索氏提取法-高效液相色谱法测定卷丹百合中秋水仙碱的含量

利用索氏提取法提取卷丹百合中的有效活性成分秋水仙碱,建立高效液相色谱法(HPLC)测定百合中秋水仙碱的含量。通过单因素试验探究索氏提取过程中样品预处理方式和萃取剂因素对秋水仙碱含量的影响。HPLC色谱条件为色谱柱Hypersil ODS 5μm(4.6 mm×250 mm),甲醇-水为流动相进行梯度洗脱,检测波长为350 nm,流速0.6 mL/min,柱温为30℃。经定量限试验、系统适应性试验、线性关系考察、回收率试验验证,在HPLC色谱条件下,秋水仙碱在0.101~1.522μg/mL浓度范围内线性关系良好,线性回归方程为Y=1.0154X+0.0112,R2=0.9998,平均回收率为99.18%,RSD为0.0038%。湖南、浙江、湖北、山东产地的卷丹样品中的秋水仙碱含量存在差异,其中山东产地的卷丹样品中秋水仙碱含量最高。

高效液相色谱法测定一锅法制备的1-甲基-3,4,5-三硝基吡唑及其3种中间产物的含量

通过优化柱温、流动相、流量等色谱条件,采用高效液相色谱法测定一锅法制备的1-甲基-3,4,5-三硝基吡唑(MTNP)及中间产物1-甲基-4-硝基吡唑(4-MNP)、1-甲基-4,5-二硝基吡唑(4,5-MDNP)、1-甲基-3,5-二硝基吡唑(3,5-MDNP)的含量。反应液经乙腈稀释后,添加适量内标2-硝基甲苯,采用优化的色谱条件测定。以AT.C18色谱柱为固定相,在柱温30℃,流动相体积比45∶55的乙腈和0.1%(体积分数)乙酸溶液的混合溶液,流量1.0 mL·min^(−1)下等度洗脱分离4种目标物,在检测波长265 nm下采用内标法进行定量。结果显示:4种目标物的分离度大于2.5,其质量浓度分别在10.00~250.00 mg·L^(−1)(MTNP和4-MNP)和10.00~350.00 mg·L^(−1)(4,5-MDNP和3,5-MDNP)内和峰面积比值呈线性关系,检出限(3S/N)为0.40~0.80 mg·L^(−1),加标回收率为97.3%~105%,测定值的相对标准偏差(n=6)小于1.0%。

高效液相色谱法测定植物油中苯并(α)芘的不确定度

为了评定高效液相色谱法测定植物油中苯并(α)芘的不确定度,根据相关规定和化学分析测量不确定度评定等原理建立数学模型,对整个检测过程中各种不确定度的来源进行分析与计算,找出不确定度分量并合成相对不确定度和扩展不确定度。结果表明,当植物油中苯并(α)芘的测定结果为7.60μg/kg时,其扩展不确定度为0.69μg/kg(k=2),其中,标准溶液配制与测量重复性两方面引入的不确定度占比较高。

高效液相色谱仪使用过程中常见问题及其解决方法

通过高效液相色谱(H PLC)常见问题的提出和解决,为液相色谱使用者特别是初学者指明正确使用及维护方法。

高效液相色谱仪法检测乳酸链球菌素含量的研究

乳酸链球菌素效价检测法有琼脂扩散法、显色法和酶联免疫吸附法等,前两种方法检测周期长,操作过程复杂,结果误差大;酶联免疫吸附法灵敏度高,检测准确快速,但前期需制备免疫原、多克隆抗体,周期长,成本高。为提高检测效率,节约成本,本实验建立了高效液相色谱仪法快速检测乳酸链球菌素含量(效价)的方法。本法在乳酸链球菌素质量浓度1～20mg/mL范围内线性关系良好,其回归方程为Y=340.118973x+35.202113,相关系数为r^2=0.99973,检出限为0.5mg/mL,样品回收率达90%以上。本实验建立的分析方法简便快捷、具有较好的灵敏度和可靠性,可用于乳酸链球菌素的定量分析。

