高效液相色谱法测定地西泮直肠凝胶有关物质

目的 建立一种高效液相色谱法,用于测定地西泮直肠凝胶中的有关物质。方法 采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18(4.6 mm×150.0 mm,3.5μm)色谱柱,以10 mmol/L磷酸二氢钾缓冲液(用0.5 mmol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.0)-甲醇为流动相,进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为234 nm。结果 地西泮与已知杂质Ⅰ~Ⅶ的色谱峰具有良好的分离度;地西泮和已知杂质Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ分别在0.01~10.05μg/mL和0.01~9.92μg/mL、0.01~10.24μg/mL、0.01~10.18μg/mL、0.01~10.24μg/mL范围内呈现良好的线性关系(r^(2)≥0.999),且其平均回收率均在99%~101%范围内。制剂中的辅料对主成分及有关物质的测定无干扰。结论 该高效液相色谱法专属性强,重复性好,适用于地西泮直肠凝胶中有关物质的检测。

高效液相色谱法测定凝胶糖果中的β-胡萝卜素

采用色谱柱SB-C 18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为:三氯甲烷∶乙腈∶甲醇=3∶12∶85,含抗坏血酸0.4 g/L;流速:2 mL/min等度洗脱;检测波长:450 nm,建立一个β-胡萝卜素的高效液相色谱测定方法。凝胶糖果样品取完整多颗破碎混匀后,在避光且添加抗氧化剂情况下分散、提取、皂化、液液萃取、水洗、浓缩后复溶测试,在β-胡萝卜素含量0.25~10 mg/L范围内线性系数R=1.00000,呈良好的线性;各前处理影响因子经摸索后设置为最佳,此时重复性变异系数为0.32%,中间精密度相对标准偏差为1.45%,回收率为95.37%~99.93%。该方法体现出良好的准确度、精密度、耐用性,适用于凝胶糖果中β-胡萝卜素的测试。

高效凝胶过滤色谱法测定皂角米中多糖组分

采用高效凝胶过滤色谱法(HPGFC)测定皂角米中多糖组分的含量,以水凝胶色谱柱Ultrahydrogel^(TM) Linear300 mm×7.8 mmid×2为分离柱;以0.1 mol/L硝酸钠为流动相;流速:0.8 mL/min;柱温:40℃。试验表明,多糖组分1#(M_(w)=2 115 637),2#(M_(w)=12 516),3#(M_(w)=418)在质量浓度0.10~5.00 g/L之间,峰面积与质量浓度呈良好的线性关系,相关系数γ为0.999 5,0.999 2,0.999 0(n=5),方法检出限为0.056,0.053,0.050 g/L,加标回收率为96.7%~102.0%,96.0%~101.6%,94.0%~103.6%,相对标准偏差为0.63%~1.81%,0.81%~1.94%,1.01%~2.03%(n=6)。该方法操作简便,具有良好的重复性和回收率,可用于皂角米中多糖组分的检测。

高效凝胶过滤色谱法分离测定豆薯种子蛋白

用高效凝胶蛋白往分离豆薯种子蛋白租提液，结合光电二极管阵列检测器对分离的蛋白峰进行紫外光谱扫描来确认蛋白的纯度，测定了3种蛋白的分子量，采用邻苯二甲醛（OPA）柱后衍生法测定了豆薯种子蛋白的氨基酸含量。

SDS-PAGE电泳和高效凝胶过滤色谱法研究人参蛋白热稳定性

目的研究人参蛋白在不同加热温度及时间下的热稳定性。方法采用中性缓冲液抽提和硫铵分级沉淀法提取人参蛋白,在不同加热温度及时间条件下,对人参蛋白进行SDS-PAGE电泳和高效凝胶过滤色谱分析。结果人参蛋白随着加热温度的升高而发生聚集和解聚;在50℃时,人参蛋白会形成可溶性的大分子聚合物,这一聚合物的浓度随加热时间的延长而不断升高。结论人参中各种蛋白亚基的热敏感性各不相同。

