高糖基化人绒毛膜促性腺激素在妇产科中的应用及研究进展

高糖基化人绒毛膜促性腺激素(hCG-H)是hCG的一种亚型,主要由妊娠早期滋养细胞和滋养细胞肿瘤细胞分泌,能够促进滋养细胞或肿瘤细胞的侵入作用,可以抑制肿瘤细胞的凋亡。hCG-H对妊娠和妊娠相关疾病的检查有一定的价值,同时是一种可靠的滋养细胞肿瘤标记物,并能够指导滋养细胞肿瘤的治疗。

血清高糖基化hCG检测在21-三体综合征产前筛查中的意义探讨

目的初步探讨孕母血清高糖基化hCG(HhCG)用于孕中期产前筛查21-三体的临床意义。方法采用Nichols全自动化学免疫发光分析仪测定115例孕15～20周的孕妇(包括17例21-三体妊娠和98例正常妊娠)的血清高糖基化hCG水平。结果 17例21-三体妊娠的孕妇HhCGMoM值中位数为10.11,约是正常妊娠中位数值(3.55)的3倍。将115例孕妇按AFP、F-β-hCG筛查结果分成21-三体妊娠者和高风险、低风险正常妊娠3组,3组数据呈对数正态分布,组间比较,21-三体妊娠孕妇HhCGMoM值高于高风险、低风险正常妊娠(P<0.02、P<0.001)。除此,17例21-三体妊娠者HhCGMoM值均大于2.9(文献提示的21三体高风险判断阈值);2例AFP、F-β-hCG产前筛查为假阴性患者其HhCGMoM值分别为7.5、10.11,均大于2.9。结论 21-三体妊娠者孕中期血清HhCG较正常妊娠升高,血清HhCG指标有产前筛查的应用价值。

高糖基化hCG、KAI-1/CD82蛋白联合检测在妊娠滋养细胞疾病中的应用

妊娠滋养细胞疾病的特征是滋养细胞异常增生,具有侵袭性和增殖性,高糖基化人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)与妊娠滋养细胞疾病密切相关。KAI-1/CD82基因是近年来研究发现的一种肿瘤转移抑制基因,其正常表达可抑制肿瘤转移,尽管KAI-1/CD82在多种恶性肿瘤中的研究已较为深入,但在母胎界面的研究却很少。本文对联合检测hCG、高糖基化hCG、KAI-1/CD82蛋白在妊娠滋养细胞疾病中的应用作一综述。

甲醇酵母Pichia pastoris高水平表达有活性的辣根过氧化物酶

表达有活性的辣根过氧化物酶（ＨＲＰ） 不仅可以深入揭示ＨＲＰ 结构与功能及其生理作用规律， 而且为ＨＲＰ的广泛需要提供新的来源． 为了在甲醇酵母Ｐ． ｐａｓｔｏｒｉｓ 中成功表达， 将编码ＨＲＰＣ成熟肽的ｃＤＮＡ 构建到ｐＰＩＣ９ 上， 再转化到Ｐ． ｐａｓｔｏｒｉｓ 中， 筛选到了分泌表达非糖基化ＨＲＰ 和高糖基化ＨＲＰ（ 分子质量超过１００ ｋｕ） 两种主要产物的重组细胞株． 优化表达条件， 目标产物在摇瓶发酵液中高效表达， 可达４～６ ｇ／Ｌ． 并且直接从发酵液中可获得具有活性的高糖基化ＨＲＰ， 每毫升发酵液中酶活力约有２ Ｕ， 经初步的纯化ＨＲＰ具有最大吸收峰４０３ ｎｍ ．

高血糖对肝纤维化发生的影响及其机制

高血糖作为糖尿病的重要表现对肝纤维化的影响越来越引人关注。高血糖可促进脂肪性肝炎和病毒性肝炎肝纤维化的发生和发展。其机制可能涉及糖基化终末产物、氧化应激以及细胞因子等方面。

