高效液相色谱-库仑电化学检测法对多种脂溶性维生素及营养物质的分析

〔目的〕建立快速分析多种脂溶性维生素及营养物质的检测方法 ,准确分析多种脂溶性维生素及营养物质的水平。〔方法〕采用美国ESA公司的高效液相色谱—库仑电化学检测器 (HPLC -CoulArrayDetector)及天津医科大学和天津大学共同研制的血清脂溶性维生素提取试剂盒。〔结果〕对多种脂溶性维生素A(视黄醇 )、维生素D2 (麦角钙化醇 )、维生素D3 (胆钙化醇 )、维生素E(α -生育酚和γ -生育酚 )、维生素K1(叶绿醌 )、类胡萝卜素 (α -胡萝卜素和 β -胡萝卜素 )、类维生素A(维生素A棕榈酸盐 )、生育酚乙酸酯和营养物质辅酶Q10 (泛醌 )进行同时检测。〔结论〕多通道EC -HPLC检测脂溶性维生素 ,因其操作简便 ,灵敏度高 ,准确性强 ,可作为临床对脂溶性维生素分析的可靠方法。

高效液相色谱-库仑电化学检测法定量测定小鼠血浆中CTN986

目的 建立血浆中CTN986的定量测定方法，为药物代谢研究提供技术手段。方法 采用HPLC-库仑电化学色谱方法，Diamonsil^TM（钻石）C18（4．6mm×200mm，5μm）色谱柱，0．2mol·L^-1磷酸二氢钠-甲醇（60：40）为流动相，Coulochem Ⅲ电化学检测器，Model 5010 Analytical cell为检测手段，以峰面积定量。结果检测下限为150μg·L^-1，定量下限为390μg·L^-1，方法线性范围为0．390—12．5，12．5—50mg·L^-1；在1．563，6．25，12．5，25mg·L^-1 4种质量浓度平均回收率为53．43％；日内、日间平均RSD为1．03％，2．28％。结论 该方法灵敏度高，方法操作简便，可满足药动学研究的要求。

复方丹参片中四种成分的高效液相色谱-电化学检测-紫外检测法分析

建立了电化学检测器与二极管阵列检测器联用的液相色谱(HPLC-ECD-DAD)同时分离和测定复方丹参片中原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸和丹参酮ⅡA 等4种成分的分析方法.采用Zorbax SB-C18柱(150 mm×4.6 mm i.d.,5.0 μm),以甲醇和0.4%磷酸为流动相(流速1.0 mL/min)进行梯度洗脱;ECD检测电压0.7 V,DAD检测波长270 nm,柱温30 ℃.实验结果表明,原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸和丹参酮ⅡA质量浓度分别为0.3～9.0 mg/L,1.1～54.0 mg/L,1.1～11.1 mg/L和5.2～52.0 mg/L时与其峰面积呈良好的线性关系(线性相关系数均高于0.999),原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸和丹参酮ⅡA的平均回收率(n=6)分别为97.8%(相对标准偏差(RSD)为2.15%),98.2%(RSD为2.07%),97.6%(RSD为2.18%)和97.2%(RSD为2.07%).该法同时利用了ECD和DAD的优点,是一种快速、灵敏、准确的分析方法,可以为复方丹参片的质量控制提供科学依据.

高效液相色谱-电化学检测法测定金荞麦饮片中表儿茶素的含量

目的：建立可测定金荞麦饮片中表儿茶索含量的高效液相色谱-电化学检测法。方法：采用Diamonsil C18（4．6mm×250mm，5μm）柱，流动相甲醇-0．1mol·L^-1磷酸盐缓冲液（1：3，pH2．5），流速1．0mL·min^-1，柱温35℃，参比电极ISAAC（in-situ silver／silver chloride），工作电极玻碳电极，检测电位＋600mV。结果：表儿茶素的线性范围为0．004875～1．56μg，r=0．9999；平均回收率为100．7％，RSD 1．9％（n=5）。9批不同市售来源的金养麦饮片中表儿茶素的含量存在差异。结论：该方法重复性好，可以用来测定金荞麦饮片中表儿茶素的含量。

