高成瘤性前列腺癌细胞亚克隆细胞株的制备及其生物学特性的研究

目的:建立人前列腺癌LNCap细胞高成瘤性亚克隆细胞株并探讨其生物学特性。方法:慢病毒载体PGK-luciferase-GFP转染LNCap细胞,稳转株与Matrigel混合注入SCID小鼠皮下,反复消化法原代培养皮下瘤获得亚克隆细胞株,CCK8及Transwell实验检测细胞增殖及迁移力;用亲代LNCap细胞及亚克隆细胞皮下注射SCID小鼠成瘤,观察两组瘤体生长及大小,并用生物活体发光、病理及免疫组织化学检测瘤体情况。结果:与亲代LNCap细胞相比,亚克隆细胞的生长速度增快,迁移力增强,皮下瘤成瘤率增高,荧光信号强度增加,皮下瘤组织切片HE染色镜下可见核分裂相,免疫组织化学AR染色阳性。结论:制备的人前列腺癌亚克隆细胞株其恶性生物行为增加。

高成瘤性前列腺癌细胞亚克隆细胞株在反基因治疗中的应用

【目的】选用高成瘤性前列腺癌细胞亚克隆细胞株LNCap1-luc构建人类前列腺癌裸鼠移植瘤模型,应用于反基因治疗,探讨该细胞株进行抗肿瘤研究的价值。【方法】采用皮下接种法制备24只荷LNCap1-luc前列腺癌移植瘤裸鼠模型,随机分为3组:三螺旋形成寡核苷酸(TFO)治疗组、序列对照寡核苷酸(SCO)非特异性对照组、生理盐水(NS)阴性对照组。瘤内注射给药6周,测量移植瘤质量和体积,计算抑瘤率。实时荧光定量逆转录PCR(qRT-PCR)检测肿瘤组织AR mRNA表达;免疫组化法检测AR,PSA,Ki67蛋白的表达;TUNEL法检测细胞凋亡。【结果】TF0治疗组的抑瘤率为63.16%,AR mRNA的表达水平(39.16±3.21)%,Ki67的阳性表达率(25.43±2.01)%,凋亡指数(35.76±2.35)%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。TFO组AR、PSA蛋白的表达水平低于对照组。【结论】TFO能有效抑制LNCap1-luc移植瘤的生长;LNCap1-luc细胞株为前列腺癌抗肿瘤药物的研究提供了新的细胞模型,具有良好的应用价值。