超高效液相色谱串联四级杆/飞行时间质谱仪鉴定喹赛多在鸡体内代谢研究

采用超高效液相色谱串联四级杆/飞行时间质谱仪(UPLC-Q-TOF MS)识别和鉴定了喹赛多在鸡体内的代谢产物,并讨论了喹赛多在鸡体内可能的代谢途径。按800mg/kg体重的剂量给鸡单次灌服喹赛多,采集试验前后鸡的粪便,经简单前处理后,运用UPLC-Q-TOF MS进行分析,采集的数据经Metabolynxxs软件处理后,共鉴定出15种喹赛多的代谢产物。试验结果表明,喹赛多在鸡体内发生广泛的代谢。

干姜油中姜酚类成分的UPLC/Q-TOFMS分析

目的采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术(UPLC/Q-TOFMS)对干姜油中姜酚类成分进行分析,并对主要成分进行鉴别。方法用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱,以水(A)-乙腈(B)梯度洗脱,检测波长280 nm,使用APCI离子源,正离子与负离子模式下采集数据。结果鉴定出干姜油中姜酚类化合物8个,分别为:6-姜酚、8-姜酚、6-姜烯酚、12-姜二醇、10-姜酚、8-姜烯酚、10-姜烯酚和10-姜二酮。结论经过超高效液相色谱的分离,借助Q-TOFMS测定的相对分子质量及正负离子信息可以鉴定干姜油中的主要姜酚类成分,为干姜油姜酚类成分的鉴定提供了一种准确有效的方法。

厚朴超临界提取物大鼠体内外化学成分的UPLC/Q-TOF-MS分析

目的采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术(UPLC/Q-TOF-MS)对厚朴超临界萃取(SFE)提取物进行大鼠体内外化学成分分析。方法用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱,以水(A)/乙腈(B)梯度洗脱,使用ESI离子源,负离子模式下采集数据。初步分析提取物的化学成分、给药后吸收入血成分及其代谢情况。结果厚朴SFE提取物中检测到和厚朴酚、厚朴酚、龙脑基厚朴酚等5个化学成分,其中厚朴酚原型成分吸收入血,并初步鉴定其3个代谢物。结论厚朴酚是厚朴SFE提取物在体内的直接作用物质,结合其代谢产物分析,有助于阐明厚朴SFE提取物的体内药效物质基础。

UPLC-Q-TOF-MS法分析防风中香豆素类化学成分

目的:分析防风中香豆素类化学成分,为全面解析防风药材的药效物质基础提供参考。方法:采用超高效液相色谱仪联用四级杆串联飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)法。色谱条件:色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18,流动相为0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈(梯度洗脱),流速为0.3 mL/min,柱温为35℃,进样量为3μL;质谱条件:采用电喷雾离子源(ESI)在正、负离子模式下进行检测,离子喷雾电压ESI+/ESI-为5 500 V/-4 500 V,去簇电压为80～-80 V,辅助加热气压力为55.00 psi,雾化气压力为-55psi,气帘气压力为-35.00 psi,去溶剂温度为550℃,碰撞活化扫描能量为15 eV;碰撞电压为35 psi。通过与相关文献数据及标准品图谱对照,并结合UPLC-Q-TOF-MS提供的化合物准确相对分子质量进行成分分析及鉴定。结果:在ESI+模式下共解析出了135个化学成分,在ESI-模式下共解析出了105个化学成分。并鉴定出了在ESI+模式下的异欧芹素乙、伞形花内酯、东莨菪素、花椒毒素、补骨脂素、Ostenol、秦皮啶、异欧前胡素、5-羟基-8-甲氧基补骨脂素、珊瑚菜素、紫花前胡素等11个香豆素类化学成分。结论:该方法准确、快速,可用于防风中香豆素类化学成分的分析。

UPLC-Q-TOF-MS/MS鉴定马钱苷大鼠体内代谢产物

目的采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术(UPLC-Q-TOF-MS/MS)分析鉴定大鼠灌胃马钱苷后其在尿液中的代谢产物,阐明马钱苷代谢途径。方法大鼠灌胃给予马钱苷,收集给药前后的尿样,经固相萃取进行预处理,采用超高液相色谱C18色谱柱,流动相为乙腈-1%甲酸水,梯度洗脱,采用动态背景扣除(DBS)触发信息关联采集(IDA)进行MS/MS数据采集。结果经MetabolitePilot代谢物分析软件处理后,根据MS/MS给出质谱碎片信息对代谢产物进行结构推测,共鉴定马钱苷代谢物3种,并归纳了马钱苷在大鼠体内的代谢过程。结论该方法简单可靠,灵敏度高,可用于体内微量成分的分析鉴定。