高效液相色谱-电化学(库仑电极)阵列检测技术用于植物内源激素等小分子物质的差异显示

以壳寡糖为诱导物处理烟草植株,利用高效液相色谱 电化学(库仑电极)阵列检测技术检测不同处理时间植物体内内源激素的变化情况及其他小分子物质的差异显示。所用色谱柱为HypersilBDSC18柱(4.6mmi d ×200mm,5μm),八通道电化学阵列检测器(八个电极)的检测电势依次为-200,300,400,500,600,700,800,850mV。结果表明,茉莉酸(JA)和赤霉酸(GA)含量在用壳寡糖处理6h时达到高峰,吲哚乙酸(IAA)含量在处理8h时达到高峰。处理后烟草植株产生的其他一些未知的小分子物质尚有待定性和进一步考察其变化规律。

微渗析活体取样-高效液相色谱电化学检测法测定鼠脑中的单胺类神经递质

采用微渗析活体取样技术和高效液相色谱电化学检测法,测定了鼠脑纹状体中的3种单胺类神经递质多巴胺(DA)、3,4二羟基苯乙酸(DOPAC)和5羟吲哚乙酸(5HIAA)。在3.0×10-8～1.0×10-5mol/L浓度范围内,DA、DOPAC和5HIAA的浓度分别与氧化峰的峰电流呈良好的线性关系。通过在灌流液中加入1.0×10-5mol/L的NO释放剂硝普钠(SNP),研究了NO对DA释放的影响,结果表明:受NO刺激后纹状体中DA的量为基础水平的150%。

高效液相色谱-电化学检测法测定脱氧核糖核酸分子氧化损伤标志物8-羟基脱氧鸟苷

采用螯合剂 Fe2 + H2 O2 作为Fenton型反应的氧化源 ,与小牛胸腺脱氧核糖核酸反应生成 8 羟基脱氧鸟苷 ( 8 OhdG) ,建立脱氧核糖核酸 (DNA)分子氧化损伤的体外反应模型 ,用高效液相色谱 电化学检测方法对 8 OhdG进行定量。建立的方法灵敏度高 ,最低检出限 30fmol,线性范围宽 ,从 0 .32pmol到3.2nmol,相关系数达 0 .9996,方法能够适用于生物体与细胞脱氧核糖核酸分子低水平氧化损伤的检测。

高效液相色谱/电化学检测法测定大鼠下丘脑的组胺和5-羟色胺

采用高效液相电化学检测的方法测定了大鼠下丘脑内组胺和5_羟色胺。色谱柱为NUCLEOSILRC18(250mm×4mm ,10μm) ,流动相 :磷酸二氢钠溶液 (25mmol/L ,内含乙二胺四乙酸二钠0.5mmol/L ,辛烷磺酸钠3mmol/L,pH4.8) -乙腈=100∶14(体积比 ) ,流速0.8mL/min,检测电位0.6V。大鼠下丘脑匀浆液经低温高速离心 ,上清液直接进样测定5_羟色胺 ,另取上清液衍生后进样测定组胺。组胺在0.075～1.8μg/mL ,5_羟色胺在0.0625～1.25μg/mL浓度范围内 ,线性关系良好。组胺测定的日内和日间相对标准偏差分别小于1.0%和11.4 %,5_羟色胺测定的日内和日间相对标准偏差分别小于3.4 %和6.3 %,两者回收率分别为94.1 %～102.3%和72.8 %～89.1 %。正常雄性SD大鼠下丘脑内组胺和5_羟色胺的平均含量分别为0.280±0.029μg/mL和0.224±0.068μg/mL。本法简便、准确、快捷 。

