格隆溴铵对高氧诱导幼鼠急性肺损伤的影响及其机制研究

目的探究格隆溴铵对高氧诱导幼鼠急性肺损伤(ALI)的影响及作用机制。方法从30只SD幼鼠中随机选取10只为对照组,其余幼鼠成功复制高氧诱导的ALI模型,随机分为ALI组、格隆溴铵组,每组10只。格隆溴铵组雾化吸入0.8 mg/(kg·d)格隆溴铵,ALI组、对照组吸入等体积生理盐水,连续给药7 d后,测量幼鼠肺组织湿/干重比值(W/D)、肺指数,检测白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及血清活性氧基团(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,比较肺组织病理学变化及Toll样受体4/髓分化因子88(TLR4/MyD88)通路蛋白的表达。结果与对照组比较,ALI组W/D及肺指数升高(P<0.05),血清IL-1β、IL-6、TNF-α、SOD水平升高(P<0.05),ROS水平降低(P<0.05),TLR4、MyD88蛋白相对表达量上调(P<0.05);与ALI组比较,格隆溴铵组W/D及肺指数降低(P<0.05),血清IL-1β、IL-6、TNF-α、SOD水平降低(P<0.05),ROS水平升高(P<0.05),TLR4、MyD88蛋白相对表达量下调(P<0.05)。结论格隆溴铵能改善血清炎症指标及氧化应激指标,降低高氧诱导的ALI,其作用机制可能与TLR4/MyD88通路有关。

乌司他丁对高氧诱导的新生小鼠肺损伤 模型的疗效研究

目的研究乌司他丁对高氧诱导的新生小鼠肺损伤的疗效,并初步探讨其作用机制。方法新生2日龄昆明小鼠随机分为空气组(46只)及高氧组(46只),分别在空气或55%~65%氧气中饲养至21 d。21 d后空气组随机选取9只作为空气对照组(n=9);高氧组造模成功后再随机分为高氧对照组(n=9),乌司他丁低剂量治疗组(n=9),乌司他丁中剂量治疗组(n=9),乌司他丁高剂量治疗组(n=9),分别给予生理盐水(空气对照组及高氧对照组)、乌司他丁1万U/kg(乌司他丁低剂量治疗组)、5万U/kg(乌司他丁中剂量治疗组)及10万U/kg(乌司他丁高剂量治疗组)腹腔内注射,1次/d,连续用21 d,观察每组小鼠状态及体重变化。21 d后处死各小鼠,观察肺组织外观,HE染色观察肺组织病理结构,免疫组化染色观察肺组织肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)表达水平及巨噬细胞浸润的情况;Western印迹法检测肺组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialehyde,MDA)的活性。统计学方法采用t检验和χ2检验。结果乌司他丁治疗组小鼠体重增长高于高氧对照组,其中乌司他丁高剂量治疗组尤为明显,两组间差异有统计学意义(P<0.05);乌司他丁治疗能显著减轻高氧诱导的肺组织结构紊乱、巨噬细胞浸润、炎性反应及肺水肿,其中乌司他丁高剂量治疗组尤为明显。与高氧对照组比较,乌司他丁治疗组治疗21 d时,肺组织SOD、MDA表达水平变化不大。结论乌司他丁对高氧诱导的新生小鼠肺损伤模型有保护作用,可能主要通过抗炎性反应实现,且其抗炎性作用呈剂量依赖性。

P物质减轻高氧诱导新生大鼠肺损伤

抢救早产儿呼吸衰竭最常用的措施是氧气疗法,持续高氧治疗可导致新生儿尤其是早产儿支气管肺发育不良,是一种肺氧化应激性损伤的疾病.神经肽P物质（substance P,SP）是速激肽家族最早发现的神经肽,其在肺损伤修复中的作用还无研究,本研究将从整体动物水平研究神经肽SP对高氧暴露肺损伤的影响.

