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用N-(3-P)NEM标记毛发角蛋白研究毛发中低硫蛋白和高硫蛋白的状态 被引量:4
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作者 何学民 严品华 《华东师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1992年第2期74-80,共7页
本文用一种特异性标记蛋白质巯基的N-(3-P)NEM为荧光探针标记毛发角蛋白,经SDS-PAGE后,通过荧光薄层扫描确定N-(3-P)NEM与含巯基蛋白结合的部位.结果表明,毛发角蛋白中的低硫蛋白分子量在45,000~63,000范围,约占总蛋白量的49.6%~68.2%... 本文用一种特异性标记蛋白质巯基的N-(3-P)NEM为荧光探针标记毛发角蛋白,经SDS-PAGE后,通过荧光薄层扫描确定N-(3-P)NEM与含巯基蛋白结合的部位.结果表明,毛发角蛋白中的低硫蛋白分子量在45,000~63,000范围,约占总蛋白量的49.6%~68.2%;高硫蛋白分子量在4,000~20,000范围,约占总蛋白量的18.9%~36.2%.除低硫和高硫蛋白以外,毛发角蛋白中还可能存在一种极低硫蛋白,分子量位于22,000~32,000范围.对人与5种动物的毛发角蛋白组分进行比较,证实人与动物的毛发角蛋白的主要差异在高硫蛋白,不同种属的动物毛发角蛋白中低硫蛋白和高硫蛋白的含量也不相同.作者认为毛发角蛋白中含巯基蛋白的差异可为动物分类学和法医学在进行毛发比较鉴别方面提供新的重要信息. 展开更多
关键词 毛发角蛋白 蛋白 高硫蛋白
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大豆高硫蛋白提纯试验
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作者 黄少美 《广州食品工业科技》 1990年第3期40-42,共3页
大豆含35~40%蛋白质(干基)。大豆蛋白的主要成分是由大豆球蛋白(llS)和β一伴大豆球蛋白(7S)组成(Derbyshire et al,1976)。一、高硫蛋白的提纯工艺将大豆研磨至40目,用冻丙酮(4℃)将大豆粉脱脂,置于铝制薄片中摊开,在通风槽中干燥。... 大豆含35~40%蛋白质(干基)。大豆蛋白的主要成分是由大豆球蛋白(llS)和β一伴大豆球蛋白(7S)组成(Derbyshire et al,1976)。一、高硫蛋白的提纯工艺将大豆研磨至40目,用冻丙酮(4℃)将大豆粉脱脂,置于铝制薄片中摊开,在通风槽中干燥。干大豆粉置于密封容器内,在—20℃下贮存备用。高硫球蛋白提纯工艺见图: 展开更多
关键词 大豆蛋白 高硫蛋白 提纯
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绵羊高硫角蛋白启动子表达活性研究 被引量:2
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作者 罗芳 王春生 +1 位作者 刘欣 安铁洙 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第6期61-64,共4页
角蛋白是羊毛主要结构蛋白,为了筛选在绵羊毛囊中具有高表达活性高硫角蛋白的内源启动子,本研究以绵羊基因组为模板,克隆得到高硫角蛋白基因启动子B2C,将B2C与去除CMV启动子的pAcGFP1-N1载体连接,构建了重组真核表达载体。采用阳离子脂... 角蛋白是羊毛主要结构蛋白,为了筛选在绵羊毛囊中具有高表达活性高硫角蛋白的内源启动子,本研究以绵羊基因组为模板,克隆得到高硫角蛋白基因启动子B2C,将B2C与去除CMV启动子的pAcGFP1-N1载体连接,构建了重组真核表达载体。采用阳离子脂质体法转染传代培养的绵羊成纤维细胞和去除透明带的小鼠4细胞期胚,分析其表达活性。结果表明,转染后48 h,在蓝光激发条件下可以检测到绵羊成纤维细胞核内及核周围绿色荧光蛋白的高表达,转染72 h后,在核内表达减弱,而细胞质内表达增加;此外,虽然利用病毒启动子构建的GFP表达载体能够在小鼠的早期胚胎细胞中表达,但由B2C启动子与GFP构建的表达载体转染小鼠早期胚胎后,未观察到绿色荧光,表明B2C启动子在绵羊成纤维细胞中具有表达活性,但不能在小鼠早期胚胎中表达。 展开更多
关键词 蛋白 启动子 分子克隆 活性分析
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单根毛发角蛋白的分离与分析 被引量:3
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作者 何学民 严品华 +1 位作者 徐俊杰 赵珍敏 《中国法医学杂志》 CSCD 1991年第2期65-67,130,共4页
本文用单根毛发(1~5cm)进行微量化角蛋白 SDS-梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,并对人与5种不同种属的动物毛发角蛋白进行了比较研究。结果表明,人与动物毛发角蛋白组分有明显差异,主要区别在于低分子量区域;用 N-(3-芘)马来酰胺标记毛发... 本文用单根毛发(1~5cm)进行微量化角蛋白 SDS-梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,并对人与5种不同种属的动物毛发角蛋白进行了比较研究。结果表明,人与动物毛发角蛋白组分有明显差异,主要区别在于低分子量区域;用 N-(3-芘)马来酰胺标记毛发角蛋白巯基,进一步确定了毛发角蛋白中低硫蛋白位于45,000~52,000分子量范围,高硫蛋白位于<18,500分子量范围。人与动物毛发角蛋白的主要差异是高硫蛋白。作者认为,本实验方法对法医学毛发鉴别有一定的实用意义。 展开更多
关键词 毛发角蛋白 SDS-梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳 蛋白 高硫蛋白
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双波长法测定硫高铁血红蛋白 被引量:2
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作者 顾华强 王仁仪 +2 位作者 游全程 朱月武 秦景香 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 1999年第1期23-25,共3页
目的探讨建立硫高铁血红蛋白的测定方法以评价不同高铁血红蛋白形成剂对急性硫化氢中毒的解毒作用。方法采用标准方法、定值参考物进行质量控制。用硫化氢气体饱和高铁血红蛋白生成硫高铁血红蛋白样品,扫描吸收曲线。氰化高铁血红蛋白... 目的探讨建立硫高铁血红蛋白的测定方法以评价不同高铁血红蛋白形成剂对急性硫化氢中毒的解毒作用。方法采用标准方法、定值参考物进行质量控制。用硫化氢气体饱和高铁血红蛋白生成硫高铁血红蛋白样品,扫描吸收曲线。氰化高铁血红蛋白与硫高铁血红蛋白在各自特征吸收峰540nm、654nm处的毫摩尔消光系数,求得硫高铁血红蛋白百分比浓度。结果质控变异百分率V≤0.4%,各消光系数变异系数CV≤3.0%,平均回收率97.5%±4.1%;重复实验CV≤1.5%,n=10;线性范围0.0%~80.0%,直线回归方程为Y=0.973X+0.158、r=0.999。结论该方法灵敏、准确且简便、快速,适用于临床和科学研究。 展开更多
