鼻咽癌高癌家系气虚质癌患者α-enolase的表达活性

目的探讨高癌家系气虚质鼻咽癌初诊患癌组织中α-enolase的表达活性水平及其临床病理意义。方法分别收集高癌家系中气虚质鼻咽癌初诊患者、鼻咽黏膜慢性炎症患者各9例,非高癌家系气虚质鼻咽癌初诊患者12例的鼻咽黏膜组织,Real Time PCR分别检测ENO1 mRNA表达活性,Western blotting检测ENO1蛋白表达水平,比较分析其组间差异及其临床病理意义。结果高癌家系组、非高癌家系气虚质鼻咽癌患者组、健康人鼻咽组织中ENO1 mRNA的△Ct分别为2.45±0.42,3.47±0.28,4.49±0.51;2^(-△△Ct)值分别为4.09±1.27,1.97±0.38,1.00±0.30;各组ENO1蛋白相对表达量依次为2.94±0.81、1.73±0.53、1.27±0.25;ENO1 mRNA及其蛋白表达水平组间差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论高癌家系气虚质初诊鼻咽癌患者ENO1 mRNA及蛋白表达水平的明显上调具有显著的临床病理意义,对高癌家系气虚质鼻咽癌患者早期筛查及诊断可能具有较好的临床应用价值。

鼻咽癌高癌家系调查及其分析

目的 调查鼻咽癌高癌家系在整个鼻咽癌发病中的比例、鼻咽癌高癌家系中患者出现状况及亲属关系以及鼻咽癌高癌家系患者与散发性患者在性别、发病年龄及发病时病毒壳膜抗原 -免疫球蛋白A(VcA -IgA)水平的差异 ,从而了解遗传与EB病毒在鼻咽癌发病中的作用及其可能的关系。方法 对 984例鼻咽癌患者进行回顾性调查分析。结果 鼻咽癌高癌家系发生率为 9 46% ,其中以一个家庭出现 2个患者占多数 ,为 75 % ,并且多出现在一级及二级亲属内。散发性鼻咽癌患者与鼻咽癌高癌患者在性别、发病年龄无差别 ,但发病时VcA -IgA水平 ,散发性患者高于家系患者。结论 鼻咽癌高癌家系患者可能存在更多的遗传缺陷 。

气虚体质之鼻咽癌高癌家系成员基因组稳定与修复基因表达

目的:研究气虚质鼻咽癌高癌家系成员基因组稳定与修复基因的表达情况。方法:在鼻咽癌高发区广东中山市,选择气虚质鼻咽癌高癌家系成员为研究对象,以正常质鼻咽癌高癌家系成员、鼻咽癌患者为对照,以基因组稳定和修复之功能分类基因芯片及实时荧光定量PCR技术进行研究。结果:鼻咽癌高癌家系成员DNA损伤修复基因主要以上调表达为主,且上调幅度高,下调的基因少且幅度低,气虚质较正常质鼻咽癌高癌家系成员的基因亦以上调表达为主,荧光定量PCR检测结果与芯片检测结果基本一致。结论:鼻咽癌高癌家系成员存在着特定的DNA损伤修复基因变化规律,气虚状态亦可影响DNA损伤修复基因变化。