高氧诱导肺损伤新生鼠肺表面活性蛋白基因表达的研究

目的:探讨高氧对肺组织结构和表面活性蛋白(Surfactant protein,SP)A、B、C、D(SP-A、SP-B、SP-C、SP-D)基因表达的影响和机制。方法:应用高氧诱导新生大鼠肺损伤观察肺组织结构和SP-A、SP-B、SP-C、SP-D基因表达的变化。将生后6h内的SD新生大鼠随机分为空气组和高氧组,于1、4、7d和14d4个时间点,分别取肺组织,计算肺系数(肺重/体重×100%),通过HE染色观察组织病理学变化,采用逆转录-聚合酶链反应(Reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测SP mRNAs的表达。结果:高氧组14d新生大鼠体重低于空气组,差异有显著统计学意义(P<0.01),而7d和14d新生大鼠的肺系数明显高于空气组相应时间点,差异有显著统计学意义(P<0.05);高氧组1、4d和7d新生大鼠SP-A、SP-D mRNAs的表达均高于空气组相应时间点,且差异有显著统计学意义(P<0.05),14d新生大鼠的表达水平较空气组减低,差异有显著统计学意义(P<0.05);高氧组1、4d新生大鼠SP-B、SP-C mRNAs的表达均高于空气组,且差异有显著统计学意义(P<0.05),7d差异无显著统计学意义(P>0.05),而14d新生大鼠的表达水平较空气组减弱,差异有显著统计学意义(P<0.05)。结论:长期高氧抑制肺泡发育,并抑制肺SP基因的表达,这可能是肺损伤的重要因素。

CXCL4与高氧诱导新生小鼠性别差异性肺损伤的相关研究

目的:探讨肺组织CXC趋化因子配体4(chemokine C-X-C motif ligand 4,CXCL4)与高氧诱导新生小鼠性别差异性肺损伤的关系及相关机制。方法:32只C57BL/6J新生小鼠(雄性、雌性各16只)随机分为4组:高氧雄性组、高氧雌性组、空气雄性组、空气雌性组(每组8只)。高氧组小鼠置于95%氧浓度下暴露7 d,空气组于室内环境(FiO2=21%)中饲养。串联质谱标签(tandem mass tags,TMT)定量蛋白组学技术检测4组小鼠肺组织中蛋白质的表达变化,筛选差异表达的蛋白质;ELISA法检测肺组织匀浆CXCL4含量;HE染色法观察小鼠肺组织病理改变;冰冻切片免疫荧光染色检测肺组织'M4'型巨噬细胞(MMP7+ S100A8+)分布情况。结果:高氧暴露组肺组织肺泡化程度降低,辐射状肺泡计数(radial alveolar count,RAC)明显减小(P <0.001);与高氧雌性组相比,高氧雄性组RAC值下降(P <0.01)。TMT筛选出的CXCL4在高氧雄性组差异性表达上调;肺组织匀浆验证了质谱分析结果。高氧雄性小鼠肺组织MMP7+ S100A8+细胞增多。结论:高氧诱导新生小鼠肺损伤程度存在性别差异,雄性损伤程度高于雌性,可能与CXCL4诱导肺'M4'型巨噬细胞形成存在一定的相关性。

人参皂苷Rb1对高氧诱导新生仔鼠肺损伤的改善作用及机制研究

目的观察人参皂苷Rb1(ginsenoside Rb1,G-Rb1)对高氧诱导新生仔鼠肺损伤的改善作用及相关机制。方法模型组、Rb1组、Rb1联合ML385组建立新生仔鼠高氧肺损伤模型。Rb1联合ML385组腹腔注射G-Rb1(10 mg/kg)+灌胃ML385(20 mg/kg),Rb1组腹腔注射G-Rb1(10 mg/kg)+灌胃等量生理盐水,空白组、模型组腹腔注射、灌胃等量生理盐水。检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;检测肺表面活性物质蛋白-D(alveolar surface active substance-D,SP-D)含量;检测肺组织核因子E2相关因子2(nuclear factor-E2 related factor2,Nrf2)蛋白表达量。结果与模型组比较,Rb1组MDA水平、SP-D水平降低,SOD活性、Nrf2蛋白表达量升高(P <0.05);与Rb1组比较,Rb1联合ML385组MDA水平、SP-D水平升高,SOD活性、Nrf2蛋白表达量降低(P <0.05)。结论 G-Rb1可改善新生仔鼠肺损伤,提升机体抗氧化能力,抑制肺组织氧化应激反应,激活Nrf2/ARE通路可能是其发挥作用的机制之一。

