高敏与普通荧光定量PCR技术在慢乙肝患者抗病毒疗效监测中的对比研究

目的比较高灵敏度与普通荧光定量PCR技术在慢性乙型肝炎(CHB)患者抗病毒疗效监测中的区别。方法对49例CHB患者141份采用普通PCR检测结果为阴性(<500 IU/mL)标本,采用高敏PCR试剂进行复查。结果根据高敏PCR血清HBV DNA定量检测结果,141份采用普通PCR检测结果阴性标本存在以下5种状况,即>500、20~500、10~20、<10 IU/mL和阴性,比例分别为13.5%、31.9%、18.4%、30.5%和5.7%。随着血清HBV DNA水平的逐渐增高,各组ALT、AST水平和异常升高率也存在逐渐增加的趋势,但是仅仅各组AST水平差异有显著意义(P<0.05)。随着血清HBV DNA水平逐渐降低,各组血清HBeAg阳性率和水平也存在逐渐降低的趋势。其中,HBV DNA阴性组血清HBeAg阳性率显著低于10~20 IU/mL组和>500 IU/mL组(P<0.05)。结论与普通PCR技术相比,高灵敏度的HBV DNA荧光定量PCR技术在CHB患者抗病毒治疗监测中准确性更高。

MRI结合高敏的实时荧光定量PCR对代偿期乙型肝炎肝硬化与微量HBV-DNA的早期诊断

目的探讨MRI结合高敏的实时荧光定量PCR(HSFQ-PCR)对代偿期乙型肝炎肝硬化(CSHBC)与微量HBV-DNA的早期诊断作用。方法共调查100例住院的慢性乙型肝炎(CHB)患者,对各例患者使用B超未发现CSHBC且使用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)未检出HBV-DNA者,再行MRI检查和高敏的实时荧光定量PCR(HSFQ-PCR)进一步排查可能存在的CSHBC与微量HBV-DNA。结果在100例CHB患者中,检出5例(5%)CSHBC同时存在微量HBV-DNA的患者,并给予抗病毒治疗。结论应用MRI结合HSFQ-PCR法可在CHB中早期发现可能漏诊的CSHBC与微量HBV-DNA,对此类患者给予及时的抗病毒治疗可延缓病情向DSHBC与HCC进展。

国产高敏HCV-RNA定量试剂与国产普敏及进口高敏试剂一致性分析

目的分析国产高敏HCV-RNA核酸检测试剂与国产普敏、进口高敏HCV-RNA核酸检测试剂的一致性。方法选取2021年1月至9月中国科学技术大学附属第一医院感染病医院检验科收录的丙肝患者临床样本165例,分别采用国产高敏HCV-RNA核酸检测试剂A与国产普敏HCV-RNA核酸检测试剂B进行HCV-RNA定量检测,对两种HCV-RNA定量检测试剂定量结果均为阳性的样本(≥500 IU/mL,87例)进行Bland-Altman一致性分析;选择稀释样本(15~500 IU/mL,60例),采用国产高敏HCV-RNA核酸检测试剂A与进口高敏HCV-RNA核酸检测试剂C进行HCV-RNA平行定量检测,对两种HCV-RNA定量检测试剂定量结果进行Bland-Altman一致性分析。结果Bland-Altman分析显示试剂A与试剂B定量值差值均值为(-0.0326)log_(10)IU/mL,95%置信区间为(-0.4626~0.3974)log_(10)IU/mL,95.4%(83/87)的样本检测值在95%置信区间内。试剂A与试剂C定量值差值均值为0.1800 log_(10)IU/mL,95%可信区间为(-0.0907~0.4506)log_(10)IU/mL,96.67%(58/60)的样本检测值在95%置信区间内。结论国产高敏定量试剂A与国产普敏定量试剂B在≥500 IU/mL检测结果具有一致性,国产高敏定量试剂A与进口高敏定量试剂C在15~500 IU/mL具有检测结果高度一致性。

高敏与普通荧光定量PCR技术在不同病毒载量慢乙肝患者HBV-DNA检测的一致性及应用价值

目的比较高灵敏度与普通荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法对乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)定量检测结果的相关性与一致性。方法收集2020年8月-2021年6月中山大学附属第三医院感染性疾病科门诊患者的血浆标本511份。以Bland-Altman图分析2种检测方法间绝对与相对偏差,以组内相关系数(ICC)评价方法间一致性。高敏法HBV-DNA检出率与临床指标的关系用χ^(2)检验分析。结果在收集的511份慢性乙型肝炎(CHB)患者样本中,高灵敏度与普通荧光定量PCR法在<2×10^(3)、2×10^(3)~<2×10^(6)和2×10^(6)~IU/mL组的ICC分别为0.54、0.80和0.66,差异有统计学意义(P<0.05)。Bland-Altman法也显示类似的结果。对于HBV-DNA低于检测下限(普通PCR法)的样本,乙型肝炎表面抗原(HBsAg)≥1000 IU/mL、丙氨酸氨基转移酶(ALT)异常和未治疗的高灵敏度法检出率显著高于HBsAg<1000 IU/mL、ALT正常和抗病毒治疗(χ^(2)=6.67、5.00、30.51,P均<0.05)。结论普通荧光定量PCR法与高灵敏度法HBV-DNA结果存在差异,且在低病毒载量的样本中,两种方法的一致性较低。对于低水平病毒血症、普通法HBV-DNA检测低于检测下限、ALT异常、HBsAg≥1000 IU/mL、尚未进行抗病毒治疗的CHB患者,建议使用高灵敏度HBV-DNA进行检测。

高灵敏乙型肝炎病毒核酸检测在术前筛查中的应用价值

目的探讨高灵敏乙型肝炎病毒(HBV)核酸检测在术前筛查中的应用价值。方法收集术前筛查患者的血清标本,分别采用高灵敏荧光定量PCR法(高敏PCR)和化学发光微粒子免疫分析法(CMIA),检测血清中的HBV DNA和HBsAg,两方法结果不一致的标本采用Roche Cobas AmpliPrep/Cobas TaqMan全自动核酸检测系统检测HBV DNA。结果519例血清标本中,HBsAg阳性标本90例(17.3%),按HBsAg定量结果分为5组:I组(>5 000 IU/mL)、II组(1 000~5 000 IU/mL)、III组(500~1 000 IU/mL)、IV组(100~500 IU/mL)和V组(0.05~100 IU/mL),I组HBV DNA高于II、III、IV、V组,差异有统计学意义(P<0.05)。90例HBsAg阳性标本中有13例标本的HBV DNA低于高敏PCR法的最低检测限,占阳性标本的14.4%。HBV DNA阳性标本79例(15.2%),其中2例标本HBsAg为阴性,CMIA法的漏检率为2.5%。15例定性结果不一致的标本经Roche全自动核酸检测系统复核后,13例HBV DNA阴性而HBsAg阳性标本的HBV DNA均低于该方法的最低检测限,2例HBV DNA阳性而HBsAg阴性标本的HBV DNA高于该方法的最低检测限。与金标准相比,高敏PCR法检测HBV DNA的灵敏度、特异度、阳性预测值(PPV)和阴性预测值(NPV)均为100.0%;CMIA法检测HBsAg的灵敏度、特异度、PPV、NPV分别为97.5%、97.0%、85.6%、99.5%;高敏PCR法检测HBV的特异度和PPV高于CMIA法(P<0.05)。结论高敏荧光定量PCR检测HBV DNA可用于术前筛查,优于目前常规使用的CMIA法,能准确反映患者体内HBV的复制情况和传染性,及时发现隐匿性感染,有效防止医源性传播。