固相萃取-高效液相色谱电化学法检测大鼠血浆儿茶酚胺

建立了一种Oasis HLB固相萃取-高效液相色谱（HPLC）电化学检测大鼠血浆儿茶酚胺（CAs）的方法。血浆样本在形成二苯基硼酸-儿荼酚胺复合物后经优化的固相提取技术，得到较高样本回收率。以Atlantis C18色谱柱为固定相，确定了各种影响色谱的参数，如流动相组成、pH范围及检测器的设定。儿茶酚胺所有组分肾上腺素（E）、去甲肾上腺素（NE）和多巴胺（DA）的平均提取回收率在90％～95％之间。E、NE和DA的质量浓度在0．25～30ng／mL时与峰面积呈良好的线性关系（r值分别为0．9989，0．9992和0．9984）；检出限为0．4pg。该法灵敏、准确、重现性好、结果可靠。

高效液相色谱电化学法检测人体血浆中芹菜素和相关黄酮类化合物

建立了同时检测人体血浆中芹菜素等5种黄酮类化合物含量的反相高效液相色谱法。血浆样品经固相萃取柱提取后，用HypersilC18色谱柱分离样品，流动相为甲醇／磷酸水溶液（V/V，2／3，pH2．25），等度洗脱，流量为1mL／min，柱温为40℃，用电化学检测器在直接模式下，1100mV分析检测待测物，内标法定量。对于全部待测组分r均大于0．99；槲皮素、毛地黄黄酮、山奈酚、芹菜素和异鼠李黄素线性范围分别为3～7000、3～5900、3～7000、5～7000和3～7400nmol／L；检出限为1．4～4．8nmol／L。方法的实际样品加标回收率为86．8％～102．9％；相对标准偏差（RSD）低于7．4％（n=3）。方法简便、快速、准确，可用于芹菜素等黄酮类化合物在人体内的生物利用度及膳食干预研究。

高效液相色谱电化学法测定血清褪黑激素水平

目的 :建立测定血清褪黑激素水平的高效液相色谱方法。方法 :血清褪黑激素用氯仿反复萃取 ,氯仿层经真空干燥、氮气吹干 ,最后残流物溶解进样。用C18反相柱进行色谱分析 ,电化学检测器测定结果。结果 :测定线性范围达 1.72nmol·L-1 ,最低检测限为 0 .0 84nmol·L-1 ,日内变异 4.2 %～ 4.8%,日间变异 4.4%～ 5 .0 %,方法回收率 5 5 .3 %～ 76.5 %。结论 :本方法可用于临床实验室测定血清褪黑激素水平。

高效液相色谱电化学法分析伊立替康对大鼠脑内组胺、5-羟色胺的影响

目的采用高效液相色谱电化学检测法,观察伊立替康(CPT-11)对大鼠脑透析液中的组胺(HA)和5-羟色胺(5-HT)含量的影响。方法将18只SD大鼠随机分组,分别为空白组、生理盐水组、伊立替康(CPT-11)组,采用高效液相色谱-电化学检测的方法检测大鼠脑透析液中组胺和5-羟色胺的含量,研究CPT-11对组胺和5-羟色胺含量的影响。结果大鼠注射CPT-11后脑内的组胺、5-HT含量比空白组及生理盐水组显著升高,随着时间和药物代谢的变化,HA及5-HT表现出一定的时效关系,且给药后分别在162.5min、320min达到顶峰。结论 CPT-11可升高大鼠脑内组胺和5-羟色胺的含量,推测抗癌药CPT-11可能对中枢神经组织中HA、5-HT产生影响,单胺类神经系统可能是CPT-11作用靶点之一使之达到透过血脑屏障的作用。

高效液相色谱电化学法检测PCR实验室环境中溴化乙锭残量

目的：建立检测分子生物学及临床PCR实验室环境中溴化乙锭残量的高效液相色谱电化学法。方法：以正己烷为采样载体对PCR实验室中的操作台、仪器载面等区域进行采样，样本用HCl酸化处理，以CLEAN—UP氧化铝固相萃取柱对样品进行固相萃取，乙腈-乙酸钠溶液作为流动相从Symmetry C8柱上分离和测定溴化乙锭，并借助于电化学检测器于＋750 mV检测。结果：标准曲线的线性范围为5．0～500．0ng／L，平均相对标准偏差为4．8％，检出限为2.9ng／L，平均回收率为87．2％～106．2％。结论：此方法准确、简单、快速、灵敏，适用环境中溴化乙锭残量的检测。