LRP1-pPyk2-MMP9通路在高氧诱导新生大鼠肺损伤中的作用

目的探讨低密度脂蛋白受体相关蛋白1(low-density lipoproteinreceptor-related protein 1,LRP1)-磷酸化酪氨酸激酶2(proline-rich tyrosinekinase 2 phosphorylation,pPyk2)-基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinases 9,MMP9)通路在高氧诱导新生大鼠肺损伤中的作用。方法将16只新生大鼠随机分为空气组和高氧组,每组8只。高氧组大鼠于生后即置于吸入氧浓度>95%的环境中7 d,空气组大鼠置于同室空气环境中;第8天处死全部大鼠。苏木精-伊红染色法观察两组大鼠肺组织病理变化;ELISA法检测血清及支气管肺泡灌洗液中可溶性LRP1(sLRP1)、MMP9水平;Western blot法检测肺组织LRP1、MMP9、pPyk2及Pyk2蛋白表达水平;RT-PCR法检测肺组织LRP1 mRNA及MMP9 mRNA表达水平。结果血清和支气管肺泡灌洗液中sLRP1、MMP9在高氧组的水平均高于空气组(P<0.05);高氧组肺组织匀浆LRP1、MMP9、pPyk2蛋白表达水平较空气组显著升高(P<0.05);肺组织LRP1 mRNA、MMP9 mRNA在高氧组的相对表达量显著高于空气组(P<0.05)。结论LRP1-pPyk2-MMP9通路在高氧诱导新生大鼠肺损伤中活化增强,可能参与支气管肺发育不良的发病机制。

新生大鼠高氧肺损伤血管内皮生长因子蛋白及其mRNA表达变化研究

目的血管内皮生长因子(VEGF)参与肺的发育和损伤修复,VEGF具有促进肺泡和肺血管增殖以及预防新生儿支气管肺发育不良(BPD)的作用。该研究的目的是探讨新生大鼠高氧肺损伤后肺组织VEGF蛋白及VEGF mRNA表达的变化。方法新生Sprague-Dawley大鼠48只随机分为高氧实验组和空气对照组,高氧实验组吸入95%以上高氧建立高氧肺损伤模型。分别采用免疫组化法和逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)检测新生大鼠3d,7d,14d肺组织VEGF蛋白及VEGF mRNA表达变化。结果空气对照组新生大鼠生后随着肺发育,肺组织中VEGF蛋白及VEGF mRNA表达逐渐增加。高氧实验组新生鼠吸入高氧3d,肺VEGF蛋白表达出现降低,在7d,14d明显降低与对照组比较差异有显著性(VEGF蛋白:12.67±3.82vs7.79±5.23;15.10±8.91vs5.85±3.37,均P<0.01);高氧实验组VEGF mRNA表达在3d,7d,14d均明显低于对照组(VEGF mRNA:1.19±0.63vs0.78±0.22,1.52±0.47vs0.53±0.18,1.89±0.81vs0.48±0.12,均P<0.01)。结论VEGF能促进新生大鼠肺发育,VEGF蛋白及VEGF mRNA表达与新生大鼠肺发育有密切关系。高氧可抑制VEGF蛋白及VEGF mRNA在新生大鼠肺内的表达,VEGF在新生鼠肺发育和高氧肺损伤发病机制中起重要作用。

高氧致新生鼠肺损伤时肾组织一氧化氮及氧自由基的变化

目的 观察持续吸入高氧致新生大鼠肺损伤时肾组织自由基的变化,以探讨高氧对肾脏的损伤。 方法 采用高氧致新生鼠肺损伤的模型,将足月新生鼠生后分别在90%±5%氧气(n=140)和正常空气(n=88) 中持续暴露,于1,3,7,14,21d各处死8只,用分光光度计比色法动态测定肺和肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)活 性、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量的变化。结果 高氧暴露3d肺组织SOD的活性开始增高,7d时明显高 于对照组(214±19KNU/gvs186±19KNU/g,P<0.01),并逐渐增高持续至14d(220±15KNU/gvs197±21 KNU/g,P<0.05)和21d(251±15KNU/gvs195±8KNU/g,P<0.01);MDA含量于高氧暴露3d开始增高并高 于对照组(28.1±2.0μmol/gvs21.1±1.3μmol/g,P<0.05),7d最高(30.8±4.2μmol/gvs19.9±2.2μmol/g, P<0.01),14d虽有下降但仍高于对照组(26.3±3.8μmol/gvs22.6±2.3μmol/g,P<0.05);NO水平则于7d 时有所增高并高于对照组(99±8μmol/gvs89±8μmol/g,P<0.05),14d(128±34μmol/gvs93±17μmol/g,P <0.05)和21d(171±34μmol/gvs106±25μmol/g,P<0.01)仍高于对照组。而高氧组肾组织SOD活性的改变 与对照比较无差异,MDA和NO含量改变较肺晚,于吸高氧14d时高于对照(分别为24.1±5.0μmol/gvs16.0± 1.