茯苓酸改善多囊卵巢综合征大鼠胰岛素抵抗的作用及机制研究

目的研究茯苓酸对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠胰岛素抵抗的改善作用及机制。方法将126只雌性大鼠按随机数字表法分为空白组、PCOS组、茯苓酸低剂量组(8.33 mg/kg)、茯苓酸高剂量组(33.32 mg/kg)、炔雌醇环丙孕酮组(阳性对照组,0.34 mg/kg)、重组大鼠高迁移率族蛋白B1蛋白(rHMGB1)组(8μg/kg)和茯苓酸高剂量+rHMGB1组(33.32 mg/kg茯苓酸+8μg/kg rHMGB1),每组18只。除空白组外,其余各组大鼠均通过灌胃来曲唑混悬液的方式构建PCOS模型。建模成功后,每天给药1次,持续4周。给药结束后,检测大鼠空腹血糖、空腹胰岛素水平及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),检测大鼠血清中促卵泡素(FSH)、促黄体生成素(LH)、睾酮(T)水平及卵巢组织中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,计算大鼠卵巢系数,观察大鼠卵巢组织病理变化,检测大鼠卵巢组织中HMGB1、晚期糖基化终产物受体(RAGE)、磷酸化核因子κB p65(p-NF-κB p65)蛋白表达情况。结果与空白组比较,PCOS组大鼠卵巢组织病理损伤严重,空腹血糖、空腹胰岛素水平、HOMA-IR、卵巢系数升高,血清中LH和T水平升高、FSH水平降低,卵巢组织中IL-1β、TNF-α水平及HMGB1、RAGE、p-NF-κB p65蛋白表达量升高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与PCOS组比较,茯苓酸低、高剂量组和炔雌醇环丙孕酮组大鼠卵巢组织病理损伤减轻,空腹血糖、空腹胰岛素水平、HOMA-IR、卵巢系数降低,血清中LH和T水平降低、FSH水平升高,卵巢组织中IL-1β、TNF-α水平及HMGB1、RAGE、p-NF-κB p65蛋白表达量降低,差异均具有统计学意义(P<0.05);rHMGB1组大鼠对应指标的变化趋势与上述给药组相反(P<0.05)。与茯苓酸高剂量组比较,茯苓酸高剂量+rHMGB1组大鼠的上述指标变化均被显著逆转(P<0.05)。结论茯苓酸可能通过抑制HMGB1/RAGE信号通路改善PCOS大鼠胰岛素抵抗并抑制其炎症反应。

柠檬苦素对溃疡性结肠炎大鼠肠道损伤和肠道菌群紊乱的改善作用及机制

目的探究柠檬苦素对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠道损伤和肠道菌群紊乱的改善作用及机制。方法构建UC大鼠模型,将建模成功的70只大鼠随机分为模型组和柠檬苦素低、中、高剂量组(12.5、25、50 mg/kg)以及柳氮磺胺吡啶组(阳性对照组,500 mg/kg),每组14只;另取14只大鼠作为对照组。各组大鼠灌胃相应药液或等量生理盐水,每天1次,连续2周。末次给药结束24 h后,观察大鼠一般情况并称重,取结肠组织进行结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分;检测大鼠结肠组织中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;观察大鼠结肠组织病理学变化;检测大鼠结肠组织中紧密连接蛋白1(Claudin-1)、闭合蛋白(Occludin)、闭锁小带蛋白1(ZO-1)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)蛋白的表达水平;基于16S rRNA检测大鼠肠道菌群的相对丰度。结果与对照组相比,模型组大鼠精神状态不佳、皮毛较暗、情绪烦躁易发怒,结肠组织腺体排列杂乱,出现炎症细胞浸润和细胞坏死、水肿现象;CMDI评分和结肠组织中IL-1β、IL-6、TNF-α水平,HMGB1、RAGE蛋白表达水平以及肠道变形菌门、拟杆菌门菌群的相对丰度均显著升高(P<0.05);体重和结肠组织中Claudin-1、Occludin、ZO-1蛋白表达水平以及肠道厚壁菌门菌群的相对丰度均显著降低(P<0.05)。与模型组相比,柠檬苦素各剂量组大鼠一般情况和结肠组织病理损伤均改善,上述指标水平均显著逆转(P<0.05),且具有剂量依赖性(P<0.05);柳氮磺胺吡啶组与柠檬苦素高剂量组大鼠各项指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论柠檬苦素可改善UC模型大鼠肠道损伤及肠道菌群紊乱,其作用机制可能与下调HMGB1/RAGE信号通路活性有关。