高效液相色谱法测定生活饮用水中的五种拟除虫菊酯类农药残留

建立了高效液相色谱(HPLC)同时测定生活饮用水中5种拟除虫菊酯类农药的方法。取5.0 mL水样,加入2.0 mL乙腈,振荡2 min,再加入1.0 g NaCl,继续振荡2 min,静置分层。取上清液1.0 mL经0.22μm的有机相滤膜过滤后,采用高效液相色谱法进行测定。结果表明,5种拟除虫菊酯类农药在0.02~5.00μg/L水平上线性关系良好,r>0.9980,回收率为71.8%~103.0%,精密度为4.56%~8.32%,方法检出限为0.0005~0.0020 mg/L,定量限为0.002~0.007 mg/L。采用高效液相色谱测定5种拟除虫菊酯类农药残留能有效提高样品前处理的效率,且能达到检测标准的要求。

反相液相色谱法测定索磷布韦起始物料中的对映异构体

目的:建立索磷布韦起始物料[(2R)-2-脱氧-2-氟-2-甲基-D-赤式戊糖酸γ-内酯3,5-二苯甲酸酯]对映异构体检测方法。方法:采用CHIRALCEL OJ-RH (4.6 mm×150 mm,5μm)为色谱柱;流动相为三氟乙酸-乙腈-水(0.25∶680∶320),等度洗脱;检测波长为230 nm,流速为1.0mL/min。结果:专属性良好,对映异构体在限度浓度的20%~200%范围内线性关系良好,r=0.9999;回收率在97.7%~104.0%范围内,RSD小于10.0%(n=9);进样精密度RSD小于2.0%,中间精密度和重复性RSD值均小于10.0%;耐用性良好。结论:方法精密度好且准确度高,可用于索磷布韦的对映异构体检测。

高效液相色谱(HPLC)法分析大米红曲中的桔霉素

本文探讨了大米红曲色素中桔霉素的高效液相色谱检测方法,并研究了影响红曲中桔霉素含量的一些因素。结果表明:红曲色素经预处理后以2%冰醋酸水和甲醇为流动相(2%冰醋酸水:甲醇=70:30)时,桔霉素能很好地与其他红曲色素成分分开;选育得到的15株红曲菌种中,11号和14号菌株产生的红曲色素中没有检测到桔霉素;液体发酵产物中桔霉素含量显著低于固体发酵法;干燥方法对桔霉素含量有一定的影响,但没有达到显著性差异。

放射性高效液相色谱仪故障与应对措施

放射性高效液相色谱仪是常用的放射性药物含量测定仪器。日常应用中会出现管道堵塞、背景干扰、放射性活度超载等故障问题,从而影响药物的质控和研发。本文主要对该仪器使用中的常见故障及问题进行剖析并对解决方法进行探讨。

肝素亲和柱-高效液相色谱法快速测定乳粉中乳铁蛋白的优化研究

目的:建立一种肝素亲和柱-高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)快速检测乳粉中乳铁蛋白的分析方法。方法:样品经水溶液超声提取,调节pH,采用50 mmol/L磷酸氢二钠溶液(A)和1 mol/L氯化钠溶液(B)作为流动相进行梯度洗脱,采用HPLC进行测量,检测器采用280 nm波长。结果:乳铁蛋白在上述色谱条件下能完全分离。乳铁蛋白线性范围为5.54~110.9μg/mL,相关系数r=0.999966,方法检出限为12 mg/100g,定量限为28.5 mg/100g;平均回收率97.5%~101.9%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)<3.0%。该方法检测结果与酶联免疫吸附法(ELISA)基本一致。结论:该方法操作简便,精密度和回收率高,重复性好,可以用于测定乳粉中乳铁蛋白。