关键词 铁血红蛋白 双波长法 测定 化氢中毒
原文传递
羊驼皮肤cDNA文库构建及鉴定 被引量:1
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作者 姜俊兵 张巧灵 +1 位作者 耿建军 董常生 《激光生物学报》 CAS CSCD 2007年第2期222-225,共4页
采用原核表达载体pet-32-a+构建了羊驼皮肤组织cDNA文库。双链cDNA采用Universal Ribo Clonec DNA Synthesis System合成,并经过琼脂糖分级胶回收,去除了小于400 bp的片断;通过酶切载体的去磷酸化和插入片断的磷酸化,提高了重组率,蓝白... 采用原核表达载体pet-32-a+构建了羊驼皮肤组织cDNA文库。双链cDNA采用Universal Ribo Clonec DNA Synthesis System合成,并经过琼脂糖分级胶回收,去除了小于400 bp的片断;通过酶切载体的去磷酸化和插入片断的磷酸化,提高了重组率,蓝白斑筛选结果全部为阳性;库扩增后检测容量达2.25×107。随机挑取阳性克隆进行单引物测序分析,七个测序样品中获得两个与毛发生长相关的EST(expression sequence tag),分别为S100钙离子结合蛋白A3基因(S100 calcium binding protein A3,S100A3)的部分序列和高硫角蛋白关联蛋白基因(high sulfur keratin-associated protein,KRTAP3-3)的部分序列,说明所构建的文库具有较高的代表性。 展开更多
关键词 羊驼 CDNA文库 S100钙离子结合蛋白A3 蛋白关联蛋白
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High levels of dRYBP induce apoptosis in Drosophila imaginal cells through the activation of reaper and the requirement of trithorax, dredd and dFADD 被引量:1
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作者 Inma Gonzalez Ana Busturia 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2009年第6期747-757,共11页
Drosophila RYBP (dRYBP; Ringl and Y_Y1 Binding Protein) is a Polycomb and trithorax interacting protein, whose homologous RYBP/DEDAF mammalian counterparts exhibit tumor cell-specific killing activity. Here we show ... Drosophila RYBP (dRYBP; Ringl and Y_Y1 Binding Protein) is a Polycomb and trithorax interacting protein, whose homologous RYBP/DEDAF mammalian counterparts exhibit tumor cell-specific killing activity. Here we show that although endogenous dRYBP is not involved in developmental apoptosis, high levels of exogenous dRYBP induce apoptosis in all the imaginal discs of the fly, indicating that dRYBP apoptotic activity is not specific to tumor cells. We also show that dRYBP-induced apoptosis is inhibited by high levels of either p35 or DIAP1 (Drosophila Inhibitor of Apoptosis Protein 1), and requires the function of the pro-apoptotic REAPER, HID and GRIM proteins, the apical caspase DREDD, the adaptor dFADD protein as well as TRITHORAX (TRX), an epigenetic transcriptional regulator. Furthermore, we demonstrate that overexpression of TRX also induces apoptosis in the imaginal discs. Finally, we show that the expression of reaper-lacZ is upregulated both upon dRYBP-induced apoptosis and upon TRX- induced apoptosis in imaginal discs and that the reaper gene is a direct target of dRYBP in Drosophila embryos. Our results indicate that dRYBP triggers in a receptor-mediated apoptotic pathway that also includes TRX-dependent epigenetic regulation of gene expression. 展开更多
关键词 dRYBP apoptosis TRITHORAX POLYCOMB DROSOPHILA
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职业医学
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《中国妇幼卫生杂志》 2000年第2期72-81,共10页
关键词 作业工人 职业病 再生障碍性贫血 职业医学 煤工尘肺 铁血红蛋白 矽肺 医学杂志 中国工业 劳动卫生
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