水通道蛋白1,5与新生鼠高氧肺损伤肺水肿的关系研究

目的水通道蛋白(aquaporin,AQP)是新近发现的一组与水通透性有关的细胞膜转运蛋白,该文旨在探讨高氧损伤状态下,肺组织内AQP1,AQP5的动态变化规律及其在肺水肿中的作用。方法新生鼠200只,依据吸氧浓度(F iO2)分组:实验组1(F iO2=0.8)、实验组2(F iO2=0.6)、实验组3(F iO2=0.4)、空气对照组(F iO2=0.21)。每组分别于实验后1,3,5,7,14 d行AQP1、AQP5W estern印迹检测,同时检测肺湿/干重比值(wet/dry we ight ratio,W/D),BALF中蛋白含量。结果高氧各组肺W/D比值、BALF中蛋白含量与空气组相比均显著增加,并随吸氧浓度、暴露时间的增加而增加。实验组AQP1第3天表达开始降低,第5天,第7天明显降低(P<0.05),第14天有所恢复。实验组AQP5表达低于对照组,第1,3天呈稍高表达,以后随日龄增加逐渐降低(P<0.05)。总趋势上AQP1,AQP5的表达在实验组3、实验组2、实验组1依次降低。结论AQP1,AQP5在高氧肺损伤时表达降低,并与肺水肿的严重程度相关。

SPF级新生大鼠高氧肺损伤模型的建立

目的建立一种操作简便、性能稳定的新生大鼠高氧肺损伤动物模型。方法①设计制造能自动控制氧浓度的高氧动物饲养舱。②将孕期满21 d出生的SPF级新生大鼠随机分成4组,即：高氧组Ⅰ（入高氧舱中饲养1～7 d）,高氧组Ⅱ（入高氧舱中饲养14 d）,以及相应的空气对照组Ⅰ、Ⅱ,每组14只。舱内氧浓度≥90%,每天23 h。计算肺系数,HE染色与病理学观察。结果高氧组与相应的对照组比较：高氧组大鼠体重轻,肺系数大,HE染色显示部分肺泡萎缩、肺间质及肺泡腔有水肿、出血,中性粒细胞浸润;肺泡发育明显滞后,辐射状肺泡计数明显少。结论本动物饲养舱性能稳定,操作简便;复制的新生大鼠的肺病理变化符合高氧肺损伤的改变。

新生鼠高氧肺损伤中p38MAPK的磷酸化

目的探讨p38丝裂素活化蛋白激酶(p38mitogen-activatedproteinkinase,p38MAPK)在新生鼠高氧肺损伤中的表达及意义。方法160只新生鼠分为空气对照组、高氧肺损伤组、高氧肺损伤+SB203580组和高氧肺损伤+生理盐水组,分别建立动物模型。在12、24、72h和1周4个时相点处死,进行肺组织病理学检查、肺湿/干重比值(W/D)测定、Westernblot法检测p38MAPK的表达。结果高氧暴露72h即可建立肺损伤模型。新生鼠暴露于高氧12h后,p38MAPK开始表达,72h达高峰,后逐渐降低。在高氧暴露72h后,空气对照组未见p38MAPK表达,高氧肺损伤组可见p38MAPK表达;高氧肺损伤+生理盐水组p38MAPK表达明显强于高氧肺损伤+SB203580组。结论p38MAPK参与了新生鼠高氧肺损伤的过程,SB203580可以减轻这种损伤。

谷酰胺对新生大鼠急性高氧肺损伤的保护机制

目的探讨谷酰胺对新生大鼠急性高氧肺损伤的保护机制。方法将新生SD大鼠随机分成对照组、谷酰胺组和高氧组,比较三组大鼠存活率和体质量、肺湿质量/干质量、病理改变、热休克蛋白-70(HSP-70)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达情况。结果高氧暴露6 d后:①高氧组体质量明显低于对照组(P<0.05),谷酰胺组与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。②高氧组肺湿质量/干质量明显低于对照组(P<0.05),谷酰胺组与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。③三组中高氧组肺泡炎性病理改变最为严重。④高氧组肺组织HSP-70表达量较对照组明显增加(P<0.05),谷酰胺组较对照组、高氧组均显著增加(P均<0.01);高氧组肺组织TNF-α表达量较对照组与谷酰胺组均明显增加(P均<0.01),谷酰胺组较高氧组明显减少(P<0.05)。结论谷酰胺可能通过调节炎症反应与抗炎反应之间的平衡对高氧肺损伤起到保护作用。