栀子苷调节HMGB1-RAGE信号通路对子痫前期大鼠血管内皮细胞损伤的影响

目的 探究栀子苷调节高迁移率族蛋白B1(HMGB1)-晚期糖基化终末产物受体(RAGE)信号通路对子痫前期大鼠胎盘损伤的保护作用。方法 将妊娠大鼠分为对照组、模型组、栀子苷低剂量[25 mg/(kg·d)]组、栀子苷高剂量[100 mg/(kg·d)]组、丙酮酸乙酯[EP,HMGB1抑制剂,40 mg/(kg·d)]组,皮下注射一氧化氮合酶抑制剂L-NAME建立子痫前期大鼠模型。在第14、17、19天测定各组大鼠收缩压和24 h尿蛋白水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平变化,采用试剂盒测定胎盘组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平,采用HE染色观察胎盘组织形态变化,采用Western blot检测胎盘组织HMGB1、RAGE、核转录因子-κB(NF-κB)、p-NF-κB、淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(Bax)蛋白水平。结果 与对照组相比,模型组大鼠在第14、17、19天收缩压和24 h尿蛋白水平,血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平、胎盘组织MDA水平、HMGB1、RAGE、p-NF-κB/NF-κB、Bax蛋白水平显著升高,胎盘组织中SOD、GSH、Bcl-2蛋白水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,栀子苷低、高剂量组大鼠在第17、19天收缩压和24 h尿蛋白水平、血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平、胎盘组织中MDA水平、HMGB1、RAGE、p-NF-κB/NF-κB、Bax蛋白水平显著降低,胎盘组织SOD、GSH水平、Bcl-2蛋白水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 栀子苷可缓解子痫前期大鼠胎盘组织损伤,可能是通过抑制HMGB1-RAGE信号通路实现的。

