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采用不同疏水相互作用色谱柱从包涵体中快速制备重组人干细胞因子(英文) 被引量:2
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作者 王骊丽 王超展 耿信笃 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期36-41,共6页
为了提高重组人干细胞因子(rhSCF)的复性效率,改进了高效疏水相互作用色谱(HPHIC)纯化和复性rhSCF的方法。首先将目标蛋白溶解于8.0mol/L脲中,然后将rhSCF包涵体的提取液直接进样到不同规格的HPHIC柱进行纯化和复性。优化了固定相配基... 为了提高重组人干细胞因子(rhSCF)的复性效率,改进了高效疏水相互作用色谱(HPHIC)纯化和复性rhSCF的方法。首先将目标蛋白溶解于8.0mol/L脲中,然后将rhSCF包涵体的提取液直接进样到不同规格的HPHIC柱进行纯化和复性。优化了固定相配基结构和流动相组成等实验条件,结果表明,本方法可以快速地获得高质量回收率和高生物活性的rhSCF,rhSCF在40min内即可完成复性与纯化,目标蛋白的纯度在95.5%以上,质量回收率高于49.6%。通过体积排阻色谱和基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)的分析,确认rh-SCF以单体存在。结果进一步证明HPHIC法是同时复性和纯化重组蛋白的有效工具。 展开更多
关键词 高效疏水相互作用色谱 重组人干细胞因子 包涵体
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高效液相色谱法研究水溶性杯[8]芳烃与二苯胺磺酸钠的相互作用 被引量:1
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作者 李来生 黄志兵 +1 位作者 刘旭 王宇晓 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2005年第4期509-511,共3页
采用高效液相色谱法研究了水溶性的对二甲氨甲基杯[ 8 ]芳烃(以下简称杯胺)与二苯胺磺酸钠的相互作用。以水溶性杯胺作流动相添加剂,考察了二苯胺磺酸钠在ODS柱上的色谱保留行为。实验发现,随着杯胺浓度的增大,二苯胺磺酸钠的保留时间... 采用高效液相色谱法研究了水溶性的对二甲氨甲基杯[ 8 ]芳烃(以下简称杯胺)与二苯胺磺酸钠的相互作用。以水溶性杯胺作流动相添加剂,考察了二苯胺磺酸钠在ODS柱上的色谱保留行为。实验发现,随着杯胺浓度的增大,二苯胺磺酸钠的保留时间逐渐延长,这是由于杯胺与溶质二苯胺磺酸钠形成了包结物的缘故。一方面二苯胺磺酸钠易电离,在ODS柱上保留弱;另一方面,由于杯胺对二苯胺磺酸钠的包结作用,降低了其极性,疏水性增强导致保留时间增加。其包结常数测定为1. 17×104 L/mol,包结比为1∶1,这与荧光法测定值2. 0×104 L/mol一致。同时考察了流动相的添加剂浓度、pH值等因素对二苯胺磺酸钠的保留行为的影响。实验表明,杯胺与二苯胺磺酸钠之间主要存在疏水作用和静电作用。 展开更多
关键词 二苯胺磺酸钠 高效液相 杯[8]芳烃 相互作用 水溶性 保留行为 ODS柱 保留时间 实验发现 包结作用 包结常数 静电作用 疏水作用 添加剂 流动相 mol 氨甲基 包结物 疏水 包结比 测定值 荧光法 pH值 浓度 溶质
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高效液相色谱-质谱技术在蛋白质组学中的应用 被引量:1
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作者 刘威 翁凌霄 +1 位作者 高明霞 张祥民 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期601-612,共12页
蛋白质组学研究在生物医学领域发挥了重要作用,然而研究面临的主要难点在于其研究对象的复杂性和多样性。随着质谱技术的快速发展,高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)分离分析复杂生物样品已经成为蛋白质组学研究的基础工具。蛋白质组学的研究... 蛋白质组学研究在生物医学领域发挥了重要作用,然而研究面临的主要难点在于其研究对象的复杂性和多样性。随着质谱技术的快速发展,高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)分离分析复杂生物样品已经成为蛋白质组学研究的基础工具。蛋白质组学的研究从肽段分离,延伸到蛋白质和蛋白质复合物的分离,随着分析物的分子质量不断增大,其结构和组成复杂性也持续增加,分子特性也发生改变。面对不同的蛋白质组学研究对象,选择不同的分离模式、分离条件以及固定相参数是进行深度蛋白质组学研究的关键。