复方丹参片中四种成分的高效液相色谱-电化学检测-紫外检测法分析

建立了电化学检测器与二极管阵列检测器联用的液相色谱(HPLC-ECD-DAD)同时分离和测定复方丹参片中原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸和丹参酮ⅡA 等4种成分的分析方法.采用Zorbax SB-C18柱(150 mm×4.6 mm i.d.,5.0 μm),以甲醇和0.4%磷酸为流动相(流速1.0 mL/min)进行梯度洗脱;ECD检测电压0.7 V,DAD检测波长270 nm,柱温30 ℃.实验结果表明,原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸和丹参酮ⅡA质量浓度分别为0.3～9.0 mg/L,1.1～54.0 mg/L,1.1～11.1 mg/L和5.2～52.0 mg/L时与其峰面积呈良好的线性关系(线性相关系数均高于0.999),原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸和丹参酮ⅡA的平均回收率(n=6)分别为97.8%(相对标准偏差(RSD)为2.15%),98.2%(RSD为2.07%),97.6%(RSD为2.18%)和97.2%(RSD为2.07%).该法同时利用了ECD和DAD的优点,是一种快速、灵敏、准确的分析方法,可以为复方丹参片的质量控制提供科学依据.

高效液相色谱-电化学检测法测定脱氧核糖核酸分子氧化损伤标志物8-羟基脱氧鸟苷

采用螯合剂 Fe2 + H2 O2 作为Fenton型反应的氧化源 ,与小牛胸腺脱氧核糖核酸反应生成 8 羟基脱氧鸟苷 ( 8 OhdG) ,建立脱氧核糖核酸 (DNA)分子氧化损伤的体外反应模型 ,用高效液相色谱 电化学检测方法对 8 OhdG进行定量。建立的方法灵敏度高 ,最低检出限 30fmol,线性范围宽 ,从 0 .32pmol到3.2nmol,相关系数达 0 .9996,方法能够适用于生物体与细胞脱氧核糖核酸分子低水平氧化损伤的检测。

高效液相色谱-电化学检测法测定金荞麦饮片中表儿茶素的含量

目的：建立可测定金荞麦饮片中表儿茶索含量的高效液相色谱-电化学检测法。方法：采用Diamonsil C18（4．6mm×250mm，5μm）柱，流动相甲醇-0．1mol·L^-1磷酸盐缓冲液（1：3，pH2．5），流速1．0mL·min^-1，柱温35℃，参比电极ISAAC（in-situ silver／silver chloride），工作电极玻碳电极，检测电位＋600mV。结果：表儿茶素的线性范围为0．004875～1．56μg，r=0．9999；平均回收率为100．7％，RSD 1．9％（n=5）。9批不同市售来源的金养麦饮片中表儿茶素的含量存在差异。结论：该方法重复性好，可以用来测定金荞麦饮片中表儿茶素的含量。

高效液相色谱/电化学检测法测定大鼠下丘脑的组胺和5-羟色胺

采用高效液相电化学检测的方法测定了大鼠下丘脑内组胺和5_羟色胺。色谱柱为NUCLEOSILRC18(250mm×4mm ,10μm) ,流动相 :磷酸二氢钠溶液 (25mmol/L ,内含乙二胺四乙酸二钠0.5mmol/L ,辛烷磺酸钠3mmol/L,pH4.8) -乙腈=100∶14(体积比 ) ,流速0.8mL/min,检测电位0.6V。大鼠下丘脑匀浆液经低温高速离心 ,上清液直接进样测定5_羟色胺 ,另取上清液衍生后进样测定组胺。组胺在0.075～1.8μg/mL ,5_羟色胺在0.0625～1.25μg/mL浓度范围内 ,线性关系良好。组胺测定的日内和日间相对标准偏差分别小于1.0%和11.4 %,5_羟色胺测定的日内和日间相对标准偏差分别小于3.4 %和6.3 %,两者回收率分别为94.1 %～102.3%和72.8 %～89.1 %。正常雄性SD大鼠下丘脑内组胺和5_羟色胺的平均含量分别为0.280±0.029μg/mL和0.224±0.068μg/mL。本法简便、准确、快捷 。