基于多孔石墨碳柱的高效液相色谱法测定电化学合成尿素产物

电化学合成尿素法是一种相对绿色环保的尿素制备方法,其反应产物中,除目标产物尿素外,还含有大量NO_(3)^(-)、NO _(2)^(-)、CO _(3)^(2-)等杂质离子,这些离子易对尿素测定产生干扰。本文基于多孔石墨碳柱特殊的极性保留效应,并结合其柱流失远小于普通反相C18色谱柱、在极低紫外吸收波长下基线稳定的优势,利用多孔石墨碳柱建立了电合成尿素产物中尿素的高效液相色谱分析方法。经过色谱条件优化后,选择Hypercarb TM多孔石墨碳柱(100 mm×4.6 mm,5μm),采用水-25 mmol/L甲基磺酸溶液为流动相进行梯度洗脱分离,柱温为30℃,流速为1.0 mL/min,进样量为25.0μL,检测波长190 nm,可实现不受电解液中其他杂质(如NO_(3)^(-)、NO _(2)^(-)、CO _(3)^(2-)等离子)干扰的尿素测定。结果表明,单次样品分析可在15 min内完成,尿素在0.1~100 mg/L范围内线性关系良好,相关系数(r ^(2))不小于0.9988;方法的检出限(S/N=3)和定量限(S/N=10)分别为0.028 mg/L和0.093 mg/L,低、中、高3个水平下的加标回收率为112.0%~118.4%。采用所建立的方法对实际电化学合成尿素反应液样品进样分析,结果显示尿素色谱峰的峰形较为良好。该方法前处理简单,方便快捷,尿素与其他干扰离子实现了一定程度的分离,结果准确可靠,特异性好,可用于实际电合成尿素电解液产物中微量尿素及其他相关离子的检测。

QuEChERs-超高效液相色谱-串联质谱法快速测定太子参中208种农药残留

建立QuEChERs-超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定太子参中208种农药残留快速检测方法.样品用1%的酸化乙腈溶液提取、盐析,再经无水硫酸镁、十八烷基硅烷键合硅胶(C 18)、乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶(PSA)萃取净化,多反应监测(MRM)测定,外标法定量.208种农药在0.010~0.10 mg·L-1质量浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.990,方法的定量限为0.010 mg·kg-1,在添加农药质量浓度为0.010~0.050 mg·kg-1时回收率为70.1%~120.0%,相对标准偏差(RSD)为0.29%~9.17%(n=6).该方法简单、快捷、精密度和准确度高,能够满足太子参中的208种农药残留的检测要求.

高效液相色谱-电化学检测法研究针刺对家兔血浆及脑组织中单胺类神经递质的影响

通过高效液相色谱 电化学检测法测定了电针刺激家兔肾旁穴前后其血浆及脑组织中单胺类神经递质去甲肾上腺素 (NE)、肾上腺素 (E)、多巴胺 (DA)和 5 羟色胺 (5 HT)含量的变化 ;研究了神经递质的变化与家兔繁殖能力的关系。该实验采用ODS柱 ,流动相为V(0 0 2mol/L柠檬酸三钠 0 0 5mol/L磷酸氢二钠 )∶V(甲醇 ) =95∶5的溶液 ,用电化学检测器检测。实验证明 ,血浆及脑组织中NE ,E ,DA和 5 HT的含量在针刺肾旁穴前后都有了显著的变化 ,说明针刺能激发家兔脑内神经元的活动 ,导致相应的递质含量的变化 ,同时使得血浆中相应含量也发生变化。单胺类神经递质含量的变化能引起动物体内雌激素的增加 ,使兔子的繁殖能力增强。该方法为临床诊断提供了一个简单易行、稳定可靠的生化检验手段。

高效液相色谱-电化学法测定四季青叶中4种化合物的含量

目的:建立同时测定四季青叶中原儿茶酸、咖啡酸、槲皮素和山奈酚4种成分含量的高效液相色谱-电化学(HPLC-ECD)法。方法:采用 Zorbax SB-C_(18)(150 mm×4.6 mm,5.0 μm)色谱柱;以(A)甲醇、(B)水-0.1%醋酸为流动相,梯度洗脱:0min 时 A-B(20:80),9 min 时 A-B(24:76),30 min 时 A-B(50:50),40 min 时 A-B(65:35);流速为0.8 mL·min^(-1),柱温为30℃,电化学检测器的工作电位为0.7 V,采用标准曲线法对4种化合物进行定量。结果:在选定的色谱条件下原儿茶酸、咖啡酸、槲皮素和山奈酚的检出限分别为3,6,2,5 ng,定量限分别为9.1,20.0,7.2,16.0 ng。4种化合物的平均加样回收率均在95.7%～102.6%之间,RSD 在1.6%～2.9%之间。结论:方法简便、准确,可用于同时检测四季青叶中4种化合物的含量。

