高效液相-电化学法测定人血清中盐酸丁螺环酮含量

目的 :建立快速灵敏的高效液相 电化学检测法 ,测定丁螺环酮的血药浓度。方法 :血清样品用甲苯提取 ,甲苯层经空气流吹干后用流动相定容 ,以 30 μL进样。色谱柱为ZORBAXExtend C18(5 μm ,4 6mm× 15 0mm) ,流动相采用 0 0 2mol·L-1,pH =4 5的磷酸二氢钾缓冲液 甲醇 (6 2∶38,V/V) ,流速为 0 7mL·min-1,外标法峰面积定量。结果 :本法的最低检测浓度为0 6 2ng·mL-1,在 0 6 2～ 31ng·mL-1浓度范围内线性良好 ,回归方程为 :A =- 2 0 1 85 +4 73 42c ,r =0 997。日内精密度为4 6 8%～ 12 0 3% ,日间精密度为 9 79%～ 14 73% ,回收率在 90 %以上。结论 :该法准确、灵敏、快速 。

高效液相色谱-电化学法测定四季青叶中4种化合物的含量

目的:建立同时测定四季青叶中原儿茶酸、咖啡酸、槲皮素和山奈酚4种成分含量的高效液相色谱-电化学(HPLC-ECD)法。方法:采用 Zorbax SB-C_(18)(150 mm×4.6 mm,5.0 μm)色谱柱;以(A)甲醇、(B)水-0.1%醋酸为流动相,梯度洗脱:0min 时 A-B(20:80),9 min 时 A-B(24:76),30 min 时 A-B(50:50),40 min 时 A-B(65:35);流速为0.8 mL·min^(-1),柱温为30℃,电化学检测器的工作电位为0.7 V,采用标准曲线法对4种化合物进行定量。结果:在选定的色谱条件下原儿茶酸、咖啡酸、槲皮素和山奈酚的检出限分别为3,6,2,5 ng,定量限分别为9.1,20.0,7.2,16.0 ng。4种化合物的平均加样回收率均在95.7%～102.6%之间,RSD 在1.6%～2.9%之间。结论:方法简便、准确,可用于同时检测四季青叶中4种化合物的含量。

高效液相色谱-电化学法同时测定多巴丝肼片中2组分含量

目的 :建立高效液相色谱电化学法同时测定多巴丝肼片中左旋多巴 (levodopa,LD)和苄丝肼 (benserazin ,BSZ)的含量。方法 :色谱柱 :SpherisorbODS 2 5 0mm× 4 .0mm柱温 :18℃ ,流动相 :醋酸盐缓冲液 (含柠檬酸 0 .0 3mol·L-1,氢氧化钠0 .0 7mol·L-1,乙酸钠 0 .0 5mol·L-1,用冰醋酸调节 pH至 4 .6 )。流速 :0 .9mL·min-1。电化学检测器 (ECD)。结果 :LD、BSZ的线性范围分别为 0 .2 5～ 10mg·L-1和 0 .0 6 2 5～ 2 .5mg·L-1。LD的回收率为 99.4 %～ 10 2 .4 % ,BSZ回收率为 98.3%～10 1.6 % ,RSD <5 % (n =5 )。LD和BSZ的最低检测浓度分别为 0 .378μg·L-1和 0 .12 4 μg·L-1(S/N >3)。结论 :本法较简便、准确、灵敏度高 。

高效液相色谱-电化学法测定乙肝舒康胶囊中6种酚酸

目的:建立同时测定乙肝舒康胶囊中没食子酸、原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、香草酸和阿魏酸含量的高效液相色谱-电化学(HPLC-ECD)法。方法:采用 Hypersil ODS(4.6mm×250mm,5.0μm)色谱柱;以甲醇(A)-0.1%醋酸水溶液(pH=3.50)(B)为流动相,梯度洗脱:0min,A-B(2:98);17min,A-B(20:80);30min,A-B(90:10),流速为0.8mL·min^(-1),柱温为30℃,电化学检测器的工作电压为0.7V,采用标准曲线法对6种酚酸进行定量。结果:在选定的色谱条件下没食子酸、原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、香草酸和阿魏酸的检出限分别为1,3,3,6,1,5ng。6种酚酸的平均加样回收率均在98.7%～99.6%之间,RSD 在2.1%～3.2%之间。结论:方法简便、快速、准确,可作为检测乙肝舒康胶囊中酚酸类成分含量的有效方法。

