高迁移率族蛋白B1结合高级糖基化终产物受体可增加人支气管上皮细胞肿瘤坏死因子α的表达

目的:探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对人支气管上皮细胞(16HBE)肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响及相关机制。方法:(1)设置HMGB1不同浓度(0、100、500、2 000 ng/m L)组;(2)设置高级糖基化终产物受体(RAGE)拮抗组:对照,HMGB1 2 000 ng/m L,anti-RAGE,anti-RAGE+HMGB1。用实时荧光定量PCR检测16HBETNF-α mRNA的表达,双抗体夹心酶联免疫吸附实验法(ELISA)检测细胞培养上清TNF-α的浓度,蛋白质印迹法(Western blotting)检测RAGE蛋白表达。结果:(1)16HBETNF-α的表达随HMGB1浓度的增大而增加;(2)16HBE的RAGE蛋白表达随HMGB1浓度的增大而增加;(3)相对于HMGB1 2 000ng/m L刺激组,anti-RAGE+HMGB1组TNF-α表达明显减少。结论 :HMGB1通过结合RAGE受体可以浓度依赖形式增加16HBETNF-α的表达。

晚期糖基化终产物对高糖诱导NRK-52E细胞的转分化作用

目的:探讨晚期糖基化终产物(AGEs)对高糖诱导大鼠肾小管导管上皮细胞株NRK-52E的转分化干预作用。方法:大鼠肾小管导管上皮细胞株设空白组(不给葡萄糖)、高糖组(25mmol/L葡萄糖)、AGEs干预组(100mg/LAGEs)、高糖AGEs干预组(100mg/LAGEs+25mmol/L葡萄糖),培养72h后,用Westernbolt检测转化因子β1(TGF-β1)、Ⅰ型胶原、金属蛋白酶2(MMP2)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及甲状旁腺素相关肽(PTHrP)在NRK-52E细胞的表达,活性氧(ROS)含量应用CM2H2DCFDA试剂盒检测。结果:高浓度葡萄糖上调TGF-β1、Ⅰ型胶原、MMP2、α-SMA以及PTHrP表达,AGEs显著上调高浓度葡萄糖状态下TGF-β1、Ⅰ型胶原、MMP2、α-SMA和PTHrP表达,提高ROS含量。结论:AGEs可以促进高浓度葡萄糖诱导肾小管导管上皮细胞转分化。

阿尔茨海默病诊断中的sLRP以及sRAGE敏感性和特异性分析

目的研究在阿尔茨海默病(AD)诊断中血浆可溶性低密度脂蛋白相关受体蛋白-1(s LRP)以及可溶性晚期糖基化终产物受体(s RAGE)敏感性与特异性。方法 350例招募的志愿调查患者,根据患病情况分为四组:126例AD患者作为AD组,96例深思血管性痴呆患者作为Va D组,30例非AD变性病痴呆患者作为NND组,98例认知正常患者作为NC组。比较四组患者的s LRP与s RAGE指标检测及其敏感性与特异性。结果四组患者中s LRP以及s RAGE指标整体比较,差异具有统计学意义(P<0.01)。AD组s LRP水平低于Va D组、NND组、NC组,差异具有统计学意义(P<0.01);Va D组s LRP水平低于NND组、NC组,差异具有统计学意义(P<0.01);AD组s RAGE水平低于Va D组、NC组,差异具有统计学意义(P<0.01);Va D组、NND组s RAGE水平低于NC组,差异具有统计学意义(P<0.01)。NND组与NC组中s LRP指标的特异性分别为93.3%与85.7%,Va D组中的特异性低为58.3%;AD组中s RAGE指标的敏感性为82.5%,NND组中s RAGE指标的特异性为53.3%,s LRP与s RAGE指标检测联合检测能够得到优于单独检测的诊断结果。结论把s LRP与s RAGE联合运用于AD诊断的治疗过程中能够得到比较准确的诊断结果 ,具有重要的临床推广应用价值。

