液相色谱检测器联用技术在中药分析中的应用进展

目的:了解液相色谱检测器联用技术在中药分析中的现状,为其进一步应用提供参考。方法:在中国知网、万方、维普、PubMed等数据库中查找相关文献,梳理中药分析常用检测器联用现状及存在问题。结果与结论:液相系统适配多种检测器,包括紫外-可见分光检测器(UVD)、荧光检测器(FLD)、蒸发光散射检测器(ELSD)、电喷雾检测器(CAD)、示差折光检测器(RID)、质谱检测器(MSD)等,适用于大部分化合物分析。但是,单一检测器色谱峰容量有限,无法满足中药多组分同时准确测定需求。UVD与ELSD、FLD、CAD、MSD等联用,可同时分析多种不同特性的化合物,提高检测准确度。检测器联用技术已应用于中药含量测定、指纹图谱建立、炮制工艺及血清药物化学研究等方面,为中药分析提供强有力的手段。

高效液相色谱-蒸发光散射检测器联用法测定婴幼儿配方乳粉中胆碱的含量

目的建立一种以高效液相色谱-蒸发光散射检测器联用测定婴幼儿配方乳粉中胆碱含量的方法。方法样品以ZORBAX 300 SCX阳离子交换柱（4.6 mm×250 mm,5μm）分离,用三乙胺水溶液-乙腈（80∶20,V/V）作为流动相洗脱,蒸发光散射检测器检测。结果胆碱的检测限为4μg/ml,线性相关系数（r）为0.998 1,加标回收率在94.98%～100.90%之间,且日内精密度（RSD日内）和日间精密度（RSD_（日间））分别为2.75%和3.12%。结论本方法操作简便、回收率高、准确度好、可缩短试验时间且目标峰峰形窄而对称,适用于对婴幼儿配方乳粉中胆碱的测定。

高效液相色谱-蒸发光散射检测器和二极管阵列检测器分析总状升麻中的成分

总状升麻(Cimicifuga racemosa)已被美国政府批准作为治疗更年期综合征的一种替代药品。本次采用高效液相色谱法、流线蒸发光散射检测器和二极管阵列检测器，对总状升麻中的18个主要成分进行了分析，成分包括咖啡酸、阿魏酸、异阿魏酸、升麻苷H-1、cimiracemoside A、升麻苷H-2、(26R)-actein、26-去氧升麻苷、

HPLC-UV-ELSD同时检测新型催泪喷射器中的合成辣椒素与吐温20

为检测警用催泪喷射器中合成辣椒素和吐温20的质量浓度,建立了一种紫外与蒸发光散射检测器联用的高效液相色谱方法(HPLC-UV-ELSD).其中紫外检测器检测合成辣椒素(SC)、蒸发光散射检测器检测吐温20.检测条件为:流动相为甲醇:水(80∶20),流速1 mL/min,紫外检测波长280 nm,柱温28℃;蒸发光散射检测器空气载气流量2.5 L/min,漂移管温度为60℃,雾化载气流压力设置为0.5 MPa.在合成辣椒素质量浓度为196~980μg/mL范围内,吐温20在质量浓度为212~1 060μg/mL范围内呈良好的线性关系(R^2>0.999),回收率均在90%~110%范围内.本方法已成功应用于实际警用催泪喷射器填充剂的检测.

高效液相色谱法测定清肝利胆口服液中5种成分的含量

目的建立HPLC法测定清肝利胆口服液中5种成分的含量。方法高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)测定绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙的含量;高效液相色谱-二极管阵列检测器法(HPLC-DAD)测定粉防己碱、防己诺林碱的含量。结果5种成分实现完全分离;上述成分进样量的线性范围分别为0.35~8.98μg(r=0.9993)、1.24~18.62μg(r=0.9992)、0.15~3.91μg(r=0.9997)、0.08~7.86μg(r=0.9999)、0.10~10.57μg(r=1.0000)。平均加样回收率(n=6)分别为100.30%,99.50%,102.17%,97.87%,98.84%。5批样品中上述5个成分的含量范围分别为:1.66~2.59,6.08~9.04,0.77~1.97,0.02~0.04,0.11~0.15 mg/ml。结论本法可为制定清肝利胆口服液的质量标准提供参考。