高效液相色谱-电化学法测定尿儿茶酚胺及其甲氧基代谢产物在嗜铬细胞瘤诊断中的作用

目的 探讨利用高效液相色谱 -电化学法 (HPLC -ECD)测尿儿茶酚胺 (CA)及其甲氧基代谢产物对嗜铬细胞瘤进行诊断的可行性。方法 2 1 3例高血压患者中有 2 4例在术前测 2 4h尿NE、E等单项指标增高 ,由影像定位确诊并经术后病理检查证实为嗜铬细胞瘤为患病组 ,其余为对照组。结果 嗜铬细胞瘤患者的 2 4h尿E、NE、DA、MN及NM明显高于正常对照组 ,其中变化最明显的是NE与NM ;与正常对照组相比 ,嗜铬细胞瘤患者 2 4h尿NE、NM均明显增加 ,且其NM增加的倍数明显高于NE ,差异有显著性。结论 本方法是一种灵敏、准确的测定手段 ,并可作为从高血压患者中筛选嗜铬细胞瘤的一种方法 ,值得推广。

超高效液相色谱-电化学法检测莲子中的去甲乌药碱

目的通过超高效液相色谱-电化学法(UPLC-ECD)检测莲子中的去甲乌药碱。方法采用UPLC-ECD检测莲子中的去甲乌药碱,将77%的甲醇作为提取溶剂,以0.22μm的滤膜过滤提取液,行色谱分离,制备标准曲线,分析UPLC-ECD对莲子中(包括莲子心和去心莲子)的去甲乌药碱的测定情况。结果UPLC-ECD检测去甲乌药碱的标准曲线在实验浓度0.05~10 mg/L内表现出良好线性关系(R^(2)=0.9987),去甲乌药碱的检测限(LOD)为2.08μg/L,样品平均回收率、相对标准偏差(RSD)分别在94.6%~97.4%、2.9%~3.6%。与去心莲子相比,莲子心中去甲乌药碱含量明显较高。结论UPLC-ECD可检测莲子不同部位中的去甲乌药碱。

格列齐特中亚硝酸盐的电化学测定法

目的:建立高效液相-电化学(ECD)检测法测定格列齐特中亚硝酸盐(NO2-)的残留量。方法:阳离子色谱柱,醋酸盐缓冲液(pH为4.3)为流动相。结果:NO2-线性范围0.04～0.80μg,r=0.999 5,回收率为99.2％,RSD=1.7％(n=9)。结论:方法灵敏,简便,结果准确。

高效液相色谱-电化学法测定大鼠纹状体细胞外液中单胺类神经递质含量

目的:建立应用常规高效液相色谱-电化学法(HPLC-ECD)测定大鼠脑微透析液中单胺类神经递质及其代谢产物。方法:将探针插入大鼠右侧纹状体,在清醒自由活动状态下,用Ringer氏液以1.5μL.min-1的速度灌流,每20 min收集l管透析液,将其注入HPLC-ECD仪,考察本方法的专属性、线性范围、精密度和准确度等,并对其中所含的NE、DA、DOPAC、HIAA、HVA和5-HT进行含量测定。结果:各递质在0.025～0.5 ng.μL-1范围内线性关系良好,方法加样回收完全,日间日内测定均RSD<3.8%。结论:本实验选用了高效液相色谱与电化学检测器连用的方法测定神经递质的含量,该方法简单准确、灵敏、特异性好。