高效液相色谱-电化学检测法测定生物样品中单胺类神经递质及其代谢产物

[目的]建立一种简单、快速、灵敏的测定生物样品中单胺类神经递质及其代谢产物的高效液相色谱方法。[方法]色谱柱采用WatersC18反相色谱柱(3.9mm×150mm,5μm),流动相为水相(每500mL中含辛烷磺酸钠1.25g,磷酸二氢钾6.8g,乙二胺四乙酸18mg,pH值3.3)∶甲醇∶乙腈=78∶19∶3,流速为0.8mL/min,柱温35℃;电化学检测器工作电极为玻璃碳电极,参比电极为银/氯化银(Ag/AgCl)电极,工作电压为0.7V。[结果]5种物质保留时间分别为:去甲肾上腺素3.6min,5-羟吲哚乙酸4.5min,高香草酸5.2min,多巴胺6.2min,5-羟色胺11.9min;线性范围均为20～1000μg/L,最低检测限为4～8μg/L。[结论]此方法测定生物样品中的单胺类神经递质及其代谢产物,简便,快速且灵敏度高。

CTMAB对反相高效液相色谱-电化学检测法测定水中痕量酚类化合物的增敏、增稳作用

研究了阳离子表面活性剂CTMAB对高效液相色谱 -电化学检测法测定水中痕量酚类化合物的增敏、增稳作用。流动相中CTMAB的最佳浓度为 0 .80mmol/L。使用NucleosilC8色谱柱 (2 0 0mm× 4 .6mmi.d .) ,流动相为甲醇 - 0 .0 2 5mol/L邻苯二甲酸氢钾缓冲液 (体积比为 6 0∶4 0 ,pH =5 .0 ,含 0 .0 6mmol/LEDTA、0 .80mmol/LCTMAB)。该方法测定苯酚、4 氯苯酚、2 ,4 二氯苯酚、2 ,4 ,5 三氯苯酚的线性范围分别为 0 .10～ 15 .0 0、0 .15～ 12 .5 0、0 .15～ 2 2 .5 0、0 .30～ 5 0 .0 0 μg/mL ,检出限分别为 0 .0 0 8、0 .0 10、0 .0 16、0 .0 34μg/mL ,测定结果的相对标准偏差分别为 7.0 %、7.2 %、6 .0 %、7.0 % ,回收率分别为 4 8.0 %、80 .0 %、76 .0 %、85 .0 %。

库仑阵列电化学-高效液相色谱法同时检测大鼠不同脑区中的8种单胺类神经递质

目的建立库仑阵列电化学-高效液相色谱法同时测定大鼠海马、皮质、下丘脑中8种单胺类神经递质的分析方法。方法采用库仑阵列电化学高效液相色谱仪检测,以内标法测定大鼠不同脑区中单胺类神经递质及其相关代谢产物的含量。结果 8种单胺类神经递质在本实验条件下线性关系良好,最低检测限在0.245～0.330μg/L之间,平均回收率均在87.0%～98.3%之间,大鼠不同脑区中8种单胺类神经递质的含量均在28.2～2472.8 ng/g之间。结论该方法具有操作简便、快速、准确、灵敏、分离度好、仪器稳定等优点,可以用于大鼠不同脑区8种单胺类神经递质的同时检测与分析。

高效液相色谱-电化学检测法研究大蒜素对百草枯中毒小鼠脑组织中单胺类神经递质含量的影响

建立了单胺类神经递质的高效液相色谱-电化学检测方法,探讨了大蒜素对百草枯中毒小鼠脑组织内的单胺类神经递质及其代谢产物的影响。健康ICR小鼠随机分为4组:正常对照(Con)组、大蒜素(DAS)组、百草枯染毒(PQ)组和大蒜素治疗(PQ+DAS)组,每组6只。PQ组灌胃PQ 35 mg/kg建立中毒模型,Con组和DAS组灌服同体积生理盐水。DAS组和PQ+DAS组小鼠于造模2、26、50 h后腹腔内各注射1次DAS(25 mg/kg),PQ组和正常组小鼠腹腔内注射等量无菌生理盐水。造模12 h后处死小鼠。收集小鼠脑组织样品并称重,处理后进样。色谱分析采用Acclaim 120 C18(150 mm×2.1 mm,3μm)色谱柱,以离子对缓冲盐溶液-甲醇(93∶7,体积比)为流动相,流速为0.27 m L/min;电化学检测器检测,工作电压为450 m V。结果表明,与正常组和DAS组比较,PQ组部分神经递质水平降低;DAS治疗后能够改变上述生化指标的变化;与PQ组相比,PQ+DAS组神经递质含量增高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。脑组织样品中5-HT、DA、5-HIAA、DOPAC和HVA低、中、高3水平的加标回收率均为79.8%~112.1%,相对标准偏差(RSD)小于10%。实验表明,大蒜素对百草枯中毒后小鼠体内含量降低的神经递质有明显的上调作用。