本文综述了实验室常用的液相色谱分离模式,包括反相色谱(RPLC)、亲水相互作用色谱(HILIC)、疏水相互作用色谱(HIC)、离子交换色谱(IEC)和体积排阻色谱(SEC),以及其不同的组合模式与质谱联用在自下而上(bottom-up)分析、自上而下(top-down)分析、蛋白-蛋白相互作用分析中应用的研究。具体分析了色谱流动相与被分析对象之间的兼容性问题、色谱流动相与质谱兼容性问题,以及多维色谱中不同色谱模式之间流动相的兼容性问题。重点关注存在不兼容问题时研究者所提出的解决方案。此外,本文还评述了HPLC-MS结合样本前处理的方法在外泌体和单细胞蛋白质组学中的应用研究。总之,文章聚焦于近年来HPLC-MS技术在蛋白质组学中的研究进展,旨在为未来蛋白质组学领域的研究提供参考。 展开更多
关键词 高效液相 反相液相 亲水相互作用 疏水作用 离子交换 体积排阻 蛋白质组学
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高效疏水作用色谱法对还原变性溶菌酶的折叠研究 被引量:3
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作者 王彦 耿信笃 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期218-221,共4页
首次用高效疏水相互作用色谱(HPHIC)研究了还原变性溶菌酶(Lys)的复性。对还原变性Lys在3种疏水性不同的色谱柱上的复性情况进行了考察,发现还原变性Lys在疏水性最弱的XDM GM1型色谱柱上的复性效率最高,当Lys质量浓度为2 0g/L时,其复性... 首次用高效疏水相互作用色谱(HPHIC)研究了还原变性溶菌酶(Lys)的复性。对还原变性Lys在3种疏水性不同的色谱柱上的复性情况进行了考察,发现还原变性Lys在疏水性最弱的XDM GM1型色谱柱上的复性效率最高,当Lys质量浓度为2 0g/L时,其复性效率可达到94 6%。 展开更多
关键词 高效疏水相互作用色谱 还原变性 溶菌酶 蛋白质 折叠 复性
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疏水相互作用与亲水相互作用组合色谱纯化缩宫素 被引量:2
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作者 张晓鸥 宋茂谦 +2 位作者 王长海 Jan-Christer Janson 顾铭 《过程工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期598-602,共5页
将疏水相互作用色谱与亲水相互作用色谱结合,建立了用于化学合成缩宫素粗品分离纯化的两步纯化工艺.先以纯水为流动相,采用Nylon6疏水相互作用色谱对粗品进行脱盐与富集,后以Superose12亲水相互作用色谱进行进一步纯化,两步纯化后,峰面... 将疏水相互作用色谱与亲水相互作用色谱结合,建立了用于化学合成缩宫素粗品分离纯化的两步纯化工艺.先以纯水为流动相,采用Nylon6疏水相互作用色谱对粗品进行脱盐与富集,后以Superose12亲水相互作用色谱进行进一步纯化,两步纯化后,峰面积纯度达93.5%,提高了5.96倍,总回收率为50.1%,与用C18为介质的传统两步反相色谱纯化的结果相当.本方法有机溶剂用量仅为传统反相色谱的1/7,且两种介质都能耐受极端pH值清洗条件,重复利用率高. 展开更多
关键词 聚己内酰胺 琼脂糖凝胶 疏水相互作用 亲水相互作用 缩宫素 纯化
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超高效液相色谱结合亲水相互作用色谱法测定普鲁卡因青霉素注射液中普鲁卡因和青霉素的含量 被引量:1
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作者 吴剑平 姜芹 +3 位作者 王博 严凤 张文刚 黄士新 《中国兽药杂志》 2020年第4期41-46,共6页
建立了超高效液相色谱结合亲水相互作用色谱法测定普鲁卡因青霉素注射液中的主成分含量的方法。精密量取1.00 mL样品悬浊液置分液漏斗中,加入石油醚和甲醇震摇提取。静置分层后将下层提取液取出置容量瓶中以甲醇定容至刻度。提取液经稀... 建立了超高效液相色谱结合亲水相互作用色谱法测定普鲁卡因青霉素注射液中的主成分含量的方法。精密量取1.00 mL样品悬浊液置分液漏斗中,加入石油醚和甲醇震摇提取。静置分层后将下层提取液取出置容量瓶中以甲醇定容至刻度。提取液经稀释至适当浓度后过0.22μm滤膜,上机测定。目标物使用超高效液相色谱等度洗脱分离。以亲水相互作用色谱柱为固定相,以0.05 mol/L甲酸铵溶液(pH=4.00)∶乙腈=10∶90为流动相。紫外二级管阵列检测器检测235 nm波长处吸收进行定量分析。实验结果表明,该方法在青霉素含量40~800 mg/mL,普鲁卡因含量50~1000 mg/mL内线性关系良好(r>0.999),其添加回收率在92%~105%,RSD<3%,表明该方法具有较好的准确度与精密度。通过与《中国兽药典2015版一部》普鲁卡因青霉素注射液含量测定项下方法所测得结果的比较,两者RSD<3%,表明结果一致。 展开更多
