UPLC-Q-TOF-MS E技术结合UNIFI数据库快速定性分析蒲黄化学成分

应用超高效液相-四极杆-飞行时间质谱仪(UPLC-Q-TOF-MS E)联用技术结合UNIFI分析平台对蒲黄的化学成分进行快速定性分析。应用时间依赖型MSE方式采集样品质谱数据,结合自动检出及人工核对方法分析蒲黄化学成分。通过UNIFI数据库自动检出、在线及离线数据库的检索和相关文献的人工核对,鉴定了98个化合物,包括黄酮类12个,甾体类20个,有机酸类19个,其它47个;其中86个为首次从本属药材中鉴定出。

干姜油中姜酚类成分的UPLC/Q-TOFMS分析

目的采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术(UPLC/Q-TOFMS)对干姜油中姜酚类成分进行分析,并对主要成分进行鉴别。方法用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱,以水(A)-乙腈(B)梯度洗脱,检测波长280 nm,使用APCI离子源,正离子与负离子模式下采集数据。结果鉴定出干姜油中姜酚类化合物8个,分别为:6-姜酚、8-姜酚、6-姜烯酚、12-姜二醇、10-姜酚、8-姜烯酚、10-姜烯酚和10-姜二酮。结论经过超高效液相色谱的分离,借助Q-TOFMS测定的相对分子质量及正负离子信息可以鉴定干姜油中的主要姜酚类成分,为干姜油姜酚类成分的鉴定提供了一种准确有效的方法。

厚朴超临界提取物大鼠体内外化学成分的UPLC/Q-TOF-MS分析

目的采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术(UPLC/Q-TOF-MS)对厚朴超临界萃取(SFE)提取物进行大鼠体内外化学成分分析。方法用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱,以水(A)/乙腈(B)梯度洗脱,使用ESI离子源,负离子模式下采集数据。初步分析提取物的化学成分、给药后吸收入血成分及其代谢情况。结果厚朴SFE提取物中检测到和厚朴酚、厚朴酚、龙脑基厚朴酚等5个化学成分,其中厚朴酚原型成分吸收入血,并初步鉴定其3个代谢物。结论厚朴酚是厚朴SFE提取物在体内的直接作用物质,结合其代谢产物分析,有助于阐明厚朴SFE提取物的体内药效物质基础。

UPLC-Q-TOF-MS/MS鉴定马钱苷大鼠体内代谢产物

目的采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术(UPLC-Q-TOF-MS/MS)分析鉴定大鼠灌胃马钱苷后其在尿液中的代谢产物,阐明马钱苷代谢途径。方法大鼠灌胃给予马钱苷,收集给药前后的尿样,经固相萃取进行预处理,采用超高液相色谱C18色谱柱,流动相为乙腈-1%甲酸水,梯度洗脱,采用动态背景扣除(DBS)触发信息关联采集(IDA)进行MS/MS数据采集。结果经MetabolitePilot代谢物分析软件处理后,根据MS/MS给出质谱碎片信息对代谢产物进行结构推测,共鉴定马钱苷代谢物3种,并归纳了马钱苷在大鼠体内的代谢过程。结论该方法简单可靠,灵敏度高,可用于体内微量成分的分析鉴定。

急性ST段抬高型心肌梗死患者的血清代谢组学研究

目的:分析急性ST段抬高型心肌梗死(acute ST-segment elevation myocardial infarction,ASTEMI)患者的血清,找出特异性的代谢产物。方法:运用超高效液相色谱与四级杆飞行时间串联质谱仪联用技术(ultraperformance liquid chromatography/electrospray ionization quadruple time-of-flight mass spectrometry,UPLC-Q-TOF-MS/MS)和多维统计分析结合单维统计分析的方法,比较ASTEMI患者组(n=15)和健康对照组(n=10)的血清。同时采用化学发光法检测ASTEMI患者组(n=15)和健康对照组(n=10)血清中的硫酸脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone sulfate,DHEAS)含量,进一步证实ASTEMI患者的部分代谢组学研究结果。结果:经UPLC-Q-TOF-MS/MS分析后发现ASTEMI患者组和健康对照组具有不同的代谢特征。在多维统计分析中,主成分分析(principal component analysis,PCA)和偏最小二乘判别分析(partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)结果显示ASTEMI患者组和健康对照组分布在不同区域。结合多维统计分析和单维统计分析方法,发现ASTEMI患者组血清中至少有9个代谢产物明显不同于健康对照组。经过代谢组学研究发现的部分差异(ASTEMI患者组血清中的DHEAS含量明显低于健康对照组),进一步采用化学发光法检测证实(P=0.000)。结论:通过代谢组学分析发现ASTEMI患者血清代谢水平明显不同于健康对照者。在ASTEMI患者血清中至少有9个代谢产物与该疾病相关。这些发现可能提供关于ASTEMI患者代谢改变的新见解。

UPLC-Q-TOF-MS法分析防风中香豆素类化学成分

目的:分析防风中香豆素类化学成分,为全面解析防风药材的药效物质基础提供参考。方法:采用超高效液相色谱仪联用四级杆串联飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)法。色谱条件:色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18,流动相为0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈(梯度洗脱),流速为0.3 mL/min,柱温为35℃,进样量为3μL;质谱条件:采用电喷雾离子源(ESI)在正、负离子模式下进行检测,离子喷雾电压ESI+/ESI-为5 500 V/-4 500 V,去簇电压为80～-80 V,辅助加热气压力为55.00 psi,雾化气压力为-55psi,气帘气压力为-35.00 psi,去溶剂温度为550℃,碰撞活化扫描能量为15 eV;碰撞电压为35 psi。通过与相关文献数据及标准品图谱对照,并结合UPLC-Q-TOF-MS提供的化合物准确相对分子质量进行成分分析及鉴定。结果:在ESI+模式下共解析出了135个化学成分,在ESI-模式下共解析出了105个化学成分。并鉴定出了在ESI+模式下的异欧芹素乙、伞形花内酯、东莨菪素、花椒毒素、补骨脂素、Ostenol、秦皮啶、异欧前胡素、5-羟基-8-甲氧基补骨脂素、珊瑚菜素、紫花前胡素等11个香豆素类化学成分。结论:该方法准确、快速,可用于防风中香豆素类化学成分的分析。

