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高肺转移人源骨肉瘤细胞系的建立及鉴定 被引量:1
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作者 支文兰 常君丽 +5 位作者 胡少朴 王晓波 赵福来 孙星媛 马小平 杨燕萍 《中国癌症防治杂志》 CAS 2021年第4期394-399,共6页
目的建立具有高肺转移能力的人源骨肉瘤细胞系,为探索骨肉瘤肺转移的发生机制提供研究模型。方法将GFP和荧光素酶标记的人源骨肉瘤143B细胞重悬到MEM培养基并与Matrigel胶按1∶1比例混匀,制成浓度为1×107/mL的细胞悬液。取10μL注... 目的建立具有高肺转移能力的人源骨肉瘤细胞系,为探索骨肉瘤肺转移的发生机制提供研究模型。方法将GFP和荧光素酶标记的人源骨肉瘤143B细胞重悬到MEM培养基并与Matrigel胶按1∶1比例混匀,制成浓度为1×107/mL的细胞悬液。取10μL注射到4周龄BALB/c裸鼠的左侧胫骨内,建立胫骨内原位注射肺转移瘤模型(n=6)。收集肺转移结节制成单细胞悬液,在完全培养基中贴壁培养,并用新霉素(G418)抗性筛选后扩增,再次接种于裸鼠胫骨内;采用同样方法在体内循环2次后获得的细胞命名为143B-HLM。采用体外实时细胞迁移实验检测细胞迁移情况,RT-qPCR和Western blot检测迁移浸润关键分子标志物的表达情况,同时观察肺转移瘤模型肺部肿瘤结节的形成情况。结果与亲本人源骨肉瘤143B细胞相比,建立的143B-HLM细胞体外迁移能力增强,波形蛋白(Vimentin)和锌指转录因子(Slug)的蛋白表达量增加(均P<0.05),Vimentin、Slug、锌指转录抑制因子(Snail)和凋亡抑制基因(Survivin)的mRNA表达水平也升高(均P<0.05)。与注射143B细胞的裸鼠相比,裸鼠胫骨内原位注射143B-HLM细胞的荷瘤模型中,原位肿瘤体积减小(P<0.05),肺部肿瘤转移荧光信号显著增强,肺转移的裸鼠数目也更多(P<0.01)。结论骨肉瘤肺转移细胞经体内循环筛选及分离,成功建立了稳定的具有高肺转移能力的骨肉瘤细胞系143B-HLM。 展开更多
关键词 骨肉瘤 143B-HLM 高肺转移细胞
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Ad-GFP-nm23-H1体内外抑制人高转移肺巨细胞癌株95D生长和转移作用的研究
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作者 鲁远飞 王琦 +2 位作者 刘艳 何学令 尹海林 《四川动物》 CSCD 北大核心 2010年第1期7-13,共7页
目的观察Ad-GFP-nm23-Hl抑制人高转移肺巨细胞癌株95D细胞生长和转移的作用,为后期nm23-Hl基因和腺病毒载体用于95D及其他肿瘤的基因治疗提供一定的理论和方法。方法应用MTT法及Transwell小室法分别检测95D细胞经Ad-GFP-nm23-Hl作用后... 目的观察Ad-GFP-nm23-Hl抑制人高转移肺巨细胞癌株95D细胞生长和转移的作用,为后期nm23-Hl基因和腺病毒载体用于95D及其他肿瘤的基因治疗提供一定的理论和方法。方法应用MTT法及Transwell小室法分别检测95D细胞经Ad-GFP-nm23-Hl作用后的细胞体外增殖活性、黏附能力以及侵袭力的变化。同时应用人高转移肺巨细胞癌株95D裸鼠移植瘤模型,研究Ad-GFP-nm23-Hl对此移植瘤生长的抑制作用。结果108PFU/ml、109PFU/ml、1010PFU/ml处理组,可以明显抑制95D细胞的增殖、黏附和侵袭能力,其抑制作用呈剂量-效应关系。109PFU/ml的Ad-GFP-nm23-Hl对移植瘤的抑瘤率为38.23%,较对照组差异显著。结论Ad-GFP-nm23-Hl对人高转移肺巨细胞癌株95D细胞的生长和转移以及95D实体瘤具有抑制作用。 展开更多
关键词 NM23-H1 侵袭 转移细胞癌株95D 基因治疗
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重组抑瘤素M抑制肿瘤细胞增殖转移的研究 被引量:1
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作者 欧阳立明 刘建文 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2005年第12期1335-1339,共5页
目的考察重组表达的抑瘤素M(oncostatinM,OSM)对肿瘤细胞增殖转移的抑制能力。方法在大肠杆菌中重组表达了人抑瘤素M,并通过MTT检测实验、软琼脂克隆形成抑制实验、粘附抑制实验、细胞移动能分析实验和浸润杯实验来考察重组hOSM对高转... 目的考察重组表达的抑瘤素M(oncostatinM,OSM)对肿瘤细胞增殖转移的抑制能力。方法在大肠杆菌中重组表达了人抑瘤素M,并通过MTT检测实验、软琼脂克隆形成抑制实验、粘附抑制实验、细胞移动能分析实验和浸润杯实验来考察重组hOSM对高转移人肺腺癌细胞95-D增殖和侵袭转移过程的抑制能力。结果重组hOSM在上述体外模型中能以较低浓度有效抑制95-D肿瘤细胞的增殖和转移。结论原核表达的人抑瘤素M在对肺癌的临床治疗中具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 抑瘤素M 转移腺癌细胞95.D 浸润转移 肿瘤