关键词 普鲁卡因 青霉素 高效液相 亲水相互作用
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高效疏水作用色谱填料的合成及其在重组人干扰素纯化中的应用 被引量:2
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作者 郭立安 朱宝泉 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1997年第9期1462-1464,共3页
The synthesis of packing of oxygen-ethane as end-ligand bonded to silica andseparation for recombinant human interferons(rhIFN) in high-performance hydrophobicinteraction chromatography has been studied in this paper.... The synthesis of packing of oxygen-ethane as end-ligand bonded to silica andseparation for recombinant human interferons(rhIFN) in high-performance hydrophobicinteraction chromatography has been studied in this paper. It was showed that the packingsynthesized was not only suitable for separating standard proteins, but also for different rhIFNs,i. e., rhIFN-αA expressed in yeast, rhIFN-αA and rh1FN-γ in E. colt. The purify of threerhIFNs purified by one-step HPHIC, which rhIFN-γ expressed in E. colt was recognized as80%, rhIFN-αA expressed in yeast as 70%, and rhIFN-αA expressed in E. colt as 30%, wasmore than that of other chromatography besides affinity chromatography. 展开更多
关键词 高效 疏水作用 干扰素 HPHIC 填料 人干扰素
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反相离子对色谱研究铝与儿茶酚胺的相互作用 被引量:1
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作者 练鸿振 戴翔 +2 位作者 邹公伟 毕树平 田笠卿 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期419-420,共2页
用反相离子对高效液相色谱法初步研究了铝与儿茶酚胺的相互作用。结果显示,去甲肾上腺素的峰高随加入铝的增加而线性下降,铝与去甲肾上腺素的配位比为1∶1。该项研究为进一步活体测定铝提供了一条新思路。
关键词 反相离子 高效液相 儿茶酚胺 相互作用
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高效液相色谱法研究与蛋白结合中的药物相互作用
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作者 李发美 郭兴杰 +2 位作者 乔明曦 熊志立 周大炜 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期349-353,共5页
