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高敏荧光层析法在骆驼布鲁氏菌病流行病学调查中的应用 被引量:1
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作者 马晓菁 努尔巴哈提·努尔旦 +6 位作者 刘丽娅 李威 剡文亮 叶锋 谷文喜 章健 易新萍 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期466-470,共5页
目的了解新疆部分地区骆驼布鲁氏菌病(简称布病)流行情况,探索高敏荧光层析法在骆驼布病流行病学调查中的应用。方法分别在新疆阿勒泰地区、塔城地区、和田地区、伊犁地区、博尔塔拉蒙古自治州采集骆驼血清2000份,骆驼乳307份。应用布... 目的了解新疆部分地区骆驼布鲁氏菌病(简称布病)流行情况,探索高敏荧光层析法在骆驼布病流行病学调查中的应用。方法分别在新疆阿勒泰地区、塔城地区、和田地区、伊犁地区、博尔塔拉蒙古自治州采集骆驼血清2000份,骆驼乳307份。应用布病虎红平板凝集试验(RBT)和试管凝集试验(SAT)进行骆驼布病血清学调查。提取骆驼乳基因组DNA,应用实时荧光PCR(Realtime-PCR)和AMOS-PCR方法进行病原学检测并分型。同时应用高敏荧光层析法对200份骆驼血清和100份骆驼乳样进行布病符合率检测。结果新疆5个地区骆驼血清SAT确诊阳性31份,布病血清学阳性率为1.55%(31/2000)。307份骆驼乳经Realtime-PCR检测,5份骆驼乳出现扩增曲线且Ct值在29.65~33.68,骆驼乳布鲁氏菌核酸阳性率为1.63%(5/307)。其中2份骆驼乳提取基因组DNA经AMOS-PCR扩增获得498 bp目的条带,测序并在NCBI进行BLAST比对分析,结果与牛种生物I型布鲁氏菌序列同源性在99.8%~100%。高敏荧光层析法检出骆驼布病阳性血清33份,阴性血清167份,该方法敏感性为96.77%,特异性为98.22%,与SAT检测方法总体符合率为98%,两种方法的Kappa值为0.925。高敏荧光层析法对100份骆驼乳检出布病抗体阳性乳7份,阴性乳93份,该方法与病原学检测方法(Realtime-PCR)总体符合率为98%。结论布鲁氏菌高敏荧光层析法具有灵敏度和特异度高的优点,且与布病常规检测方法符合率较好,可用于骆驼布病现场快速检测。骆驼布病流行病学调查数据提示应加强骆驼布病防控,同时加强骆驼乳的食品安全监管。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 骆驼 高敏荧光 流行病学
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高敏荧光免疫层析分析法检测牛分枝杆菌抗体 被引量:1
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作者 张家瑞 屈勇刚 +6 位作者 樊晓旭 张力 剡文亮 孙淑芳 李敏 岳建国 李岩 《中国动物检疫》 CAS 2022年第11期121-125,共5页
为探究高敏荧光免疫层析分析法检测牛分枝杆菌(M. bovis)抗体的可行性,对该方法的特异性、灵敏性、稳定性及临床适用性进行了分析。特异性试验结果显示,该方法能够检出M. bovis抗体阳性血清参考品,而对布鲁氏菌阳性血清、O型口蹄疫阳性... 为探究高敏荧光免疫层析分析法检测牛分枝杆菌(M. bovis)抗体的可行性,对该方法的特异性、灵敏性、稳定性及临床适用性进行了分析。特异性试验结果显示,该方法能够检出M. bovis抗体阳性血清参考品,而对布鲁氏菌阳性血清、O型口蹄疫阳性血清、A型口蹄疫阳性血清、样品稀释液、结核菌素皮内变态反应(TST)阴性牛血清样品等均为阴性;灵敏性试验结果显示,该方法最低可检测到3 200倍稀释的牛结核(bTB)强阳性血清参考品;稳定性试验结果显示,该方法检测bTB强阳性血清和阳性血清的变异系数分别为5.48%和5.83%;临床样本检测结果显示,该方法与IDEXX M bovis ELISA抗体检测试剂盒的符合率为86.36%,具有较高的一致性,且差异不显著。以上结果表明,高敏荧光免疫层析分析法特异性强、灵敏度高、结果可靠,可作为TST检疫的补充抗体检测方法,用于bTB的诊断、检疫和净化。 展开更多
关键词 牛结核病 牛分枝杆菌 高敏荧光免疫层析分析法 抗体检测
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高敏与普通荧光定量PCR技术在慢乙肝患者抗病毒疗效监测中的对比研究 被引量:13
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作者 卢建华 杨莉 +5 位作者 赵召霞 李芊璘 李敏然 刘玉珍 戴二黑 陈秀丽 《分子诊断与治疗杂志》 2019年第5期361-364,共4页