夏黑葡萄藤放置过程中化学成分的变化及可能变化机制分析

为分析夏黑葡萄藤在放置过程中化合物的种类、含量变化规律及机制。本研究应用超高效液相色谱仪联用四级杆串联飞行时间质谱仪(UPLC-Q-TOF-MS)在负离子模式下对夏黑葡萄藤中主要化学成分进行定性分析;采用高效液相色谱仪(HPLC)分析夏黑葡萄藤在放置过程中化合物的含量变化趋势。通过液质联用分析方法初步鉴定出夏黑葡萄藤中的黄酮类化合物主要有儿茶素、表儿茶素、槲皮素、槲皮素-3-O-半乳糖苷、petunidin 3-O-glucoside、trans-scirpusin A;芪类化合物为反式白藜芦醇、ε-葡萄素、vitisin B、miyabenol C;苯丙素类化合物为反式咖啡酸。葡萄藤在剪枝后放置过程中,反式白藜芦醇与ε-葡萄素在0~20天左右期间,含量呈显著上升趋势,最高值分别为新鲜样品中的250倍和190倍,从第20天起含量开始降低;vitisin B与miyabenol C为剪枝后放置过程中产生的新化合物,从第10天时含量开始上升,到第50天时含量开始下降。儿茶素、表儿茶素、槲皮素与反式咖啡酸的含量会随着葡萄藤放置时间的延长而持续降低。采用UPLC-Q-TOF-MS可以对葡萄藤中化合物进行快速分析鉴定;葡萄藤在放置过程中逆境胁迫会诱导芪类化合物(反式白藜芦醇、ε-葡萄素、vitisin B、miyabenol C)含量上升,而芪类化合物合成前体物质(trans-scirpusin A)和白藜芦醇合成的竞争物质(儿茶素、表儿茶素、槲皮素)含量则呈下降趋势。

复方赶黄草方中保肝护肝成分的鉴定和定量分析

针对复方赶黄草方中的保肝护肝成分不明确的问题,采用超高效液相色谱仪串联四极杆-飞行时间质谱仪(UPLC/QTOF-MS)对复方赶黄草方提取物中具有保肝、护肝疗效的化学成分进行了初步鉴定,确定了没食子酸、栀子苷、虎杖苷、槲皮素、大黄素等5种对保肝、护肝、治愈黄疸有确切疗效的化学成分,并通过HPLC法对这5种化学成分进行定量分析,为复方赶黄草方的质量控制和二次开发提供了科学依据。

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS快速鉴定腰康宁汤中化学成分

目的采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS/MS)技术对腰康宁汤中化学成分进行快速鉴定。方法采用ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(150 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为0.2%甲酸水溶液-甲醇,梯度洗脱,流速:0.5 mL·min^(-1),柱温:40℃,进样量:3μL;电子喷雾离子源,在正、负离子模式下对色谱流出物质进行质谱检测。结果通过与对照品对照和结合文献,从腰康宁汤中鉴定出山奈苷、宝藿苷Ⅰ、葛根素、毛蕊异黄酮苷、芍药苷、夏佛塔苷、芒柄花苷、丹酚酸B、二十八烷酸、2-乙氧羰基-5,7-二羟基-4-甲氧基异黄酮10种成分。结论建立的定性分析方法能快速、系统地分析腰康宁汤中的化学成分,为该方的质量控制及药效物质基础研究提供了理论基础。

UPLC-Q-TOF-MS E技术结合UNIFI数据库快速定性分析蒲黄化学成分

应用超高效液相-四极杆-飞行时间质谱仪(UPLC-Q-TOF-MS E)联用技术结合UNIFI分析平台对蒲黄的化学成分进行快速定性分析。应用时间依赖型MSE方式采集样品质谱数据,结合自动检出及人工核对方法分析蒲黄化学成分。通过UNIFI数据库自动检出、在线及离线数据库的检索和相关文献的人工核对,鉴定了98个化合物,包括黄酮类12个,甾体类20个,有机酸类19个,其它47个;其中86个为首次从本属药材中鉴定出。

