变性高效液相色谱分析检测人类糖皮质激素受体基因变异

目的 :以变性高效液相色谱分析 (DHPLC)检测糖皮质激素受体基因 (NR3C1)在中国人群中的变异情况。方法 :提取 6 4例中国人基因组DNA ,参照文献所报道的引物序列 ,PCR方法扩增糖皮质激素受体基因编码区(2～ 9α外显子 )及其邻近的部分内含子序列 ,琼脂糖凝胶电泳鉴定产物后 ,以DHPLC检测PCR产物 ,对洗脱曲线异常者进行DNA测序。结果 :经DHPLC分析和DNA测序证实 ,研究人群的NR3C1基因中存在 8处变异 ,5处为新发现 ;其中有 2组变异呈紧密连锁的单倍型 ,均为首次报道 ,它们在人群中的基因型频率达 3.1%与 14 .1% ;另一处变异出现频率相对较低。结论 :成功地建立了以DHPLC检测NR3C1基因变异的方法及技术参数 ,证实在中国人群中NR3C1基因存在变异 ,其中 2种频率较高的单倍型为新发现。

圆珠笔油墨字迹色痕的高效液相色谱分析方法

采用正交实验设计法从多种流动相体系中优选出了圆珠笔油墨字迹色痕的高效液相色谱分析条件。在此条件下分析了 10 5种市售的不同生产厂家和牌号蓝色圆珠笔油墨的字迹色痕 ,并依据有色成分的差异将这些同色油墨分成了 6大类 ,考察了纸张的影响因素及在该条件下分析结果的重现性和精密度 。

顺铂注射液的高效液相色谱分析

提出了测定顺铂注射液中顺铂含量的反相高效液相色谱法 ,其线性相关系数为0 994,精确度为 0 45% (n =8) ,顺铂的回收率为 99 7%。该法也能用于顺铂注射液中杂质反铂的测定 ,实现顺铂与水合物、三氯氨铂 (铂B)的分离。提出了用氯化钠溶液替代空白溶剂 (顺铂注射液所用的溶剂简称 )

黄芩中黄芩苷的亚临界水提取及高效液相色谱分析

建立了黄芩药材中黄芩苷的亚临界水提取 高效液相色谱测定方法。分别考察了温度、压力、提取时间、提取物颗粒度、溶剂比等因素对提取量的影响,并与有机溶剂提取法比较。结果表明,当两者具有相同的提取效果时,亚临界水提取法的提取时间及提取溶剂的消耗量大大减少,避免了使用有机溶剂造成的污染。黄芩苷提取最佳条件为:样品颗粒度80～100目,溶剂比0 2mL/mg,5MPa,130℃保持10min。并通过提取 高效液相色谱联机分析实现了对提取物的实时监测。该技术有望成为从中药材中提取脂溶性成分的有效方法。

比久和多效唑混合物的高效液相色谱分析

在吸光度为 2 10nm、流动相配比为甲醇∶乙腈∶水 =4 0∶2 0∶4 0的条件下 ,多效唑和比久均能得到很好的分离。比久的保留时间约为 3.19min ,多效唑的保留时间约为 11.83min。加标回收率 :比久为 10 8.6 9% ,多效唑为 90 .39%。

芦苇叶类黄酮高效液相色谱分析

目的:分析芦苇叶类黄酮的组分。方法:制备芦苇叶类黄酮提取浓缩过程中形成的析出物和浓缩液再经大孔树脂纯化后产生的初纯物,优化两种样品中类黄酮苷转化为苷元的水解条件,采用高效液相色谱(HPLC)法测定两种样品和其水解样品类黄酮的组分。结果:析出物和初纯物的总黄酮含量分别为57.1%和18.5%,酸浓度1.4mol/L、温度80～90℃条件下水解4h可获得相对最好的水解效果;HPLC测定表明,析出物含32种组分,其中7种得到确定,初纯物含22种组分,其中5种得到确定;水解析出物含28种组分,其中7种得到确定,水解初纯物含25种组分,其中7种得到确定。结论:芦苇叶含有芦丁、野黄芩苷、橙皮苷、木犀草素、槲皮素、芹菜素、山奈酚、异鼠李素(或橙皮素)、异甘草素和黄芩素,其中芹菜素含量最高,还有许多未确定的类黄酮。

川西獐牙菜与抱茎獐牙菜中酮的高效液相色谱分析

采用反相高效液相色谱法同时分离和测定了龙胆科獐牙菜属的川西獐牙菜和抱茎獐牙菜中几种酮的含量。色谱柱为KromasilC18(250mm×4 60mmi d ,5μm),流动相为甲醇 0 1%的磷酸水溶液(体积比为73∶27),流速1mL/min,检测波长260nm,柱温20℃。实验结果表明,该方法具有很好的线性关系与精密度,方法简单、准确、实用性强。