栀子苷调节HMGB1-RAGE信号通路对妊娠期糖尿病大鼠胰岛素抵抗的影响

目的探讨栀子苷(GP)调节高迁移率组框1-晚期糖基化终产物信号通路(HMGB1-RAGE信号通路)对妊娠期糖尿病大鼠胰岛素抵抗的影响。方法建立妊娠期糖尿病大鼠模型(GDM),分为对照组(Control组)、模型组(GDM组)、栀子苷低剂量组(GP-L组,200 mg·kg^(-1)·d^(-1)GP)、栀子苷中剂量组(GP-M组,400 mg·kg^(-1)·d^(-1)GP)、栀子苷高剂量组(GP-H组,500 mg·kg^(-1)·d^(-1)GP),HMGB1抑制剂Glycyrrhizin组(Gly组,50 mg·kg^(-1)·d^(-1)Gly)。ELISA法检测IL-1β、IL-6和TNF-α水平;试剂盒测定空腹胰岛素(FINS)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、血清中GLUT4和CTRP3蛋白浓度;HE染色观察肝组织病理学变化;PAS染色观察肝糖原表达情况;Western blot测定HMGB1和RAGE蛋白表达。结果与Control组相比,GDM组肝组织结构损伤、脂肪沉积增多,肝糖原表达(0.17±0.02)显著降低(P<0.05),IL-1β(35.34±3.52)、IL-6(24.31±2.32)、TNF-α(38.96±2.25)、FBG(13.21±1.06)、FINS(20.43±1.65)、HOMA-IR(11.99±1.20)、TC(3.11±0.56)、TG(1.91±0.35)、LDL-C(1.49±0.19)、HMGB1(1.28±0.13)和RAGE(1.43±0.15)水平及TG/HDL-C比值(2.81±0.26)显著升高(P<0.05),HDL-C(0.68±0.07)、GLUT4(2.21±0.61)和CTRP3(299.21±31.43)水平显著降低(P<0.05);与GDM组相比,GP-L、GP-M、GP-H和Gly组肝组织结构整齐,细胞形态正常,脂肪沉积较少;肝组织染色均匀,糖原表达(0.31±0.04、0.44±0.03、0.56±0.05、0.59±0.07b)显著增加(P<0.05),且药物治疗组呈剂量依赖性增加(P<0.05),GP-L、GP-M、GP-H和Gly组IL-1β(分别为30.81±2.41、27.65±2.03、21.54±2.12、21.68±1.97)、IL-6(分别为21.05±1.28、17.35±1.04、12.37±1.16、12.69±1.05)、TNF-α(分别为32.17±2.03、29.18±1.74、22.69±1.41、23.17±1.12)、FBG(分别为11.86±1.19、9.38±1.06、7.07±1.14、6.96±1.08)、FINS(分别为17.06±1.37、14.60±1.16、11.03±1.25、11.76±1.11)、HOMA-IR(分别为8.99±1.22、6.07±0.91、3.47±0.43、3.64±0.14)、TC(分别为2.64±0.16、1.83±0.12、1.43±0.04、1.36±0.38)、TG(分别为1.67±0.21、1.41±0.19、1.17±0.23、1.20±0.11)、LDL-C(分别为1.36±0.16、1.17±0.13、0.96±0.06、0.87±0.04)、HMGB1(分别为0.94±0.10、0.54±0.05、0.35±0.07、0.30±0.2)、RAGE水平(分别为1.21±0.10、0.98±0.06、0.77±0.09、0.69±0.05)及TG/HDL-C比值(分别为2.06±0.21、1.48±0.11、0.98±0.12、1.03±0.10)显著降低(P<0.05),HDL-C浓度(分别为0.81±0.06、0.95±0.09、1.19±0.13、1.16±0.21)、GLUT4(分别为3.06±0.49、4.18±1.10、5.41±0.96、5.25±0.82)和CTRP3(分别为362.43±30.27、427.25±45.41、481.16±44.23、473.53±41.38)水平显著升高,且药物治疗组呈剂量依赖性(P<0.05)。结论栀子苷通过抑制HMGB1-RAGE信号通路抑制妊娠期糖尿病大鼠胰岛素抵抗。

绞股蓝皂苷调节HMGB1-RAGE信号通路对骨肉瘤细胞恶性生物学行为的影响

目的探讨绞股蓝皂苷(Gyp)调节高迁移率族蛋白B1-晚期糖基化终产物受体(HMGB1-RAGE)信号通路对骨肉瘤细胞恶性生物学行为的影响及其机制。方法使用不同浓度(0~400μmol/L)绞股蓝皂苷处理MG63细胞,CCK-8检测细胞活力。将MG63细胞分为对照组(Control组)、绞股蓝皂苷低、中、高浓度组(Gyp-L组、Gyp-M组、Gyp-H组,50、100、200μmol/L Gyp)、绞股蓝皂苷高浓度+过表达HMGB1阴性对照组(Gyp-H+pcDNA-NC组,200μmol/L Gyp+转染pcDNA-NC质粒)和绞股蓝皂苷高浓度+过表达HMGB1组(Gyp-H+pcDNA-HMGB1组,200μmol/L Gyp+转染pcDNA-HMGB1质粒)。Edu检测细胞增殖水平;Transwell小室和划痕愈合实验检测细胞侵袭和迁移能力;ELISA检测转化生长因子-β(TGF-β)、基质金属蛋白酶(MMP-9)和白介素-6(IL-6)水平;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测通路、凋亡及EMT相关蛋白。随后建立骨肉瘤移植小鼠模型,在体检验绞股蓝皂苷对骨肉瘤移植瘤生长的影响。结果25~400μmol/L的绞股蓝皂苷能降低MG63细胞活力。与Control组相比,Gyp-L组、Gyp-M组和Gyp-H组细胞Edu阳性率、细胞侵袭数、划痕愈合率、TGF-β、MMP-9和IL-6水平及Bcl-2、HMGB1、RAGE、N-cadherin和VEGF蛋白表达显著降低(P<0.05);细胞凋亡率及Bax和E-cadherin蛋白表达显著增加(P<0.05),且呈浓度依赖性。过表达HMGB1可部分逆转绞股蓝皂苷对骨肉瘤细胞恶性生物学行为的抑制作用(P<0.05)。小鼠移植瘤实验结果表明,绞股蓝皂苷可显著抑制小鼠骨肉瘤移植瘤的生长(P<0.05)。结论绞股蓝皂苷对骨肉瘤细胞恶性生物学行为的抑制作用可能与抑制HMGB1-RAGE信号通路有关。