急性ST段抬高型心肌梗死患者的血清代谢组学研究

目的:分析急性ST段抬高型心肌梗死(acute ST-segment elevation myocardial infarction,ASTEMI)患者的血清,找出特异性的代谢产物。方法:运用超高效液相色谱与四级杆飞行时间串联质谱仪联用技术(ultraperformance liquid chromatography/electrospray ionization quadruple time-of-flight mass spectrometry,UPLC-Q-TOF-MS/MS)和多维统计分析结合单维统计分析的方法,比较ASTEMI患者组(n=15)和健康对照组(n=10)的血清。同时采用化学发光法检测ASTEMI患者组(n=15)和健康对照组(n=10)血清中的硫酸脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone sulfate,DHEAS)含量,进一步证实ASTEMI患者的部分代谢组学研究结果。结果:经UPLC-Q-TOF-MS/MS分析后发现ASTEMI患者组和健康对照组具有不同的代谢特征。在多维统计分析中,主成分分析(principal component analysis,PCA)和偏最小二乘判别分析(partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)结果显示ASTEMI患者组和健康对照组分布在不同区域。结合多维统计分析和单维统计分析方法,发现ASTEMI患者组血清中至少有9个代谢产物明显不同于健康对照组。经过代谢组学研究发现的部分差异(ASTEMI患者组血清中的DHEAS含量明显低于健康对照组),进一步采用化学发光法检测证实(P=0.000)。结论:通过代谢组学分析发现ASTEMI患者血清代谢水平明显不同于健康对照者。在ASTEMI患者血清中至少有9个代谢产物与该疾病相关。这些发现可能提供关于ASTEMI患者代谢改变的新见解。

湿热泄泻模型大鼠的尿液代谢组学研究

目的应用基于超高效液相色谱-串联四级杆飞行时间二级质谱联用(UPLC-Q/TOF-MS/MS)尿液代谢组学方法筛选湿热泄泻潜在代谢标志物,探讨大鼠湿热泄泻发病机制。方法采取高糖高脂(HF)+高温高湿(HH)+腹腔注射产肠毒性大肠杆菌(EC)建立大鼠湿热泄泻模型,采集大鼠造模各阶段(高糖高脂,高温高湿,攻毒)尿液样本,应用尿液代谢组学技术分析样本,多元统计分析方法分析代谢数据。结果筛选出左旋谷酰基-左旋半胱氨酸、左旋甲酰犬尿氨酸、5-羟基-N-甲酰犬尿氨酸、核黄素-5-磷酸、亚油酸、左旋色氨酸和褪黑素等7个潜在代谢标志物。结论湿热泄泻涉及色氨酸代谢、核黄素代谢与亚油酸代谢等代谢通路,表明大鼠体内出现能量、氨基酸及脂类代谢紊乱,本研究结果为揭示中(兽)医湿热泄发病机制提供了参考依据。

基于UPLC-Q TOF-MS和HPLC-QQQ-MS技术的赤豆酚类化合物定性、定量分析及其抗氧化能力分析

为深入了解赤豆的营养价值,用80%甲醇溶液提取酚类物质,对提取物中不同存在形态的酚类化合物含量及其抗氧化活性进行测定,并对其80%甲醇提取物中酚类物质进行定性、定量分析。结果表明,赤豆80%甲醇提取物中酚酸含量为3.44 mg/g,黄酮含量为2.50 mg/g,其中3种存在形式酚类萃取物含量及抗氧化能力不同,糖苷键合态酚酸含量最高,可达1.44 mg/g,游离态黄酮含量最高,可达0.85 mg/g;糖苷键合态亚铁离子还原能力最强,可达15.76 mmol/g,酯键合态1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基、2,2′-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)阳离子自由基清除能力最强;80%甲醇提取物通过超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱仪定性分析,初步鉴定出25种化合物,包括3种有机酸、6种酚酸、16种黄酮;高效液相色谱串联三重四极杆质谱联用仪定量分析可得,芦丁(327.40?μg/g)、儿茶素类(210.70?μg/g)含量丰富。