高效液相色谱-脉冲安培电化学检测器法替代微生物检定法测定硫酸新霉素效价的研究

目的建立用于测定硫酸新霉素效价的高效液相色谱-脉冲安培电化学检测器法(HPLC-PAD)。方法建立并验证HPLC-PAD法,测定硫酸新霉素各主要组分含量及相关物质;采用在线膜抑制脱盐技术辅助LC-IT-TOF法测定硫酸新霉素杂质谱,结合组分活性研究确定了硫酸新霉素的主要活性组分;采用半制备液相色谱-蒸发光散射检测器串联制备硫酸新霉素B及硫酸新霉素C精制品,采用波谱手段进行结构确证;采用质量平衡法测定二者的纯度;采用三剂量抗生素微生物检定法测定B、C精制品各自的效价值,推导公式计算出硫酸新霉素的量效转换系数,设计实验进行交互作用考察及实际样品的验证。结果建立的HPLC-PAD方法在分离能力及方法的稳定性上均优于《欧洲药典》(EP)方法,适用于硫酸新霉素各组分的准确定量及有关物质检查;在线膜抑制脱盐技术成功地去除了流动相中的三氟乙酸,对硫酸新霉素的杂质谱进行研究,结合活性研究结果,确定新霉素B和新霉素C为新霉素的主要活性组分;成功制备获得新霉素B、C精制品,通过实验和计算获得了硫酸新霉素的量效转换系数,并通过了验证。结论初步实现了仪器法对微生物生物检定法的替代,基本完成了多组分氨基糖苷类抗生素硫酸新霉素的量效一致性研究工作。

HPLC-ECD法同时测定青天葵中鼠李柠檬素、鼠李秦素的含量

目的采用高效液相-库仑阵列电化学法（HPLC-ECD）同时测定青天葵中鼠李柠檬素和鼠李秦素含量,并对不同培养方法及不同生长阶段的青天葵进行测定分析。方法采用Agilent HC-C18色谱柱（150 mm×4.6mm,5μm）,以甲醇∶乙腈（体积比2∶1）混合后加5%20 mmol·L^-1Na H2PO4（A）-20 mmol·L^-1Na H2PO4水溶液,用H3PO4调p H至2.50（B）为流动相,A∶B=48∶52等度洗脱,流速：1 m L·min^-1,进样量15μL,柱温：35℃,检测电压：50,150 m V。结果鼠李柠檬素和鼠李秦素的线性范围分别为0.2-50.1μg·m L^-1（r=0.9999）和0.15-36.4μg·m L^-1（r=0.9999）,平均回收率（n=9）分别为97.98%（RSD=1.50%）和97.64%（RSD=2.49%）。结论 HPLC-ECD法测定青天葵中鼠李柠檬素、鼠李秦素操作简便、准确,灵敏度高,不同培养阶段药材含有的鼠李柠檬素、鼠李秦的含量有一定差异,可为青天葵质量标准制定及提高提供依据。