高效液相色谱电化学检测法测定血清奥氮平浓度

目的 :建立测定血清奥氮平浓度的高效液相色谱电化学检测法。方法 :以奥氮平的同系物LY170 2 2 2为内标 ,待测血清经碱化后 ,乙醚一步提取 ,氮气吹干 ,用定量流动相溶解后进样。采用InertsilODS - 3柱进行分离 ,BIO-RAD16 40型电化学检测器检测 ,检测电压 0 34V。流动相为甲醇与 5 0mmol·L-1KH2 PO4 -Na2 HPO4 缓冲液 (pH =5 98)的混合液 (6 0∶40 )。结果 :被测化合物奥氮平和内标LY170 2 2 2的色谱峰高均与检测电压呈“S”型曲线相关 ,检测电压应大于 0 30V才能得到稳定的峰高。奥氮平与内标峰高比和血清奥氮平浓度直线相关 ,r=0 9999,线性范围 0 5～ 32 μg·L-1。奥氮平的最低检测限 80pg ,最低检测浓度 0 2 5 μg·L-1,提取回收率在 80 %～ 97%之间 ,日内RSD 4 17%～ 5 76 % ,日间RSD 2 8%～ 12 2 1%。结论 :本法具有较高的灵敏度、精密度和特异性 。

高效液相色谱电化学检测法测定猪组织中的克伦特罗

建立了猪组织中克伦特罗的高效液相色谱 电化学检测方法。色谱柱为DiscoveryC18柱(5μm,4 6mmi.d.×250mm);流动相为1.7mmol/L氯化锂 甲酸 甲醇(体积比为65∶1∶34)混合溶液,流速为1 0mL/min;柱温为40 0℃;电化学检测器工作电位为1 25V。猪组织中克伦特罗含量为0 5～500ng/g时,克伦特罗的含量与其峰面积之间存在良好的线性关系(r>0 99),在组织中按0 5,50,500ng/g3个添加水平做克伦特罗的回收率试验,其回收率为75 8%～87 1%(n=4)。该方法重现性好,灵敏度高,简便,可用于猪的肌肉、肺脏、肝脏、肾脏及脂肪组织中克伦特罗残留的检测。

血清及脑组织中单胺类神经递质高效液相色谱电化学检测方法研究

目的建立一种快速准确测定大鼠血清及脑组织中单胺类神经递质去甲肾上腺素（NE）、肾上腺素（E）、多巴胺（DA）和5-羟色胺（5-HT）含量的高效液相色谱-电化学检测方法.方法采用ODS柱,流动相为缓冲液（0.02mol/L柠檬酸三钠和0.05mol/L磷酸氢二钠）：甲醇=85：15的溶液,流速1.0ml/min.结果四种神经递质保留时间的RSD在0.29%～0.67%之间、峰面积RSD在0.09%～0.36%之间,重现性好.4种回收率在85.3%～95.4%之间,检测限NE为0.083ng/ml、E为0.51ng/ml、DA为0.046ng/ml、5-HT为0.078ng/ml,线性范围NE在1.0～100 ng/ml之间、E为5.0～80ng/m之间、DA为1.0～80ng/ml之间、5-HT为1.0～60ng/ml之间,相关系数在0.996～0.999之间.结论该方法为单胺类递质的神经毒理学、药理学等研究提供了一个简单灵敏、稳定可靠的方法.

高效液相色谱-电化学检测法测定脱氧核糖核酸分子氧化损伤标志物8-羟基脱氧鸟苷

采用螯合剂 Fe2 + H2 O2 作为Fenton型反应的氧化源 ,与小牛胸腺脱氧核糖核酸反应生成 8 羟基脱氧鸟苷 ( 8 OhdG) ,建立脱氧核糖核酸 (DNA)分子氧化损伤的体外反应模型 ,用高效液相色谱 电化学检测方法对 8 OhdG进行定量。建立的方法灵敏度高 ,最低检出限 30fmol,线性范围宽 ,从 0 .32pmol到3.2nmol,相关系数达 0 .9996,方法能够适用于生物体与细胞脱氧核糖核酸分子低水平氧化损伤的检测。

高效液相色谱-电化学检测法测定金荞麦饮片中表儿茶素的含量

目的：建立可测定金荞麦饮片中表儿茶索含量的高效液相色谱-电化学检测法。方法：采用Diamonsil C18（4．6mm×250mm，5μm）柱，流动相甲醇-0．1mol·L^-1磷酸盐缓冲液（1：3，pH2．5），流速1．0mL·min^-1，柱温35℃，参比电极ISAAC（in-situ silver／silver chloride），工作电极玻碳电极，检测电位＋600mV。结果：表儿茶素的线性范围为0．004875～1．56μg，r=0．9999；平均回收率为100．7％，RSD 1．9％（n=5）。9批不同市售来源的金养麦饮片中表儿茶素的含量存在差异。结论：该方法重复性好，可以用来测定金荞麦饮片中表儿茶素的含量。