白介素8在新生鼠高氧肺损伤炎症反应中的作用

探讨白介素 8在高氧肺损伤炎症反应中的作用。采用支气管肺泡灌洗术获取肺泡巨噬细胞 ,经贴壁纯化后 ,随机分为 : 、空气组 , 、高氧组 , 、空气 +脂多糖 (lipopolysacchide,L PS)组 , 、高氧 +L PS组。培养 48h后 ,收集培养上清液 ,并检测上清液中白介素 8、过氧化氢的含量和乳酸脱氢酶活性。结果表明 :1培养 48h后 , 组白介素 8增加最显著 ,其次为 组、 组 , 组最低 ,各组之间均有显著性差异。 2 组较 组、 组较 组过氧化氢均明显降低 ; 组较 组、 组较 组过氧化氢则显著增加。 3 组、 组细胞形态无明显改变 , 组、 组细胞呈现生长不良状态 ,但乳酸脱氢酶活性在各组之间均无显著性差异。提示白介素

卡托普利在高氧致新生大鼠肺损伤模型中的保护作用

目的观察卡托普利对高氧暴露新生大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织形态学改变的影响。方法足月新生Wistar大鼠40只生后即置于有机玻璃氧舱内持续吸入高浓度氧(FiO2=0.90)14d、21d造成高氧肺损伤模型,治疗组经胃管灌服卡托普利每日60mg/kg(用生理盐水配成5.4mg/mL混悬液),对照组每天经胃管灌服等量生理盐水,空气对照组:吸入空气(FiO2=0.21)。对4组大鼠进行肺系数、BALF中蛋白含量及BALF细胞计数和分类测定并同步观察肺组织形态学的改变。结果模型组及盐水对照组14d,21d肺系数、BALF中蛋白含量、BALF细胞总数、中性粒细胞、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞比例较空气对照组显著升高(P<0.01)。卡托普利治疗组与模型组比较上述指标(除淋巴细胞外)均显著下降(P<0.05或P<0.01);与空气对照组比较亦有统计学差异,P<0.05。模型组及盐水对照组14d,21d肺组织学表现为不同程度的肺泡炎、肺泡间隔增宽、肺泡融合、肺泡数量减少;而卡托普利治疗组肺组织病变明显减轻。结论卡托普利对高氧所致肺损伤具有一定的保护作用。

一氧化氮吸入对新生鼠高氧肺损伤时表面活性蛋白A和肺甘露糖结合力的影响

目的通过观察吸入一氧化氮(iNO)对新生大鼠高氧肺损伤时表面活性蛋白A(SP-A)和肺组织甘露糖结合力(MBA)的影响,探讨iNO对高氧肺损伤保护作用的可能机制。方法新生大鼠随机分为对照组(空气);高氧组(>95%O2,6d);NO组(空气+10ppmNO,24h);高氧+NO组(>95%O2,6d+10ppmNO,24h)。观察暴露后2d和6d肺组织病理变化,肺SP-AmRNA基因表达、蛋白含量和MBA的变化。结果高氧组病理损伤明显,暴露后2d时SP-A的mRNA含量(0.81±0.04vs1.53±0.25)和蛋白表达(59.45±18.37vs89.77±16.41)比对照组减少,6d时分别比对照组增加(0.81±0.02vs0.63±0.03),(93.57±13.71vs47.73±21.69),(P<0.05)。高氧+NO组暴露后2d时病理损伤比高氧组明显减轻,SP-AmRNA(0.55±0.91)比对照组和高氧组降低,SP-A蛋白表达(55.12±17.53)比对照组降低(P<0.01);6d时SP-A蛋白表达(67.33±18.59)比高氧组降低(P<0.05)。甘露糖结合力在暴露后2d时NO组比对照组增加(0.821±0.133vs0.580±0.158)、高氧+NO组比高氧组增加(0.430±0.175vs0.738±0.141)(P<0.05)。结论小剂量NO吸入可降低高氧肺组织SP-A蛋白表达的升高,增加肺组织的MBA,减轻肺组织的病理损伤。