人绒毛膜促性腺激素及其变异体应用与检测标准化的研究进展

人绒毛膜促性腺激素(hCG)是人体内一种糖蛋白类激素,由α、β链以非共价键结合而成。hCG存在于多个器官中,主要包括规则hCG(R-hCG)、高糖基化hCG(H-hCG)、H-hCG游离β链3种变异体。在整个孕期中,hCG的主要作用有两个,一是维持胎盘绒毛膜的血供和胎儿的营养供给,二是促进绒毛膜合胞滋养层细胞的融合。总hCG和3种hCG变异体的检测在临床得到广泛应用:早孕检查、唐氏综合症风险预测及先兆子痫、妊娠滋养层疾病、胎盘部位滋养层肿瘤、睾丸畸胎瘤、其他肿瘤的实验诊断等。目前,总hCG和3种hCG变异体检测的标准化取得了一定进展,但还面临许多问题,亟需研制新的hCG标准物质。

HMGB1-RAGE/TLRs-NF-κB信号通路与脓毒症关系的研究进展

高迁移率族蛋白B1(HMGB1)作为晚期炎症因子可促进早期炎症因子释放,不断触发并维持下游炎症反应,其受体主要有晚期糖基化终产物受体和Toll样受体,受体活化后可激活各种信号通路,并激活NF-κB信号转导通路枢纽,进而上调各种炎症因子,促进炎症级联反应,进一步促进脓毒血症发展。本文对HMGB1介导的信号通路HMGB1-RAGE/TLRs-NF-κB与脓毒症关系的研究进展作一综述。

妊娠并发病

0113911 妊娠的急性脂肪肝中辅助性肝移植/Franco J//Obstet Gynecol.-2000,95(6 Part 2).-1042～1043 津医情0113912 高危人群中尿高糖基化 hCG 加超声生物测定检测中期妊娠唐氏综合征/Bahado-Singh R//Obstet Gynecol.-2000,-889～894

芒柄花素对脓毒症大鼠急性肺损伤和免疫功能的影响及其机制

目的探讨芒柄花素(Formo)调节高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/晚期糖基化终产物受体(RAGE)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路对脓毒症大鼠急性肺损伤和免疫功能的影响。方法通过盲肠结扎和穿刺方法建立脓毒症大鼠,将造模后的大鼠随机分为脓毒症组、低剂量Formo(Formo-L)组(15 mg/kg Formo)、Formo中剂量(Formo-M)组(30 mg/kg Formo)、Formo高剂量(Formo-H)组(60 mg/kg Formo)、Formo-H^(+)重组HMGB1蛋白(rHMGB1)组(60 mg/kg Formo^(+)8μg/kg rHMGB1),并以仅做切口,不进行盲肠结扎或穿刺的大鼠为假手术组。干预结束后,检测大鼠肺组织湿干比(W/D);腹部取血,流式细胞术及ELISA分别检测大鼠免疫功能及白细胞介素-6(IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;苏木精-伊红(HE)染色检测右肺上叶病理学变化;Western blot检测肺组织中HMGB1/RAGE/NF-κB信号通路相关的蛋白表达。结果与对照组相比,脓毒症组肺组织病理损伤严重,CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)显著降低,TNF-α,IL-1β,IL-6水平、病理损伤评分、W/D、CD8^(+)、HMGB1、RAGE、p-NF-κB p65/NF-κB p65表达比较显著增加(P<0.05);与脓毒症组相比,Formo-L组、Formo-M组、Formo-H组病理损伤得到改善,CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)显著增加,TNF-α,IL-1β,IL-6水平、病理损伤评分、W/D、CD8^(+)、HMGB1、RAGE、p-NF-κB p65/NF-κB p65表达显著降低,组间有差异(P<0.05);与Formo-H组相比,Formo-H^(+)rHMGB1组病理损伤加重,CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)显著降低,TNF-α,IL-1β,IL-6水平、病理损伤评分、W/D、CD8^(+)、HMGB1、RAGE、p-NF-κB p65/NF-κB p65表达显著增加(P<0.05)。结论Formo可能通过抑制HMGB1/RAGE/NF-κB信号通路减轻脓毒症大鼠急性肺损伤,提高免疫功能。