鼻咽癌高癌家系成员中医体质特征调查

目的:观察鼻咽癌高癌家系成员中医体质特征。方法:建立中医体质证候分类标准,分别调查鼻咽癌高癌家系核心成员、鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者的中医体质类型,并以散发性鼻咽癌患者(外对照组)及高癌家系已婚核心成员配偶(内对照组)进行中医病理体质的对照研究。结果:鼻咽癌高癌家系核心成员中医体质证候类型主要表现为正常质和气虚质,而内对照组成员则多表现为正常质,高癌家系鼻咽癌患者多表现为气虚质、失调热质和复合质,散发性鼻咽癌患者多表现为气虚质和复合质,后三者各组间比较,差异有显著性或非常显著性意义(P<0.05,P<0.01)。而将高癌家系核心成员中医体质类型与外对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。51例高癌家系核心成员中,共有复合质7例,其中虚热质4例,虚湿质、湿热质、虚热瘀质各1例;而内对照组成员则未见复合质者。高癌家系鼻咽癌患者17例中,共有复合质7例,其中虚热质1例,虚湿质2例,湿热质3例,虚热瘀质1例,与高癌家系核心成员比较,差异无显著性意义(P>0.05)。外对照组成员34例中,有复合质6例,其中虚湿质3例,虚寒质1例,湿热质2例,与高癌家系核心成员及高癌家系鼻咽癌患者比较,差异无显著性意义(P>0.05)。体质证候积分高癌家系核心成员与内对照组成员比较,气虚质积分差异有非常显著性意义(P<0.01),失调瘀质积分差异有显著性意义(P<0.05)。高癌家系核心成员与高癌家系鼻咽癌患者比较,气虚质积分、失调瘀质积分差异有非常显著性意义(P<0.01),失调寒质积分比较,差异有显著性意义(P<0.05)。高癌家系核心成员与外对照组成员比较,失调寒质积分及失调瘀质积分,差异有非常显著性意义(P<0.01),失调湿质积分,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:鼻咽癌高癌家系核心成员的中医体质类型中,除正常质外,病理体质主要表现为气虚质和复合质,而高癌家系鼻咽癌患者的中医体质类型主要表现为气虚质、失调热质和复合质。中医体质特征与鼻咽癌发病关系密切。

鼻咽癌高癌家系癌患者不同体质证型的蛋白质组学研究

目的比较鼻咽癌高癌家系不同体质证型癌患者鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)组织蛋白质组差异,筛选体质证型相关性差异蛋白质。方法鼻咽癌高癌家系初诊鼻咽癌患者14例,包括气虚体质组7例和湿热体质组7例,取鼻咽原发灶癌组织,应用双向凝胶电泳技术分离标本组织总蛋白后,自动识别差异表达蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱MALDI-TOF-MS分析得到肽质量指纹图谱PM F,生物信息学技术鉴定部分差异蛋白质点及其病理意义。结果建立了鼻咽癌高癌家系癌患者气虚体质组和湿热体质组鼻咽原发灶癌组织的双向凝胶电泳图谱,发现该系气虚体质组鼻咽癌患者和湿热体质组患者之间差异表达大于3倍的蛋白质点10个,并鉴定出了F-肌动蛋白戴帽蛋白亚基(F actin capping protein)等5个蛋白质。这些差异表达蛋白质的功能涉及遗传与转录、物质代谢、能量的产生、物质转运等现象。结论鼻咽癌高癌家系气虚体质鼻咽癌患者组和湿热体质鼻咽癌患者鼻咽病灶组织存在不同的蛋白质表达谱,已经筛选鉴定的5个差异表达蛋白质,可能为揭示鼻咽癌高癌家系不同体质患者鼻咽癌发病机制研究提供有用信息。

鼻咽癌高癌家系不同体质证型鼻咽癌患者鼻咽病灶组织蛋白双向凝胶电泳分析

目的建立鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者气虚体质证型及湿热体质证型高分辨率双向凝胶电泳特征图谱,探讨其证本质相关性蛋白质组学特征。方法设鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者气虚体质组、湿热体质组、其他体质证型组,散发性鼻咽癌患者组,鼻咽癌高癌家系健康成员对照组,共计5组。分别获取鼻咽组织标本,提取总蛋白质,固相pH梯度双向凝胶电泳分离,经考马斯亮蓝显色后,Image Master 2D Elite4.01图像分析软件进行电泳结果分析。结果各组标本均获得分辨率高、重复性好的双向凝胶电泳图谱,平均蛋白质点数分别为860±20,854±25,842±30,867±20及857±15。比较分析,发现鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者气虚体质组与湿热体质组,差异蛋白质点10个。结论鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者不同体质证型蛋白质谱发生了明显变化,提示同病异证存在不同的本质内涵,为进一步研究鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者中医体质证型的本质内涵提供了实验依据。