目的比较高灵敏度与普通荧光定量PCR技术在慢性乙型肝炎(CHB)患者抗病毒疗效监测中的区别。方法对49例CHB患者141份采用普通PCR检测结果为阴性(<500 IU/mL)标本,采用高敏PCR试剂进行复查。结果根据高敏PCR血清HBV DNA定量检测结果,14... 目的比较高灵敏度与普通荧光定量PCR技术在慢性乙型肝炎(CHB)患者抗病毒疗效监测中的区别。方法对49例CHB患者141份采用普通PCR检测结果为阴性(<500 IU/mL)标本,采用高敏PCR试剂进行复查。结果根据高敏PCR血清HBV DNA定量检测结果,141份采用普通PCR检测结果阴性标本存在以下5种状况,即>500、20~500、10~20、<10 IU/mL和阴性,比例分别为13.5%、31.9%、18.4%、30.5%和5.7%。随着血清HBV DNA水平的逐渐增高,各组ALT、AST水平和异常升高率也存在逐渐增加的趋势,但是仅仅各组AST水平差异有显著意义(P<0.05)。随着血清HBV DNA水平逐渐降低,各组血清HBeAg阳性率和水平也存在逐渐降低的趋势。其中,HBV DNA阴性组血清HBeAg阳性率显著低于10~20 IU/mL组和>500 IU/mL组(P<0.05)。结论与普通PCR技术相比,高灵敏度的HBV DNA荧光定量PCR技术在CHB患者抗病毒治疗监测中准确性更高。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 抗病毒治疗 疗效监测 HBV DNA 高敏荧光定量PCR
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高敏定量荧光免疫层析法、ELISA法检测猪、牛、羊O型口蹄疫病毒抗体的临床对比试验 被引量:3
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作者 杨爱华 李秀梅 +5 位作者 李颖 王健春 赵静 朱雅宁 郭恋 尹春博 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第22期96-98,共3页
为了将新型的O型口蹄疫病毒抗体高敏定量荧光免疫层析技术应用于天津市基层检测,将该技术与实验室常用的液相阻断酶联免疫吸附法(ELISA)进行了对比试验,对100份猪血清、100份牛血清、50份羊血清进行检测,猪、牛、羊的O型口蹄疫病毒抗... 为了将新型的O型口蹄疫病毒抗体高敏定量荧光免疫层析技术应用于天津市基层检测,将该技术与实验室常用的液相阻断酶联免疫吸附法(ELISA)进行了对比试验,对100份猪血清、100份牛血清、50份羊血清进行检测,猪、牛、羊的O型口蹄疫病毒抗体高敏定量荧光免疫层析法准确度分别为90. 0%、95. 0%、82. 0%,特异性分别为89. 2%、100%、85. 7%,敏感性分别为90. 5%、94. 9%、80. 6%。猪、牛、羊的O型口蹄疫病毒抗体高敏定量荧光免疫层析法与液相阻断ELISA方法的符合率分别达到90. 0%、95. 0%、82. 0%。说明利用高敏定量荧光免疫层析技术可在基层现场对家畜O型口蹄疫病毒抗体进行检测,能够及时有效地评价O型口蹄疫疫苗的临床免疫状况。 展开更多
关键词 O型口蹄疫病毒 高敏定量荧光免疫层析 ELISA 抗体 疫苗
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MRI结合高敏的实时荧光定量PCR对代偿期乙型肝炎肝硬化与微量HBV-DNA的早期诊断 被引量:1
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作者 陈南清 孙家敏 +3 位作者 卢穗万 黄永清 陈俊辉 傅丽芳 《福建医药杂志》 CAS 2015年第4期124-126,共3页
目的探讨MRI结合高敏的实时荧光定量PCR(HSFQ-PCR)对代偿期乙型肝炎肝硬化(CSHBC)与微量HBV-DNA的早期诊断作用。方法共调查100例住院的慢性乙型肝炎(CHB)患者,对各例患者使用B超未发现CSHBC且使用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)未检出HBV-DNA... 目的探讨MRI结合高敏的实时荧光定量PCR(HSFQ-PCR)对代偿期乙型肝炎肝硬化(CSHBC)与微量HBV-DNA的早期诊断作用。方法共调查100例住院的慢性乙型肝炎(CHB)患者,对各例患者使用B超未发现CSHBC且使用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)未检出HBV-DNA者,再行MRI检查和高敏的实时荧光定量PCR(HSFQ-PCR)进一步排查可能存在的CSHBC与微量HBV-DNA。结果在100例CHB患者中,检出5例(5%)CSHBC同时存在微量HBV-DNA的患者,并给予抗病毒治疗。结论应用MRI结合HSFQ-PCR法可在CHB中早期发现可能漏诊的CSHBC与微量HBV-DNA,对此类患者给予及时的抗病毒治疗可延缓病情向DSHBC与HCC进展。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 代偿期乙型肝炎肝硬化 失代偿期乙型肝炎性肝硬化 磁共振成像 高敏的实时荧光定量PCR
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国产高敏HCV-RNA定量试剂与国产普敏及进口高敏试剂一致性分析
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作者 刘婷 武建明 +2 位作者 姚亮 佟艳会 戚应杰 《大医生》 2023年第4期1-6,共6页