迷迭香酸调节HMGB1/RAGE信号轴对溃疡性结肠炎大鼠肠屏障损伤及肠道菌群失调的影响

目的分析迷迭香酸(RA)对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠屏障损伤及肠道菌群失调的影响,并探究其作用机制。方法将大鼠随机分为对照组、UC组、RA低剂量组、RA中剂量组、RA高剂量组、RA高+重组高迁移率族蛋白1(rHMGB1)组,每组10只。采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)联合乙醇处理建立UC大鼠模型,对各组大鼠进行疾病活动指数(DAI)评分和结肠黏膜损伤指数(CDMI)评分,苏木素伊红染色观察结肠组织病理变化并进行病理评分(HS),酶联免疫吸附法检测血清白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-1β水平,实时定量荧光PCR(qRT-PCR)检测肠道菌群中主要菌种数量,Western blot检测HMGB1、晚期糖基化终产物(RAGE)、核因子κB(NF-κB p65)、p-NF-κB p65、闭合蛋白-1(claudin-1)、带状闭合蛋白-1(ZO-1)及咬合蛋白(occludin)表达情况。结果与对照组相比,UC组大鼠结肠组织受损严重,大量炎性细胞浸润;DAI、CDMI和HS评分,IL-6、IL-1β水平,拟杆菌、大肠埃希菌、肠球菌数量,以及HMGB1、RAGE、p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达水平均显著升高,IL-10水平、双歧杆菌和乳酸杆菌数量及Claudin-1、ZO-1、Occludin蛋白表达水平显著下降(均P<0.05)。与UC组相比,RA低、中、高剂量组结肠组织、肠黏膜、腺体结构损伤程度得到改善,DAI、CDMI和HS评分,IL-6、IL-1β水平,拟杆菌、大肠埃希菌、肠球菌数量及HMGB1、RAGE、p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达水平均显著下降,IL-10水平、双歧杆菌、乳酸杆菌数量及Claudin-1、ZO-1、Occludin蛋白表达显著升高(均P<0.05)。rHMGB1的使用可逆转RA对UC大鼠肠屏障损伤及肠道菌群失调的改善作用。结论RA可能通过抑制HMGB1/RAGE信号通路改善UC大鼠肠屏障损伤和肠道菌群失调,抑制炎症反应。

HMGB1/RAGE信号通路参与尼古丁调控支气管上皮细胞TGF-β1和FGF-2的分泌

目的本研究旨在探讨尼古丁是否通过高迁移率族蛋白1(HMGB1)/晚期糖基化终产物受体(RAGE)信号通路调控支气管上皮细胞转化生长因子β1(TGF-β1)和成纤维细胞生长因子2(FGF-2)的分泌。方法尼古丁(6×10^-6 mol/L)刺激支气管上皮细胞株16HBE,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测刺激24 h后细胞中HMGB1、TGF-β1和FGF-2分泌,Western blotting方法检测RAGE表达。预先加入HMGB1 siRNA孵育48 h或RAGE中和抗体孵育1 h,再加入尼古丁刺激16HBE 24 h,ELISA法检测HMGB1、TGF-β1和FGF-2的分泌,Western blotting方法检测RAGE的表达。结果尼古丁刺激24 h后HMGB1的分泌和RAGE的表达量较未予尼古丁刺激的正常对照组明显增加,TGF-β1和FGF-2的分泌量也显著增加。加入HMGB1 siRNA后尼古丁刺激24 h组,HMGB1的分泌量较单纯尼古丁刺激组明显减少,RAGE的表达量显著减少,同时TGF-β1和FGF-2的分泌量较单纯尼古丁刺激组显著减少。加入RAGE中和抗体后尼古丁刺激24 h组,TGF-β1和FGF-2的分泌量较单纯尼古丁刺激组显著减少。结论HMGB1/RAGE信号通路参与了尼古丁调控支气管上皮细胞TGF-β1和FGF-2的分泌。

