枸杞原生质体培养及高效成株体系的建立

由枸杞髓部组织诱导出胚性愈伤组织 ,并由此愈伤组织建立起稳定的细胞悬浮系。从悬浮细胞游离的原生质体在改良KM培养基 ( 1 .5mg/L 6_BA ,0 .5mg/LNAA和 0 .5mg/L 2 ,4_D)中进行液体浅层培养 ,3～ 4d后出现第一次分裂 ,第 7d统计分裂频率为 5 0 .3% ,1 5d左右可形成细胞团 ,3～ 4周后形成肉眼可见的愈伤组织 ,愈伤组织植板率为 1 .2 5 %。将细胞团转移到液体分化培养基 (MS + 6_BA 1 .5mg/L+ 2 ,4_D 0 .2mg/L) 8～ 1 0d可形成大量胚状体 ,及时将胚性愈伤组织块转移到固体分化培养基上 (MS +6_BA 0 .2mg/L) ,可形成大量绿芽 ,分化率 5 4 .1 7%。绿芽在生根培养基 (MS +NAA 0 .2mg/L)可形成完整植株 。