血清sRAGE联合ESM-1对重症急性胰腺炎合并应激性高血糖患者预后的预测价值研究

目的 探讨血清可溶性晚期糖基化终末产物受体(soluble receptor for advanced glycation end products,sRAGE)联合内皮细胞特异性分子-1(endothelial cell specific molecules-1,ESM-1)对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)合并应激性高血糖患者预后的预测价值。方法 选取2021年7月至2023年1月临汾市中心医院重症医学科的SAP合并应激性高血糖患者105例,根据患者的预后(对症治疗后28 d生存情况)分为死亡组(39例)和存活组(66例)。分析SAP合并应激性高血糖患者预后的影响因素及血清sRAGE联合ESM-1对患者预后的预测价值。结果 105例患者中男61例、女44例;年龄22~69岁,平均(47.6±8.9)岁。多因素logistic回归分析结果显示,多个器官功能障碍(OR=4.845,95%CI:2.166~8.130,P=0.030)、急性生理和慢性健康评分Ⅱ得分越高(OR=1.872,95%CI:1.207~2.902,P=0.005)、24 h随机空腹血糖越高(OR=1.381,95%CI:1.094~1.743,P=0.007)、sRAGE水平越高(OR=1.017,95%CI:1.007~1.027,P=0.001)、ESM-1水平越高(OR=1.074,95%CI:1.027~1.123,P=0.002)的SAP合并应激性高血糖患者更容易死亡。ROC曲线分析结果显示,血清sRAGE联合ESM-1检测预测SAP合并应激性高血糖患者死亡的AUC为0.882(95%CI:0.804~0.936,P<0.001),血清sRAGE和ESM-1单独预测的AUC分别为0.784(95%CI:0.693~0.859,P<0.001)和0.780(95%CI:0.689~0.855,P<0.001)。结论 SAP合并应激性高血糖患者的血清sRAGE、ESM-1浓度升高与不良预后有关,血清sRAGE联合ESM-1检测对SAP合并应激性高血糖患者预后的预测价值较高。

糖尿病大鼠血糖与视网膜微血管RAGE及ICAM-1表达的关系

目的:探讨糖尿病大鼠血糖水平与视网膜微血管中糖基化终产物受体(RAGE)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达及无细胞毛细血管数的关系.方法:复制链脲佐菌素(strep-tozoc in,STZ)糖尿病大鼠模型,成模后每4 wk监测血糖,采用免疫组织化学方法和半定量方法分析视网膜微血管中RAGE,ICAM-1的表达,光学显微镜观察视网膜微血管形态学改变.结果:糖尿病大鼠视网膜微血管中RAGE,ICAM-1的表达较非糖尿病组分别增加1.27,1.41倍,无细胞毛细血管数增加2.68倍(P<0.05),与血糖升高成线性相关(r分别为-0.693,-0.805,0.855,P<0.01).结论:糖尿病大鼠视网膜中无细胞毛细血管,RAGE及ICAM-1表达的增加与血糖水平密切相关.

不同入路MIS-TLIF治疗退变性腰椎滑脱症的疗效及其对血清TGF-β1、RAGE表达的影响

目的评估两种不同入路微创经椎间孔腰椎椎体间融合术(MIS-TLIF)治疗单节段退变性腰椎滑脱症(DLS)的疗效,探讨两种术式对血清转化生长因子(TGF)-β1和晚期糖基化终产物受体(RAGE)表达的影响。方法选取2014年3月—2018年12月重庆市璧山区人民医院收治的70例单节段DLS患者,均采用MIS-TLIF手术治疗,根据手术入路的不同分为两组,其中A组行Wiltse入路,B组行正中入路,每组各35例。结果A组切口长度、住院时间、术中出血量少于B组,手术时间长于B组,术后1个月视觉模拟量表(VAS)评分和日本骨科学会(JOA)评分优于B组,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。患者术后3 d、7 d血清TGF-β1和RAGE表达水平,术后1、3个月VAS评分、JOA评分及腰椎前凸角、椎间隙前凸角、椎间隙高度均较术前改善(P<0.05)。A组、B组在并发症发生率(9%vs 11%)、末次随访椎间融合率[(92.5±3.8)%vs(90.9±4.0)%]方面比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论MIS-TLIF治疗单节段DLS能够改善患者术后血清TGF-β1、RAGE表达水平,缓解疼痛症状,恢复腰椎生理曲度和椎间隙高度,改善腰椎功能;与正中入路相比,Wiltse入路MIS-LIF切口更小,能进一步减少术中损伤,增强术后早期疗效,利于患者康复。