荧光蛋白标记/高效液相色谱分析枯草芽孢杆菌-烯酰吗啉菌药合剂

生物和化学组分构建的菌药合剂是新农药制剂发展的热点,其中生物活体和化学组分的准确、快速检测方法备受关注。本实验应用绿色荧光蛋白标记和高效液相色谱技术研究了枯草芽孢杆菌-烯酰吗啉菌药合剂在54±2℃贮存14d前后生防菌株和化学组分含量的变化。结果表明:绿色荧光蛋白标记和高效液相色谱技术联用,可以用于该菌药合剂质量检测和热贮实验中混剂的贮存稳定性监控;菌药合剂在热贮实验过程中的组分含量变化在允许变化范围之内。

杀菌剂中抑霉唑含量的离子对高效液相色谱分析

选用庚烷磺酸钠作离子对试剂 ,拟定了杀菌剂中抑霉唑及其硫酸盐的反相离子对HPLC测定方法。讨论了离子对的形成过程 ,pH值对离子对形成的影响 ,推导了流动相pH值计算公式 ,估算了流动相的pH值范围 ,确定了色谱柱为EclipseXDB C815 0mm× 4 .6mm ,流动相为甲醇 :含 12mmol/L庚烷磺酸钠的 2 5mmol/L磷酸盐缓冲溶液 (pH≈ 2 .8) =6 2∶38(V/V) ,测定波长为 2 2 5nm的分析条件。方法的检出限为 7.1× 10 -4μg ;线性范围为 8.0× 10 -3 ～ 4 .0 μg ,实验结果线性关系良好 ;相关系数r =0 .9998。方法用于杀菌剂样中抑霉唑及其硫酸盐的测定 ,回收率 99.7% 。

稻米中三唑磷残留免疫亲合色谱-高效液相色谱分析

目的提高三唑磷残留的监测效率。方法采用碳酰二咪唑(CDI)将SepharoseCL-4B活化并与纯化的抗三唑磷多克隆抗体共价偶联,合成免疫亲合色谱(IAC)吸附剂并制备对三唑磷具有特异性亲合力的IAC柱。对IAC条件进行了优化,选择0.02mol·L-1pH7.2磷酸盐缓冲液作吸附与平衡介质,60%(体积分数)甲醇水作洗脱剂。结果在试验条件下,IAC柱对三唑磷的动态柱容量达1.91μg·ml-1床体积,当标样溶液中三唑磷含量为2ng·ml-1时,经IAC柱富集的效率近250倍。稻米中添加三唑磷0.1μg·g-1,提取液以IAC柱分离富集,洗脱液采用高效液相色谱(HPLC)法测定,5次重复测定的平均回收率为102.5%,相对标准偏差4.44%。结论成功建立了三唑磷IAC-HPLC分析技术并用于稻米中三唑磷残留的测定。

葛酒、葛粉中葛根素的高效液相色谱分析

本文研究了用 Discovery C18色谱柱 ,甲酵 -水为流动相的反相高效液相色谱法测定葛酒、葛粉中葛根素的方法。讨论了流动相的组成和流速对葛根素分离及测定的影响 。

单糖的柱前衍生化高效液相色谱及胶束电动毛细管色谱分析的对比研究

采用1 苯基 3 甲基 5 吡唑啉酮(PMP)衍生糖类物质,通过简化衍生方法,优化分析条件,采用胶束电动毛细管色谱(MEKC)和高效液相色谱(HPLC)两种方法对5种还原单糖的PMP衍生物实现了良好的分离。5种还原单糖衍生物的保留时间的重现性较好(MEKC法的相对标准偏差(RSD)小于5%(n=5),HPLC法的RSD为0 23%(n=5))。用所建立的两种方法对实际样品中的糖进行了分析,结果表明所建方法可作为实际样品中单糖分析的常规方法。

植物叶黄素的高效液相色谱分析测定

采用高效液相色谱分析方法分析测定植物样品中的叶黄素含量,对不同的前处理方法进行了实验。最佳测定方法为利用植物冻干样,以丙酮为提取液进行HPLC测定。利用上述方法进行一些植物中的叶黄素含量的测定,结果表明在所测定的几种植物中,叶黄素的含量差异很大。其中羽衣甘蓝的含量最高,其次为白薯叶、苋菜、菠菜等。

对二甲苯氧化产物的高效液相色谱分析

Micro-amount terephthalic acid and 4-carboxybenzaldehyde in p-toluic acids were determined by a reversed-phase ion suppression chromatography.The separation was carried out on a C18column（4.6mm i.d.×150mm）with methanol-water（70∶30）as the mobile phase at a flow rate of 0.8ml/min and with H3PO4 as an inhibitor.The detection wavelength was 240 nm.The relative standard deviation of terephthalic acid and 4-carboxybenzaldehyde are less than 3% and 2%,respectively.The average recoveries were 102.9% and 103.2%,respectively.The detection limit were 0.25 ng and 0.45 ng,respectively.