Drugs in the body are bound to metabolizing enzymes, targets/receptors and transport proteins in certain extent. The binding of drugs to targets or receptors is mainly specific and responsible for its pharmacological ... Drugs in the body are bound to metabolizing enzymes, targets/receptors and transport proteins in certain extent. The binding of drugs to targets or receptors is mainly specific and responsible for its pharmacological and therapeutic effects. The metabolizing of drugs by enzyme involves both specific and non-specific binding. Drugs interact to a different degree with proteins in blood non-specifically, which affects the distribution, metabolism, elimination, and pharmacological action. These binding properties are characteristic for a particular drug. Therefore, characterization of protein binding of drugs is important not only in therapeutic drug monitoring but also in early drug development. The binding of drugs to various proteins has been extensively studied. However, drugs may interact with each other in these binding reactions. Simultaneous administration of drugs influences their protein binding behavior, subsequently their absorption, excretion, distribution, efficacy and toxicity, which has been observed in many cases such as warfarin and phenylbutazone[1], cefazolin and cefoperazone[2]. Depending on the concentrations and their relative affinities for the binding sites, one drug may compete with another and displace it from the binding sites. The purpose of this study is emphasized on the evaluation of drug interaction in binding to protein. 展开更多
关键词 蛋白质结合 高效液相 化学发光检测 青霉素 头孢哌酮 血清白蛋白 药物相互作用
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用于蛋白质的分离和蛋白质组学研究的高稳定性疏水相互作用色谱柱
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作者 Srinivasa Rao Andrei Bordunov +1 位作者 Andrea Heckenberg Christopher Pohl 《生命科学仪器》 2007年第5期45-47,共3页
本文介绍了一种以硅胶为基质,修饰多功能氨基官能团的疏水相互作用色谱固定相。由于同时具有疏水和亲水配基,这种固定相在水相中的稳定性得到了改善。这种修饰还能改善蛋白/多肽分离的分辨率和柱效,同时延长色谱柱的使用寿命。
关键词 疏水相互作用 蛋白质组学 高稳定性 分离 固定相 使用寿命 官能团
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RNase等10种标准蛋白质在高效疏水作用色谱上的复性
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作者 黄亚渝 童卫 郭立安 《第四军医大学学报》 北大核心 2005年第8期682-684,共3页
目的: 研究变性蛋白质在高效疏水作用色谱(HPH IC)上的保留行为及复性效率. 方法: 分别用盐酸胍(Gu HCl)、尿素(Urea)和十二烷基磺酸钠(SDS)将核糖核酸酶(RNase)等10种标准蛋白质变性,然后在流动相为硫酸铵的条件下,用HPHIC对变性蛋白... 目的: 研究变性蛋白质在高效疏水作用色谱(HPH IC)上的保留行为及复性效率. 方法: 分别用盐酸胍(Gu HCl)、尿素(Urea)和十二烷基磺酸钠(SDS)将核糖核酸酶(RNase)等10种标准蛋白质变性,然后在流动相为硫酸铵的条件下,用HPHIC对变性蛋白质进行复性,并测定其保留时间、Z值、质量及活性回收率. 结果: 在10种变性蛋白质中有5种在HPHIC上得到复性,其保留时间、峰形、Z值与天然蛋白基本一致,其中溶菌酶和核糖核酸酶的质量和活性回收率高,复性效果好. 结论: 用HPHIC对变性的标准蛋白质进行复性,得到较好的复性效果. 展开更多