晚期糖基化终末产物与糖尿病角膜病变关系的研究进展

糖尿病角膜病变是常见的糖尿病眼部并发症之一，47％～64％患者在糖尿病病程中会出现该眼部疾患，严重影响患者的视觉质量和视功能。目前发病机制尚不完全明确。大量研究结果证实晚期糖基化终末产物（AGEs）是引起糖尿病慢性并发症的重要因素之一，同时AGEs参与糖尿病高血糖记忆效应的发生。本文就AGEs与糖尿病角膜病变的研究现状及研究前景进行总结和分析，以期为临床进行相关研究提供参考。

血清钙结合蛋白S100A_(12)及可溶性sRAGE在急性胰腺炎患者血清中的表达及意义

目的:探讨急性胰腺炎(AP)患者血清钙结合蛋白S100A_(12)及可溶性糖基化终末产物受体(sRAGE)蛋白的表达及临床意义。方法:将110例急性胰腺炎(AP)患者分为轻症组(MAP 54例)和重症组(SAP 56例),并以45例健康献血者作为对照组。入院后获取APACHEII评分,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定患者外周血中S100A_(12)、sRAGE在发病48h内的水平,使用受试者工作特征曲线(ROC)下面积分析S100A_(12)、sRAGE、PCT、APACHEII评分在区分重度和轻度急性胰腺炎方面的价值。结果:SAP组S100A_(12)、sRAGE、PCT、APACHEII评分的水平显著高于对照组、MAP组,差异有统计学意义(P<0.05)。MAP组和对照组各项指标之间比较差异无统计学意义(P>0.05),SAP组死亡者S100A_(12)、sRAGE水平明显高于存活者(P<0.05)。ROC曲线显示,S100A_(12)对SAP组的预测价值相关指标:敏感度81.42%、特异度93.28%,曲线下面积0.86,sRAGE对SAP的预测价值相关指标:敏感度66.54%、特异度92.38%,曲线下面积0.81,联合检测S100A_(12)和sRAGE的敏感度63.74%、特异度95.73%。结论:S100A_(12)、sRAGE与AP的严重程度和预后密切相关,S100A_(12)、sRAGE有可能成为重症急性胰腺炎早期诊断的新指标。

大豆异黄酮对阿尔茨海默病大鼠海马RAGE介导的信号转导通路的影响

目的观察大豆异黄酮(soybean isoflavones)对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)大鼠高级糖化终产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)介导的信号转导系统的影响。方法采用β淀粉样蛋白25-35片段(amyloidβ25-35,Aβ25-35)双侧海马注射建立AD大鼠模型,60只大鼠随机分为模型组、大豆异黄酮高剂量组[30mg/(kg·d)]、大豆异黄酮低剂量组[10mg/(kg·d)]、雌激素组[0.4mg/(kg·d)]及假手术组,每组12只。大豆异黄酮高、低剂量组和雌激素组造模后3天灌胃给药(2mL/只),模型组与假手术组给予等体积的0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)灌胃,连续21天。酶联免疫吸附法观察各组大鼠海马组织RAGE、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的含量。分光光度法检测大鼠海马组织天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(cysteine-containing aspartate-specific protease-3,Caspase-3)活性。免疫组织化学法观察大鼠海马组织磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(phosphorylation extracellular signal-regulatedkinase1/2,P-ERK1/2)的表达。结果与模型组比较,大豆异黄酮可显著降低AD大鼠海马RAGE蛋白、IL-6含量、Caspase-3活性及ERK1/2蛋白磷酸化水平(P<0.01)。结论大豆异黄酮对AD大鼠海马组织RAGE介导的炎症信号通路具有下调作用,减弱炎症反应,降低Aβ的神经毒性,抵抗海马神经元凋亡。

