经房角镜光凝小梁网法建立慢性高眼压大鼠模型及其与经角膜缘光凝法的比较

背景慢性高眼压动物模型的建立是青光眼发病机制研究的基础，以往激光光凝建立慢性高眼压动物模型的方法存在模型眼压波动大，需要重复光凝和并发症多的问题，造模方法的改良对于顺利开展相关的实验研究具有重要意义。目的用经房角镜光凝小梁网法建立大鼠慢性高眼模型，并与以往的经角膜缘光凝法进行比较。方法选取8～12周龄清洁级Fischer344大鼠36只，将动物分为正常对照组、经角膜缘光凝组和经房角镜光凝组，每组12只，经角膜缘光凝组采用532nmYAG激光经角膜缘光凝大鼠右眼小梁网建立慢性高眼压模型，激光能量为440—500mW，激射光斑40～60个；经房角镜光凝组激光能量为800～850mw，激射光斑100～120个。光凝后用Tonolab眼压计测量并观察各组大鼠眼压变化；于光凝后第3周每组处死5只大鼠，分离视网膜，采用免疫荧光技术检测并比较各组大鼠视网膜中Tuj一1阳性的视网膜神经节细胞（RGCs）数目。实验动物的使用及喂养遵循ARVO声明。结果造模后3周各组大鼠一般情况可，眼表无明显损伤。经角膜缘光凝组和房角镜光凝组慢性高眼压模型的成模率分别为75％和100％。正常对照组、经角膜缘光凝组和经房角镜光凝组大鼠模型眼造模后3周的平均眼压分别为（11．0±1．3）、（23．4±12．6）和（25．3±4。9）mmHg（1mmHg=0．133kPa），峰服压分别为（12．3±1．0）、（50．5±7．3）和（44．3±12．3）mmHg，组问总体比较差异均有统计学意义（F=25．496、80．762，均P〈0．001），其中经角膜缘光凝组和经房角镜光凝组大鼠模型眼平均眼压均明显高于正常对照组，差异均有统计学意义（均P〈0．001），而2个组间平均眼压和峰眼压差异均无统计学意义（P=1．000、0．195）。正常对照组、经角膜缘光凝组和经房角镜光凝组大鼠视网膜中Tuj-1阳性RGCs数目分别为（2048．2±148．5）、（645．2±177．1）及（1223．7±148．6）／mm2，总体比较差异有统计学意义（F=98．767，P〈0．001），其中经角膜缘光凝组和经房角镜光凝组大鼠视网膜中Tuj-1阳性RGCs数目均明显少于正常对照组，且经角膜缘光凝组大鼠视网膜中Tuj-1阳性RGCs数目明显少于经房角镜光凝组，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结论经房角镜光凝小梁网能够诱导大鼠慢性高眼压并导致RGCs损害，但眼压升高模式及RGCs损害程度与经角膜缘光凝法有所不同，经房角镜光凝法建立慢性高眼压模型成模率更高。

急性高眼压模型兔眼不同眼压状态下视神经轴浆运输的改变

目的观察急性高眼压模型兔眼不同眼压状态下视神经轴浆运输的改变。方法成年新西兰大白兔24只，分为眼压20、30、40mmHg（1mmHg=0．133kPa）组和眼压为10～15mmHg的对照组，每组均为6只兔。采用前房穿刺灌注法联合压力持续监测法建立急性高眼压模型。实验开始时，兔眼玻璃体腔中注射罗丹明异硫氰酸（RITc）标记轴浆运输。持续3h高眼压后，过量麻醉处死兔后取下视神经。荧光显微镜下观察视神经轴浆运输情况的改变。采用德国Leica公司Q500IW图像分析软件对RITC进行灰度定量分析，并对各眼压组平均灰度值和筛板前、筛板区、筛板后350μm区域灰度值进行统计学分析处理。结果RITC在视神经中心呈顺行标记染色。不同眼压组轴浆运输情况不同，随着眼压升高，轴浆运输能力减弱，差异有统计学意义（F=159．3，P〈0．05）。筛板前区，各眼压组间灰度值比较，差异无统计学意义（F=0．2545，P〉0．05）。40mmHg组灰度值与对照组灰度值比较，在筛板区（t=5．684）和筛板后350μm区域（t=5．124）差异均有统计学意义（P〈0．05）；20、30mmHg组灰度值与对照组灰度值比较，差异无统计学意义（t=1．747，P〉0．05）。结论眼压40mmHg持续3h将导致视神经轴浆运输改变，轴浆运输障碍部位以筛板区及以后的区域为主。