夏黑葡萄藤放置过程中化学成分的变化及可能变化机制分析

为分析夏黑葡萄藤在放置过程中化合物的种类、含量变化规律及机制。本研究应用超高效液相色谱仪联用四级杆串联飞行时间质谱仪(UPLC-Q-TOF-MS)在负离子模式下对夏黑葡萄藤中主要化学成分进行定性分析;采用高效液相色谱仪(HPLC)分析夏黑葡萄藤在放置过程中化合物的含量变化趋势。通过液质联用分析方法初步鉴定出夏黑葡萄藤中的黄酮类化合物主要有儿茶素、表儿茶素、槲皮素、槲皮素-3-O-半乳糖苷、petunidin 3-O-glucoside、trans-scirpusin A;芪类化合物为反式白藜芦醇、ε-葡萄素、vitisin B、miyabenol C;苯丙素类化合物为反式咖啡酸。葡萄藤在剪枝后放置过程中,反式白藜芦醇与ε-葡萄素在0~20天左右期间,含量呈显著上升趋势,最高值分别为新鲜样品中的250倍和190倍,从第20天起含量开始降低;vitisin B与miyabenol C为剪枝后放置过程中产生的新化合物,从第10天时含量开始上升,到第50天时含量开始下降。儿茶素、表儿茶素、槲皮素与反式咖啡酸的含量会随着葡萄藤放置时间的延长而持续降低。采用UPLC-Q-TOF-MS可以对葡萄藤中化合物进行快速分析鉴定;葡萄藤在放置过程中逆境胁迫会诱导芪类化合物(反式白藜芦醇、ε-葡萄素、vitisin B、miyabenol C)含量上升,而芪类化合物合成前体物质(trans-scirpusin A)和白藜芦醇合成的竞争物质(儿茶素、表儿茶素、槲皮素)含量则呈下降趋势。

UPLC-Q-TOF-MS^E技术结合UNIFI数据库快速定性分析黄牡丹化学成分

目的应用超高效液相色谱仪联用四级杆串联飞行时间质谱仪(UPLC-Q-TOF-MSE)结合UNIFI天然产物信息平台对黄牡丹Paeonia delavayi var.lutea的化学成分进行快速定性分析。方法应用时间依赖型MSE方式采集样品质谱数据,结合自动检出及人工核对方法分析黄牡丹化学成分。结果通过UNIFI数据库自动检出、在线及离线数据库的检索和相关文献的人工核对,鉴定了57个化合物,包括单萜苷、酚酸、鞣酸、丹皮酚和三萜等类化合物。结论本方法可以快速全面地定性分析黄牡丹根的化学成分,为黄牡丹的质量控制和药效物质基础的阐明提供参考。

肾康注射液中化学成分的UPLC-Q-TOF-MS分析

目的建立肾康注射液中的化学成分的超高效液相色谱仪联用四级杆串联飞行时间质谱仪(UPLC-Q-TOF-MS)分析方法。方法采用Waters Acquity HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相为0.1%甲酸水溶液–乙腈,梯度洗脱;体积流量为0.4 m L/min;柱温为40.0℃;进样量为2.00μL。质谱检测采用正、负离子模式,电压分别为3.0、2.9k V;离子源温度120℃;脱溶剂气体温度450℃;脱溶剂气体体积流量900 L/h。结果鉴定出了肾康注射液中10个化合物,分别为没食子酸、芦荟大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、丹参素、原儿茶醛、苯乙醛、芦荟大黄素、毛蕊异黄酮、云杉鞣酚-3'-O-葡萄糖苷、白藜芦醇-4'-O-葡萄糖苷、大黄素,并结合文献报道对其药材来源进行了归属。结论建立了一种简单、快速、高效的UPLC/Q-TOF-MS方法对肾康注射液中化学成分进行了鉴定,为阐明肾康注射液的物质基础提供了参考。

UPLC Q-TOF/MS法研究艾叶抑制EGFR激酶的活性部位

目的应用高通量药物筛选寻找具有EGFR激酶抑制活性的中药提取物,同时采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术(UPLCQ-TOF/MS)对其活性部位进行分析和鉴别。方法艾叶药材经石油醚渗滤、乙醇提取、乙酸乙酯萃取和水煎煮后,得到4个相应提取部位;采用均相时间分辨荧光法检测抑制表皮生长因子受体(EGFR)的激酶活性,于620、665 nm处测定荧光信号的变化及信号值,计算提取物对EGFR激酶的抑制率;采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱,以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相梯度洗脱,在210~400 nm扫描,使用ESI离子源,在正离子模式下采集数据。结果艾叶的乙酸乙酯部位显示较强的EGFR激酶抑制活性,IC50=8.848μg·mL-1;Q-TOF/MS测定的一级、二级质谱信息及结合文献鉴定艾叶乙酸乙酯提取物中7个化合物,其中6个分别是芹菜素、棕矢车菊素、木犀草素、异泽兰黄素、β-谷甾醇、槲皮素,1个未知成分。其中棕矢车菊素、异泽兰黄素、β-谷甾醇为主要成分。结论首次发现艾叶具有抑制EGFR的激酶活性,推测其乙酸乙酯提取物中的黄酮类和甾醇类为抑制EGFR激酶活性的主要活性成分。