高选择性高效液相色谱-电化学检测法测定丹参中5种酚类物质（英文）

发展了一种高灵敏度的高效液相色谱-电化学检测(HPLC-ECD)方法,用于丹参中5种酚类物质的定量分析。为了获得较高的检测灵敏度,对流动相的pH、缓冲溶液类型和浓度、有机相种类和梯度以及流速做了系统研究。在较低的pH(2.8)、较低的缓冲盐浓度(20 mmol/L NaH2PO4)和较缓的乙腈梯度下,以0.2 mL/min流速可为5种酚类的分离检测提供较好的分离度和较高的检测灵敏度。在获得优化的分离参数后,将其用于14批丹参药材中5种酚类物质的定量分析。结果表明,该方法可获得较好的回收率(>95%)、较宽的线性范围(高达4个数量级)、较好的重复性(RSD<4.01%)和较高的灵敏度(咖啡酸的LOQ低至1.5μg/L)。与紫外检测方法相比,ECD检测方法具有更高的选择性,可减少非抗氧化活性的物质的干扰。

高效液相色谱电化学检测法测定猪组织中的克伦特罗

建立了猪组织中克伦特罗的高效液相色谱 电化学检测方法。色谱柱为DiscoveryC18柱(5μm,4 6mmi.d.×250mm);流动相为1.7mmol/L氯化锂 甲酸 甲醇(体积比为65∶1∶34)混合溶液,流速为1 0mL/min;柱温为40 0℃;电化学检测器工作电位为1 25V。猪组织中克伦特罗含量为0 5～500ng/g时,克伦特罗的含量与其峰面积之间存在良好的线性关系(r>0 99),在组织中按0 5,50,500ng/g3个添加水平做克伦特罗的回收率试验,其回收率为75 8%～87 1%(n=4)。该方法重现性好,灵敏度高,简便,可用于猪的肌肉、肺脏、肝脏、肾脏及脂肪组织中克伦特罗残留的检测。

高效液相色谱-电化学检测指纹图谱鉴别3种单花种蜂蜜花源

基于高效液相色谱-电化学检测器(high performance liquid chromatography-electrochemical detection,HPLC-ECD)技术建立一种新的蜂蜜花源鉴别方法。以采自中国不同地区的3种单花种蜂蜜为研究对象,构建了3种单花种蜂蜜的HPLC-ECD指纹图谱,提取HPLC-ECD图谱共有峰面积信息并应用主成分分析和系统聚类分析进行蜂蜜花源分类,并对完全未参与建模的蜂蜜样品进行验证。结果表明,45个蜂蜜样品(枸杞蜜、荆条蜜、荔枝蜜各15个),均可通过主成分分析和系统聚类分析按照其花源正确分类,正确率达到100%。该蜂蜜花源鉴别的模型对完全未参与建模的枸杞蜜、荆条蜜和荔枝蜜样品的正确预判率可达到100%、80%和100%。研究表明,HPLCECD指纹图谱技术应用主成分分析和系统聚类分析可以作为一种快速、准确、绿色的判别蜂蜜花源的方法。

利用高效液相色谱-电化学法检测尿液8-羟基脱氧鸟苷

目的观察利用高效液相色谱-电化学法（HPLC—ECD）检测尿液8-羟基脱氧鸟苷（8—OH—dG）的效果。方法尿液经前处理后，利用美国Varian Prostar高效液相色谱仪检测8—OH—dG水平。结果8—OH—dG峰与杂质峰分离良好，8—OH—dG浓度在1～25ng／ml之间呈良好线性，流动相最佳pU为3．5，最佳工作电压为0．80V，最低检测浓度为0．39ng／ml，回收率在89．1％和86．1％之间，批内差异（CV）均低于8％。结论该HPLC—ECD法是一种灵敏度高、重复性好的尿液8—OH—dG简便检测方法，值得推广。