初诊2型糖尿病血清维生素D和AGEs变化及意义

目的观察初诊2型糖尿病病人体内血清25-羟维生素D(25-OH-D)和晚期糖基化终末产物(AGEs)含量变化,分析其变化与胰岛素抵抗和胰岛β细胞早相分泌功能的关系。方法选取初诊2型糖尿病病人60例为观察组,另选择同期参加门诊体检的40名健康人作为正常对照组。分别测定两组血清25-OH-D、AGEs、白细胞介素-1β(IL-1β)、空腹血糖、血脂和糖化血红蛋白(HbA1c)等指标,并同期进行精氨酸试验。两因素间关系采用Pearson相关分析,多个变量间的分析采用多元逐步回归分析。结果与对照组比较,观察组25-OH-D含量明显降低,而AGEs、IL-1β明显增高,差异均有统计学意义(t=-9.276~4.430,P<0.01)。相关分析显示,25-OH-D与胰岛素第一时相峰值倍数呈正相关(r=0.453,P<0.01),而与稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、AGEs和IL-1β呈负相关(r=-0.425^-0.315,P<0.01)。多元逐步回归分析显示,校正性别、年龄、血脂、血压、HbA1c和IL-1β后,胰岛素第一时相峰值倍数与25-OH-D呈显著正相关(t=5.028,P<0.01),与AGEs呈显著负相关(t=-2.933,P<0.01);HOMA-IR与25-OH-D呈显著负相关(t=-2.234,P<0.05),与AGEs呈显著正相关(t=11.513,P<0.01)。结论初诊2型糖尿病病人体内维生素D水平降低,而AGEs水平升高,可能与胰岛素抵抗和胰岛β细胞早相分泌功能下降相关。

白藜芦醇对急性肺栓塞大鼠炎症抑制的作用机制研究

目的:探讨白藜芦醇通过高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/高级糖基化终产物受体(RAGE)/核因子-κB(NF-κB)信号通路对急性肺栓塞(APE)大鼠的干预作用。方法:APE组、白藜芦醇低剂量组和高剂量组建立APE模型,设置假手术组。建模前1 h,白藜芦醇低剂量组和高剂量组尾静脉注射为2.5、5.0 mg/kg白藜芦醇溶液,假手术组、APE组注射等量溶媒。检测建模后6、24、72 h血清白细胞介素-1β(IL-1β)、TNF-α水平;观察肺组织病理学改变;检测肺组织中HMGB1、RAGE、NF-κB蛋白表达。结果:与APE组比较,白藜芦醇低剂量组及高剂量组造模后6、24、72 h血清IL-1β、TNF-α水平均降低,且白藜芦醇高剂量组低于白藜芦醇低剂量组,但仍均高于假手术组(P<0.05)。造模72 h APE组大量炎症细胞浸润,肺间隔增厚,部分肺泡完整性破环,肺泡腔内大量红细胞浸润,肺动脉腔内见血栓形成;白藜芦醇低剂量组和高剂量组病变较APE组减轻,高剂量组减轻更明显。与APE组比较,白藜芦醇低剂量组和高剂量组造模后6 h、24 h、72 h肺组织HMGB1、RAGE、NF-κB蛋白相对表达量均降低,且白藜芦醇高剂量组低于低剂量组,但仍均高于假手术组(P<0.05);随造模时间的延长,APE组、白藜芦醇低剂量组和高剂量组肺组织HMGB1、RAGE、NF-κB蛋白相对表达量均呈升高趋势(P<0.05)。结论:白藜芦醇可有效抑制APE大鼠机体炎症反应,可能通过抑制HMGB1蛋白表达,进而抑制RAGE/NF-κB信号通路发挥调控作用。

益智汤对APP695转基因小鼠行为学及脑组织LRP-1和RAGE表达的影响

目的:观察益智汤对淀粉样蛋白前体蛋白(APP)695转基因小鼠行为学及脑组织低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP-1)和高糖基化终产物受体(RAGE)表达的影响,探讨益智汤治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法:13月龄APP695转基因小鼠随机分为模型组、益智汤组、同月龄同背景转基因阴性小鼠正常组。益智汤组小鼠每天根据体质量以益智汤(1mL/100g)灌胃,模型组和正常组给予等体积蒸馏水。中药治疗3个月后,使用电迷宫检测各组小鼠学习记忆能力,使用免疫组化和Western Blot技术观察各组小鼠大脑LRP-1和RAGE的表达情况。结果:电迷宫检测发现模型组小鼠学习记忆能力低于正常组(P<0.01),益智汤组小鼠学习记忆能力较模型组小鼠明显改善(P<0.01)。免疫组化和Western Blot结果提示:与正常组相比,模型组小鼠脑组织LRP-1的表达降低,RAGE的表达增加(P<0.01);益智汤治疗90d后,与模型组相比,益智汤组小鼠脑组织各LRP-1的表达增强,RAGE的表达降低(P<0.05)。结论:APP695转基因小鼠脑组织LRP-1和RAGE的表达改变,益智汤通过调整LRP-1和RAGE的表达来改善其学习记忆能力。

