高核苷酸型酵母抽提物产品分析及其在零脂牛肉酱中的应用

文章研究了高核苷酸型酵母抽提物及其在零脂牛肉酱中的应用,结果发现:将高核苷酸型酵母抽提物添加到零脂牛肉酱中,可增加其鲜味、增强其浓厚味、降低其咸味,赋予零脂牛肉酱浓郁的特征性香味,延长其厚味的持续时间。研究结果说明高核苷酸型酵母抽提物具有提升零脂牛肉酱整体风味的作用。

核酸酶提高酵母抽提物呈味核苷酸含量的应用研究

本核酸酶是专门针对目前国际市场上对于天然I+G含量越来越重视,对富含呈味核苷酸(I+ G)的抽提物的需求越来越大而专门研制的酵母抽提物专用酶制剂。它是通过桔青霉培养发酵、膜分离技术提纯精制、真空冷冻干燥而得,可将核酸定向水解为5′-核苷酸的生物酶制剂,可催化RNA或寡核酸的分子上的3′-碳原子羟基与磷酸之间形成的二酯键,使断裂生成四种5′-核苷酸和5′-磷酸寡核苷酸。结合酵母水解工艺,本文研究了核酸酶在酵母抽提物的应用,得出了较优的水解工艺条件:酵母底物浓度为10%～15%,pH=5.0;水解温度T=60℃,水解时间为4h～8h,最后酵母抽提物的呈味核苷酸(I+G)含量由原来的1%～2%提高到8%～10%,达到国内领先水平。

15种核酸水解产物的高效液相色谱分离及其在酵母抽提物分析中的应用

采用反相高效液相色谱同时分离１５种核酸水解产物，包括６种核苷酸、４种核苷和５种碱基，利用二极管矩阵检测器提供的紫外光谱图对复杂样品进行辅助定性及鉴定峰纯度，并将此方法应用于测定酵母抽提物中的核苷酸，取得了满意的结果。方法的精密度为相对标准偏差小于３．５％，回收率为９３．８％～１０４．６％。

酵母抽提物中呈味核苷酸含量偏低的原因探讨(I) 啤酒酵母中核酸酶性质研究

本研究主要研究酵母中核酸酶的性质包括最适pH和最适温度, pH稳定性和温度稳定性,金属离子和抑制剂对酵母核苷酸的作用等。通过将酵母核酸酶性质与外加的5'-磷酸二酯酶(麦芽根核酸酶)的性质的比较,发现由于外加的麦芽根核酸酶的稳定性比酵母核酸酶的要高,因此外加麦芽根核酸酶不能显著提高自溶法制备的酵母提取物中呈味核苷酸的含量的原因,并不在于外加的麦芽根核酸酶本身的性质,而是另有其它原因。

酵母抽提物中呈味核苷酸含量偏低的原因探讨(Ⅱ) 啤酒酵母自溶过程核酸的降解规律研究

本论文通过详细测定酵母自溶过程中蛋白质、核酸以及各种核苷酸在产物中的变化量,研究pH、外加5’-磷酸二酯酶(麦芽根核酸酶)、外加蛋白酶等对酵母自溶的影响,从而探讨外加5’-磷酸二酯酶不能显著提高酵母自溶产物中呈味核苷酸含量的原因。研究结果显示:在自溶过程直接添加麦芽根核酸酶只能略提高酵母抽提物中呈味核苷酸的含量,但提高程度不明显;在pH8自溶的产物中5’-核苷酸和3’-核苷酸的量均显著低于在pH5自溶的产物中的量。酵母在pH8～8.5条件下自溶时,外加蛋白酶可以显著提高酵母自溶物产物中可溶性固形物含量、可溶性蛋白质和核苷酸的含量,显著降低核酸含量,产物中的5'-核苷酸含量显著比3'-核苷酸含量高。上述结果说明了酵母在外加麦芽根核酸酶条件下自溶时,核酸未能迅速降解并生成大量的呈味核苷酸的原因之一是由于酵母细胞壁的存在阻碍了细胞器中核酸的溶出,致使外加的5'-磷酸二酯酶不能很好与核酸底物接触,从而不能有效提高呈味核苷酸的产量。