目的分析国产高敏HCV-RNA核酸检测试剂与国产普敏、进口高敏HCV-RNA核酸检测试剂的一致性。方法选取2021年1月至9月中国科学技术大学附属第一医院感染病医院检验科收录的丙肝患者临床样本165例,分别采用国产高敏HCV-RNA核酸检测试剂A与... 目的分析国产高敏HCV-RNA核酸检测试剂与国产普敏、进口高敏HCV-RNA核酸检测试剂的一致性。方法选取2021年1月至9月中国科学技术大学附属第一医院感染病医院检验科收录的丙肝患者临床样本165例,分别采用国产高敏HCV-RNA核酸检测试剂A与国产普敏HCV-RNA核酸检测试剂B进行HCV-RNA定量检测,对两种HCV-RNA定量检测试剂定量结果均为阳性的样本(≥500 IU/mL,87例)进行Bland-Altman一致性分析;选择稀释样本(15~500 IU/mL,60例),采用国产高敏HCV-RNA核酸检测试剂A与进口高敏HCV-RNA核酸检测试剂C进行HCV-RNA平行定量检测,对两种HCV-RNA定量检测试剂定量结果进行Bland-Altman一致性分析。结果Bland-Altman分析显示试剂A与试剂B定量值差值均值为(-0.0326)log_(10)IU/mL,95%置信区间为(-0.4626~0.3974)log_(10)IU/mL,95.4%(83/87)的样本检测值在95%置信区间内。试剂A与试剂C定量值差值均值为0.1800 log_(10)IU/mL,95%可信区间为(-0.0907~0.4506)log_(10)IU/mL,96.67%(58/60)的样本检测值在95%置信区间内。结论国产高敏定量试剂A与国产普敏定量试剂B在≥500 IU/mL检测结果具有一致性,国产高敏定量试剂A与进口高敏定量试剂C在15~500 IU/mL具有检测结果高度一致性。 展开更多
关键词 体外诊断试剂 高敏HCV-RNA荧光定量PCR 对比分析
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高敏与普通荧光定量PCR技术在不同病毒载量慢乙肝患者HBV-DNA检测的一致性及应用价值 被引量:3
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作者 李静 毕燕华 +5 位作者 黄月华 顾玉荣 台艳 许颖君 廖春红 刘忠华 《热带医学杂志》 CAS 2023年第2期198-202,共5页
目的比较高灵敏度与普通荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法对乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)定量检测结果的相关性与一致性。方法收集2020年8月-2021年6月中山大学附属第三医院感染性疾病科门诊患者的血浆标本511份。以Bland-Altman图分析2... 目的比较高灵敏度与普通荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法对乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)定量检测结果的相关性与一致性。方法收集2020年8月-2021年6月中山大学附属第三医院感染性疾病科门诊患者的血浆标本511份。以Bland-Altman图分析2种检测方法间绝对与相对偏差,以组内相关系数(ICC)评价方法间一致性。高敏法HBV-DNA检出率与临床指标的关系用χ^(2)检验分析。结果在收集的511份慢性乙型肝炎(CHB)患者样本中,高灵敏度与普通荧光定量PCR法在<2×10^(3)、2×10^(3)~<2×10^(6)和2×10^(6)~IU/mL组的ICC分别为0.54、0.80和0.66,差异有统计学意义(P<0.05)。Bland-Altman法也显示类似的结果。对于HBV-DNA低于检测下限(普通PCR法)的样本,乙型肝炎表面抗原(HBsAg)≥1000 IU/mL、丙氨酸氨基转移酶(ALT)异常和未治疗的高灵敏度法检出率显著高于HBsAg<1000 IU/mL、ALT正常和抗病毒治疗(χ^(2)=6.67、5.00、30.51,P均<0.05)。结论普通荧光定量PCR法与高灵敏度法HBV-DNA结果存在差异,且在低病毒载量的样本中,两种方法的一致性较低。对于低水平病毒血症、普通法HBV-DNA检测低于检测下限、ALT异常、HBsAg≥1000 IU/mL、尚未进行抗病毒治疗的CHB患者,建议使用高灵敏度HBV-DNA进行检测。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 HBV-DNA 高敏荧光定量PCR 组内相关系数
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高灵敏乙型肝炎病毒核酸检测在术前筛查中的应用价值 被引量:2
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作者 李宝琪 陈培松 +2 位作者 黄浩 余学高 黄彬 《分子诊断与治疗杂志》 2019年第5期355-360,共6页