高效液相色谱-紫外检测法同时测定类鼻疽患者血浆中亚胺培南、美罗培南和头孢他啶的浓度

目的建立一种快速、经济的高效液相色谱-紫外检测法(HPLC-UV),用于同时测定人血浆中亚胺培南、美罗培南和头孢他啶的药物浓度。方法采用Millipore 10KD超滤离心去蛋白,使用互为内标法,色谱柱为SunFire-C18柱(4.6 mm×250 mm,5µm);预柱为C18柱(4.0 mm×2.1 mm,5µm),流动相为0.1 mol·L^(-1)的3-(N-吗啡啉)丙磺酸(pH=7.0)和乙腈,梯度洗脱,检测波长299nm,流速1.0mL·min^(-1),运行时间30min,进样体积30µL。结果亚胺培南、美罗培南和头孢他啶的保留时间分别为6.699 min、10.795 min和8.722 min。血浆内源性物质对样品的测定无干扰,峰形良好。该方法具有良好的线性、准确度和精密度。不同浓度的样品在–20℃反复冻融、–20℃长期冷冻和4℃(48 h)下均表现出了较高的稳定性。结论该方法操作成本低、专属性强、分离效果好,可用于类鼻疽患者血浆中亚胺培南、美罗培南和头孢他啶治疗药物浓度的测定。

高效液相色谱-电化学检测法测定生物样品中单胺类神经递质及其代谢产物

[目的]建立一种简单、快速、灵敏的测定生物样品中单胺类神经递质及其代谢产物的高效液相色谱方法。[方法]色谱柱采用WatersC18反相色谱柱(3.9mm×150mm,5μm),流动相为水相(每500mL中含辛烷磺酸钠1.25g,磷酸二氢钾6.8g,乙二胺四乙酸18mg,pH值3.3)∶甲醇∶乙腈=78∶19∶3,流速为0.8mL/min,柱温35℃;电化学检测器工作电极为玻璃碳电极,参比电极为银/氯化银(Ag/AgCl)电极,工作电压为0.7V。[结果]5种物质保留时间分别为:去甲肾上腺素3.6min,5-羟吲哚乙酸4.5min,高香草酸5.2min,多巴胺6.2min,5-羟色胺11.9min;线性范围均为20～1000μg/L,最低检测限为4～8μg/L。[结论]此方法测定生物样品中的单胺类神经递质及其代谢产物,简便,快速且灵敏度高。

高效液相色谱-电化学检测指纹图谱鉴别3种单花种蜂蜜花源

基于高效液相色谱-电化学检测器(high performance liquid chromatography-electrochemical detection,HPLC-ECD)技术建立一种新的蜂蜜花源鉴别方法。以采自中国不同地区的3种单花种蜂蜜为研究对象,构建了3种单花种蜂蜜的HPLC-ECD指纹图谱,提取HPLC-ECD图谱共有峰面积信息并应用主成分分析和系统聚类分析进行蜂蜜花源分类,并对完全未参与建模的蜂蜜样品进行验证。结果表明,45个蜂蜜样品(枸杞蜜、荆条蜜、荔枝蜜各15个),均可通过主成分分析和系统聚类分析按照其花源正确分类,正确率达到100%。该蜂蜜花源鉴别的模型对完全未参与建模的枸杞蜜、荆条蜜和荔枝蜜样品的正确预判率可达到100%、80%和100%。研究表明,HPLCECD指纹图谱技术应用主成分分析和系统聚类分析可以作为一种快速、准确、绿色的判别蜂蜜花源的方法。

高效液相色谱-电化学检测法研究大蒜素对百草枯中毒小鼠脑组织中单胺类神经递质含量的影响

建立了单胺类神经递质的高效液相色谱-电化学检测方法,探讨了大蒜素对百草枯中毒小鼠脑组织内的单胺类神经递质及其代谢产物的影响。健康ICR小鼠随机分为4组:正常对照(Con)组、大蒜素(DAS)组、百草枯染毒(PQ)组和大蒜素治疗(PQ+DAS)组,每组6只。PQ组灌胃PQ 35 mg/kg建立中毒模型,Con组和DAS组灌服同体积生理盐水。DAS组和PQ+DAS组小鼠于造模2、26、50 h后腹腔内各注射1次DAS(25 mg/kg),PQ组和正常组小鼠腹腔内注射等量无菌生理盐水。造模12 h后处死小鼠。收集小鼠脑组织样品并称重,处理后进样。色谱分析采用Acclaim 120 C18(150 mm×2.1 mm,3μm)色谱柱,以离子对缓冲盐溶液-甲醇(93∶7,体积比)为流动相,流速为0.27 m L/min;电化学检测器检测,工作电压为450 m V。结果表明,与正常组和DAS组比较,PQ组部分神经递质水平降低;DAS治疗后能够改变上述生化指标的变化;与PQ组相比,PQ+DAS组神经递质含量增高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。脑组织样品中5-HT、DA、5-HIAA、DOPAC和HVA低、中、高3水平的加标回收率均为79.8%~112.1%,相对标准偏差(RSD)小于10%。实验表明,大蒜素对百草枯中毒后小鼠体内含量降低的神经递质有明显的上调作用。