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多被银莲花总皂甙对ACC-M细胞内Bcl-2与Bax蛋白表达的影响 被引量:1
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作者 晏震 陈彦平 刘现云 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第5期33-35,共3页
目的探讨多被银莲花总皂甙对人涎腺腺样囊性癌高肺转移细胞(ACC-M)内Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法将体外培养的ACC-M细胞随机分为实验组与对照组,分别加入50μg/m L多被银莲花总皂甙溶液2 m L、含同样浓度二甲基亚砜的RPMI1640培养液... 目的探讨多被银莲花总皂甙对人涎腺腺样囊性癌高肺转移细胞(ACC-M)内Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法将体外培养的ACC-M细胞随机分为实验组与对照组,分别加入50μg/m L多被银莲花总皂甙溶液2 m L、含同样浓度二甲基亚砜的RPMI1640培养液2 m L。分别于培养24、48、72 h用Western blotting法检测细胞内Bcl-2和Bax蛋白的表达量。结果对照组各时间点Bcl-2、Bax蛋白相对表达量及Bax/Bcl-2比较差异均无统计学意义(P均>0.05);实验组各时间点Bcl-2、Bax蛋白相对表达量及Bax/Bcl-2比较差异均有统计学意义(P均<0.05);两组间各时间点Bcl-2、Bax蛋白相对表达量及Bax/Bcl-2比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论多被银莲花总皂甙可上调ACC-M细胞内Bax蛋白表达,同时下调Bcl-2蛋白表达,导致Bax/Bcl-2升高。 展开更多
关键词 涎腺腺样囊性癌 高肺转移细胞 多被银莲花总皂甙 B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白 B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白
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茶多酚对ACC-M细胞Fas/FasL、PCNA表达的影响 被引量:1
5
作者 李萍 杨志刚 +1 位作者 魏丹 宋琦 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1219-1221,共3页
目的体外观察不同浓度茶多酚对腺样囊性癌肺高转移细胞株(ACC-M)生长、Fas/FasL和增殖细胞核抗原(PC-NA)表达的影响。方法 (1)不同浓度茶多酚(0.05、0.1、0.15、0.2 g/L)组处理对数期生长ACC-M细胞;(2)用MTT法观察不同浓度茶多酚对ACC-... 目的体外观察不同浓度茶多酚对腺样囊性癌肺高转移细胞株(ACC-M)生长、Fas/FasL和增殖细胞核抗原(PC-NA)表达的影响。方法 (1)不同浓度茶多酚(0.05、0.1、0.15、0.2 g/L)组处理对数期生长ACC-M细胞;(2)用MTT法观察不同浓度茶多酚对ACC-M细胞生长的影响;(3)用免疫细胞化学法检测不同浓度茶多酚对ACC-M细胞中Fas/FasL和PCNA表达的影响。结果 (1)茶多酚对ACC-M细胞生长抑制作用明显(P<0.05);(2)细胞免疫组化结果显示:与未加茶多酚相比,加入茶多酚后,在ACC-M细胞中Fas蛋白表达增高(P<0.05)、FasL和PCNA蛋白表达降低(P<0.05),且随着浓度的增加更为明显。结论茶多酚可抑制ACC-M细胞生长,这种抑制作用可能与茶多酚促进ACC-M细胞中Fas表达和抑制FasL、PCNA表达有关。 展开更多
关键词 茶多酚 腺样囊性癌转移细胞 FAS/FASL 增殖细胞核抗原
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HBXIP对腺样囊性癌细胞株ACC-M生物学功能及PI3K/Akt信号通路的影响 被引量:2
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作者 孟雪 齐晓宇 +1 位作者 王秋旭 刘维贤 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2017年第4期389-394,共6页
目的:研究乙肝病毒X蛋白结合蛋白(hepatitis B X-interacting protein,HBXIP)对唾液腺腺样囊性癌肺高转移细胞株(ACC-M)增殖、迁移和侵袭的影响,及其对PI3K/Akt信号通路的影响。方法:将HBXIP质粒转染到ACC-M中,将细胞分为实验组(转染pEG... 目的:研究乙肝病毒X蛋白结合蛋白(hepatitis B X-interacting protein,HBXIP)对唾液腺腺样囊性癌肺高转移细胞株(ACC-M)增殖、迁移和侵袭的影响,及其对PI3K/Akt信号通路的影响。方法:将HBXIP质粒转染到ACC-M中,将细胞分为实验组(转染pEGFP-N1-HBXIP质粒)、对照组1(未转染组)和对照组2(vector组,pEGFP-N1)。采用RT-PCR检测HBXIP在ACC-M中的表达;采用MTT实验、Transwell小室实验和划痕实验检测HBXIP过表达对ACC-M的增殖、迁移和侵袭的影响;Western印迹法检测HBXIP过表达对Akt、p-Akt、PI3K、p-PI3K及S100A4蛋白表达量的影响。