高效液相色谱-电喷雾式检测器法同时测定恩格列净中D-葡萄糖-δ-内酯与D-葡萄糖-γ-内酯

目的:建立高效液相色谱-电喷雾式检测法(HPLC-CAD)测定恩格列净中两种可能存在的葡萄糖内酯含量的方法。方法:采用Waters Xbridge BEH Amide色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相A为甲酸盐缓冲液(20 mmol·L^(-1)甲酸铵溶液,用甲酸调pH为3.0),流动相B为乙腈,梯度洗脱,流速为0.8 mL·min^(-1);柱温为30℃;电喷雾检测器(蒸发温度35℃,滤光片3.6 s,采集频率2 Hz),进样量20μL。结果:在该色谱条件下,D-葡萄糖-δ-内酯与D-葡萄糖-γ-内酯峰的检测限分别为1.37μg·mL^(-1)和1.46μg·mL^(-1)(均相当于供试品浓度的0.01%),定量限分别为4.12μg·mL^(-1)和4.37μg·mL^(-1)(均相当于供试品浓度的0.04%);D-葡萄糖-δ-内酯与D-葡萄糖-γ-内酯之和的回收率为97.4%(RSD为6.6%<10.0%);3批恩格列净中均未检出D-葡萄糖-δ-内酯与D-葡萄糖-γ-内酯。结论:方法可用于恩格列净中葡萄糖内酯的质控。

高效液相色谱-电雾式检测器法测定托吡酯片中主要成分及杂质含量

目的建立测定托吡酯片中主要成分及杂质含量的高效液相色谱-电雾式检测器(HPLC-CAD)法。方法色谱柱为Waters Sun Fire C_(18)柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%甲酸水溶液(35∶65,V/V),流速为1.0 m L/min,柱温为35℃,雾化温度为35℃,过滤常数为3.6 s,幂率为1.0,采样频率为10 Hz,进样量为10μL。结果托吡酯质量浓度在0.05~1.0 mg/m L范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9956),检测限和定量限分别为1μg/m L和3μg/m L;精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于2.0%;平均加样回收率为100.19%,RSD为1.19%(n=9)。3批样品中托吡酯含量为97.98%~98.96%,杂质总量为0.25%~0.31%。结论所建立的方法操作简便,结果准确可靠,可用于托吡酯片中主要成分及杂质的含量测定。

高效液相色谱-电喷雾检测器法测定甲钴胺注射液中甘露醇含量

目的建立测定甲钴胺注射液中甘露醇含量的高效液相色谱-电喷雾检测器(HPLC-CAD)法。方法色谱柱为Agilent ZOR‐BAX SB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为15%乙腈-80%乙腈,梯度洗脱,流速为0.5 mL/min;检测器为CAD,雾化气体为氮气,蒸发管温度为35℃,增益值为1,幂函数为1.0,采集频率为10 Hz,过滤常数为3.6。结果甘露醇质量浓度在0.105~1.05 mg/mL范围内其对数值与峰面积对数值线性关系良好(r=0.9992),检测限和定量限分别为0.21μg/mL和0.70μg/mL;精密度、稳定性和重复性试验结果的RSD均小于2.0%;平均加样回收率为98.37%,RSD为2.02%(n=9)。结论该方法操作简单、检测迅速、结果准确,可用于测定甲钴胺注射液中甘露醇的含量。

高效液相色谱-电喷雾式检测器测定生物质制乙酰丙酸反应中纤维素水解产物的单糖组成

建立了高效液相色谱-电喷雾式检测器测定生物质制乙酰丙酸反应中纤维素水解产物的单糖组成的方法。采用XBridge Amide C18色谱柱(4.6mm×150mm,3.5μm),以85%乙腈水溶液(含0.025%氨水)为流动相,色谱柱温70℃,流速1mL·min^(-1),分析周期10min。标样测定结果表明,各目标化合物在一定浓度范围内呈良好的线性响应,回归系数(R2)均大于0.99,最低检出限为0.001g·L^(-1)。实际样品的加标回收率在89.74%~107.58%之间,6次重复测定的相对标准偏差(RSD)均小于3%。该方法分析速度快,灵敏度高,分离效果好,结果准确可靠,数据精密度良好,无需进行糖类衍生化反应,为纤维素水解产物的单糖组成分析提供了一种新的简便、快速、准确的方法。