随机尿游离型NMN、MN HPLC-ED检测方法的建立和临床应用

目的建立检测随机尿游离型甲氧基去甲肾上腺素(NMN)、甲氧基肾上腺素(MN)的高效液相色谱-电化学(HPLC-ED)方法,并探讨其临床应用价值。方法完善样本处理流程及色谱条件,建立检测随机尿游离型NMN、MN的HPLC-ED法。采用HPLC-ED法检测35例嗜铬细胞瘤患者(嗜铬细胞瘤组)、70例原发性高血压患者(高血压组)、78例非嗜铬细胞瘤肾上腺占位患者(肾上腺占位组)和44名体检健康者(正常对照组)的随机尿和血浆游离型NMN、MN浓度,同时检测肌酐(Cr),计算尿NMN/Cr比值和尿MN/Cr比值。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估各项指标诊断嗜铬细胞瘤的效能。结果HPLC-ED法检测随机尿游离型NMN、MN的线性范围均为25~2500μg/L,检测限[信噪比(RSN)=3]分别为5.9和11.3μg/L,平均回收率为92.8%~103.4%。NMN高、低浓度的批内变异系数(CV)分别为3.7%、2.2%,批间CV分别为5.6%、3.3%;MN高、低浓度批内CV分别为4.3%、2.7%,批间CV分别为5.1%、3.4%。嗜铬细胞瘤组随机尿游离型NMN、MN浓度和尿NMN/Cr比值、尿MN/Cr比值明显高于高血压组、肾上腺占位组及正常对照组(P<0.001),高血压组、肾上腺占位组及正常对照组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线分析结果显示,随机尿游离型NMN、随机尿游离型MN、尿NMN/Cr比值、尿MN/Cr比值、血浆游离型NMN、血浆游离型MN诊断嗜铬细胞瘤的曲线下面积(AUC)分别为0.91、0.88、0.96、0.94、0.93和0.88。嗜铬细胞瘤患者术后1周尿MN/Cr比值均降为正常,但有2例患者术后血浆MN浓度高于术前,有1例患者血浆NMN浓度高于术前。结论建立了检测随机尿游离型NMN、MN浓度的HPLC-ED方法。尿NMN/Cr比值和尿MN/Cr比值诊断嗜铬细胞瘤的效能均优于血浆游离型NMN、MN,且在嗜铬细胞瘤的术后评估中也有较好的价值。

HPLC-ECD法测定小鼠脑组织内去甲肾上腺素的含量

目的:建立小鼠脑内去甲肾上腺素含量的高效液相色谱-电化学(HPLC-ECD)测定方法。方法:小鼠脑组织采用70%高氯酸沉淀蛋白后,以HPLC-ECD法进行分析。使用汉邦lichrospher C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为醋酸钾缓冲液-甲醇(95:5,pH 4.5),流速为1.0 ml·min^(-1),温度为25℃;电化学检测器电压为0.6 V,电流为100 nA,频率为0.05 Hz。结果:去甲肾上腺素在0.1～25μmol·L^(-1)范围内线性关系良好,日内、日间RSD分别小于7.81%和3.61%,回收率为75.05%,测得小鼠脑内去甲肾上腺素含量为(8.94±0.71)μg·g^(-1)。结论:该方法快速、准确。

HPLC-ECD法测定盐酸多巴胺预灌装注射液的含量

目的建立测定盐酸多巴胺预灌装注射液含量的HPLC-ECD方法。方法采用Diamonsil-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.11%庚烷磺酸钠溶液(含0.1 mmol/L EDTA-2Na及5%冰醋酸,用1 mol/L NaOH溶液调节pH值至3.4)-甲醇(70∶30,v/v)为流动相,玻碳电极为工作电极,银/氯化银电极为参比电极,工作电位为+0.65 V,流速1.0 ml/min,柱温20℃。结果盐酸多巴胺在0.05～5μg/ml浓度范围内线性关系良好(r=0.999 9,n=5),平均加样回收率为(99.19±4.03)%(n=3),日内及日间RSD均小于4%(n=3);3批样品中盐酸多巴胺的平均含量相当于标示量的(102.97±1.11)%。结论该方法准确、快速、灵敏度高,能够用于盐酸多巴胺预灌装注射液的含量测定。

药物干预对6-羟基多巴胺处理大鼠的纹状体细胞外液多巴胺的影响

目的 研究古拉定、川芎嗪、丹参对 6 羟基多巴胺 ( 6 OHDA)处理后大鼠的纹状体细胞外液多巴胺 (DA)及其代谢产物的影响。方法 运用 6 OHDA损毁大鼠黑质 ,设立正常对照组、6 O HDA损毁组、损毁后古拉定治疗组、川芎嗪治疗组和丹参治疗组。损毁后 8周用微透析法采集各组大鼠纹状体细胞外液 ,用高效液相色谱 电化学法 (HPLC ECD)检测DA、DOPAC、HVA。结果 发现四组损伤组的DA及其代谢产物含量明显低于正常对照组 (P <0 .0 0 1) ,而三组治疗组与非治疗组组间比较无统计学差异 (P >0 .0 5 )。结论 三种药物不能改变 6