全自动高效液相色谱分析系统在地中海贫血诊断中的应用

目的探讨全自动高效液相色谱(HPLC)分析检测系统在地中海贫血(地贫)诊断和筛查中的临床应用价值。方法入选100例基因诊断确诊地贫患儿及35例正常儿童,应用HPLC检测系统以及传统碱变性法、醋纤电泳法定量分析HbF和HbA2;并比较不同检测方法与相应β地贫基因诊断结果的符合率、敏感性与特异性。结果β地贫74例,64例单杂合子,10例复合杂合子;α地贫26例,1例单杂合子,25例复合杂合子。在地贫患儿和正常儿童中,HPLC法测定的HbF百分含量均高于碱变性法,差异有统计学意义(P<0.01)。HPLC法测得的HbF在α地贫患儿和正常儿童间的差异亦有统计学意义(P=0.011),对α地贫的分辨力高于碱变性法。α地贫患儿,HPLC法测得的HbA2百分含量高于醋纤电泳法,差异有统计学意义(P=0.010);β地贫患儿,HPLC法和醋纤电泳法测得的单杂合子的HbA2含量均高于复合杂合子,差异有统计学意义(P<0.01)。HPLC方法测定HbF-HbA2(≥4.0%)联合MCV(<80 fl)、MCH(<27 pg),与α或β基因诊断的符合率达99.3%,灵敏度和特异度分别为99.0%和100.0%。结论采用HPLC法检测HbA2和HbF,并结合MCV、MCH,与基因诊断结果的符合率、灵敏度和特异度均高,可成为大规模筛查β地贫的一种理想方法。

间苯二甲酸双羟乙酯-5-磺酸钠的高效液相色谱分析

探讨了用高效液相色谱法测定间苯二甲酸双羟乙酯5磺酸钠(SIPE)的酯交换率的测试条件。采用ZorbaxSBC18色谱柱,测试波长为230nm,以甲醇/水(21∶79)为流动相,流速为1.0mL/min,能快速、准确地测定SIPE的酯交换率。该法可用于SIPE的检测和质量控制。

井冈霉素A的反相高效液相色谱分析

建立了一种用反相高效液相色谱测定井冈霉素A的定量分析方法。使用新型Venusil HILIC液相色谱柱,以乙腈与水不同比例进行梯度洗脱,流速1.0mL/min,紫外检测波长为210nm。该方法的标准偏差为0.24,变异系数为0.42%,回收率在96.5%～101.8%之间,线性相关系数为0.9987。该方法简便、快速、准确、精密,适用于井冈霉素A的定量分析。

储存受损害大豆的磷脂成分变化的高效液相色谱分析

大豆在储运中因湿度和温度过高而受损害后 ,磷脂组份发生较大的化学变化 ,高效液相色谱分析表明 ,不可皂化部分 (主要是甾醇 )和磷脂酸 (PA)含量增加 ,而主要磷脂成分磷脂酰乙醇胺 (PE)、磷脂酰肌醇 (PI)、磷脂酰胆碱 (PC)含量减少。受损害大豆毛油水化脱胶困难及脱胶后油中磷含量偏高均与磷脂组份发生化学变化有关。

多杀菌素高效液相色谱分析

本文建立了一种多杀菌素的高效液相色谱定量分析方法。以甲醇+乙腈+水为流动相,C18和紫外检测器进行测定。结果表明本方法的标准偏差为0.0026,变异系数为0.30%,相关系数r=0.9998,平均回收率为99.92%。

黄连解毒汤高效液相色谱分析方法的建立

黄连解毒汤由黄连、黄芩、黄柏、栀子四味中药组成,主要包含生物碱类(黄连、黄柏),黄酮类(黄芩)和环烯醚萜类(栀子)三大类成分,其理化性质差别较大,在分别进行高效液相色谱(HPLC)分析时适用的流动相差别较大。本文比较了不同浓度的甲酸-三乙胺流动相添加剂对黄连解毒汤水提取物高效液相色谱(HPLC)分析的影响,提出了一种稳定、重复的HPLC分析方法:柱子为HypersilODS2色谱柱(250×4.6mmi.d,5μm),流动相组成为0.3%(V/V)甲酸-0.3%(V/V)三乙胺的水溶液与0.3%(V/V)甲酸-0.3%(V/V)三乙胺的乙腈溶液,检测波长260nm。这种方法能够同时分析复方中的生物碱类、黄酮类和环烯醚萜类物质,为类似的成分复杂中药提取物的分析提供了参考。