在线固相萃取结合高效液相色谱-电喷雾式检测器测定鸡粪中红霉素残留

将在线固相萃取（ online SPE）与高效液相色谱（ HPLC）-通用型电喷雾检测器（ CAD）结合,建立了集约养殖业常用抗生素红霉素的分析方法。5.0 g鸡粪样品与硅藻土混合后,置于34 mL萃取池中,以热水为萃取剂,在70℃、10.4 MPa条件下,用快速溶剂萃取仪提取样品中的红霉素。利用双三元液相色谱仪,采用在线富集进样方式,经Acclaim 120 C18色谱柱,以乙腈-0.1％甲酸溶液为流动相分离后,用CAD进行检测。红霉素在21～2000μg/kg范围内线性关系良好（r≥0.99）,检出限为6.3μg/kg,加标回收率为79.2％～87.5％。

高效液相色谱-电喷雾检测器法测定乳糖的含量及有关物质

目的建立高效液相色谱-电喷雾检测器测定乳糖的含量及有关物质的方法。方法使用Alltech Prevail carbohydrate ES(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-水(70∶30)为流动相,流速0.6mL·min^(-1),采用电喷雾检测器进行检测。结果蔗糖、乳糖分离良好,乳糖在线性浓度内与峰面积线性关系良好,相关系数为0.9993,加样回收率均大于98%,检测限为1.5μg·mL^(-1)。检测到微量的有关物质。结论所建立的方法具有灵敏度高,准确性、重复性良好,操作简单,节省时间,环保等特点,可用于乳糖的质量控制,尤其是对于有关物质的控制具有一定的优势。

高效液相色谱-电喷雾检测器法测定贞芪扶正颗粒中黄芪甲苷含量

目的建立测定贞芪扶正颗粒中黄芪甲苷含量的高效液相色谱-电喷雾检测器（HPLC-CAD）法。方法采用ZORBAX Eclipse Plus C_（18）柱（100 mm×4.6 mm,3.5μm）,检测器为电喷雾检测器,雾化温度为35℃,载气N_2,压力63.6 psi,柱温40℃。结果黄芪甲苷进样量在0.286～2.86μg范围内与峰面积对数值线性关系良好（r=0.999 8）,平均回收率为99.14%,RSD为0.42%（n=9）,阴性对照无干扰。结论该方法操作简便,灵敏度高,方法可靠,结果准确,重复性好,可作为贞芪扶正颗粒质量控制的方法。

高效液相色谱-电喷雾检测器法测定枸杞子中甜菜碱的含量

目的:建立枸杞子中甜菜碱的高效液相色谱-电喷雾检测器分析方法。方法:采用高效液相色谱-电喷雾检测器(HPLC-CAD)法,安捷伦Poroshell 120 Hillic色谱柱(3.0mm×150mm,2.7μm),乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,流速0.5m L/min。结果:甜菜碱标准曲线线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为91.1%~95.9%,RSD为1.1%~2.6%,重复性RSD=1.3%(n=6)。结论:该方法准确、简便,重现性好,适用于枸杞子中甜菜碱的含量测定。

高效液相色谱-电雾式检测器法同时测定烘焙食品中的6种糖类物质

目的建立高效液相色谱-电雾式检测器法(high performance liquid chromatography-charged aerosol detection,HPLC-CAD)同时测定烘焙食品中果糖、葡萄糖、乳糖、半乳糖、蔗糖和麦芽糖含量的分析方法。方法以NH2P-50柱(250mm×4.6mm,5μm)为分离柱,乙腈-水(78:22,V:V)为流动相,等度洗脱,流速为0.8 mL/min,以CAD为检测器,雾化温度35℃。结果方法在40 min内完成了6种糖的定量分析。果糖、葡萄糖、乳糖和半乳糖在2~200mg/L、蔗糖和麦芽糖在4~400mg/L范围内有良好的线性关系(r^(2)>0.999),相对标准偏差(relative standard deviations,RSDs)不超过3.3%,回收率不小于71.0%。结论该方法快速、灵敏、准确度高,可为烘焙食品中糖类物质的含量测定提供技术支持,也可以为食品安全监督抽检和居民膳食控制提供科学依据。