高效液相凝胶过滤色谱法测定注射用乌司他丁中乌司他丁的含量

目的：建立高效液相凝胶过滤色谱法测定注射用乌司他丁中乌司他丁的含量。方法色谱柱：凝胶柱TSKgel G3000SWxl（7.8 mmx300 mm,5μm）；流动相：[0.001 mol·L-1磷酸二氢钠-0.001 mol·L-1磷酸氢二钠（39：61）]-乙腈（90：10）；流速0.7 mL·min-1；检测波长280 nm；柱温25℃；进样量20μL。结果乌司他丁的检测质量浓度线性范围为0.78125-50.00 U（r =0.9999）；低、中、高剂量样品平均回收率分别为100.32%,100.17%,100.21%, RSD 分别为0.633%,0.568%,0.414%（n=3）。结论该法简便、快速,结果准确,可用于乌司他丁的含量测定。

高效凝胶过滤色谱法测定啤酒中混浊活性蛋白质的研究及应用

建立了啤酒中混浊活性蛋白质的提取制备方法和基于高效凝胶过滤色谱的蛋白质分析方法,对混浊活性蛋白进行了系统的分子量分布特点及定量分析,并将其应用在了啤酒非生物稳定性及啤酒样品分析领域高效凝胶过滤色谱法解决了混浊活性蛋白分子量及含量难以测定的问题,对啤酒生产蛋白质分子量的控制也具有重要的指导意义结果表明混浊活性蛋白的分布区间为23.4-150.0 kDa、5.7-23.4 kDa、1.0-5.7 kDa和05-1.0kDa啤酒样品中蛋白质含量最高的分子量包括4.8 kDa,2.4 kDa,3.9 kDa和128.8 kDa方法相对标准偏差为0 3％-2.0％,不需混浊活性蛋白提取制备过程中的透析除盐处理,大大简化了操作流程方法简便快速,准确度高,重复性好最后应用该方法对啤酒稳定剂硅胶、酿造单宁和脯氨酸蛋白酶的作用效果进行了分析研究.结果显示硅胶主要去除0.5-1.0 kDa,酿造单宁去除32.0-55.0kDa,而脯氨酸蛋白酶主要去除51.6-150 0kDa部分蛋白质.

高效液相色谱法测定正骨消肿止痛凝胶中阿魏酸的含量及制剂稳定性考察

目的建立测定正骨消肿止痛凝胶中阿魏酸含量的高效液相色谱法并考察制剂的稳定性。方法色谱柱为月旭Ultimate Plus⁃C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为甲醇⁃0.1%醋酸溶液,梯度洗脱;检测波长为324 nm;流速为1.0 mL·min^(-1);柱温为35℃;进样量为20μL。制剂稳定性通过加速试验和长期试验进行考察。结果阿魏酸在0.6687~33.4357μg·mL^(-1)(r^(2)=1.0000)范围内线性关系良好,平均回收率101.42%。制剂稳定性考察结果符合质量要求。结论所建方法快速,准确,重复性好,可用于正骨消肿止痛凝胶的质量控制且该制剂稳定性良好。

高效液相色谱法测定双唑泰凝胶中抑菌剂羟苯乙酯

建立高效液相色谱法测定双唑泰凝胶中抑菌剂羟苯乙酯含量的分析方法。以Agilent Zorbax SB C8柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为分析柱,流动相为甲醇-水-三乙胺(体积比为70∶30∶0.3,含10 mmol/L的庚烷磺酸钠,用磷酸调pH至4.0),流量为1.0 mL/min,检测波长为256 nm,柱温为30℃,进样体积为20μL。羟苯乙酯的质量浓度在0.5128~51.28μg/mL范围内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数为0.9999,方法检出限为0.08μg/mL。样品测定结果的相对标准偏差为0.3%(n=6),平均加标回收率为100.9%。该方法简便可行,准确可靠,灵敏度高,重现性好,可用于双唑泰凝胶中羟苯乙酯的含量测定,以便对双唑泰凝胶质量指标进行全面评价。

高效凝胶过滤色谱法测定菊糖聚合度

菊糖属于天然大分子多糖,其生理活性与性质受聚合度的影响。以OHpak SB-802.5 HQ为色谱柱,进样量为20μL,柱温为30℃,流动相为0.3 mol/L NaNO3溶液,流速为0.3 mL/min,通过GPC软件拟合三次方程标准曲线,利用高效凝胶色谱方法检测了9个样品的分子量并计算了其聚合度。结果表明,9个样品的菊糖聚合度在10~29,同种原材料的不同批次和不同品种间聚合度均存在差异。该方法为分析样品中菊糖的结构性质及控制产品质量提供了参考依据。