脑部转运体参与β-淀粉样蛋白脑内转运的研究进展

β-淀粉样蛋白(Aβ)的产生及清除异常会影响其脑内的动态平衡。研究表明,位于脑实质及血脑屏障上的转运体在Aβ的产生及清除过程中都发挥重要作用。因此,影响转运体在脑内的表达及活性可能改变Aβ在脑内累积量的变化,进而影响阿尔采末病的病理学过程。本文从ATP结合盒转运体、晚期糖基化终产物受体和低密度脂蛋白受体相关蛋白-1在脑内的分布及对Aβ的产生和清除的影响等方面进行综述。

LncRNA HCG18调控miR-185-5p/AGER轴影响糖尿病肾病内质网应激和自噬

目的本研究旨在探讨LncRNA HCG18调控miR-185-5p/AGER轴对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)内质网应激和自噬的影响。方法收集DN患者肾脏组织,建立高糖(high glucose,HG)诱导的足细胞损伤模型。检测DN患者肾组织与DN细胞模型中HCG18的表达。确定HCG18在细胞中的定位表达。证实HCG18与miR-185-5p、miR-185-5p与晚期糖基化终产物特异性受体(advanced glycosylation end-product specific receptor,AGER)的调控关系。qRT-PCR和western blot检测内质网应激相关因子(CHOP、XBP1)及自噬相关因子(Beclin-1、p62)的表达。结果相对于非DN患者,DN患者肾组织中HCG18高表达(P<0.05)。相对于正常糖(normal glucose,NG)组,HG模型中内质网应激相关因子(CHOP、XBP1)的mRNA和蛋白表达增加而自噬相关因子Beclin-1的mRNA和蛋白表达被抑制,p62的mRNA和蛋白表达增强(均P<0.05)。HCG18通过调控miR-185-5p/AGER轴发挥生物学作用。敲低HCG18能减轻内质网应激,激活自噬并减少足细胞损伤,该作用被miR-185-5p抑制剂部分逆转。结论HCG18调控miR-185-5p/AGER信号轴并通过调控内质网应激和自噬促进DN的发生。