基于UPLC-Q-TOF-MS技术快速分析鉴定四川阿坝野生滇黄精的化学成分

利用灵敏的超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱串联技术(UPLC-Q-TOF-MS)对珍稀中药资源四川阿坝野生滇黄精的80%甲醇提取液进行分析。采用电喷雾离子源(ESI)的阴离子模式对样品中的化学成分进行扫描,通过MS^(E)数据采集方式获得准分子离子峰及二级碎片等质谱信息。结合文献中已报道的黄精化学成分,建立了基于UNIFI平台的黄精数据库,通过快速筛选鉴定了包括5个黄酮类,17个甾体皂苷类等的28个化学成分,所有28个化合物为首次在四川阿坝野生滇黄精中确认,其中10个化合物为首次明确在滇黄精中发现。同时,对发现的黄酮类、皂苷类等的质谱裂解规律进行了探讨。该方法可用来快速、高效、准确评估黄精等中药活性成分。

基于UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS技术分析藏药粗壮秦艽的化学成分

目的用超高效液相色谱-电喷雾/四级杆飞行时间串联质谱联用(UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS)技术对粗壮秦艽的主要化学成分进行定性分析。方法色谱条件为ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以1 mL·L^(-1)甲酸(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^(-1),柱温为40℃,进样量为1μL,质谱用电喷雾(ESI)离子源,在正、负离子模式下采集数据。结果通过分析二级高分辨质谱结合对照品数据及相关文献,共鉴定出39个化合物,包括环烯醚萜类21个、三萜类9个、黄酮类3个和其他类成分6个。结论基于UPLC的高效分离能力和MS的高灵敏检测优势,用UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS技术可快速分析粗壮秦艽中的化学成分,为粗壮秦艽化学成分的提取、分离及其药效物质基础研究提供科学依据。

分子对接技术结合LC-MS/MS筛选半夏厚朴汤抗PDE4有效成分

目的 采用分子对接技术筛选半夏厚朴汤方中抗磷酸二酯酶4(PDE4)潜在有效成分,结合高分辨质谱技术评价不同提取方法的有效成分含量变化.方法 采用TCMSP等数据库和文献检索方法搜集药味中所含化合物,采用Autodock分子对接软件计算化合物与蛋白质的对接结果,优选结合能较低的化合物作为潜在有效成分,采用超高效液相色谱-串联四级杆飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS/MS)检测不同提取方法样品中有效化合物分子含量.结果 1028个已报道化合物经对接筛选,得到25个对接结果较好的化合物分子.与高分辨质谱进行比对,对应得到5种化合物分子.考察不同方法的提取效率,以50%乙醇提取得到的baicalein、scutellarein、luteolin、orobol 4种成分的含量较高;以95%乙醇提取得到的apigenin含量较高.结论 半夏厚朴汤中某些分子有通过抑制PDE4作用发挥抗抑郁症作用的潜在作用.不同提取方法对半夏厚朴汤有效成分的含量影响较大,这可能对半夏厚朴汤治疗抑郁症的作用有较大影响.

基于UHPLC-Q-TOF-MS/MS及网络药理学探讨葛根芩连汤治疗代谢综合征的潜在作用机制

目的基于超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱联用技术(UHPLC-Q-TOF-MS/MS)与网络药理学方法探讨葛根芩连汤治疗代谢综合征(Metabolic syndrome,MetS)的潜在作用机制。方法采用UHPLC-QTOF-MS/MS方法分析葛根芩连汤的化学成分;通过Swiss Target Prediction数据库筛选葛根芩连汤中4味中药的成分靶点;通过Genecards、TTD、OMIM数据库检索MetS疾病相关靶点;采用Venny 2.1平台对葛根芩连汤作用靶点与疾病靶点取交集,获得葛根芩连汤治疗MetS的关键靶点;构建“活性成分-靶点”网络及关键靶点蛋白互作(PPI)网络;采用DAVID数据库对关键靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析。结果从葛根芩连汤中鉴定出50个化学成分,共筛选出20个关键活性成分,得到葛根芩连汤治疗MetS的关键靶点174个。筛选出SRC、MAPK3、STAT3、HSP90AA1、MAPK8等核心靶点。GO功能富集分析涉及379条生物过程、65条细胞组分和100条分子功能。KEGG通路分析得到Ras信号通路、Rap1信号通路、PI3K-Akt信号通路、VEGF信号通路等108条相关通路。结论明确了葛根芩连汤的化学成分,预测得到葛根芩连汤治疗MetS的药效物质基础及分子机制,可为中药复方研究提供参考。