利用啤酒废酵母制备高核酸酵母抽提物的应用研究

文章是专门针对目前国内外市场上对富含I+G的抽提物的需求越来越大而专门研制的高核酸型啤酒酵母抽提物。采用分步酶解啤酒酵母制取高核酸酵母抽提物,得出了较优的酶解工艺条件。抽提酶酶解最适条件:酵母底物浓度10%,0.04%酵母悬浮液量的外加抽提酶量,22h的酶解时间,55℃酶解,pH值为6.5。核酸酶酶解最适条件:酵母底物浓度10%,0.02%酵母悬浮液量的外加核酸酶量,6h的酶解时间,70℃酶解,pH值为5.0。最后,酵母抽提物的呈味核苷酸(I+G)含量由原来的3%～4%提高到10%～12%。

特鲜型酵母抽提物的开发与应用

特鲜型酵母抽提物采用全酶法生产,并且FDA认可酵母抽提物的安全性,在国外特鲜型5′-核苷酸酵母抽提物已经广泛应用。我们开发的特鲜型5′-核苷酸酵母抽提物结合国内现状,有效地降低了生产成本,必将成为新型抽提物的领导者。

高浓度氧暴露对早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸表达的影响

目的探讨高浓度氧(高氧)暴露对早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)-脱氢酶亚基4(ND4)表达的影响。方法原代培养早产Sprague-Dawley(SD)大鼠AECⅡ,待其在含50mL/L二氧化碳(CO2)培养箱中生长至接近融合状态时随机分为高氧组和空气组。高氧组持续暴露于常压高浓度氧中,氧体积分数>900mL/L,CO2体积分数为50mL/L;空气组仍置于含50mL/L CO2培养箱中。二组分别于高氧或空气暴露6、12、24h提取细胞RNA,采取半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定ND4 mRNA的表达;采用免疫细胞化学染色法检测细胞爬片ND4蛋白的表达。结果与空气组比较,免疫细胞化学结果显示高氧暴露6、12h ND4的表达无显著性差异(Pa>0.05),高氧暴露24h ND4的表达显著减弱(P<0.05);RT-PCR检测显示高氧暴露6h ND4 mRNA表达无显著性差异(P>0.05),高氧暴露12、24h ND4 mRNA表达显著减弱(Pa<0.05)。结论高氧暴露下调早产SD大鼠AECⅡ ND4 mRNA和蛋白水平的表达,这种改变可能参与高氧肺损伤的发病过程。

提高酵母抽提物品质研究

以啤酒废酵母为原料,研究了5’—磷酸二酯酶提取及提高酵母抽提物品质的最适合条件,结果表明:从麦芽根中浸提5’—磷酸二酯酶的最佳条件为加水比9:1、浸提温度5℃、浸提24h,过滤得到的粗酶液酶活力达143.5U/mL。在酵母自溶液中添加5’—磷酸二酯酶液可显著提高酵母抽提液中5’—核苷酸含量,适宜水解条件为:添加5.00%(v/w)的酶液,在pH7.0、60℃下作用2h,酵母抽提液中5’—核苷酸含量达8.06mg/mL,比不添加的3.25mg/mL提高1.48倍。

啤酒废酵母中酵母抽提物的制备

主要研究了机械破壁、pH值以及麦芽根核酸酶的作用对啤酒酵母自溶过程的影响 .均质破壁能显著提高自溶速率及酵母抽提物中蛋白质和核苷酸的含量 ,麦芽根核酸酶的加入有效地提高了酵母抽提物中 5′ 核苷酸含量 ,而提高自溶时的 pH值不能显著地提高酵母抽提物中 5′ 核苷酸的含量 .因此 ,有效地提高酵母抽提物中 5′ 核苷酸含量的方法是 :啤酒废酵母经 0 .5%NaHCO3脱苦后 ,加 2倍体积无菌水和 5%NaCl,再加质量分数为 1%的核酸酶 ,搅拌均匀 ,在 4 0MPa下均质 3次 ,然后升温至 55℃ ,自溶 30h ,得到的酵母抽提物中 5′ GMP含量高达 6.37mg/g .