高效液相色谱-库仑电化学检测法对多种脂溶性维生素及营养物质的分析

〔目的〕建立快速分析多种脂溶性维生素及营养物质的检测方法 ,准确分析多种脂溶性维生素及营养物质的水平。〔方法〕采用美国ESA公司的高效液相色谱—库仑电化学检测器 (HPLC -CoulArrayDetector)及天津医科大学和天津大学共同研制的血清脂溶性维生素提取试剂盒。〔结果〕对多种脂溶性维生素A(视黄醇 )、维生素D2 (麦角钙化醇 )、维生素D3 (胆钙化醇 )、维生素E(α -生育酚和γ -生育酚 )、维生素K1(叶绿醌 )、类胡萝卜素 (α -胡萝卜素和 β -胡萝卜素 )、类维生素A(维生素A棕榈酸盐 )、生育酚乙酸酯和营养物质辅酶Q10 (泛醌 )进行同时检测。〔结论〕多通道EC -HPLC检测脂溶性维生素 ,因其操作简便 ,灵敏度高 ,准确性强 ,可作为临床对脂溶性维生素分析的可靠方法。

鼠脑组织中6-羟基-1-甲基-1,2,3,4-四氢-β-咔啉及其相关生物胺的高效液相色谱-电化学检测

建立了大鼠脑组织中6-羟基-1-甲基-1,2,3,4-四氢-β-咔啉（6-OH-MTHβC）、5-羟色胺（5-HT）和5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）含量的高效液相色谱-库仑阵列电化学检测（HPLC-ECD）方法。采用的色谱柱为Discovery（HS F5柱（250mm×4.6mm,5μm）,流动相为缓冲液（40mmol/L柠檬酸＋20mmol/L磷酸氢二钠＋0.3mmol/L乙二胺四乙酸二钠,pH4.0）-甲醇（体积比为78∶22）混合液,流速为1mL/min。6-OH-MTHβC、5-HT、5-HIAA在1.0~500.0μg/L范围内线性关系良好（r〉0.999 2）,检出限分别为0.56,0.26,0.53μg/L,日内和日间精密度（以相对标准偏差表示）均低于6.1%,回收率分别为87.1%~98.2%,87.0%~95.3%,90.1%~97.7%。用该方法检测新生7d的SD胎鼠脑内6-OH-MTHβC及5-HT、5-HIAA的含量,发现SD胎鼠在急性酒精中毒8h后6-OH-MTHβC显著上升（P〈0.05）;而5-HT和5-HIAA的含量有所下降,但无显著性差异。该法简便、稳定、灵敏度高,适用于测定鼠脑组织中6-OH-MTHβC和5-HT,5-HIAA含量的相关研究。

高选择性高效液相色谱-电化学检测法测定丹参中5种酚类物质（英文）

发展了一种高灵敏度的高效液相色谱-电化学检测(HPLC-ECD)方法,用于丹参中5种酚类物质的定量分析。为了获得较高的检测灵敏度,对流动相的pH、缓冲溶液类型和浓度、有机相种类和梯度以及流速做了系统研究。在较低的pH(2.8)、较低的缓冲盐浓度(20 mmol/L NaH2PO4)和较缓的乙腈梯度下,以0.2 mL/min流速可为5种酚类的分离检测提供较好的分离度和较高的检测灵敏度。在获得优化的分离参数后,将其用于14批丹参药材中5种酚类物质的定量分析。结果表明,该方法可获得较好的回收率(>95%)、较宽的线性范围(高达4个数量级)、较好的重复性(RSD<4.01%)和较高的灵敏度(咖啡酸的LOQ低至1.5μg/L)。与紫外检测方法相比,ECD检测方法具有更高的选择性,可减少非抗氧化活性的物质的干扰。