L-NAME对新生大鼠高氧肺损伤的影响

研究 Nω-硝基 - L -精氨酸甲酯 (Nω- nitro- L - arginine methyl ester,L - NAME)对新生大鼠高氧肺损伤的影响 ,以探求内源性一氧化氮在新生大鼠高氧肺损伤中的作用。生后 3d的新生大鼠随机分为 : .高氧对照组 , .高氧 +L- NAME组 , .空气对照组 , .空气 +L- NAME组。检测暴露 3d及 7d时各组的肺湿重 /干重比值 (W/ D) ,支气管肺泡灌洗液中总蛋白、丙二醛 (malondialdehyde,MDA)含量及肺组织病理学变化。结果显示 ,3d时 , 组的总蛋白和 W/ D值高于 组和 组 (均为 P<0 .0 1) ;7d时 , 组的 W/ D、总蛋白和 MDA均较 组增加 (P<0 .0 5、 0 .0 1和 0 .0 1) ,总蛋白含量显著高于 I组 (P<0 .0 1)。 组与 组的肺组织病理改变类似 ,但 7d时无明显增生反应 ; 、 组无明显病理变化。结果表明 ,L - NAME加重新生鼠高氧诱导的肺水肿及呼吸膜通透性 ,提示内源性一氧化氮在机体对抗高氧诱导的肺损伤过程中可能发挥了积极作用。

超氧化物歧化酶和U74389G对新生鼠高氧肺损伤的治疗作用

目的:探讨抗氧化剂治疗高氧肺损伤的疗效及机制。方法:将新生SD大鼠随机分为对照组、高氧组、SOD组和U74389G组,每组14只。复制高氧肺损伤模型,用SOD和U74389G进行治疗。黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性,硫代巴比妥酸法测定MDA含量,TUNEL法检测细胞凋亡,观察肺病理变化以及放射状肺泡计数(RAC)。结果:高氧组的肺系数、MDA含量和凋亡指数显著高于对照组,RAC明显减少(均P<0.01);U74389G组及SOD组与高氧组相比,肺系数下降、MDA含量减少、SOD活性增高、凋亡指数下降,RAC升高(P<0.01,P<0.05)。高氧组肺组织严重水肿,中性粒细胞浸润,SOD组肺组织病理改变明显减轻,U74389G较高氧组有所减轻。SOD组在缓解肺系数、降低SOD活性及抑制凋亡方面优于U74389G组(P<0.01,P<0.05);U74389G组在抑制MDA含量方面优于SOD组(P<0.01),而两组间RAC差异无显著性。结论:抗氧化剂U74389G和SOD能减轻高氧肺损伤。

SSeCKS蛋白在新生大鼠高氧肺损伤中的表达

目的观察新生大鼠高氧肺损伤模型肺组织中Src抑制的蛋白激酶C的底物(SSeCKS)的表达及细胞定位。方法64只新生大鼠按照随机数字表法分为空气对照组和高氧暴露组,分别建立动物模型,于12、24、48、72h处死动物,进行肺组织的病理学检查及肺湿干质量比(W/D)检测,应用Western blot及免疫组化法检测各组各时相点肺组织中SSeCKS蛋白的表达,用间接免疫荧光双标法明确SSeCKS蛋白在肺组织中的定位。结果病理HE染色:高氧暴露24h肺泡内出现少量红细胞,肺泡壁增厚;48h肺泡内红细胞增多,肺间隔增宽,粒细胞附壁;72h出现肺出血,肺泡内可见大量的红细胞,肺泡间隔粒细胞浸润。Western blot法检测SSeCKS蛋白:空气对照组可检测到极少量的SSeCKS的表达,高氧暴露24h表达增加,72h达到最高,72h内随高氧暴露时间延长而增加;免疫组化定量分析与Western blot结果一致;间接免疫荧光双标法明确SSeCKS定位于毛细血管内皮细胞。结论提示SSeCKS参与了新生大鼠高氧肺损伤的过程。

新生大鼠高氧损伤肺组织的超微结构

目的:探讨新生大鼠在高氧肺损伤不同时点肺组织各种细胞超微结构的改变。方法:99只新生大鼠随机分为高氧组和空气组,生后3、7和14 d分批处死并取肺组织进行H.E染色病理检测,电镜检查各组肺组织的超微结构改变。结果:1)高氧组肺损伤主要表现为肺泡结构破坏、大小不一、肺间隔增厚以及胶原纤维沉积。2)超微结构主要表现为肺泡Ⅱ型细胞板层小体空泡化、肺泡Ⅰ型细胞胞浆溶解,成纤维细胞胞浆中的内质网、高尔基体和线粒体增多,肺泡Ⅰ型和Ⅱ型细胞线粒体肿胀等改变。结论:肺泡Ⅱ型细胞的不成熟、肺泡Ⅰ型细胞的变性和成纤维细胞合成胶原能力增强是导致高氧肺损伤病理改变的基础。