气相色谱法和高效液相色谱法测定角膜塑形镜中3种单体的残留量

提出了气相色谱法(GC)和高效液相色谱法(HPLC)测定角膜塑形镜中甲基丙烯酸(MAA)、3-(异丁烯酰氧)丙基三(三甲基硅氧烷)硅烷(TRIS)、1,1,1,3,3,3-六氟异丙基异丁烯酸酯(HFIPM)等3种单体残留量的方法,并对两种方法的方法学验证与样品测定结果进行比较。取不少于200 mg的镜片样品,置于真空干燥箱中,于(60±5)℃真空条件下干燥不少于24 h至恒重。将恒重后的样品放入索氏提取器中,加入100 mL二氯甲烷,加热提取4~6 h。提取液转移至100 mL容量瓶中,用二氯甲烷定容,得到供试品溶液。GC采用DB-WAX毛细管色谱柱(30 m×0.32 mm,0.5μm),以氮气为载气,以柱升温程序方式分离,以氢火焰离子化检测器检测。HPLC采用CAPCELL PAK C_(18) MGⅡ色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以不同体积比的0.1%(体积分数)磷酸溶液和乙腈的混合溶液为流动相,以梯度洗脱方式分离,以二极管阵列检测器检测。结果显示:GC得到的标准曲线的线性范围为1.0~1 000 mg·L^(-1),检出限为0.006%~0.010%;HPLC得到的标准曲线的线性范围为0.1~200 mg·L^(-1)(MAA、HFIPM)和1.0~1 000 mg·L^(-1)(TRIS),检出限为0.001%~0.009%,表明GC适用于测定高残留量样品,HPLC适用于测定低残留量样品。GC所得回收率为89.1%~111%,测定值的相对标准偏差(RSD,n=6)为0.83%~4.1%;HPLC所得回收率为90.5%~108%,测定值的RSD(n=6)为0.92%~4.7%。在显著性水平为0.05条件下,经F检验和t检验分析,两种方法的测定结果无显著性差异。对3批来自不同生产企业的角膜塑形镜进行残留量和迁移量试验,结果显示:3批样品中均检出TRIS残留,TRIS的迁移量最大值为0.112%;2批样品中检出MAA残留,1批样品中检出HFIPM残留,而MAA和HFIPM均未在迁移量试验中检出。

高效液相色谱法同时测定不同品种菊花中绿原酸和木犀草苷及异绿原酸A含量

采用Alphasil VC-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱分离,乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,选择348 nm作为检测波长,柱温为30℃,进样量为5μL,建立同时测定不同品种菊花(Chrysanthemum morifolium Ramat.)中绿原酸、木犀草苷、异绿原酸A含量高效液相色谱(HPLC)法。结果表明,绿原酸、木犀草苷、异绿原酸A在相应的进样浓度范围内与对应的峰面积呈良好的线性关系(r≥0.9929);平均加样回收率为96.40%~98.07%,RSD为0.69%~1.81%。4种菊花品种中上述3个成分含量分别为0.3575%~0.7872%、0.1879%~0.8239%、0.7611%~1.6169%。该方法简便易行、灵敏度高、结果准确,可用于不同品种菊花的质量控制。

高效液相色谱法分析黄芩汤配伍前后化学成分变化

采用高效液相色谱(HPLC)分析技术建立黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)汤配伍前后的指纹图谱及其中没食子酸、芍药苷、野黄芩苷、黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素6种化学成分的含量测定方法,并分析其配伍前后物质含量的变化。结果表明,所建立的黄芩汤配伍前后HPLC指纹图谱特征明显,黄芩汤配伍后,野黄芩苷含量升高,黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素3种成分含量降低,研究结果可为黄芩汤的配伍作用机制提供科学依据。

双三元高效液相色谱仪在线二维测定化妆品中22种防晒剂

本文建立了双三元高效液相色谱仪在线二维测定化妆品中22种防晒剂的方法。样品经四氢呋喃超声提取后,采用双泵高效液相色谱仪的右泵作为第一维色谱泵对22种防晒剂进行分离,分离柱为Tech Mate C18(150mm×4.6mm×5μm),采用乙腈-异丙醇-0.05mol/L乙酸铵(体积分数0.05%甲酸)溶液梯度洗脱,DAD检测器检测。双泵高效液相色谱仪的左泵作为第二维色谱泵,以体积分数0.1%甲酸水溶液-体积分数0.1%甲酸甲醇溶液为流动相,岛津ODS-3 C18(150 mm×4.6 mm×5μm)为分离柱。方法中22种防晒剂回收率为88.02%~109.66%;相对标准偏差0.66%~3.84%。该方法快速、简便、自动化高,适用于膏霜乳剂、喷雾剂防晒剂中22种防晒剂的测定,对样品色谱图中光谱图与对照品不完全一致的峰或与杂质峰无法分离能进行有效的定性定量。