金匮肾气丸总苷类成分HPLC-DAD-ELSD指纹图谱的建立

目的以马钱苷为参照物建立金匮肾气丸总苷类成分的指纹图谱。方法采用二极管阵列检测器-蒸发光散射检测器(DAD-ELSD)串联技术,乙腈-1%冰醋酸为流动相(梯度洗脱),流速0.5 mL·min^(-1),柱温30℃,漂移管温度90℃,气体压力为207 kPa。结果DAD图谱中有12个共有峰,ELSD图谱中有16个共有峰,确定其为指纹峰。采用国家药典委员会指纹图谱自动处理系统,10批样品的相似度均大于0.90。结论该方法简便,稳定,重现性好。适用于金匮肾气丸总苷类的指纹图谱检测。

HPLC-DAD-ELSD法测定丹膝颗粒中8种成分的含量

目的:建立HPLC-DAD-ELSD法测定丹膝颗粒中8种成分的含量。方法:色谱柱:CAPCELL PAK C18 MGⅡ(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-0.05%甲酸溶液,梯度洗脱;流速:0.8 ml·min^(-1);柱温:35℃;进样量:10μl。结果:没食子酸、栀子苷、丹酚酸B、淫羊藿苷、丹皮酚、丹参酮ⅡA、人参皂苷Ro、橙黄决明素进样量分别在0.10~1.25μg、0.20~2.50μg、0.40~5.00μg、0.10~1.25μg、0.20~2.50μg、0.03~0.38μg、0.03~0.38μg、0.03~0.38μg(r为0.9989~0.9999)范围内与峰面积呈良好线性关系,平均回收率分别为99.5%,100.1%,98.0%,101.2%,98.9%,99.3%,98.5%,97.8%(RSD<2.0%,n=6)。结论:该方法操作简便、结果可靠,重复性好,可用于丹膝颗粒的质量控制。

HPLC-DAD-ELSD法同时测定复方吐温软膏中硫酸新霉素与盐酸达克罗宁的含量

目的：建立同时测定复方吐温软膏中硫酸新霉素与盐酸达克罗宁含量的HPLC-DAD-ELSD法。方法：采用 Agilent ZOR BAXSB-C18色谱柱（250 mm ×4.6 mm,5μm）,以含0.1 mol·L-1三氟乙酸的水溶液、乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 ml·min-1,DAD的检测波长为282 nm,ELSD的漂移管温度为50℃,雾化温度为60℃,载气流速为1.6 L·min-1,柱温为35℃。结果：硫酸新霉素检测浓度的线性范围为141.540~323.520μg·ml-1（r=0.9996）,平均回收率为98.87%,RSD=0.95%（n=9）；盐酸达克罗宁检测浓的线性范围为28.000~64.000μg·ml-1（r=0.9996）,平均回收率为99.57%,RSD=1.10%（n=9）。结论：该方法结果准确、灵敏度高、重复性好,在同一色谱条件下实现了复方吐温软膏中全部有效成分的含量测定,为其质量控制提供了依据。

色谱指纹图谱在区分3种引种松果菊中的应用

用高效液相色谱-二极管阵列检测(HPLC-DAD)技术,建立了同时满足不同品种松果菊指纹图谱测定要求的色谱条件,以及紫花松果菊花的色谱指纹图谱模型.用DAD最大值化技术和蒸发光散射检测器(ELSD)评估检测结果并验证指纹图谱的信息量.用采集的色谱-光谱信息和对照品推断及确定特征成分.紫花松果菊花模板的色谱峰个数达到总个数的88%,信息量达到总量的63%.该研究提出评估指纹图谱模板质量的思路,并为区分易混淆的植物药材提供了一种新的合理、可靠的方法模式.