鼠脑组织中6-羟基-1-甲基-1,2,3,4-四氢-β-咔啉及其相关生物胺的高效液相色谱-电化学检测

建立了大鼠脑组织中6-羟基-1-甲基-1,2,3,4-四氢-β-咔啉（6-OH-MTHβC）、5-羟色胺（5-HT）和5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）含量的高效液相色谱-库仑阵列电化学检测（HPLC-ECD）方法。采用的色谱柱为Discovery（HS F5柱（250mm×4.6mm,5μm）,流动相为缓冲液（40mmol/L柠檬酸＋20mmol/L磷酸氢二钠＋0.3mmol/L乙二胺四乙酸二钠,pH4.0）-甲醇（体积比为78∶22）混合液,流速为1mL/min。6-OH-MTHβC、5-HT、5-HIAA在1.0~500.0μg/L范围内线性关系良好（r〉0.999 2）,检出限分别为0.56,0.26,0.53μg/L,日内和日间精密度（以相对标准偏差表示）均低于6.1%,回收率分别为87.1%~98.2%,87.0%~95.3%,90.1%~97.7%。用该方法检测新生7d的SD胎鼠脑内6-OH-MTHβC及5-HT、5-HIAA的含量,发现SD胎鼠在急性酒精中毒8h后6-OH-MTHβC显著上升（P〈0.05）;而5-HT和5-HIAA的含量有所下降,但无显著性差异。该法简便、稳定、灵敏度高,适用于测定鼠脑组织中6-OH-MTHβC和5-HT,5-HIAA含量的相关研究。

人血浆儿茶酚胺及其代谢产物的高效液相色谱——电化学检测法

血浆儿茶酚胺包括去甲肾上腺素、肾上腺素和多巴胺,由交感神经、肾上腺體质合成与释放,是神经递质之一,调节生理功能的重要物质。因此、测定人血浆中儿茶酚胺(catechol amine,CA)含量有着十分重要的意义,可作为临床某些疾病如嗜铬细胞瘤、类癌瘤等的诊断与预测工具。国内外有关CA测定方法报道甚多,有荧光分光光度计法、放射酶法。

高效液相色谱-电化学(库仑电极)阵列检测海水处理对菊芋幼苗体内氯原酸及小分子物质的影响

以不同浓度海水处理菊芋幼苗体,利用高效液相色谱-电化学(库仑电极)阵列检测技术检测不同处理时间植物体内氯原酸及小分子物质的差异。结果表明:0%海水处理下氯原酸含量变化不显著,而15%和30%海水处理下氯原酸含量变化显著,15%海水处理下在1h时较2h和3h时高,而30%海水处理下在3h时较1h和2h时高。处理后菊芋幼苗体植株产生的其他一些未知的小分子物质尚有待定性和进一步考察其变化规律。

高效液相色谱-电化学检测器测定富硒酵母中硒代蛋氨酸含量

目的建立测定富硒酵母中的硒代蛋氨酸含量的高效液相色谱-电化学检测器检测法。方法色谱柱采用Agilent Eclipse plus C18柱(150 mm×3.0 mm,3.5μm),流动相为100 mmol/L柠檬酸缓冲盐(p H=2.75,含300 mg/L辛烷基磺酸钠)-甲醇(85∶15),检测电压为500 m V(ECD1)和700 m V(ECD2)。结果硒代蛋氨酸质量浓度在1~300μmol/L范围内与峰面积线性关系良好(r^2=0.999 6),检出限为0.30μmol/L,加样回收率为101.30%,RSD为2.30%(n=6)。结论该方法操作简便,灵敏度高,重复性好,可用于富硒酵母中硒代蛋氨酸的检测。