超声辅助酸解-超高效液相色谱-电雾式检测器测定灵芝多糖的单糖组成

目的:建立超声辅助酸解-超高效液相色谱-电雾式检测器(UAH-UPLC-CAD)法测定灵芝多糖的单糖组成的方法,为药食两用真菌多糖的单糖组成研究提供快速分析方法支持。方法:以赤芝为研究对象,对灵芝多糖超声辅助酸解条件进行系统优化,采用Waters ACQUITY UPLC Amide柱(3.0 mm×100 mm,1.7μm),梯度洗脱(A为0.8%甲酸水溶液,B为乙腈),流速:0.4 mL·min^-1,柱温:25℃,采用CAD检测器,其中:雾化器温度35℃,N_2压力61.2 Psi。结果:获得了最佳的超声辅助酸解工艺条件:超声功率270 W、水解温度70℃、水解时间1 h;在优化的UPLC-CAD条件下,各化合物分离较好、灵敏度较高,方法具有较好的精密度、重现性和稳定性;应用该方法测定了灵芝多糖酸解产物中的7种单糖(摩尔比为:鼠李糖∶岩藻糖∶木糖∶阿拉伯糖∶甘露糖∶葡萄糖∶半乳糖=5.90∶5.34∶72.64∶31.96∶1.00∶1.89∶5.24),其中,木糖和阿拉伯糖的含量较高,其值分别为27.25±0.67和11.99±0.29 mg/g;而甘露糖和葡萄糖的含量则较低,其值分别为0.45±0.01和0.85±0.04 mg/g。结论:该方法简单、快速、灵敏度高,为药食两用真菌多糖的单糖组成研究提供了方法支持。

QuEChERS法结合超高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱测定焙烤蛋糕中丙烯酰胺残留量

建立了Qu EChERS法结合超高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱(UPLC-MS/MS)测定焙烤蛋糕中丙烯酰胺残留量的分析方法。该方法用乙腈-水作为混合提取溶剂,加入丙烯酰胺同位素内标物后,经QuEChERS法净化,以0.2%甲酸水溶液-乙腈作为流动相梯度洗脱,在电喷雾离子源ESI正离子模式下以多重反应监测(MRM)模式测定。结果表明,丙烯酰胺在1~3 000 ng·mL^-1浓度范围内线性关系良好,相关系数(r^2)为0.999 4,检出限低至5 mg·kg^-1,平均加标回收率86.2%~105.6%,相对标准偏差(RSD)为3.5%~4.2%。该方法简便灵敏、准确快速、重现性好、杂质干扰少,适用于焙烤蛋糕食品中丙烯酰胺的测定。

内皮细胞提取和高效液相色谱－电喷雾飞行时间质谱联用预测玄参中的活性成分

目的:应用内皮细胞提取和高效液相色谱-电喷雾飞行时间质谱联用(HPLC-ESI/TOF MS)预测玄参的活性成分。方法:应用内皮细胞作为靶细胞,中药提取液中的活性成分可选择性地与其结合,洗去未结合的成分,用HPLC-ESI/TOF MS对细胞解离液中的成分进行分析。结果:从玄参提取液中检测出6个可与内皮细胞结合的成分,其中3个鉴定为安格洛苷C(angoroside C)、肉桂酸(cinnamic acid)和哈巴俄苷(harpagoside)。结论:细胞解离液中检测到的成分为玄参中与内皮细胞有结合作用的成分,本方法可用于预测中药中与内皮细胞相结合的活性成分。