HPLC-DAD-ELSD法测定黄芪经九州虫草双向固体发酵前后8种成分的含量

目的:建立同时测定黄芪经九州虫草双向固体发酵前后毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪皂苷Ⅳ、异黄芪皂苷Ⅱ、环黄芪醇、异黄芪皂苷Ⅰ等8种成分含量的方法,并探讨发酵处理对黄芪中上述8种成分含量的影响。方法:采用高效液相色谱-二极管阵列检测器-蒸发光检测器联用技术(HPLC-DAD-ELSD)进行含量测定。色谱柱为Agilent 5 TC-C18;流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱;流速为1 mL/min;柱温为30℃;DAD检测波长为260 nm;ELSD蒸发管温度为100℃;雾化器温度为80℃;载气流速为1.6 L/min;进样量为15μL。结果:8种成分在各自质量浓度范围内线性关系良好(R2均大于0.9990);精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于3%(n=3或n=6);平均加样回收率为97.88%~101.32%,RSD为1.22%~2.39%(n=6)。以未发酵黄芪中相应成分含量为100%计算,经九州虫草双向固体发酵后,黄芪中毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪皂苷Ⅳ、异黄芪皂苷Ⅱ、环黄芪醇、异黄芪皂苷Ⅰ的含量变化率分别为-98.51%、-96.41%、-94.74%、-96.40%、289.20%、20.25%、-75.05%、562.46%。结论:黄芪经过九州虫草发酵后,有利于增加其主要活性成分黄芪皂苷Ⅳ、异黄芪皂苷Ⅰ、异黄芪皂苷Ⅱ的含量。

HPLC-DAD-ELSD法测定补阳还五汤中8个活性成分含量

目的建立高效液相色谱-二极管阵列检测器-蒸发光散射检测器(HPLC-DAD-ELSD)法同时测定补阳还五汤中羟基红花黄色素A、芍药苷、毛蕊异黄酮苷、阿魏酸、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素和黄芪甲苷8个活性成分含量的方法。方法采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸为流动相,梯度洗脱,流速1.0 ml/min,柱温30℃,检测波长230 nm(芍药苷)、254 nm(毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素)、322 nm(阿魏酸)和403 nm(羟基红花黄色素A),蒸发光散射检测器漂移管温度60℃,载气流速1.6 L/min。结果羟基红花黄色素A、芍药苷、毛蕊异黄酮苷、阿魏酸、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素和黄芪甲苷分离度良好,线性关系符合要求(r=0.9940~0.9999),平均回收率为97.8%~101.4%,RSD为1.28%~3.70%。结论该方法简便、稳定、重复性良好,可用于补阳还五汤的质量控制。

HPLC-DAD-ELSD法同时测定黄芪中5个成分的含量

目的:建立HPLC-DAD-ELSD法同时测定黄芪药材中黄酮类和皂苷类成分的方法,比较15批不同产地的黄芪药材中各有效成分的含量。方法:采用HPLC-DAD-ELSD联用法,乙腈和水不同比例梯度洗脱,流速1 mL.min-1,检测波长254nm;蒸发光散射检测器(ELSD)漂移管温度112.8℃,载气流速3.2 L.min-1,同时测定黄芪药材中毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪甲苷(黄芪皂苷Ⅳ)、黄芪皂苷Ⅱ和黄芪皂苷Ⅲ的含量。结果:通过1次进样,同时测定了2个黄酮类和3个皂苷类等成分的含量,且线性关系良好(r=0.9992～0.9999)。平均回收率为99.1%～100.9%。结论:该方法简便,重复性好,可用于黄芪药材中黄酮类和皂苷类成分的同时测定,也可用于黄芪药材的质量控制。

复方五仁醇胶囊主要成分的定性定量分析

目的:对复方五仁醇胶囊所含主要成分进行定性定量分析,为该制剂药效物质研究奠定基础。方法:使用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)和超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测相结合进行成分定性分析,分别采用紫外检测器和蒸发光散射检测器测定主要木脂素类和皂苷类成分的含量。结果:液相色谱图显示峰面积大于总峰面积0.1%的成分27个,通过对照品比对鉴定出三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素8个成分,结合文献资料初步推测出米辛J、戈米辛N和五味子丙素3个成分;UPLC-MS/MS分别鉴定出木脂素类成分8个,其中包括戈米辛J、戈米辛N和五味子丙素。分别建立了同时测定5种木脂素类成分和3种皂苷类成分含量的方法。结论:复方五仁醇胶囊主要成分包括木脂素和皂苷两大类,以木脂素类成分为主,这两类成分可能是该制剂的主要药效物质。