降压类中成药及保健食品中非法添加氯沙坦的定性定量检测方法研究

目的建立降压类中成药及保健食品中非法添加氯沙坦的定性及定量检测方法。方法采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱（UPLC-Q-TOF）联用技术对降压类中成药及保健食品中非法添加的氯沙坦进行定性筛查,采用Shimadzu Shim-pack XRODS色谱柱（100 mm×2.0 mm,2.2μm）,以0.5%甲酸溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,电喷雾离子源（ESI）,正负离子检测,扫描范围m/z 100～1 000。经筛查为阳性的样品用超高效液相色谱进行紫外吸收光谱定性鉴别和定量测定,采用Waters XBridgeTM色谱柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,以0.2%磷酸溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,检测波长为220 nm,流速为1.0 mL/min。结果通过对9批降压类中成药和保健食品进行快速质谱定性筛查,有2批样品检出氯沙坦,含量分别为48.3,20.9 mg/g。结论该方法准确性好、灵敏度高、选择性强,可作为降压类中成药及保健食品中非法添加氯沙坦的检验方法。

基于UPLC-Q-TOF/MS技术的橘皮竹茹汤血清药物化学初步研究

[目的]对橘皮竹茹汤进行血清药物化学初步研究。[方法]大鼠灌胃橘皮竹茹汤冻干粉,采集含药血清。采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱联用(UPLC-Q-TOF/MS)技术,对橘皮竹茹汤冻干粉样品、空白血清及给药血清图谱进行比较,并利用Peakview和MetabolitePilot数据处理软件,根据质谱所提供的保留时间、精确相对分子质量及二级质谱裂解碎片来鉴定和推测其血中移行成分。[结果]橘皮竹茹汤冻干粉灌胃给药后,从血清中检测出41个入血成分,其中原型成分13个、代谢产物28个。[结论]初步确定了橘皮竹茹汤的入血成分,为阐明其药效物质基础提供了依据。

辅助降血糖类保健食品非法添加化学物质检测方法研究

目的：利用超高效液相-串联四级杆-飞行时间液质联用系统（UPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS）,建立快速可靠灵敏的测定辅助降血糖类保健食品中非法添加二甲双胍、丁二胍、苯乙双胍、甲苯磺丁脲、格列齐特、吡格列酮、罗格列酮、格列波脲、格列吡嗪、瑞格列奈、格列美脲、格列本脲和格列喹酮13种化学药品的液质联用检测方法。方法：采用UPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS检测,以Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18为填充柱;0.1%甲酸-0.01 mol/L乙酸铵水溶液和甲醇梯度洗脱,流速0.3 mL/min;ESI正离子模式,一级、二级质谱全扫描,进行UPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS的定性及定量分析。结果：此方法经过验证,线性良好（r〉0.99）、精密度RSD〈3%、样品回收率在74.1%-90.0%之间,检出限在9.29-60.0 ng/mL之间,均能满足辅助降血糖类保健食品非法添加化学成分筛查的要求。结论：此方法快速、准确、灵敏度高、分离度高,可为辅助降血糖类保健食品非法添加筛查检测提供有力工具。

UPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS测定缓解体力疲劳类保健品中非法添加的化学物质

目的：利用超高效液相-串联四级杆-飞行时间液质联用系统（UPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS），建立快速可靠灵敏的测定缓解体力疲劳类保健食品中违法添加西地那非、他达拉非、伐地那非、红地那非、豪莫西地那非、羟基豪莫西地那非、那莫西地那非、氨基他达拉非、伪伐地那非、硫代艾地那非、那红地那非和育亨宾等12种化学药品的液质联用检测方法。方法：采用UPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS液质联用仪，以Agilent ZORBAX Eclipse plus C18为色谱柱；以0.1%甲酸-0.01 mol/L乙酸铵水溶液和甲醇梯度洗脱，流速为0.3 mL/min；ESI正离子模式，一级、二级质谱全扫描，进行 UPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS的定性及定量分析。结果：经方法学验证，本方法在2～80μg/mL浓度范围内线性良好、精密度（RSD%）小于2%、回收率在80.5%～98.7%之间。结论：本方法快速、准确、灵敏度高、分离度高，为快速筛查缓解体力疲劳类保健食品中非法添加化学物质提供有力工具。