目的探讨高灵敏乙型肝炎病毒(HBV)核酸检测在术前筛查中的应用价值。方法收集术前筛查患者的血清标本,分别采用高灵敏荧光定量PCR法(高敏PCR)和化学发光微粒子免疫分析法(CMIA),检测血清中的HBV DNA和HBsAg,两方法结果不一致的标本采用R... 目的探讨高灵敏乙型肝炎病毒(HBV)核酸检测在术前筛查中的应用价值。方法收集术前筛查患者的血清标本,分别采用高灵敏荧光定量PCR法(高敏PCR)和化学发光微粒子免疫分析法(CMIA),检测血清中的HBV DNA和HBsAg,两方法结果不一致的标本采用Roche Cobas AmpliPrep/Cobas TaqMan全自动核酸检测系统检测HBV DNA。结果519例血清标本中,HBsAg阳性标本90例(17.3%),按HBsAg定量结果分为5组:I组(>5 000 IU/mL)、II组(1 000~5 000 IU/mL)、III组(500~1 000 IU/mL)、IV组(100~500 IU/mL)和V组(0.05~100 IU/mL),I组HBV DNA高于II、III、IV、V组,差异有统计学意义(P<0.05)。90例HBsAg阳性标本中有13例标本的HBV DNA低于高敏PCR法的最低检测限,占阳性标本的14.4%。HBV DNA阳性标本79例(15.2%),其中2例标本HBsAg为阴性,CMIA法的漏检率为2.5%。15例定性结果不一致的标本经Roche全自动核酸检测系统复核后,13例HBV DNA阴性而HBsAg阳性标本的HBV DNA均低于该方法的最低检测限,2例HBV DNA阳性而HBsAg阴性标本的HBV DNA高于该方法的最低检测限。与金标准相比,高敏PCR法检测HBV DNA的灵敏度、特异度、阳性预测值(PPV)和阴性预测值(NPV)均为100.0%;CMIA法检测HBsAg的灵敏度、特异度、PPV、NPV分别为97.5%、97.0%、85.6%、99.5%;高敏PCR法检测HBV的特异度和PPV高于CMIA法(P<0.05)。结论高敏荧光定量PCR检测HBV DNA可用于术前筛查,优于目前常规使用的CMIA法,能准确反映患者体内HBV的复制情况和传染性,及时发现隐匿性感染,有效防止医源性传播。 展开更多
关键词 高敏荧光定量PCR法 HBV DNA 化学发光微粒子免疫分析法 术前筛查
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禽流感病毒三种病原学检测方法的比较研究 被引量:1
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作者 陈弟诗 陈斌 +3 位作者 章健 邱明双 邓飞 王泽洲 《四川畜牧兽医》 2019年第4期27-30,共4页
为了分析比较不同的商品化检测方法在禽流感病毒快速诊断中的实用性,本试验运用禽流感高敏快速荧光免疫法、胶体金免疫层析纸条法和实时荧光RT-PCR三种方法同时对禽流感病毒H5、H7和H9三个亚型抗原各12个稀释度的样本进行检测。结果表明... 为了分析比较不同的商品化检测方法在禽流感病毒快速诊断中的实用性,本试验运用禽流感高敏快速荧光免疫法、胶体金免疫层析纸条法和实时荧光RT-PCR三种方法同时对禽流感病毒H5、H7和H9三个亚型抗原各12个稀释度的样本进行检测。结果表明,禽流感高敏快速荧光免疫法对三种亚型抗原的灵敏度较高,各亚型检出最低稀释度分别为H5:1∶2 560,H7:1∶1 280,H9:1∶640,该方法快捷简便,且设备便携,通过云平台处理数据,适用于现场即时检测(POCT)等;进口胶体金免疫层析纸条法对H5、H9亚型抗原的灵敏度高,对H7亚型抗原的灵敏度较低,且国内产品存在假阳性、准确性较低等缺点,但均操作简单,适用于基层初筛;实时荧光RT-PCR法对三种亚型抗原的灵敏度高,稀释度均可达1∶40 960以上,但耗时长,设备和技术要求相对较高,更适用于实验室确诊。 展开更多
关键词 禽流感病毒 高敏快速荧光免疫法 胶体金免疫层析纸条法 实时荧光RT-PCR法
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NIR-induced highly sensitive detection of latent finger- marks by NaYF4:Yb,Er upconversion nanoparticles in a dry powder state 被引量:21
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作者 Meng Wang Ming Li +5 位作者 Mingying Yang Xiaomei Zhang Aoyang Yu Ye Zhu Penghe Qiu Chuanbin Mao 《Nano Research》 SCIE EI CAS CSCD 2015年第6期1800-1810,共11页
The most commonly found fingermarks at crime scenes are latent and, thus, an efficient method for detecting latent fingermarks is very important. However, traditional developing techniques have drawbacks such as low d... The most commonly found fingermarks at crime scenes are latent and, thus, an efficient method for detecting latent fingermarks is very important. However, traditional developing techniques have drawbacks such as low detection sensitivity, high background interference, complicated