鼻咽癌高癌家系外周单个核细胞蛋白质组学研究

目的寻找鼻咽癌高癌家系鼻咽癌的癌变机制、早期诊断、治疗和预后监测的外周血特异性分子标志物。方法利用双向凝胶电泳技术(2-DE)分别分离鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者、鼻咽癌高癌家系成员及健康对照组外周血单个核细胞的总蛋白,经蓝银染色后进行图像分析,并对差异表达的蛋白质点进行识别,利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱得到肽质量指纹图谱,搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点。结果建立了鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者、鼻咽癌高癌家系成员及健康对照组外周血单个核细胞的2-DE图谱;发现并鉴定了鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者、鼻咽癌高癌家系成员及健康对照组之间的差异表达大于2倍的蛋白质点19个,这些差异蛋白质点主要为蛋白质合成与分解、抗氧化应激、分子伴侣、细胞结构相关蛋白质、三大代谢相关酶类以及信号传导相关蛋白质等。结论通过对鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者、鼻咽癌高癌家系成员及健康对照组外周血单个核细胞的比较蛋白质学研究,筛选并鉴定到19个与鼻咽癌高癌家系鼻咽癌发生相关的蛋白质,其中HSP27、Protein S100-A9、Prohibitin可能成为鼻咽癌高癌家系鼻咽癌癌变机制、早期诊断、治疗及预后监测的外周血特异性分子标志物。

淋巴细胞亚群在鼻咽癌高癌家系外周血中的临床意义

目的探讨淋巴细胞亚群在鼻咽癌(NPC)高癌家系外周血中的临床意义。方法以梅州市人民医院2016年1月至2019年3月门诊收治的60例NPC高癌家系患者为A组,68例NPC高癌家系成员为B组,同期在该院进行体检的70名健康人员为C组,使用Ficoll分层液法分离各组成员外周血单核细胞(PBMC)后,使用流式分析法检测各组成员外周血中淋巴细胞(TBNK细胞)亚群,并使用蛋白质印迹法(Western blotting)检测各组患者外周血中钙调蛋白S100-A9含量,对比3组成员淋巴细胞亚群与S100-A9含量,并分析其意义。结果A组外周血中CD3+(T)细胞、CD4+(T)细胞、CD19+(B)细胞、CD56+(NK)细胞含量明显低于B组和C组,而CD8+(T)细胞明显高于B和C组;B组外周血中CD3+、CD4+、CD19+、CD56+细胞明显低于C组,而CD8+明显高于C组;A组S100-A9蛋白表达量明显高于B组和C组;B组S100-A9蛋白表达量明显高于C组;A组经过化疗后,患者外周血中CD3+、CD4+、CD19+、CD56+细胞明显高于化疗前,而CD8+明显低于化疗前;A组S100-A9蛋白表达量明显低于化疗前。以上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论外周血TBNK细胞及S100-A9蛋白能够区分NPC高癌家系患者、NPC高癌家系成员及健康人群,并在高癌家系NPC患者治疗后变化明显,可作为NPC风险预测和治疗效果评估的指标。

高癌家系气虚质鼻咽癌患者鼻咽组织标本RhoGDIβ的表达水平及其临床病理意义

目的:研究RhoGDIβ蛋白在高癌家系气虚质鼻咽癌患者中的表达,并探讨其特异性体质病机。方法:于2019年11月—2020年11月期间,分别由我院就诊的散发性鼻咽癌和高癌家系鼻咽癌中选取气虚质患者各6例,取鼻咽病灶组织标本,并收集同期就诊的正常鼻咽组织标本6例,分别提取总RNA和蛋白质。应用蛋白免疫印迹(Western blotting)法分别检测各组组织标本RhoGDIβ蛋白表达水平,PCR法检测各组组织标本RhoGDIβRNA mRNA表达水平。结果:PCR检测显示散发性鼻咽癌组和高癌家系鼻咽癌组的RhoGDIβmRNA的表达水平明显高于正常组(P<0.05)。Western blot法检测RhoGDIβ蛋白结果显示,正常组与散发性鼻咽癌组和高癌家系鼻咽癌组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。进行组间两两比较,正常组与散发性鼻咽癌组、正常组与高癌家系鼻咽癌组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:无论是高癌家系鼻咽癌患者还是散发性鼻咽癌患者,气虚质患者鼻咽癌病灶组织中的RhoGDIβ表达均显示明显上调。该一指标有望成为早期诊断和筛查高癌家系气虚质鼻咽癌患者的客观标志物。

