基于高效液相凝胶色谱与三维荧光光谱研究饮用水中溶解性有机物去除规律

采用高效液相凝胶色谱法及三维荧光光谱结合平行因子法,考察以太湖为原水的深度处理工艺对有机物的去除效果和规律。研究表明,深度处理工艺去除UV254的效果优于DOC,疏水性降低而亲水性增强。预臭氧和混凝沉淀可几乎完全去除大分子有机物,生物活性炭去除中分子的效果优于小分子。深度处理去除大分子的效果最佳,其次为中分子,最差为小分子。三维荧光分析表明,深度处理工艺可去除大部分的溶解性微生物产物以及腐殖酸类有机物和部分的蛋白质类。平行因子法确定太湖水DOM的3个组分,分别是色氨酸类荧光物质(C1)、腐殖质类荧光物质(C2)、氨基酸及蛋白质类荧光物质(C3)。生物活性炭对C1、C2、C3去除率分别为100%、100%、63.9%。

高效凝胶排阻色谱法测定大豆多肽相对分子质量分布及不确定度评估

采用高效凝胶排阻色谱法测定大豆多肽保健品的肽相对分子质量分布。通过优化标准物质的选择和流动相组成比例等测定条件，考察方法的日内和日间精密度。以相对分子质量标准物质制作标准曲线，对大豆多肽中100～1000分子量范围的多肽分布进行了测定，测定结果的扩展不确定度为9.2，测量结果可表示为（63．3±9．2）％。

高效液相色谱法检测食品中的苏丹红

试验目的是用高效液相色谱法检测食品中的苏丹红。试验采用凝胶柱净化-高效液相色谱法同步测定食品内苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ与Ⅳ,用乙醇提取试验样品,Bio-Beads SX3凝胶柱净化处理提取液,经洗脱处理后,Symmetry Shield RP18柱进行分离,二极管阵列检测器检测苏丹红。结果表明,苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ与Ⅳ质量浓度为0.1~10mg/L时呈现出较好的线性相关性,加标回收率均值为80.6~96.2%,相对标准偏差是2.4~5.8%。

海带褐藻糖胶的分离纯化及其抗氧化活性测定

为更好地开发海带资源,分别采用DEAE-Sepharose FF弱阴离子交换柱层析、高效液相凝胶色谱对海带褐藻糖胶粗品进行分离纯化,结果表明,2种方法均可用于褐藻糖胶的分离,均分离出3个组分,离子交换层析分离出的组分命名为D-1,D-2,D-3。高效液相凝胶色谱分离的3种组分命名为H-1,H-2,H-3,其分子量分别为193.148,74.407,44.452 kD。对D-1,D-2,D-33种组分进行抗氧化活性测定,3种组分对DPPH自由基和·OH均表现出一定的清除能力,且分子量越小,清除自由基能力越强,体外抗氧化活性越好。

Fe_3O_4-PSF磁性复合超滤膜分离麦冬多糖

以原位生成法制得Fe3O4-PSF(聚砜)磁性复合超滤膜。改变磁场强度和压力,以截留率为考察指标,确定膜截留分子质量为30000D和10000D时对应的值分别为0.1T、0.4MPa和0.8T、0.5MPa。对麦冬多糖提取液(含量为91.68%)进行连续性分离,并对分离后样品进行测定,GPC软件分析A、C、D3样品结果:A样品Mw为32610D,分子质量30000D以上的麦冬多糖的含量85.6%;C样品Mw为24069,分子质量10000～30000D的麦冬多糖的含量达87.6%;D样品Mw为8664,分子质量1000～10000D的麦冬多糖含量达88.7%。

当归多糖磁性超滤膜分级分离

基膜为80000的聚砜超滤膜经原位生成法制备得磁性超滤膜。在压力为0.2MPa条件下改变磁场强度,其截留相对分子质量可调控范围为31000～73000。利用此膜对纯度为97.5%的当归多糖进行连续分级分离,在不同磁场强度下得到3个样品(A、B和C)。高效凝胶色谱法测定样品A、B以及C的重均相对分子质量分别为86317、19989、62461,样品A中相对分子质量为70000～100000的当归多糖占70%左右;样品B中相对分子质量为10000～30000的当归多糖占95%左右;样品C中相对分子质量为50000～70000的当归多糖占80%左右。

热处理对高温煎煮和低温酶法提制绿茶多糖的影响

采用复合酶法提取和二乙基氨基乙基(DEAE)-纤维素52(DE-52)柱层析纯化制得茶多糖复合物TPC-1;采用煎煮提取、Sephadex G-200柱层析纯化获得茶多糖(TPC)复合物TPC-2。高效液相凝胶渗透色谱-蒸发光散射检测表明,TPC-1和TPC-2经98℃水浴处理5 h后,TPC-1的主要均一性组分TPC-1a裂变为TPC-1a-1和TPC-1a-2 2个组分;圆二色(CD)谱显示TPC-1在194 nm呈现1个正Cotton效应峰,热处理后在216 nm处增加1个正Cotton效应峰;TPC-2经热处理后其中2种均一性组分TPC-2a和TPC-2b未变化,CD谱显示TPC-2在203、215和272 nm处均呈现显著的的正Cotton效应峰,经热处理后前2个峰消失。98℃水浴热处理改变了低温复合酶法提制的茶多糖复合物TPC-1溶液构象和均一性组分的分布,未改变沸水煎煮提制的TPC-2的均一性组分的分布和凝胶色谱行为,但影响了其溶液构象。