维生素D调节肥胖型哮喘模型小鼠HMGB1/RAGE通路和脂肪因子水平的研究

目的探讨维生素D对肥胖型哮喘模型小鼠高迁移率组蛋白B1/高糖基化终末产物受体(HMGB1/RAGE)通路和脂肪因子水平的调节作用。方法实验完成于2023年2—9月,实验平台位于嘉兴学院第二医院实验中心及嘉兴学院实验室。30只小鼠采用数字耳号进行标识,并通过耳号数字随机分为Ⅰ组(正常对照组)、Ⅱ组(哮喘组)、Ⅲ组(肥胖型哮喘组)、Ⅳ组(哮喘+维生素D组)和Ⅴ组(肥胖型哮喘+维生素D组),每组6只。单纯肥胖小鼠模型通过高脂饮食诱导,哮喘模型小鼠需采用卵清蛋白(OVA)腹腔注射致敏和雾化吸入方式诱导,维生素D干预模型小鼠则按照1 mL/d连续灌胃2周方式完成干预。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测小鼠血液中白细胞介素4(IL-4)、IL-6、IL-10、脂联素及瘦素等因子水平,使用定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测HMGB1和RAGE基因的表达,最后对上述结果采用SPSS进行统计学分析。结果Ⅱ组支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞计数(1.34±0.48)×10^(5)/L,与Ⅳ组的(4.07±0.14)×10^(5)/L比较,差异有统计学意义(t=-18.28,P<0.001);Ⅲ组BALF中白细胞计数(9.61±0.91)×10^(5)/L,与Ⅴ组的(4.89±0.38)×10^(5)/L比较,差异有统计学意义(t=11.75,P<0.001)。Ⅱ组BALF中的嗜酸性粒细胞百分比(28.75±1.94)%,与Ⅳ组的(11.51±1.99)%比较,差异有统计学意义(t=15.20,P<0.001);Ⅴ组BALF中嗜酸性粒细胞百分比为(12.50±1.42)%,与Ⅲ组的(29.80±1.96)%比较,差异有统计学意义(t=17.74,P<0.001)。ELISA结果显示,与Ⅲ组相比,Ⅴ组血清IL-4、IL-6、白介素17(IL-17)、白介素1β(IL-1β)、免疫球蛋白E(IgE)、肿瘤坏死因子α(TNFα)水平均显著降低,两组差异均有统计学意义(t=15.24、9.65、2.26、5.83、10.86、2.50,均P<0.001);Ⅲ组血清IL-10表达水平为(4.97±0.25)pg/mL,与Ⅴ组的(8.84±0.64)pg/mL比较,差异有统计学意义(t=-13.89,P<0.001);Ⅴ组血清脂联素水平为(1.95±0.85)mg/L,与Ⅲ组的(1.15±0.13)mg/L相比,差异有统计学意义(t=-12.67,P<0.001);Ⅳ组肺组织中HMGB1表达水平为1.42±0.09,与Ⅱ组的1.91±0.16相比,差异有统计学意义(t=6.55,P<0.001);Ⅳ组肺组织中RAGE mRNA表达量为1.35±0.11,与Ⅱ组的1.55±0.152比较,差异有统计学意义(t=4.19,P<0.05);Ⅴ组肺组织中HMGB1表达量为1.51±0.10,与Ⅲ组的2.44±0.10相比,差异有统计学意义(t=1.02,P<0.001)。结论维生素D可能通过上调肥胖型哮喘模型小鼠HMGB1和RAGE的表达来减轻肺损伤,这为肥胖型哮喘的治疗和预防提供了新的概念和方法。

HMGB1与RAGE水平在急性主动脉夹层肺损伤患者中的变化及临床意义

目的:探讨急性主动脉夹层(AAD)患者血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)与晚期糖基化终产物受体(RAGE)水平与继发急性肺损伤的关系。方法:选取2016年3月—2018年5月经全主动脉CTA以及超声心动图等影像学检查明确诊断的AAD患者56例为研究对象。按静态吸氧状态下氧合指数(PaO_2/FiO_2)大小将患者分为肺损伤组(21例)与非肺损伤组(35例)。随机选取健康体检人员30例为对照组。AAD患者入院后每4小时抽血次,对照组受试者仅抽取1次清晨空腹肘静脉血。采用ELISA法检测血清HMGB1、RAGE水平,同时检测PaO_2、计算PaO_2/FiO_2。结果:与健康对照组比较,两组AAD患者入院后24 h的HMGB1、RAGE水平均明显高于健康对照组,且两者在肺损伤组均明显高于非肺损伤组(均P<0.05)。两组AAD患者入院后HMGB1、RAGE水平不断上升,而PaO_2/FiO_2逐渐降低,并均入院后48～60h达到峰值,肺损伤组的3项指标的变化幅度均明显大于非肺损伤组(均P<0.05);随着发病时间的推移,HMGB1、RAGE水平达到峰值后下降,PaO_2/FiO_2逐渐回升。AAD患者中,HMGB1与RAGE水平与PaO_2/FiO_2均呈明显负相关(r=-0.940、-0.794)。结论:HMGB1/RAGE信号通路可能在AAD肺损伤中发挥着重要的作用,随着HMGB1、RAGE水平的升高,肺损伤程度逐渐加重,监测HMGB1、RAGE水平可以对AAD并发肺损伤的风险进行评估;对HMGB1/RAGE信号通路深入研究可能会为AAD肺损伤的干预提供靶点。