关键词 蛋白质变性 蛋白质复性 高效疏水作用
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色谱技术在药物-血浆蛋白相互作用研究中的应用进展 被引量:2
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作者 白玉 范玉凡 +1 位作者 葛广波 王方军 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1077-1085,共9页
小分子药物进入人体血液循环系统后与人血清白蛋白(HSA)、α1-酸性糖蛋白(AGP)等血浆蛋白存在广泛的相互作用,这些相互作用深刻影响药物在体内的分布及其与靶标蛋白的结合,进而影响药物效应的发挥。深入探究药物与血浆蛋白间的相互作用... 小分子药物进入人体血液循环系统后与人血清白蛋白(HSA)、α1-酸性糖蛋白(AGP)等血浆蛋白存在广泛的相互作用,这些相互作用深刻影响药物在体内的分布及其与靶标蛋白的结合,进而影响药物效应的发挥。深入探究药物与血浆蛋白间的相互作用对于候选药物的成药性优化、新药研发、联合用药的风险评控等意义重大。而发展高效、灵敏、准确的分析检测方法是开展药物-血浆蛋白相互作用研究的关键。近年来,色谱技术由于其高通量、高分离性能、高灵敏度等特点在该领域得到了广泛的应用,包括测定血浆蛋白翻译后修饰对药物结合的影响,多种药物的竞争性结合等。其中,高效亲和色谱(HPAC)和毛细管电泳(CE)应用最为广泛,能够通过多种分析方法获取结合常数、结合位点数、解离速率常数等相互作用信息。该文着重综述了HPAC和CE在药物-血浆蛋白相互作用研究中的常用策略及最新研究进展,包括HPAC中常用的前沿色谱法、竞争洗脱法、超快亲和提取法、峰值分析法和峰衰减分析法,以及CE中常用的亲和毛细管电泳法(ACE)和毛细管电泳前沿分析法(CE-FA)等。最后,该文还对当前色谱方法存在的不足进行了总结,并对色谱技术在药物-血浆蛋白相互作用研究领域的应用前景和发展方向进行了展望。 展开更多
关键词 药物-血浆蛋白相互作用 高效亲和 毛细管电泳 综述
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一种聚合型弱阳离子交换/亲水相互作用色谱固定相的制备及色谱性能 被引量:5
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作者 娄旭华 左慧颖 +1 位作者 王媛 赵文杰 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期430-437,共8页
通过亲核取代反应将聚乙烯马来酸酐键合到氨基硅胶表面,然后将残余的马来酸酐水解,制备了一种弱阳离子交换/亲水相互作用高效液相色谱固定相(Sil-PolyCOOH),通过固体核磁、ζ-电势及元素分析对固定相进行了表征。选取核苷和核酸碱为模... 通过亲核取代反应将聚乙烯马来酸酐键合到氨基硅胶表面,然后将残余的马来酸酐水解,制备了一种弱阳离子交换/亲水相互作用高效液相色谱固定相(Sil-PolyCOOH),通过固体核磁、ζ-电势及元素分析对固定相进行了表征。选取核苷和核酸碱为模型化合物,通过考察流动相组成,离子强度和pH等因素对溶质保留的影响,探讨了固定相的分离性能和保留机理,结果表明,该固定相的保留机理同时涉及亲水分配相互作用和多重主客体作用力。该固定相还对糖类、敌草快与百草枯等化合物具有良好的分离性能。上述研究结果表明该固定相在极性化合物的分离上具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 亲水相互作用 高效液相 弱阳离子交换 聚乙烯马来酸酐 固定相
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疏水作用色谱法同时纯化及复性基因重组人干扰素-α 被引量:5
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作者 郭立安 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期301-303,共3页
使用高效疏水作用色谱直接从大肠杆菌表达的基因重组人干扰素 α(rhIFN α)包涵体的裂解液中纯化了rhIFN α ,并在纯化的同时获得了高的复性效率 ,使复性和纯化一步完成 ,大大地简化了操作步骤。用凝胶排阻色谱对该法纯化的rhIFN α进... 使用高效疏水作用色谱直接从大肠杆菌表达的基因重组人干扰素 α(rhIFN α)包涵体的裂解液中纯化了rhIFN α ,并在纯化的同时获得了高的复性效率 ,使复性和纯化一步完成 ,大大地简化了操作步骤。用凝胶排阻色谱对该法纯化的rhIFN α进行了纯度测定 ,纯度达到 95 %以上。该法的活性回收率分别比稀释法和透析法高 1 0倍和 1 展开更多