HPLC-ED检测血浆游离型甲氧基肾上腺素类物质诊断嗜铬细胞瘤及预后观察

目的:探讨高效液相色谱-电化学法(high performance liquid chromatography-electrochemical detection,HPLC-ED)检测血浆游离型甲氧基肾上腺素类物质(metanephrines,MNs)在嗜铬细胞瘤中诊断应用和预后观察。方法:采用HPLC-ED检测分析血浆游离型MNs嗜铬细胞瘤患者21例、健康对照组26例、原发性高血压组23例和非嗜铬细胞瘤性肾上腺占位性疾病组24例。结果:嗜铬细胞瘤患者血浆游离型MNs浓度明显高于其他3组(P<0.05);以甲氧基去甲肾上腺素(normetanephrine,NMN)150 ng/L和(或)甲氧基肾上腺素(metanephrine,MN)120 ng/L为切点,诊断敏感度、特异性分别为100%、89%。NMN、MN浓度与肿瘤体积密切相关(NMN:r=0.952,P=0.000;MN:r=0.510,P=0.018)。嗜铬细胞瘤患者在肿瘤切除后血MNs浓度迅速降低。结论:血浆游离型MNs是诊断嗜铬细胞瘤和预后观察的良好标志物。

用反相HPLC－ED法研究人体内复方多巴片的生物利用度

本文用反相ＨＰＬＣ－电化学法（ＨＰＬＣ－ＥＤ）对复方多巴进口片、国产甲片和国产乙片进行了生物利用度研究。１０名健康志愿者交叉、平行、对照口服三种复方多巴片后，测定１４ｈ内不同时间的血药浓度。结果表明，国产片与进口片的相对生物利用度：左旋多巴国产甲片为９９．４０％，乙片为１０４．３０％；卡比多巴国产甲片为９９．９２％，乙片为１０２．７９％。国产片与进口片除左旋多巴中甲片的Ｔｍａｘ和乙片的Ｃｍａｘ、Ｔ１／２（Ｐ＜０．０１）有差异非常显著外，其它各项参数（Ｐ＞０．

冰片对大鼠下丘脑单胺类神经递质的影响

目的观察天然冰片对大鼠下丘脑单胺类神经递质NE、E、5-HT、DA含量的影响,同时进行其时效和量效关系的观察,初步探讨冰片的作用靶点和作用机理。方法将168只Wistar大鼠随机分组,分别灌服生理盐水、1%CMC-Na,以及高、中、低剂量的冰片,每天灌胃2次,在0、45min、24h、72h、120h不同时相,用高效液相-电化学法检测大鼠下丘脑单胺类神经递质NE、E、5-HT、DA含量。结果灌服冰片45min后,冰片中、高剂量组对下丘脑NE含量有显著降低作用(P<0.05);对下丘脑E的含量,中、高剂量组和CMC-Na组相比有明显的降低作用(P<0.05);连续灌胃后,不同时相冰片各组下丘脑NE、E含量和CMC-Na组相比,继续呈现不同程度的下降作用,但对下丘脑5-HT无显著影响;在连续灌胃5d后,对DA含量有显著降低作用(P<0.05)。对大脑皮层乙酰胆碱含量无显著影响,对单胺氧化酶含量有升高的趋势,但除在24h时相,冰片中、高剂量组差异有显著性意义外(P<0.05),其余时相无显著差异。结论冰片在各个时相均有降低下丘脑NE、E含量的作用,而且随着剂量的递增,对下丘脑中的NE、E含量有逐渐降低的趋势,表现出一定的量效关系。推测芳香开窍中药冰片的药理作用方式可能通过调节中枢神经组织中单胺类神经递质含量达到稳态平衡有关。