大粒车前子多糖酸水解产物的分析

经水提、醇沉、Sevag除蛋白后得到精制大粒车前子多糖(Plantago a siatica L.polysaccharide,PLP),采用0.3 mol/L三氟乙酸对PLP进行部分酸水解。建立超高效液相色谱-蒸发光散射检测器技术筛选较优水解条件的方法,同时运用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用法分析产物。结果表明:车前子多糖除蛋白后多糖含量为68.56%。在水解温度90℃、水解时间1.5 h条件下,能够得到比较多的水解产物,经超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用分析鉴定,水解产物中含有单糖、二糖至低聚六糖,并且存在戊糖和己糖相互连接的片段,但并未发现多个己糖相互连接的片段。

不同厂家肝速康胶囊在两种溶出介质中的溶出曲线比较

目的：考察不同厂家肝速康胶囊中的齐墩果酸在两种不同介质中的溶出行为,为评价药品质量提供依据。方法：参照日本《医疗用药品品质情报集》中的溶出度试验条件,并根据肝速康胶囊处方成分的理化性质对溶出介质进行筛选,采用《中国药典》2010年版二部附录XC第一法装置,分别测定3个厂家7个不同批号的肝速康胶囊在pH 6.8磷酸盐缓冲液（含0.25%十二烷基硫酸钠）和水（含0.25%十二烷基硫酸钠）中的溶出曲线；用HPLC-ELSD法对齐墩果酸的溶出度进行测定。结果：齐墩果酸在2.0-40.0 mg·ml-1浓度范围内呈良好线性关系,在两种不同溶出介质中齐墩果酸的回收率均在98%以上且溶出均一性良好；7个不同批号肝速康胶囊主要成分齐墩果酸水中的溶出曲线基本一致,pH 6.8磷酸盐缓冲液中溶出曲线则有较大差异。结论：作为肝速康胶囊的溶出介质,pH6.8磷酸盐缓冲液比水更能体现肝速康胶囊不同来源和不同批次间的溶出差异；该方法简便、准确,重复性好,可用于该胶囊的溶出度测定。

薏苡仁油融合指纹图谱研究

目的建立薏苡仁油的融合指纹图谱。方法薏苡仁油经气相色谱-质谱联用(GC-MS)和高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ELSD)检测,2种分析方法所得数据进行峰面积标准化处理,运用中药色谱指纹图谱相似度评价软件进行指纹图谱融合。结果薏苡仁融合指纹谱获得21个共有峰,GC-MS技术鉴定出13种脂肪酸酯类成分;HPLC-ELSD法检测部分得到8个共有峰。结论融合指纹图谱的整体性好,信息量大,结合质谱技术部分消除了单一测定方法指纹图谱的模糊性,为中药质量控制研究提供了一定的参考。

青霉胺片的有关物质分析

目的:建立青霉胺片的有关物质检测方法,并分析国产青霉胺片的有关物质质量及存在的问题。方法:建立HPLC-ELSD法检测31批次青霉胺片和6批次青霉胺原料的有关物质,色谱柱为GRACE Apollo C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm),流速0.6 mL·min^(-1),柱温25℃,进样量20μL。采用二维色谱柱切换HPLC-MS^(n)法推测6个杂质的化学结构并分析其来源,并采用ADMET Predictor软件对这6个杂质进行毒性预测。结果:青霉胺片的有关物质个数和含量均远高于原料。推测的6个杂质中,青霉胺二硫化物为已知杂质,其余5个为未知杂质,所有杂质均为降解杂质。ADMET Predictor软件毒性预测结果显示4个杂质的毒性均较青霉胺大,2个杂质的毒性与青霉胺相当。结论:建立的HPLC-ELSD法可有效检测青霉胺片的有关物质。制剂中的杂质主要来源于制剂的生产过程。青霉胺片有关物质的风险比较大,根据各杂质的毒性预测结果,建议制剂生产企业应高度重视制剂生产的各个环节。