operation, and high toxicity. To tackle this challenge, we employed fluorescent NaYF4:Yb, Er upconversion nanoparticles (UCNPs), which can fluoresce visible light when excited by 980 nm human-safe near-infrared light, to stain the latent fingermarks on various substrate surfaces. The UCNPs were successfully used as a novel fluorescent label for the detection of latent fingermarks with high sensitivity, low background, high efficiency, and low toxicity on various substrates including non-infiltrating materials (glass, marble, aluminum alloy sheets, stainless steel sheets, aluminum foils, and plastic cards), semi-infiltrating materials (floor leathers, ceramic tiles, wood floor, and painted wood), and infiltrating materials such as various types of papers. This work shows that UCNPs are a versatile fluorescent label for the facile detection of fingermarks on virtually any material, enabling their practical applications in forensic sciences. 展开更多
关键词 UPCONVERSION NANOPARTICLES FINGERMARK development
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A highly sensitive “turn-on” fluorescent probe for bovine serum albumin protein detection and quantification based on AIE-active distyrylanthracene derivative 被引量:3
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作者 WANG ZiLong MA Ke +2 位作者 XU Bin LI Xing TIAN WenJing 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 2013年第9期1234-1238,共5页
A sulfonated 9,10-distyrylanthracene derivative with aggregation-induced emission (AIE) property is designed and synthesized. It shows a highly sensitive and selective fluorescence enhancement property for bovine seru... A sulfonated 9,10-distyrylanthracene derivative with aggregation-induced emission (AIE) property is designed and synthesized. It shows a highly sensitive and selective fluorescence enhancement property for bovine serum albumin (BSA) protein detection and quantification. Analysis on the interaction between the probe molecule and BSA reveals the essential role of the hydrophobic cavities of the protein folding structure. 展开更多
关键词 aggregation-induced emission fluorescent probe distyrylanthracene derivative
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Highly sensitive and selective two-photon sensing of cartap using Au@Ag core-shell nanoparticles 被引量:3