高尿酸血症与2型糖尿病

糖尿病是一种多因素造成的代谢异常状态，其特征是由于碳水化合物、脂肪及蛋白质代谢紊乱所致的慢性高血糖，原因是胰岛素分泌失调及胰岛素抵抗。高嘌呤含量（每100g含150～1000mg嘌呤）的食物诸如鹅肉、动物内脏（肝、肾、肠、心和脑）、鳗鱼、鲱鱼、鱼卵、鱼皮、虾米、海味、贝类如扇贝、蚝、发酵粉等，对血尿酸水平影响很大。能引起腺嘌呤核苷酸分解增加的糖有果糖和麦芽糖。

谷氨酰胺酶和酵母抽提物对无添加酱油的品质提升研究

针对无添加酱油存在的鲜味不足、偏咸偏涩、口感不够协调、口感单薄且留口时间短等缺点,开展了谷氨酰胺酶在酱油发酵过程中和酵母抽提物在后期生产过程中的应用研究。研究结果表明:在酱油发酵初期一次性添加酱醪0.01%的谷氨酰胺酶能使酱油的谷氨酸含量提升44.55%,焦谷氨酸降低67.69%,而氨基氮、全氮、总酸和盐分等指标影响不大;感官方面,酱油的鲜味和综合协调性得到明显的提升,咸味和苦涩味得到较好的淡化,但对浓厚度帮助不大。在酱油生产后期使用1.0%的酵母抽提物KU012后,谷氨酸含量提升0.11g/dL,在前者基础上再次提升7.53%,5'-呈味核苷酸由未检出提升至0.12g/dL,氨基氮和全氮分别提升0.03g/dL和0.09g/dL,而对总酸、还原糖和盐分影响较小;感官方面,酱油的鲜味和综合协调性得到较大的提升,咸味和苦涩味得到较好的淡化,并且浓厚度和持久感也得到了较好的提升。谷氨酰胺酶和酵母抽提物对无添加酱油的品质具有极大的提升作用。

问：颗粒态酵母抽提物对鸡精的品质改善有哪些作用？

答：鸡精是近些年开始流行并迅速发展起来的一种以食用盐、味精、鸡肉粉末或其浓缩抽提物、呈味核苷酸二钠（简称IMP＋GMP）等为原料，添加或不添加香辛料、食用香精等成分加工而成的一种具有鸡肉风味的复合调味料。由于其很好地迎合了消费者的需求，所以尽管面世只有短短十几年的时间，却迅速进入了千家万户，成为老百姓饮食生活的常用品。

外周血清NLRP3、HMGB1水平与急性ST段抬高型心肌梗死患者PCI术后缺血再灌注损伤的关系

目的分析外周血清核苷酸寡聚化结构域样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平与急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的关系。方法选取2020年1月—2021年7月武汉亚洲心脏病医院ICU收治接受PCI的STEMI患者165例,根据PCI术后是否发生MIRI分为MIRI组103例和非MIRI组62例。比较2组临床资料及外周血清NLRP3、HMGB1水平,多因素逐步Logistic回归分析STEMI患者PCI术后MIRI影响因素,受试者工作特征曲线(ROC)分析外周血清NLRP3、HMGB1水平对STEMI患者PCI术后MIRI的预测价值。结果MIRI组患者年龄、罪犯血管为右冠状动脉比例、Killip分级、血尿素氮、血肌酐、B型脑钠肽、住院天数、心血管不良事件发生率均高于非MIRI组,收缩压、舒张压、eGFR、ACEI/ARB/ARNI使用比例低于非MIRI组(P<0.05)。外周血清NLRP3、HMGB1水平MIRI组术前高于非MIRI组;术后即刻2组均降低,但MIRI组高于非MIRI组;术后24 h 2组均再次升高,且MIRI组高于非MIRI组(P均<0.05)。多因素Logistic逐步回归分析显示,年龄大、罪犯血管为右冠状动脉、B型脑钠肽高、血清NLRP3高、血清HMGB1高为STEMI患者PCI术后发生MIRI的独立危险因素[OR(95%CI)=1.052(1.010~1.096)、1.037(1.007~1.068)、1.003(1.001~1.004)、1.440(1.232~1.684)、1.728(1.312~2.276)],而收缩压、舒张压高为独立保护因素[OR(95%CI)=0.684(0.579~0.808)、0.551(0.406~0.746)]。ROC曲线显示,血清NLRP3、HMGB1及二者联合预测STEMI患者PCI术后MIRI的曲线下面积(AUC)分别为0.769、0.740、0.835,二者联合预测的AUC大于单项预测(Z=2.297、3.149,P=0.022、0.002)。结论PCI术后发生MIRI的STEMI患者外周血清NLRP3、HMGB1水平升高,为MIRI发生的独立危险因素,可作为PCI术后MIRI预测指标。