高效液相色谱-串联质谱法快速测定海鳗鱼肉中3种太平洋雪卡毒素

目的建立了一种平行振荡方法萃取海鳗鱼肉中的3种太平洋雪卡毒素(P-CTX-1、P-CTX-2、P-CTX-3),并采用高效液相色谱-电喷雾串联质谱法同时测定P-CTX-1、P-CTX-2、P-CTX-3残留量的分析方法。方法海鳗等样品经甲醇并采用平行振荡方法提取,C18固相萃取柱净化后,采用高效液相色谱-电喷雾串联质谱分析测定。结果以基质标准曲线外标法定量,线性范围为0.01～50.0 ng/g,相关系数均大于0.999(r≥0.999,n=3),P-CTX-1、P-CTX-2、P-CTX-3的定量限分别为(LOQs,S/N=10)0.009、0.019、0.017 ng/g。以0.05、0.10、0.50 ng/g 3个添加浓度水平进行方法验证,回收率分别为72.9~81.0%、63.0~77.9%、46.3~69.5%,相对标准偏差分别为2.3~2.7%、2.1~12.2%、6.1~15.3%。结论 该方法简便快速、灵敏度高,适用于鱼肉中同时快速检测3种太平洋雪卡毒素。

高效液相色谱-串联质谱检测化妆品中糖皮质激素、雌激素、雄激素、孕激素共22种禁用激素

建立了化妆品中糖皮质激素、雌激素、雄激素、孕激素类共22 种大范围禁用激素的电喷雾离子化-高效液相色谱-串联质谱分析方法。化妆品试样用甲醇超声提取,提取液离心后取上清液加亚铁氰化钾和醋酸锌溶液沉淀大分子杂质,再次离心将上清液以Oasis HLB 固相萃取小柱净化,经Agilent Poroshell120 EC-C18色谱柱(2.1×150mm,2.7μm)反相色谱分离后在多反应监测MRM 模式下进行定性和定量分析。结果表明,22 种激素的检出限为0.1 ~ 27.4 μg/kg;该方法样品的平均添加回收率为72.4%~ 99.7%,相对标准偏差RSD 均小于10%。

高效液相色谱离子阱质谱联用法同时测定人血浆中曲马多和对乙酰氨基酚浓度

目的:建立快速、灵敏的液相色谱-电喷雾离子阱质谱法测定人血浆中曲马多和对乙酰氨基酚的浓度。方法:血浆样品经乙腈直接沉淀蛋白后,以乙腈-10 mmoL·L-1甲酸胺-0.1%甲酸(65:15:20)为流动相,采用Hypurity C18柱(150mm× 2·1 mm,5μm)分离,流速为0.2 mL·min-1,通过电喷雾离子化离子阱质谱,以二级质谱选择离子反应监测(SRM)方式进行检测。结果:曲马多和乙酰氨基酚的线性范围分别为5～1000及20-12800 ng·mL-1,最低检测浓度分别为1和10 ng· mL-1,平均相对回收率均为103.7%,日内和日间变异均<20%,每个样品测试时间仅为7.0 min。结论:本法简单、快速、灵敏、重现性好,是一种有效的检测人血浆中曲马多和对乙酰氨基酚浓度的方法。

超高压液相色谱—电喷雾质谱法测定花蛤中肝素

研究了用高效液相色谱电喷雾质谱联用技术测定花蛤中肝素的方法。花蛤(去壳),捣碎成匀浆,加入Na Cl粉末进行超声波处理辅助盐析提取。将粗提取物经水解、纯化后,再进色谱柱分离测定。高效液相色谱条件如下:色谱柱ACQUITY UPLC BEH Amide(2.1 mm×100 mm,1.7μm);保护柱ACQUITY UPLC BEH Amide Van Guard(2.1 mm×5 mm,1.7?m);流动相水-甲醇(0.2%冰醋酸)80:20;流速0.2 m L/min;进样10μL。结果表明,该方法下肝素在25~400 mg/L范围内峰面积和浓度呈良好的线性关系,相关系数R2=0.9992;肝素的平均回收率为102.77%。此方法可快速检测花蛤中肝素组分。

QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定豆芽中4-氯苯氧乙酸钠

建立了QuEChERS法结合超高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱(UPLC-MS/MS)测定豆芽中4-氯苯氧乙酸钠残留的分析方法。该方法用酸化乙腈作为提取溶剂,经QuEChERS法净化,以含0.1%甲酸水的3 mM甲酸铵溶液-乙腈作为流动相梯度洗脱,在电喷雾离子源ESI负离子模式下以多重反应监测(MRM)模式测定。结果表明,4-氯苯氧乙酸在1~500 ng/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数(r2)为0.9998,检出限低至0.25μg/kg,总体平均加标回收率在76.4%~86.3%,相对标准偏差(RSD)在3.5%~5.4%。该方法简单灵敏、定量准确,重现性好、杂质干扰少,适用于豆芽中4-氯苯氧乙酸钠的测定。