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作者 Peiyan Yuan Rizhao Ma Qinghua Xu 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS CSCD 2016年第1期78-82,共5页
A highly sensitive and selective two-photon sensing scheme for detection of cartap was developed by using Au@Ag bimetallic core-shell nanoparticles.Cartap was found to induce the aggregation of Au@Ag nanoparticles and... A highly sensitive and selective two-photon sensing scheme for detection of cartap was developed by using Au@Ag bimetallic core-shell nanoparticles.Cartap was found to induce the aggregation of Au@Ag nanoparticles and up to 700-fold enhancement in two-photon photoluminescence.Huge enhancement in two-photon photoluminescence allows achieving a detection limit of as low as 0.0062 mg/kg,which is better than the conventional colorimetric methods.This two-photon sensing scheme has a broad dynamic range and displays excellent selectivity in detection of cartap against over other ten kinds of commonly used insecticides. 展开更多
关键词 metal nanoparticles bio-sensing two-photon excitation plasmon resonance photoluminescence cartap
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Au NP@silica@europium coordination polymer nanocomposites for enhanced fluorescence and more sensitive monitoring reactive oxygen species
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作者 李慧勤 杨建辉 +4 位作者 邓青青 窦树梅 赵微微 林冲 刘晓芳 《Science China Materials》 SCIE EI CSCD 2018年第3期401-408,共8页
Au nanoparticle(Au NP)@SiO2@TDA-Eu nanocomposites were prepared by a two-step process: Au NP@SiO2 nanocomposites were prepared by a modified onepot process. Then the europium coordination polymer was deposited on t... Au nanoparticle(Au NP)@SiO2@TDA-Eu nanocomposites were prepared by a two-step process: Au NP@SiO2 nanocomposites were prepared by a modified onepot process. Then the europium coordination polymer was deposited on the surface of the Au NP@SiO2 by mixing 2,2'-thiodiacetic acid [S(CH2 COO)2^(2-), TDA] and Eu(NO3)3·6 H2 O in ethanol via a hydrothermal method. The maximum fluorescent enhancement factor of the nanocomposites was 6.81 at 30 nm thickness of silica between the core of the Au NP and the shell of TDA-Eu. The prepared nanocomposites exhibit more sensitive monitoring of reactive oxygen species. 展开更多
关键词 NANOCOMPOSITES fluorescence enhancement SILICA coordination polymers reactive oxygen species
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