关键词 高效液相 纯化 重组蛋白质 基因重组人干扰素-α 高效疏水作用
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高效液相色谱法检测疏水缔合聚合物中残余丙烯酰胺单体
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作者 许汇 夏燕敏 李慧琴 《油气田环境保护》 CAS 2016年第6期35-39,53,共6页
以异丙醇-乙醇的混合液为沉淀剂,将疏水缔合聚合物从异丙醇-乙醇-水溶液中沉淀,提取溶液中的丙烯酰胺及其他小分子,分析了聚合物中小分子的种类和分析条件。结果表明:在适合的分析条件下其他小分子化合物对丙烯酰胺含量的分析没有... 以异丙醇-乙醇的混合液为沉淀剂,将疏水缔合聚合物从异丙醇-乙醇-水溶液中沉淀,提取溶液中的丙烯酰胺及其他小分子,分析了聚合物中小分子的种类和分析条件。结果表明:在适合的分析条件下其他小分子化合物对丙烯酰胺含量的分析没有影响;同时考察了样品前处理对测试结果的影响,得到了最佳的样品前处理方法,为:聚合物用量为0.2g,混合溶剂为水-乙醇-异丙醇混合溶液,三者质量比为(43~47):1:(52~56),沉淀剂为异丙醇-乙醇混合溶液,两者质量比约为99:1。该方法对疏水缔合聚合物色谱前处理效果良好,方法简便易行,测试结果准确可靠。 展开更多
关键词 疏水缔合聚合物 残余丙烯酰胺单体 高效液相
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无机基质疏水作用色谱填料的研制及扩试 被引量:1
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作者 何秀娟 赵睿 +3 位作者 吴晓军 乔桂娟 王萍 刘国诠 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期225-227,共3页
以无机基质可控孔径玻璃(CPG)和大孔硅胶为基质、聚乙二醇(PEG1000)为配基,利用改进的合成方法制备了疏水作用色谱(HIC)填料,并进行了150g/批的扩大试验,用标准蛋白为样品进行了色谱行为的研究。结果表明,... 以无机基质可控孔径玻璃(CPG)和大孔硅胶为基质、聚乙二醇(PEG1000)为配基,利用改进的合成方法制备了疏水作用色谱(HIC)填料,并进行了150g/批的扩大试验,用标准蛋白为样品进行了色谱行为的研究。结果表明,此类填料对蛋白质的分离性能良好,对胰蛋白酶的活性回收率大于95%。 展开更多
关键词 高效液相 疏水作用填料 蛋白质
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高效疏水电荷诱导色谱介质的基团修饰及其色谱行为的初步研究 被引量:1
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作者 郑梦杰 夏海锋 +2 位作者 吴婷 陆杰 彭奇均 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1044-1050,共7页
以粒径10μm、孔径300球形硅胶为载体,以γ-缩水甘油醚氧丙基三甲氧基硅烷(KH-560)为中间偶联剂,将4-巯基吡啶键合至硅胶上,制备了高效疏水电荷诱导色谱介质。通过单因素实验,探讨了反应温度、反应时间、KH-560的浓度对活化密度的影响... 以粒径10μm、孔径300球形硅胶为载体,以γ-缩水甘油醚氧丙基三甲氧基硅烷(KH-560)为中间偶联剂,将4-巯基吡啶键合至硅胶上,制备了高效疏水电荷诱导色谱介质。通过单因素实验,探讨了反应温度、反应时间、KH-560的浓度对活化密度的影响,结果表明,在反应温度为75℃,反应时间为10 h条件下,KH-560的利用率大,可获得较宽范围的活化密度,此外还考察了缓冲液pH、反应温度、反应时间、4-巯基吡啶浓度对偶联密度的影响。结果表明,在pH=7.5的缓冲液,反应温度40℃,反应时间6 h下,4-巯基吡啶利用率高,通过控制4-巯基吡啶的浓度,可获得较宽范围的配基密度。最后,于高效液相色谱条件下,通过等度洗脱,考察了流动相pH对牛血清蛋白和溶菌酶保留因子的影响。并通过梯度洗脱,分离了不同等电点的牛血清蛋白和溶菌酶,验证了该介质的高效疏水电荷诱导色谱行为。 展开更多
关键词 球形硅胶 高效疏水电荷诱导 4-巯基吡啶 基团修饰 牛血清白蛋白 溶菌酶
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疏水整体柱在线固相萃取与高效液相色谱-串联质谱联用测定牛肝中5种阿维菌素类药物残留 被引量:12