高效液相色谱-质谱联用法分析鸡蛋中的头孢氨苄残留量

建立了HPLC-MS/MS法分析测定鸡蛋中非法添加物头孢氨苄的方法。我们采用RP-HPLC C_(18)高效液相色谱柱,以0.1%甲酸溶液-乙腈梯度洗脱,用配有电喷雾离子源的高效液相色谱-串联质谱仪,采用电喷雾正离子模式对其进行分析测定。试样经前处理后,采用液相色谱-串联质谱仪检测,外标法定量。结果表明,头孢氨苄在1.0 ng/mL～200 ng/mL范围内线性关系良好,回收率范围在77.4%～97.9%,线性范围较宽,回收率更高,重现性更好。

高效液相色谱-电喷雾检测器测定熊去氧胆酸的有关物质

目的:建立高效液相色谱-电喷雾检测器法测定熊去氧胆酸中的10个有关物质。方法:采用SHISEIDO Capcell PAK C18MGII(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以0.1%甲酸-甲醇-乙腈(30∶45∶25)为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),柱温40℃,检测器温度35℃,采集频率5 Hz,过滤常数3.6 s。采用主成分自身对照法计算已知杂质和其它杂质的含量,并对建立的方法进行方法学验证。结果:熊去氧胆酸与各杂质分离度良好;熊去氧胆酸、杂质A、杂质B、杂质C、杂质E的质量浓度均在1.0~100.0μg·mL^(-1)范围内与峰面积呈良好的线性关系,定量限均为1.0μg·mL^(-1),检测限均为0.5μg·mL^(-1),杂质的平均回收率在99.3%~100.1%,RSD(n=9)不高于2.0%;供试品溶液在10℃条件下放置24 h内稳定;微调液相色谱参数后,对有关物质的检测结果无影响。3批样品有关物质结果显示,杂质A的含量均小于1.0%,其他单一杂质的含量均小于0.1%,杂质总量均小于1.5%。结论:本文所建立的HPLC-CAD法简便、灵敏、准确,可用于熊去氧胆酸的有关物质检测。

高效液相色谱-电雾式检测器法同时测定小儿解感片中7种黄酮类成分的含量

目的:建立同时测定小儿解感片中芦丁、槲皮苷、橙皮苷、黄芩苷、汉黄芩苷、山奈酚及黄芩素7种黄酮类成分含量的方法。方法:采用高效液相色谱-电雾式检测器(HPLC-CAD)法,色谱柱为Waters XBridge C18(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇(A)-20 mmol·L^-1乙酸铵(乙酸调pH至4.5)(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.8 mL·min^-1,柱温35℃,进样量20μL,CAD雾化器温度为35℃,过滤常数5.0。结果:芦丁、槲皮苷、橙皮苷、黄芩苷、汉黄芩苷、山奈酚及黄芩素检测质量浓度线性范围为0.28~5.60μg·mL^-1(r=0.999 2),0.23~4.60μg·mL^-1(r=0.999 6),0.17~3.40μg·mL^-1(r=0.999 1),1.88~37.60μg·mL^-1(r=0.999 6),0.51~10.20μg·mL^-1(r=0.999 5),0.15~3.00μg·mL^-1(r=0.999 4),0.16~3.20μg·mL^-1(r=0.999 1);检测限分别为0.06,0.06,0.06,0.07,0.07,0.05,0.05μg·mL^-1,定量限分别为0.17,0.16,0.16,0.18,0.19,0.13,0.13μg·mL^-1;平均加样回收率分别为99.44%,98.83%,98.44%,98.60%,98.05%,99.02%及98.53%,RSD分别为1.70%,1.47%,0.89%,1.20%,1.13%,1.80%及1.32%(n=6)。结论:本法准确性好,灵敏度高,简便易行,可用于小儿解感片中多指标成分的质量控制研究。