鼻咽癌高癌家系癌患者外周血淋巴细胞S100A9表达分析

目的探索鼻咽癌高癌家系癌患者外周血淋巴细胞S100A9差异性表达情况及其临床意义。方法收集高癌家系鼻咽癌患者、散发鼻咽癌患者及正常对照组外周血各22例,分别抽取患者及对照组病人外周静脉血10ml,提取外周血淋巴细胞进行S100A9蛋白分析,采用Western blot、RT-PCR分别检测三组研究对象S100A9蛋白、S100A9mRNA表达情况。结果鼻咽癌高癌家系癌患者及鼻咽癌散发癌患者及正常对照组S100A9 mRNA表达分别为-3.886±1.663、-3.421±1.110、-4.031±1.586,三组比较P>0.05,差异无统计学意义。S100A9蛋白表达分别为0.518±0.353、0.481±0.344、0.245±0.202,三组比较P<0.05,差异具有统计学意义。结论鼻咽癌高癌家系癌患者及散发鼻咽癌患者外周血淋巴细胞S100A9蛋白表达与正常人比存在差异性,有望成为鼻咽癌早期筛查指标。

Annexin A7在高癌家系鼻咽癌人群中的表达水平

目的检测膜联蛋白A7(Annexin A7)在高癌家系鼻咽癌组织中的表达情况,以期探讨高癌家系鼻咽癌患者与Annexin A7之间的关系。方法采集门诊患者鼻咽组织标本(高癌家系鼻咽癌组织标本、散发性鼻咽癌组织标本及鼻咽黏膜慢性炎症患者组织标本各15例),应用RT-PCR及Western blot检测Annexin A7在各组标本的mRNA及蛋白质水平的表达情况。结果在高癌家系鼻咽癌患者、散发性鼻咽癌患者及鼻咽黏膜慢性炎症患者鼻咽组织中,Annexin A7 mRNA的相对表达量依次为0.828±0.046、0.459±0.048、0.312±0.072,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。在高癌家系鼻咽癌患者、散发性鼻咽癌患者及鼻咽黏膜慢性炎症患者鼻咽组织中,Annexin A7蛋白相对表达量依次为0.867±0.068、0.624±0.065、0.392±0.087,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。Annexin A7蛋白在鼻咽癌组织中的表达与TNM分期及淋巴结转移有关,与患者的年龄﹑性别无关。结论 Annexin A7在高癌家系鼻咽癌患者鼻咽组织中表达明显上调。Annexin A7的表达和肿瘤的分期和淋巴结转移有关。

鼻咽癌高癌家系成员基因组稳定与修复基因表达的研究

目的:探讨鼻咽癌高癌家系成员基因组稳定与修复基因的表达情况。方法:在鼻咽癌高发区广东省中山市,选择鼻咽癌高癌家系成员为研究对象,以鼻咽炎及鼻咽癌患者为对照,抽提鼻咽组织RNA,合成cRNA,以基因组稳定和修复功能分类基因芯片杂交及化学发光法检查其基因的表达情况,并实时荧光定量PCR技术进行验证。结果:鼻咽癌高癌家系成员DNA损伤修复基因主要以上调表达为主,且上调幅度高,上调100倍以上的基因包括TEP1、MSH4和PMS2L1;下调的基因少且幅度低,泛素类基因多表现为下调,实时荧光定量PCR检验结果基本一致。结论:鼻咽癌高癌家系成员存在着特定的DNA损伤修复基因变化规律。

鼻咽癌高发家系新发病例及EB病毒感染指标的追踪调查

目的:追踪调查鼻咽癌(NPC)高发家系成员中新病例的发生情况,监测家系成员的EB病毒感染指标的动态变化,并分析其与发病危险性之联系,以提高NPC早期发现、早期诊断和早期治疗的几率。方法:对16个鼻咽癌高发家系(其三代成员中至少出现过2例鼻咽癌病例)成员共416人进行连续36个月的追踪随访,并用ELISA法检测其血清EBV-VCA-IgA、EBV-EA-IgA。结果:高发家系成员EBV-VCA_IgA阳性率(滴度≥1∶10为阳性)为26.44%(109/416),EBV-EA阳性率(滴度≥1∶5为阳性)3.67%(15/416),均高于当地体检人群的相应数据,差异有显著性。在追踪调查的36个月中,共出现NPC新病例9例(Ⅰ期5例,Ⅱ期4例)。结论:NPC高发家系成员中发生新病例的频率非常高;其发病危险性与其EBV-VCA-IgA和EBV-EA-IgA抗体的高阳性表达有密切关系;对NPC高发家系进行定期追踪监控,可提高三早率,最终可能提高NPC的治疗效果。