胸腺肽高分子量物质检测方法的优化

目的优化现行胸腺肽质量标准中控制高分子量(Mw)物质的检测方法,解决该方法存在的对照品Mw大小与洗脱时间矛盾的问题。方法采用高效液相凝胶过滤色谱法(HPGFC),改变流动相的组成,建立高Mw物质的分析方法,并进行方法学验证。结果确定三氟乙酸-乙腈-水(0.05∶45∶55)作为流动相的HPGFC分析方法,在该洗脱条件下,对照品的洗脱顺序符合Mw变化的规律,经过方法学验证,改进后的方法更适于检测高Mw物质的含量。结论优化后的高Mw物质检测方法可用于胸腺肽制剂的质量控制,并为其他生化制剂高Mw蛋白检测提供了方法学参考。

GPC-UPLC-MS/MS测定湿润烧伤膏中罂粟壳化学成分

目的：针对中药制剂湿润烧伤膏,建立其中罂粟壳所含罂粟碱、吗啡、那可丁、可待因、蒂巴因等5种化学成分的凝胶渗透色谱-超高效液相色谱-质谱/质谱联用的检测方法。方法：色谱柱为Phenomenex Kinetex HILIC 100A（100 mm×2.1 mm,1.7μm）;柱温为40℃;流动相为10 mmol/L甲酸铵（以甲酸调节p H值至3.0）及乙腈,梯度洗脱;流速为0.2 m L/min,以优化后的质谱参数采集信号。结果：各成分检出限浓度为0.1~0.5 ng/m L;定量限浓度为0.5~1.0 ng/m L;线性范围为各成分定量限~100 ng/m L;在线性范围内相关系数均在0.99以上;平均加样回收率86.5%~99.6%。结论：本方法准确,灵敏度高,专属性好;能用于湿润烧伤膏中罂粟壳化学成分的检测。

超高压处理对毛栓菌多酚氧化酶的影响

以茶多酚为底物,测定毛栓菌多酚氧化酶(Polyphenol Oxidase,PPO)活性的最适pH值为5.0、最适底物浓度为4mg/mL,经100、300和500MPa超高压处理10min的PPO酶活分别是未处理的93%、87%和86%。圆二色谱和高效液相凝胶渗透色谱分析结果显示,100和300MPa压力处理PPO的圆二色谱位于190～210nm的正Cotton效应峰分别产生"褶皱"和"分蘖";高效液相凝胶渗透色谱中的第一时间出峰组分(即最大分子量组分)的保留时间由6.678min分别提前至1.514和2.296min。500MPa压力处理PPO的圆二色谱和高效液相凝胶渗透色谱与对照相比差异更加显著,其圆二色谱中只有一个正Cotton效应峰;其高效液相凝胶渗透色谱中主要组分的色谱峰面积减小(即280nm的响应值降低)。不同压力处理的PPO的圆二色谱与高效液相凝胶渗透色谱图的差异程度具有对应关系。

溶剂环境对乙肝表面抗原(HBsAg)结构的影响

HBsAg作为乙肝疫苗的主要成分,是一种病毒样颗粒,由蛋白质和脂类通过非共价键作用形成。HBsAg保持完整结构对其功能非常重要,而目前未见对其在溶液中结构变化的研究。考察了不同溶剂环境(温度、pH值、离子类型和盐浓度)对HBsAg结构的影响。实验发现,HBsAg在常温下比较稳定,但在温度超过60℃时稳定性明显下降;pH值小于4.0时引起不可逆聚集,但在pH5.0时的聚集部分可逆;不同离子对HBsAg的影响基本符合Hofmeister序列,不同之处是SO42-比F-更易引起HBsAg颗粒的聚集,在所考察的盐中,(NH4)2SO4对HBsAg有着较大的影响,0.4mol/L时就会引起HBsAg聚集,随着浓度增加,聚集现象更加严重,所以在HBsAg的疏水层析中要谨慎使用(NH4)2SO4。

万寿菊提取加工过程中苯并芘的污染来源分析

利用凝胶渗透色谱净化高效液相色谱法对印度和中国新疆万寿菊提取加工过程中的苯并芘进行检测。结果表明,不同来源的万寿菊和万寿菊提取物中存在不同程度的苯并芘(1.67~94.9μg/kg)污染,且各类农资材料中均不同程度含有苯并芘,从生产过程推理,原料污染应该是万寿菊提取物中苯并芘的主要来源。在生产中要控制产品中苯并芘的污染,首要的是加强原料的控制,从根本来讲,应加强对环境的治理。