高效液相色谱仪柱后反应分析氨基酸

蛋白质、肽和氨基酸的分析在研究蛋白质或肽的结构与功能中是不可缺少的重要环节和必要的化学基础。HPLC 柱后反应技术开发为蛋白质化学、酶化学和氨基酸化学的研究开辟了引人注目的前景,其中HPLC 柱后自动反应分析氨基酸的组装仪器已有商售品[1][2]。自70年代末商售氨基酸自动分析仪问世以来,氨基酸的分析可获较满意的结果,但仪器昂贵,又因专一性限制了对其它物质的分析,因而一些色谱研究家致力于应用HPLC 离子交换法和反相法分析氨基酸,研究指出,除色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸外,其他氨基酸不具天然萤光而且形紫外区吸收很弱。示差折射又由于灵敏度差,也难应用于实践。为了解决这一问题,通常对氨基酸进行柱前或柱后反应以进行定性及定量测定[2][3][4][5][6][7][8]。本文拟比较这两种反应方式并重点介绍HPLC 柱后反应。柱前反应:氨基酸在进入色谱柱之前与试剂进行反应产生衍生物称之。如生成PTH 氨基酸,用紫外检测器鉴定;与丹磺酰氯和邻一苯二甲醛(OPA)等试剂反应后产生萤光衍生物,用萤光检测器鉴定。其优点是柱前反应很少受反应条件限制,即溶剂、PH和时间等条件。缺点是比较难于自动化,柱前反应衍生物要求高效柱和选择性高的流动相。

乳制品行业液相色谱仪使用中常见问题及解决办法

最近几年频发的毒奶粉事件威胁到人们的食品安全，大部分原因是生产企业不能正确分析进厂原料及出厂产品，因此国家制定了《原料乳与乳制品中的三聚氰胺检测方法》。标准规定了高效液相色谱法、气相色谱-质谱联用法、液相色谱-质谱／质谱法3种方法为三聚氰胺的检测方法。检测时，

高效液相色谱仪常见故障与应对措施

高效液相色谱仪(HPLC)是药物含量及杂质分析的常用仪器,就高效液相色谱仪在使用过程中经常出现的故障及问题作了简单剖析,并提出了解决这些故障的措施。

高效液相色谱法测定复方利多卡因乳膏中丙胺卡因与利多卡因的含量

目的 :探讨复方利多卡因乳膏质量控制方法 ,为该药的质量控制提供依据。方法 :采用高效液相色谱法。结果 :丙胺卡因在 13 3～ 2 40mg·L- 1、利多卡因在 14 0～ 2 50mg·L- 1范围内呈现良好的线性关系 ,r均为 0 .9996。样品回收率高 ,丙胺卡因和利多卡因回收率分别为 99.2 7%和 99.0 5% ,RSD分别为 1.14 %和 0 .67%。样品溶液稳定 ,3d内日间差异性试验结果 :丙胺卡因RSD =0 .73 % ;利多卡因RSD =0 .65%。本实验方法重复性好 ,RSD分别为丙胺卡因 1.3 0 % ,利多卡因 0 .91%。对 3批样品进行含量测定 ,结果分别为 :丙胺卡因 99.6 9% ,10 0 .53 % ,10 1.86 %。;利多卡因 99.6 7% ,98.3 0 % ,99.97%。结论 :本方法准确 ,可靠 ,能同时测定复方利多卡因乳膏中利多卡因、丙胺卡因的含量 ,在本研究基础上制定的质量标准可以控制本品的质量 ,方法具有可行性。