高分辨熔解曲线基因分型技术检测尼古丁受体rs1051730和rs16969968单核苷酸多态性

目的寻求费用低廉、简便、快速的方法检测广东地区汉族慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者尼古丁受体rsl051730和~16969968单核苷酸多态性。方法收集2010年9月至2012年4月在广州医科大学附属市一人民医院、广州医科大学附属第一医院、广州医科大学附属第三医院住院及门诊受试者1248例，从广州荔湾城区和韶关云岩、桂头农村流行病学调查的资料抽取533例，共计1781例患者，分为COPD组1013例，非COPD对照组768例。应用高分辨率熔解曲线（HRM）技术，对尼古丁受体基因rs1051730和rs16969968进行分型，并以焦磷酸测序法进行对照。Hardy-Weinberg定律检测rs1051730和rs16969968单核苷酸多态性（SNP）是否符合遗传平衡。结果以HRM法能够较准确、快速区别出COPD与非COPD对照者尼古丁受体rs16969968A风险等位基因频率及基因型频率的差异，HRM分析显示rs1051730分为3型，分别为CC、CT、TT型，rs16969968也分为3型，分别为GG、AG、AA型，高分辨率熔解曲线可清楚的分辨rs1051730基因型及rs16969968基因型。rs16969968风险等位基因A的基因频率在COPD患者中为4．3％，在对照组中为3．0％（P=0．043）。杂合基因型AG在COPD的基因型频率为8．6％，对照组为5．7％（P=0．025），突变型AA罕见（仅0．1％）。rsl051730风险等位基因T和等位基因频率及基因型频率与rs16969968完全相同，连锁性分析发现两位点完全相关。200例标本测序结果显示，199例HRM基因分型结果与测序相同，仅1例结果不同，与测序符合率达98％以上，两位点均符合Hardy-Weinberg平衡定律（χ2=0．178，P〉0．05）。结论HRM费用低廉、简便、快速，能准确对尼古受体rs1051730和rs16969968基因分型。

基因Ⅶ型NDV强毒株F基因重要功能区的克隆与序列分析

运用一步法RT-PCR扩增两株高致病力NDV分离株的F基因重要功能区,并进行序列测定。序列分析表明其在F蛋白裂解位点氨基酸顺序均为112R-R-Q-K-R-F117,与NDV的强毒株特征相符,且具有101位的K(赖氨酸)和121位V(缬氨酸)两个特征性氨基酸,与基因Ⅶ型NDV的特征完全相符[1]。与疫苗株lasota进行序列比较,并构建了系统发育树,结果表明两株病毒核苷酸同源性达96.6%,与lasota同源性为63.7%,从分子水平揭示了这两个毒株抗原性与常用疫苗株Lasota差异较大的原因。

酵母抽提物的功能及在食品中的应用

介绍了酵母抽提物的国际标准、生产工艺流程、功能及作用原理和在食品中的具体应用。

腺嘌呤核苷酸及代谢产物在调节糖脂代谢稳态中的作用

糖脂代谢是高等生命体最基本的代谢活动,其过程受到环境和遗传的影响,并在器官、细胞和分子等不同水平上得到精确调控。脂质的过度摄取和积累导致肥胖,诱导糖代谢调节的失控,从而形成胰岛素抵抗和高血糖等代谢综合征。本文综述了游离脂肪酸诱导靶细胞释放腺嘌呤核苷酸的相关研究,回顾了过去数十年关于正常和特殊生理状态下腺嘌呤核苷酸信号发生、转导和作用方式的研究成果,提出了腺嘌呤核苷酸及其代谢产物是脂质代谢和糖代谢相互调节过程中的介导因子,其在2型糖尿病发生、发展中可能承担新角色。