BCPT对小鼠单胺氧化酶活性和慢性应激抑郁大鼠的影响

目的：研究一种拟青霉代谢物提取物（BCPT）对小鼠单胺氧化酶（MAO）活性和慢性不可预见性应激（CUS）大鼠的影响方法用紫外分光光度计测定小鼠脑、肝组织MAO的活性。采用CUS法，造成大鼠抑郁模型。采用开野法和糖水消耗量法观测大鼠行为；用高效液相-电化学法检测其海马区5-HT、DA、NE及其代谢产物5-HIAA、DOPAC的含量；采用逆转录-聚合酶链反应法检测其皮质和海马区MR、GRmRNA表达；用紫外分光光度计测定其血清MDA、NO、SOD、GSH—PX、CAT含量。

HPLC-ECD法测定大鼠脑组织中单胺类神经递质的含量

目的：建立测定大鼠脑组织中的单胺类神经递质含量的方法。方法：采用高效液相色谱-电化学法，以2，5-二羟基苯甲酸为内标，测定大鼠大脑皮层、小脑、海马组织、下丘脑、嗅球中以去甲肾上腺素（NE）和5-羟色胺（5-HT）为代表的单胺类神经递质的含量。色谱柱为DIKMA C18,流动相为缓冲盐溶液（醋酸钠、庚烷磺酸钠、乙二胺四乙酸二钠和柠檬酸）-甲醇（梯度洗脱），流速为1．0ml／min，工作电压为＋0．7V。结果：NE、5-HT的检测质量浓度线性范围分别为O．084-4．2μg／ml（r=0．9999）和0．005-0．25μg／ml（r=0．9991），平均加样回收率分别为98．85％（RSD=2．89％，n=3）和101．5％（RSD=2．41％，n=3），日内（n=5）和日间（n=3）RSD均不大于3％；NE在小脑中的含量最低[（0．343±0．14）mg／g]，在下丘脑中含量最高[（3．062±1．51）mg／g]；5-HT在小脑中的含量最低[（0．059±0．04）mg／g]，在大脑皮层中含量最高[（0．383±0．21）mg／g]。结论：本方法灵敏、简便、快速，可用于大鼠脑组织中NE、5-HT含量的测定。

HPLC-ECD法测定小鼠血浆中异丙肾上腺素浓度

目的：建立高效液相色谱-电化学法测定小鼠血浆中异丙肾上腺素浓度,为研究其在小鼠体内药代动力学过程提供检测手段。方法：采用SymmetryShield C18柱（4.6 mm×250 mm,5.0μm）,流动相为含0.05 mol.L-1柠檬酸,0.05 mol.L-1无水乙酸钠,0.3 mmol.L-1EDTA-Na2,1.0 mmol.L-1IPR-B8离子对试剂,0.06 mmol.L-1二正丁胺,1.6%甲醇水溶液。流速：0.9 mL.min-1,柱温25℃。以3,4-二羟基苄胺为内标;用电化学检测器测定,检测电压：700 mV。测定小鼠皮下注射异丙肾上腺素（0.75 mg.kg-1）后不同时间的血浆药物浓度,用3P97软件拟合计算相关药动学参数。结果：IP在浓度范围为0.5~294.0 ng.mL-1内,线性关系良好（r=0.9998,n=7）。平均提取回收率为85.8%,平均回收率为100.9%,日内及日间RSD均小于3.9%（n=5）。最低检测限为0.08 ng.mL-1（S/N≥3）。相关药动学参数为AUC0-t=2424.76 min.ng.mL-1,Vc=2774 mL.kg-1,Cl=0.309 mL.g-1.min-1,Ka=（0.9817±0.174）min-1,Lag Time=（0.3076±0.0375）min。结论：本法准确、快速、稳定、灵敏度高,可用于生物样品中异丙肾上腺素浓度测定。