凝胶过滤色谱法测定泥鳅多糖的组成及分子量

从泥鳅粘液中分离提取到中性的粗多糖 ,采用凝胶过滤色谱柱在高效液相色谱仪上进行分离和测定 ,结果表明 ,该多糖由一个高聚糖 (MAP ,19 1% )和一个寡糖 (MAO ,80 9% )组成。用标准的Pullulan(P 112 0 0 0 ,P 4 730 0 ,P 2 2 80 0 ,P 5 90 0 ,P 2 70 0 )作标准曲线 ,测得其重均分子量分别为 130 2 5 2 (约 72 3个糖基 )和 15 39(约 9个糖基 )。粗多糖经SephadexG 10 0凝胶柱 (1cm× 5 0cm)过滤 ,分离得到纯化的MAP和MAO。

鲜人参药材水提取物的高效凝胶过滤色谱指纹图谱研究

目的:针对不同产地、不同生长年限的人参,建立人参药材水提取物的高效凝胶过滤色谱指纹图谱,为人参的质量评价提供依据。方法:以中性缓冲液抽提获得人参水提物,以相对分子质量标准蛋白为标准品,以人参主要蛋白(GMP)为对照,OHpak SB-803 HQ(8 mm×300 mm)凝胶排阻液相色谱柱(排阻极限10万),流动相:10 mmol·L^(-1)Tris·HCl(含10 mmol·L^(-1)NaCl,pH 7.4),流速:1.0 mL·min^(-1),柱温:25℃,应用紫外检测器检测,检测波长为280 nm。谱图通过相似度评价系统软件进行分析。结果:人参药材水提物的高效凝胶过滤色谱有6个特征峰,人参药材的相似度在0.9～1.0之间,稳定性、重复性和精密度良好。结论:该色谱图可作为人参药材水提取物的高效凝胶过滤色谱指纹图谱,用于鲜参药材水提取物的质量评价。

高效凝胶色谱法测定甘草多糖分子量及其分子量分布

[目的]建立甘草多糖分子量及分子量分布的测定方法,为甘草多糖质量控制提供方法。[方法]利用高效凝胶色谱法测定甘草多糖的分子量及分子量分布;色谱柱为TOSOH TSK gel G4000 PWXL凝胶色谱柱,检测器为示差折光检测器,流动相为0.7%硫酸钠水溶液,柱温35℃,流速为0.8 mL/min,进样量20μL。[结果]6批样品的重均分子量在8.0×10^4-1.0×10^5之间,线性关系良好,精密度、重复性均良好。[结论]本实验方法操作简便、快速、准确,为甘草多糖规模化生产的质量控制提供了参考。

方格星虫多糖分子量的高效凝胶渗透色谱法测定

目的建立方格星虫多糖的分子量测定分析方法。方法应用高效凝胶渗透色谱法,色谱柱为phenomenex PolySep-GFC-P 4000(300×7.8 mm),流动相为0.71%硫酸钠溶液(内含0.02%叠氮钠),柱温:35℃,RID-10A示差折光检测器(检测器温度35℃),流速0.5 ml·min-1。结果根据建立的方法测定,得到方格星虫多糖的高效凝胶色谱图,并计算出其重均分子量。结论所用方法简便、快速、准确,可用于方格星虫多糖的质量控制。

高效凝胶色谱法测定四维灵芝液中多糖组分的分子量

目的：采用高效凝胶色谱法测定四维灵芝液中所含多糖组分的分子量。方法：色谱柱为TSK—G4000PWXL(7．8mm×30．0cm)，以0．7％硫酸钠溶液为流动相；流速：0．6mL·min-1；柱温：400℃；示差折光检测器。结果：根据建立的方法，分析测定了13批样品，得到多糖高效凝胶色谱图谱、多糖组分平均分子量。结论：该法简便，快速，可用于四维灵芝液的质量控制。