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作者 李欣 张瑶琴 +4 位作者 艾连峰 王学生 王曼曼 徐厚君 郝玉兰 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期590-596,共7页
建立了牛肝中5种阿维菌素类药物残留的疏水整体柱在线固相萃取结合高效液相色谱-串联质谱测定的方法。以疏水的聚(甲基丙烯酸丁酯-乙二醇二甲基丙烯酸酯)整体柱(10 mm×2.1 mm)作为固相萃取介质,考察了上样流动相和洗脱流速对... 建立了牛肝中5种阿维菌素类药物残留的疏水整体柱在线固相萃取结合高效液相色谱-串联质谱测定的方法。以疏水的聚(甲基丙烯酸丁酯-乙二醇二甲基丙烯酸酯)整体柱(10 mm×2.1 mm)作为固相萃取介质,考察了上样流动相和洗脱流速对阿维菌素类药物的萃取效果,优化了梯度洗脱流动相的种类及质谱条件。方法在1-100μg/L范围内线性关系良好(r〉0.995),定量限为5μg/kg。在5、10、50、100μg/kg添加水平的回收率为77.4%-98.4%,日内和日间相对标准偏差分别为4.46%-8.03%和4.79%-8.68%,并且该柱反复使用400次后未发现萃取效率降低。结果表明,该整体柱对牛肝中5种阿维菌素类药物能够有效萃取,并且可以重复使用。该方法简单,自动化程度高,可应用于常规阿维菌素类药物残留分析。 展开更多
关键词 疏水整体柱 在线固相萃取 高效液相-串联质 阿维菌素类药物 牛肝
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虎杖提取物中白藜芦醇的定性定量分析及其与β-乳球蛋白相互作用的质谱研究
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作者 李玲鹤 徐康宁 +1 位作者 张文祥 王献 《中医药导报》 2016年第18期49-52,共4页
目的:通过构建高效液相色谱-四极杆-时间飞行(HPLC-Q-TOF)高分辨质谱方法定性地鉴定虎杖醇提物的主要组分,对其中的活性成分白藜芦醇含量进行定量分析,并用电喷雾质谱法(ESI-MS)首次研究白藜芦醇与β-乳球蛋白的相互作用。方法... 目的:通过构建高效液相色谱-四极杆-时间飞行(HPLC-Q-TOF)高分辨质谱方法定性地鉴定虎杖醇提物的主要组分,对其中的活性成分白藜芦醇含量进行定量分析,并用电喷雾质谱法(ESI-MS)首次研究白藜芦醇与β-乳球蛋白的相互作用。方法:定性分析采用高效液相色谱-四极杆-时间飞行(HPLC-Q-TOF)高分辨质谱方法,使用AgilentZORBAXEclipseXDB-C18柱(2.1×150mm,5-Micron),流动相为甲醇-水溶液,梯度洗脱:0~30min10%~90%甲醇,30.40min90%甲醇,40~60min90%~10%甲醇,柱温:40℃,进样量:2μL,流速:0.2mL/min-1,虎杖醇提物采用HPLC-Q-TOF负离子检测模式。结果:由高效液相分离和质谱特征负离子的精确质量解析,共鉴别出虎杖中13种化合物,测定出实验所用虎杖中白藜芦醇的含量为1.181mg/g,观测到白藜芦醇与β-乳球蛋白能形成稳定的蛋白复合物。结论:该方法定性分析了虎杖醇提物中主要药用成分,首次利用ESI-MS法研究了β-乳球蛋白与白藜芦醇的相互作用,检测到两者能有效形成稳定的蛋白复合物,有助于开发一种新的途径以提高白藜芦醇的稳定性和生物利用率。 展开更多
关键词 虎杖 白藜芦醇 Β-乳球蛋白 蛋白质与配体相互作用 高效液相-质联用
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新型高效液相色谱酰胺键合固定相的制备与评价 被引量:7
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作者 马言顺 龙远德 +1 位作者 翦英红 黄天宝 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2004年第2期232-236,共5页
将YWG 80硅胶和 3 氨基丙基三甲氧基硅烷反应后与 2 壬基丁二酰氯反应制得一种新型双齿酰胺键合固定相 (BABSP 2 )。采用元素分析和傅里叶变换红外光谱表征了键合相 ;用芳香族化合物溶质和甲醇 水二元流动相 ,考察了键合相的疏水选择... 将YWG 80硅胶和 3 氨基丙基三甲氧基硅烷反应后与 2 壬基丁二酰氯反应制得一种新型双齿酰胺键合固定相 (BABSP 2 )。采用元素分析和傅里叶变换红外光谱表征了键合相 ;用芳香族化合物溶质和甲醇 水二元流动相 ,考察了键合相的疏水选择性和亲硅醇基活性 ;评估了在酸性条件下 (pH 2 .5 )的水解稳定性。结果表明 :BABSP 2能有效抑制残留硅醇基活性 。 展开更多
关键词 高效液相 双齿酰胺键合固定相 制备 评价 水解稳定性 疏水选择性 亲硅醇基活性
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