基于高效液相色谱-紫外检测法的水产品中呈味核苷酸测定研究

本文在传统高效液相色谱法的基础上,结合紫外检测法以及其他技术,对水产品中呈味核苷酸的测定进行了优化。最终发现,在高效液相色谱-紫外检测法应用的背景下,水产品中呈味核苷酸的回收率达到了86.2%~108.3%,相对标准偏差均小于7.9%,证明该方法在多呈味核苷酸检测的复杂背景下,也能够实现较高的测定质量,具有一定理论参考价值。

利用高效液相色谱-电化学法检测尿液8-羟基脱氧鸟苷

目的观察利用高效液相色谱-电化学法（HPLC—ECD）检测尿液8-羟基脱氧鸟苷（8—OH—dG）的效果。方法尿液经前处理后，利用美国Varian Prostar高效液相色谱仪检测8—OH—dG水平。结果8—OH—dG峰与杂质峰分离良好，8—OH—dG浓度在1～25ng／ml之间呈良好线性，流动相最佳pU为3．5，最佳工作电压为0．80V，最低检测浓度为0．39ng／ml，回收率在89．1％和86．1％之间，批内差异（CV）均低于8％。结论该HPLC—ECD法是一种灵敏度高、重复性好的尿液8—OH—dG简便检测方法，值得推广。

高效液相色谱-电化学检测器测定富硒酵母中硒代蛋氨酸含量

目的建立测定富硒酵母中的硒代蛋氨酸含量的高效液相色谱-电化学检测器检测法。方法色谱柱采用Agilent Eclipse plus C18柱(150 mm×3.0 mm,3.5μm),流动相为100 mmol/L柠檬酸缓冲盐(p H=2.75,含300 mg/L辛烷基磺酸钠)-甲醇(85∶15),检测电压为500 m V(ECD1)和700 m V(ECD2)。结果硒代蛋氨酸质量浓度在1~300μmol/L范围内与峰面积线性关系良好(r^2=0.999 6),检出限为0.30μmol/L,加样回收率为101.30%,RSD为2.30%(n=6)。结论该方法操作简便,灵敏度高,重复性好,可用于富硒酵母中硒代蛋氨酸的检测。

高效液相色谱-荧光检测法测定饮用水中的亚硝酸盐

目的评价高效液相色谱-荧光检测法测定饮用水中的亚硝酸盐应用价值。方法采集矿泉水、自来水与水源水作为水标本,应用高效液相色谱-荧光检测法测定,分析该方法检测优势及水标本中亚硝酸盐衍生物2,3-萘三唑稳定性。结果纯水中检测出亚硝酸盐浓度为0.6μg/L,峰形好且无杂质干扰;高效液相色谱-荧光检测法的检出限为0.3μg/L,定量限为1μg/L;亚硝酸盐衍生后,衍生物稳定性较高,在7 d内开展测定误差小;亚硝酸盐加标回收率在90.29%-102.60%之间,精密度在0.71%-3.66%。结论高效液相色谱-荧光检测法测定饮用水中的亚硝酸盐具有准确性、便捷性等特征,为饮用水安全监测提供重要的技术支持。

高效液相色谱-荧光检测法测定化妆品中α-熊果苷、熊果苷、氢醌和苯酚的含量

样品经甲醇超声提取后,采用CAPCELL PAK ADME-HR(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱分离,流动相为甲醇-水,流速0.8mL/min,柱温20℃,进样量5μL,经荧光检测器多波长检测,根据保留时间定性,峰面积定量,以标准曲线法计算含量。在上述分析条件下,α-熊果苷、熊果苷、氢醌和苯酚在0.25~20、0.25~20、0.025~2、0.05~4μg/mL范围内均呈良好的线性关系(r>0.999),低、中、高3个浓度添加水平的平均加标回收率为88.2%~109.2%,RSD为0.7%~5.5%,考察了4种待测组分,48h内稳定性良好,RSD为1.1%~4.1%。经方法学验证表明该方法操作简便、准确快速。

用反相高效液相色谱-紫外检测法测定1-脱氧野尻霉素的含量

以0.05 mol/L HC l为溶剂提取蚕粉和桑叶粉中的1-脱氧野尻霉素(DNJ),并用9-芴基氯甲酸甲酯(FMOC)为衍化剂,在pH 8.5的硼酸盐缓冲液中进行衍生化反应,生成具有紫外吸收的DNJ-FMOC络合物,再用反相高效液相色谱-紫外检测法对其分离测定。结果表明,反应产物的色谱图分离效果良好,DNJ-FMOC的峰面积与DNJ浓度呈高度正相关关系,加样回收率平均为100.7%。精密度试验、稳定性试验、重现性试验、回收率试验表明,该方法稳定可靠,可以作为测定家蚕、桑叶及有关药物样品中DNJ含量的有效方法。