丹参酮ⅡA在小鼠肝脏缺血再灌注损伤模型中的保护作用及机制

目的观察丹参酮ⅡA在小鼠肝脏缺血再灌注损伤模型中的保护作用并初步探讨其减轻肝损伤的作用机制。方法C57BL/6小鼠经丹参酮ⅡA预处理1周后再建立缺血再灌注损伤模型,收集小鼠外周血清及肝脏组织检测小鼠肝功能(ALT和AST水平)、肝脏组织病理、肝细胞凋亡和炎症因子(肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-6)的变化,并检测肝组织中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、晚期糖基化终产物特异性受体(RAGE)和Toll样受体4(TLR4)蛋白表达的变化。结果所有数据经方差齐性检验,析因设计分析结果显示,丹参酮ⅡA能降低假手术小鼠ALT和AST水平(P<0.05),改善肝脏组织的病理改变(P<0.05)和使凋亡指数降低(P<0.05),减轻小鼠肝脏组织的炎性反应(P<0.05),使肝脏组织中HMGB1、TLR4和RAGE蛋白表达降低(P<0.05);缺血再灌注后,ALT和AST的水平均显著升高(P<0.05),肝脏组织的病理评分和凋亡指数显著升高(P<0.05),肝脏组织的炎性反应明显(P<0.05),肝脏组织中HMGB1、TLR4和RAGE的蛋白表达明显升高(P<0.05);丹参酮和缺血再灌注联合会拮抗(协同)影响肝功能、肝脏组织的病理评分、肝脏组织的炎性反应、细胞凋亡、抑制肝脏组织中HMGB1、TLR4和RAGE的蛋白表达(P<0.05)。结论丹参酮ⅡA可减轻小鼠肝脏缺血再灌注损伤介导的脏脏组织损伤和炎症反应,其作用机制可能与下调肝脏组织中HMGB1、RAGE和TLR4蛋白表达有关。

高迁移率族蛋白1在小鼠热射病相关急性肾损伤发病机制中的意义

目的观察高迁移率族蛋白1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)在热射病(heat stroke)小鼠动物模型肾组织中的表达,探讨HMGB1在热射病相关急性肾损伤发病机制中的意义。方法采用健康雄性C57BL/6J小鼠20只,按照随机数字表随机分为正常对照组(n=10)及热射病组(n=10),热射病组小鼠进入生物模拟仓(温度41℃,湿度70%)2 h,以肛温大于40℃为成模标准,采用18F脱氧葡萄糖标记小型正电子发射断层成像/X射线断层成像(micro-PET/CT)核素显像技术行活体显像。采集血标本检测血肌酐水平;HE染色观察肾组织病理改变;透射电镜检测线粒体形态改变;免疫组化法检测HMGB1及线粒体凋亡诱导因子2(apoptosis inducing factor mitochondria associated 2,Aifm2)定位表达情况;Western印迹法检测HMGB1、糖基化终末产物受体(advanced glycosylation end product-specific receptor,RAGE)表达情况;原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测肾组织细胞凋亡水平;液相色谱-质谱联用仪(LC-MS)检测小鼠肾组织代谢组学,并通过KEEG数据库进行通路富集分析。结果(1)热射病组小鼠造模后45 min体温显著高于正常对照组(P<0.05);热射病组血肌酐水平显著高于正常对照组(P<0.05);micro-PET/CT显示热射病组小鼠骨骼肌、内脏出现18F脱氧葡萄糖广泛浓聚。(2)HE染色显示热射病组小鼠肾组织出现集合管出血、小管内皮细胞肿胀,在透射电镜下可见线粒体肿胀变形。(3)免疫组化显示Aifm2在肾小管上皮细胞广泛表达,热射病组表达水平显著高于正常对照组(P<0.05);HMGB1呈现细胞核阳性表达,在热射病组阳性细胞比例显著高于正常对照组(P<0.05)。(4)Western印迹结果显示热射病组肾组织HMGB1、RAGE表达水平显著上升(P<0.05)。(5)TUNEL检测结果显示热射病组凋亡细胞水平显著高于正常对照组(P<0.05)。(6)正常对照组和热射病组肾组织间检出136种差异代谢物,经过KEGG数据库分析,不饱和脂肪酸代谢紊乱等代谢通路存在显著性差异,肾上腺素酸(adrenic acid)等在内的多种差异代谢物可能是发病机制中的重要调节点。结论急性肾损伤是热射病常见并发症,可能原因为全身高分解代谢导致的肾脏线粒体功能障碍及凋亡通路激活,与不饱和脂肪酸代谢紊乱及HMGB1活化可能存在相关性。部分差异代谢物可能在热射病相关急性肾损伤研究中存在较高的研究价值。