察到角膜基质细胞的细胞质有GFP阳性表达。体视荧光显微镜观察到大鼠角膜中开始有GFP阳性表达；随MOI值的增高而增强，转染再7～9d达到高峰，此时检测rAAV1-EGFP对角膜基质细胞的转染效率，MOI=10^时是16．3％，MOI=10^4时是30．3％，MOI=10^5时是43．6％，MOI=10^6时是47．5％.rAA1－ECFP在大鼠角膜中的表达也明显增强。结论：rAAV1-ECFP可以在体内外稳定、有转染大鼠角膜基质细胞，是角膜基质细胞理想的报告基因。

急性脑梗死患者血清S-100b蛋白和基质金属蛋白酶-2的含量检测及临床意义

目的观察急性脑梗死(ACI)患者血清S-100b蛋白和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)含量的变化,探讨其在ACI发病中的作用及临床意义。方法选取56例ACI病例为患者组,30例健康体检者为对照组。采用ELISA法动态监测血清S-100b蛋白和MMP-2的浓度,并用SPSS17.0统计软件进行统计学分析。结果患者组血清S-100b蛋白和MMP-2水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),S-100b蛋白浓度于发病后第3天达高峰,MMP-2浓度于发病后第7天达高峰,之后浓度逐渐降低。S-100b蛋白和MMP-2与脑梗死体积大小和损伤程度存在相关性(P<0.05)。结论 ACI患者脑血清S-100b蛋白和MMP-2浓度能敏感地反映患者梗死体积和神经功能损伤程度,是ACI临床诊断、病情监测和疗效观察的重要参数。