高效液相色谱法测定复方替硝唑凝胶中3组分

目的 :采用高效液相色谱法同时测定复方替硝唑凝胶中替硝唑、水杨酸和氯霉素的含量。方法 :色谱条件 :ODSC18分析柱 ,流动相为甲醇 0 .0 4mol·L-1磷酸二氢钾溶液 乙腈 ( 30∶5 5∶15 ) ,检测波长 30 0nm。结果 :替硝唑、水杨酸和氯霉素的线性范围分别为 :4 .0～ 79.2mg·L-1,3.0～ 6 0 .4mg·L-1,2 .4～ 4 7.6mg·L-1;替硝唑、水杨酸和氯霉素的平均回收率分别为12 0 % ,10 0 % ,80 % ;3种浓度的回收率分别为 :99.6 %RSD %为 1.15 ,99.7%RSD %为 1.88,99.9%RSD %为 0 .88。日内、日间精密度RSD均小于 5 %。结论 :高效液相色谱法用于复方替硝唑凝胶的含量测定 ,方法简单 ,专属性强。

凝胶渗透色谱净化超高效液相色谱法测定辣椒油和火锅底料中的10种工业染料

目的建立辣椒油和火锅底料中的10种工业染料的检测方法。方法采用凝胶渗透色谱仪作为前处理设备,采用超高效液相色谱仪作为检测设备,对高脂肪含量的辣椒油及火锅底料等辣椒制品中的10种红黄类工业染料进行检测,并对方法的有效性进行验证。结果以空白的辣椒油和火锅底料为基质,分别在高、中、低三个水平进行加标实验,回收率分别在56.0%~96.4%之间和70.0%~98.2%之间,RSD(n=6)分别为1.9%~8.2%之间和1.8%~7.9%之间,各工业染料的检出限(S/N=3)在0.009~0.051 mg/kg之间,定量限(S/N=10)在0.030~0.153 mg/kg之间。结论该方法操作简单,稳定性好,适于在实际检测工作中推广应用。

高效液相色谱法测定烟酰胺凝胶的含量及有关物质

目的：建立高效液相色谱法（HPLC）测定烟酰胺凝胶的含量及有关物质。方法：采用Hypersil ODS C18色谱柱（4．6mm×250mm，5μm）以0．01mol·L^-1磷酸二氢钾溶液（pH4．5）-乙腈（96：4，V／V）为流动相，紫外检测波长261nm，流速1．0mL·min^-1柱温为室温。结果：本方法能分离凝胶剂中烟酰胺及其有关物质，烟酰胺在0．08～0．28μg范围内呈良好的线性关系，r=0．9996（n=6）。平均回收率为100．2％，RSD为0．9％（n=9）。结论：本方法专属性好、准确、稳定可靠，可用于烟酰胺凝胶的含量测定及有关物质检查。

高效液相色谱法测定酮洛芬凝胶的含量

目的：建立HPLC法测定酮洛芬凝胶剂的含量。为质量控制提供有效的分析手段。方法：色谱柱为Dikma Technologies Diamonsil TM C18（4．6mm×250mm，5μm）；流动相为甲醇-0．05mol·L^-1磷酸二氢钾溶液（7：3）；流速为1．0mL·min^-1；柱温为35℃；检测波长为255nm。结果：制剂中辅料和有关物质对主药无干扰，酮洛芬在1．0～18．0mg·L^-1，r=0．9997（n=5）范围内呈良好线性关系；平均回收率分别为100．1％（RSD=1．18％），100．68％（RSD=1．24％），99．0％（RSD=0．43％）。结论：该法操作简便，结果准确、专属性强，可有效控制本品质量。

凝胶净化-高效液相色谱法同时测定烧烤肉制品中的18种多环芳烃

建立了一种高效液相色谱(HPLC)测定烧烤肉制品中18种多环芳烃(PAHs)的分析方法。样品经正己烷-二氯甲烷匀浆提取,凝胶色谱净化,采用HPLC-荧光检测器分析。结果表明,18种PAHs的线性关系良好(r2>0.992),回收率为78.1%~134.2%,相对标准偏差(RSD)<16.5%(n=6)。采用该方法对市售的羊羔不同脏器的烧烤制品进行测定,结果表明羊的不同脏器烧烤制品中PAHs的含量不同,油脂含量较高的烧烤肉制品中萘、1-甲基萘、2-甲基萘、苊、芴、菲等非致癌物的含量较高,而苯并(a)芘等强致癌物含量较低或未检出,但均低于国家限量标准(16种PAHs总含量应低于10mg/kg)。方法简便快捷,灵敏度高,适合烧烤制品中18种PAHs的分析。