复方丹参片中四种成分的高效液相色谱-电化学检测-紫外检测法分析

建立了电化学检测器与二极管阵列检测器联用的液相色谱(HPLC-ECD-DAD)同时分离和测定复方丹参片中原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸和丹参酮ⅡA 等4种成分的分析方法.采用Zorbax SB-C18柱(150 mm×4.6 mm i.d.,5.0 μm),以甲醇和0.4%磷酸为流动相(流速1.0 mL/min)进行梯度洗脱;ECD检测电压0.7 V,DAD检测波长270 nm,柱温30 ℃.实验结果表明,原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸和丹参酮ⅡA质量浓度分别为0.3～9.0 mg/L,1.1～54.0 mg/L,1.1～11.1 mg/L和5.2～52.0 mg/L时与其峰面积呈良好的线性关系(线性相关系数均高于0.999),原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸和丹参酮ⅡA的平均回收率(n=6)分别为97.8%(相对标准偏差(RSD)为2.15%),98.2%(RSD为2.07%),97.6%(RSD为2.18%)和97.2%(RSD为2.07%).该法同时利用了ECD和DAD的优点,是一种快速、灵敏、准确的分析方法,可以为复方丹参片的质量控制提供科学依据.

高效液相色谱/电化学法测定大鼠血液和脑组织中单胺类物质的含量

建立了高效液相色谱／电化学检测法测定大鼠脑组织和血液中单胺递质及其代谢产物的方法。能同时测定去甲肾上腺素（NE）、肾上腺素（E）、3，4-二羟基苯乙酸（DOPAC）、多巴胺（DA）、高香草酸（HAV）、5-羟色胺（5-HT），并能和内标3，4-二羟卞胺（DHBA）分离良好。本方法快速、简便，回收率为92％-105％，线性范围2．8-680ng／mL，检出限为0．05ng（S／N=3）。本方法已应用在服用中药的大鼠下丘脑组织及血液的测定中，数据显示，本法能满足测定要求。

高效液相色谱电化学法测定血间甲肾上腺素类物质方法的建立及临床应用

嗜铬细胞瘤是以儿茶酚胺大量分泌为特征的肿瘤。研究发现 ,与儿茶酚胺等测定指标相比较 ,间甲肾上腺素类物质 (MNs)具有更高的敏感性和特异性。本研究用高效液相色谱电化学分析法建立了血MNs的测定方法 ,并对 40名健康人及 2 6名经病理证实的嗜铬细胞瘤患者进行了血MNs的测定 ,MNs水平在嗜铬细胞瘤患者中与临床、病理符合率为 10 0 %。

微渗析活体取样-高效液相色谱电化学检测法测定鼠脑中的单胺类神经递质

采用微渗析活体取样技术和高效液相色谱电化学检测法,测定了鼠脑纹状体中的3种单胺类神经递质多巴胺(DA)、3,4二羟基苯乙酸(DOPAC)和5羟吲哚乙酸(5HIAA)。在3.0×10-8～1.0×10-5mol/L浓度范围内,DA、DOPAC和5HIAA的浓度分别与氧化峰的峰电流呈良好的线性关系。通过在灌流液中加入1.0×10-5mol/L的NO释放剂硝普钠(SNP),研究了NO对DA释放的影响,结果表明:受NO刺激后纹状体中DA的量为基础水平的150%。

高效液相色谱-电化学法测定双黄连粉针中黄芩甙和黄芩素的含量

采用高效液相色谱法，以电化学检测测定双黄连粉针中黄芩甙和黄芩素的含量。流动相０１ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾乙酸四氢呋喃（１０００∶１００∶１９０），色谱柱ＥＲＣＯＤＳ１１６１（６ｍｍ×１００ｍｍ），检测电压＋６５０ｍＶ，柱温５５℃，流速０８ｍｌ／ｍｉｎ。结果：本法的最小检测限为２５ｎｇ和５０ｎｇ，平均回收率为１００１％和９９７％，重现性好。本法测定快速、简便、准确，适用于含黄芩甙和黄芩素的中药材和制剂的含量测定。

高效液相色谱－电化学检测法同时测定血浆中5－羟色胺和5－羟吲哚乙酸

高效液相色谱－电化学检测法同时测定血浆中５－羟色胺和５－羟吲哚乙酸唐爱国，吴轰，高洁生，杨锡兰（湖南医科大学附属第二医院中心实验室长沙４１００１１）１前言测定血液中的５－羟色胺（５－ＨＴ）和５－羟吲哚乙酸（５－ＨＩＡＡ）可为多种疾病的诊断和治疗以及精...