鼻咽癌高癌家族中热休克蛋白70的表达及意义

目的探讨热休克蛋白HSP70在鼻咽癌高癌家系癌患者中的表达特点及其生物学意义。方法鼻咽癌高癌家族组和散发组鼻咽癌患者各20例,健康对照者20例,分别采集外周静脉血标本,分离外周血单个核细胞(PBMC),常规抽提总蛋白和总mRNA。然后,分别以Western blotting技术检测PBMC的HSP70蛋白表达水平,RT-qPCR检测PBMC的HSP70 mRNA转录水平,比较分析组间差异及其生物学意义。结果鼻咽癌高癌家族组和散发组鼻咽癌患者以及健康对照组PBMC HSP70蛋白水平分别为0.648±0.292,0.490±0.314,0.395±0.165,组间差异统计学意义显著(P=0.007),高癌组明显高于健康对照组,散发组则否。但是,三组的HSP70 mRNA转录水平则分别为-14.071±2.408,-13.952±2.726,-13.905±1.601,组间差异无统计学意义(P=0.970)。结论受家族遗传易感性影响,在鼻咽癌高癌家族鼻咽癌患者中,致癌因子可能通过转录后调控机制上调鼻咽癌患者PBMC HSP70蛋白的表达,促进鼻咽癌高癌家族遗传易感性鼻咽癌的发病。

不同家族史鼻咽癌患者癌组织Prohibitin的表达

目的对比Prohibitin(PMB)在不同家族史的鼻咽癌患者癌组织中的表达,以探究鼻咽组织中Prohibitin是否可以作为鼻咽癌潜在标记物。方法收集高癌家系气虚质鼻咽癌患者、鼻咽黏膜慢性炎症患者的鼻咽组织各9例,散发气虚质鼻咽癌患者的鼻咽组织12例,应用实时定量PCR方法检测Prohibitin在各组鼻咽组织中的表达。利用Western-blotting蛋白免疫印迹方法检测Prohibitin在各组患者鼻咽组织中的表达。结果 PHB m RNA在鼻咽黏膜慢性炎症鼻咽组织、散发气虚质鼻咽癌组织、高癌家系气虚质鼻咽癌组织中的2-△△Ct值分别为1.00±0.72、1.08±0.49、0.97±0.41(P>0.05)。PHB蛋白相对表达依次为0.33±0.21、0.59±0.25、1.72±0.96(P<0.05)。分析各组间对比PHB基因表达量无明显变化,但蛋白表达量鼻咽癌患者明显高于正常人,高癌家系鼻咽癌患者蛋白表达量高于散发患者,考虑与级联放大反应有关,有望成为高癌家系气虚质鼻咽癌患者早期诊断及筛查的标志物。

F-肌动蛋白在鼻咽癌不同家族史患者中的表达

目的对比F-肌动蛋白α亚基(CAPZA1)在鼻咽癌不同家族史患者外周血中的表达,以探究外周血CAPZA1是否可以作为潜在外周血标记物。方法选取鼻咽癌高癌家系癌患者6例为观察组,散发鼻咽癌患者6例为阳性对照组,健康人6例为阴性对照组。应用实时定量PCR方法检测CAPZA1在各组淋巴细胞中的表达量情况。利用Western blot蛋白免疫印迹方法检测CAPZA1在各组患者淋巴细胞中的表达量情况。结果观察组、阳性对照组、阴性对照组男女比例分别为5∶1、5∶1、2∶1。年龄分别为(41.67±15.41)、(53±12.35)、(45.93±14.42)岁。QPCR观察组、阳性对照组组、阴性对照组的CAPZA1 2^(-△△CT)值分别是0.75±0.16、0.70±0.23、1.03±0.31(P>0.05)。Western blot提示CAPZA1在观察组、阳性对照组、阴性对照组的表达分别为0.06±0.02、0.11±0.02、0.26±0.08(P<0.05)。结论各组间CAPZA1 mRMA相对其他组无明显变化,但CAPZA1表达量鼻咽癌患者明显低于正常人,且高癌家系鼻咽癌患者CAPZA1表达量低于散发患者,与F-肌动蛋白表达两亚基间调节有关,外周血CAPZA1可能是鼻咽癌的其中一个生物标志物。