高效液相色谱-紫外检测法同时测定食品接触材料中7种苯多酸及其衍生物的特定总迁移量

建立了高效液相色谱-紫外检测（HPLC-UV）同时测定5种食品模拟物（10%（v/v）乙醇、20%（v/v）乙醇、50%（v/v）乙醇、3%（w/v）乙酸和橄榄油）中偏苯三甲酸、偏苯三甲酸酐、间苯二甲酰氯、间苯二甲酸、对苯二甲酰氯、邻苯二甲酸、对苯二甲酸的特定总迁移量（SML（T））的方法。用食品模拟物浸泡待测样品,冷却至室温并混匀,水基食品模拟物经亲水性聚四氟乙酸针头过滤器过滤后进样;橄榄油用0.1%（w/v）乙酸铵水溶液提取后,下层清液用亲水性聚四氟乙烯针头过滤器过滤后进样。用Synergi Polar-RP色谱柱（250 mm×4.6 mm,4μm）分离,梯度洗脱,检测波长为232 nm。5种食品模拟物中的定量限为0.1～0.2 mg/kg;水基食品模拟物在0.5～12m g/L、橄榄油食品模拟物在0.5～12 m g/kg范围内线性关系良好（r2〉0.999 91）;1.25、2.5、6.25 m g/kg水平的加标回收率为94.3%～105%,相对标准偏差为0.1%～2.3%。结果表明,该方法的色谱分离和线性关系较好,回收率和准确度高,完全满足欧盟（EU）No 10/2011法规附表2中7种苯多酸及其衍生物的SML（T）的限量要求,并已应用于实际样品的检测。

用反相高效液相色谱-紫外检测法测定桑叶中芦丁、槲皮素和1-脱氧野尻霉素的含量

为高效检测桑叶中的药用活性成分,进行了用反相高效液相色谱-紫外检测法(RP-HPLC-UV)综合测定桑叶中芦丁、槲皮素和1-脱氧野尻霉素(1-DNJ)含量的试验。采用85%乙醇超声辅助萃取桑叶中的芦丁和槲皮素,以0.05 mol/L HCl为溶剂提取1-DNJ,并在pH8.5的硼酸盐缓冲液中进行衍生化反应,生成具有紫外吸收的1-DNJ-FMOC络合物。色谱柱为Alltima C18(4.6 mm×250 mm,5μm),检测波长分别为360、360、254 nm,流动相分别为V(四氢呋喃)∶V(0.02%磷酸)=25∶75、V(乙腈)∶V(pH4.0、0.5 mol/L醋酸缓冲液)=27∶73、V(乙腈)∶V(0.1%醋酸)=36∶64。检测结果显示:芦丁、槲皮素和1-DNJ的色谱图分离效果良好,峰面积与浓度呈高度正相关,回收率(n=3)分别为99.14%、98.89%、100.85%,相对标准偏差(RSD)分别为1.01%、0.33%、1.24%。试验显示建立在以上条件下的检测方法精密度高,检测结果准确可靠。

高效液相色谱-紫外检测法同时测定北柴胡中柴胡皂苷a、b_2、c、d、f含量

目的：建立高效液相色谱-紫外检测法（HPLC-UV）同时测定北柴胡中柴胡皂苷 a、b2、c、d、f 含量的方法。方法采用Hypersil ODS2 C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以乙腈（A）-水（B）为流动相梯度洗脱（0 min,33%A；20 min,40%A；40 min,53%A；45 min,33%A）,流速1 mL/min,柱温为室温,紫外检测器检测波长210 nm。结果柴胡皂苷a、b2、c、d、f分别在0.020～10.1、0.013～6.56、0.016～8.08、0.020～10.24、0.017～8.28μg 范围内线性关系良好（r 分别为0.9970、0.9990、0.9991、0.9978、0.9998）,平均回收率分别为99.8%、98.9%、100.2%、98.6%、99.3%。结论该方法简便、快捷、重复性好,可用于柴胡药材的质量检测。