葛根知母药对调控HMGB1/RAGE/NF-κB通路改善糖尿病大鼠认知障碍

目的:观察葛根知母水提物对糖尿病认知障碍大鼠认知功能的影响,评价其神经保护作用并探讨其机制。方法:取雄性SD大鼠,除空白对照组外均给予高脂高糖饲料喂养,50 d后腹腔注射链脲佐菌素(STZ) 35 mg/kg建立II型糖尿病认知障碍大鼠模型。造模成功后,随机分为模型对照组、多奈哌齐0. 03g/kg组、二甲双胍0. 15g/kg组、玉液汤7. 84g/kg组、葛根知母药对4. 62 g/kg、9. 24 g/kg组。给药30 d后,Morris水迷宫法进行行为学测试,结束后大鼠取血,检测血糖;部分动物处死取血检测糖化血红蛋白,取脑用Western Blot法检测脑组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/晚期糖基化终产物受体(RAGE)/核转录因子(NF-κB)信号通路的蛋白表达,其余动物灌注取脑,进行RAGE和NF-κB免疫组化染色。结果:与空白对照组相比,模型组大鼠的逃避潜伏期、探索距离显著延长,且目标象限游泳时间显著缩短、站台穿越次数显著减少、NF-κB、RAGE平均灰度值显著降低、HMGB1、RAGE、pNF-кBp65、p-IкBα的表达显著上调(P <0. 05或P <0. 01);与模型对照组相比,葛根知母药对9. 24 g/kg组和玉液汤7. 84 g/kg组都可显著缩短模型大鼠的逃避潜伏期、探索距离,明显延长目标象限游泳时间、增多站台穿越次数,显著降低空腹血糖,明显增加大鼠体重、降低糖化血红蛋白水平,NF-κB、RAGE平均灰度值也明显升高,且HMGB1、RAGE、p-NF-кBp65、p-IкBα蛋白表达显著下调(P<0. 05或P <0. 01);葛根知母药对4. 62 g/kg组大鼠血糖明显降低,能够显著降低HMGB1、RAGE、p-NF-кBp65、p-IкBα的表达(P <0. 05或P <0. 01)。结论:葛根知母药对可明显改善糖尿病大鼠模型的认知功能障碍,其机制可能是通过降低血糖及糖化血红蛋白水平、调控脑内HMGB1/RAGE/NF-κB通路实现的。

HMGB1/RAGE信号通路在ALI/ARDS肺泡巨噬细胞焦亡中作用的研究进展

干预高迁移率族蛋白1(HMGB1)/晚期糖基化终产物受体(RAGE)信号通路可影响急性肺损伤(ALI)/急性呼吸窘迫综合征(ARDS)进展,但确切机制尚不清楚。肺泡巨噬细胞(AMs)焦亡作为一种新的胱天蛋白酶依赖促炎性细胞程序性死亡,其死亡过程伴随着炎性介质释放并加重ALI/ARDS炎性反应进程。而HMGB1/RAGE信号通路可能通过调节AMs焦亡在ALI/ARDS进展中具有重要作用。本文就AMs焦亡在ALI/ARDS炎性反应中的作用及HMGB1/RAGE信号通路影响ALI/ARDS中AMs焦亡的可能机制进行综述,为干预HMGB1/RAGE信号通路减轻ALI/ARDS炎性反应提供新的理论依据。