采用SPSS18.0软件包对数据进行统计学分析。结果:MTT实验结果显示,实验组中存活的细胞数显著高于对照组(P<0.05);划痕实验结果显示,实验组细胞迁移率显著高于对照组(P<0.01);Transwell小室实验结果显示,实验组细胞侵袭个数显著高于对照组(P<0.01);Western印迹法结果显示,相对于对照组,实验组随着HBXIP过表达,p-Akt、p-PI3K及S100A4表达量相对增高。结论:HBXIP基因过表达ACC-M增殖、迁移和侵袭具有影响,可能通过促进Akt、PI3K磷酸化及S100A4蛋白表达量增加,促进ACC-M的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 乙肝病毒X蛋白结合蛋白 唾液腺腺样囊性癌转移细胞 唾液腺 生物学功能 PI3K/AKT信号通路 S100A4
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茶多酚对ACC-M细胞株Fas、Fasl表达的影响 被引量:4
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作者 李萍 杨志刚 +2 位作者 文国容 魏丹 宋琦 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期268-269,272,I0001,共4页
目的体外观察茶多酚对肺高转移性腺样囊性癌细胞株(ACC-M)生长、Fas及其配体Fasl表达的影响。方法(1)采用MTT比色实验法观察茶多酚对ACC-M细胞增殖的影响;(2)用免疫组化(SP法)检测不同浓度茶多酚对ACC-M细胞中Fas及其配体Fasl表达的影... 目的体外观察茶多酚对肺高转移性腺样囊性癌细胞株(ACC-M)生长、Fas及其配体Fasl表达的影响。方法(1)采用MTT比色实验法观察茶多酚对ACC-M细胞增殖的影响;(2)用免疫组化(SP法)检测不同浓度茶多酚对ACC-M细胞中Fas及其配体Fasl表达的影响。结果(1)茶多酚对ACC-M细胞增殖抑制作用明显,差异有统计学意义(P<0.05);(2)细胞免疫组化结果显示,加入不同浓度茶多酚后,Fas蛋白在ACC-M细胞中表达增高,差异有统计学意义(P<0.05),Fasl表达降低,差异有统计学意义(P<0.05),且随浓度增加更为明显。结论茶多酚可影响ACC-M细胞中Fas、Fasl表达,茶多酚具有抑制ACC-M细胞生长的作用可能与此有关。 展开更多
关键词 茶多酚 转移性腺样囊性癌细胞 FAS/FASL MTT法 免疫组化
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苹果多酚抑制人腺样囊性癌肺高转移细胞株增殖的体外研究 被引量:1
8
作者 郑超群 唐海阔 +2 位作者 吕标 陈之锋 陶谦 《中华口腔医学研究杂志(电子版)》 CAS 2011年第2期4-7,共4页
目的探讨苹果多酚(AP)体外抑制人腺样囊性癌肺高转移细胞株(ACC-M)细胞增殖的作用机制。方法 MTT法、流式细胞术观察不同浓度的AP对ACC-M细胞增殖的影响;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Westernblot检测AP作用下ACC-M细胞血管内皮生长因... 目的探讨苹果多酚(AP)体外抑制人腺样囊性癌肺高转移细胞株(ACC-M)细胞增殖的作用机制。方法 MTT法、流式细胞术观察不同浓度的AP对ACC-M细胞增殖的影响;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Westernblot检测AP作用下ACC-M细胞血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)mRNA和蛋白表达的变化。SPSS13.0统计学软件进行数据分析。结果随着AP浓度的增加,ACC-M细胞增殖减少,ACC-M细胞中VEGFR2mRNA和蛋白表达量减少,差异有统计学意义。结论 AP可体外抑制ACC-M细胞增殖,下调VEGFR2mRNA及蛋白的表达可能是其机制之一。 展开更多
关键词 苹果多酚 人腺样囊性癌转移细胞 血管内皮生长因子受体2
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茶多酚对ACC-M细胞株增殖的影响
9
作者 李萍 杨志刚 +2 位作者 文国容 魏丹 宋琦 《贵州医药》 CAS 2010年第2期114-116,共3页
目的体外观察茶多酚对人腺样囊性癌肺高转移细胞株(adenoid cystic carcinoma cell clones highly metastatic to thelung,ACC-M)增殖、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear anti-gen,PCNA)表达的影响。方法(1)采用MTT比色实验... 目的体外观察茶多酚对人腺样囊性癌肺高转移细胞株(adenoid cystic carcinoma cell clones highly metastatic to thelung,ACC-M)增殖、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear anti-gen,PCNA)表达的影响。方法(1)采用MTT比色实验法观察茶多酚对ACC-M细胞增殖的影响;(2)用免疫细胞化学S-P法检测不同浓度茶多酚对ACC-M细胞中PCNA表达的影响。结果(1)茶多酚对ACC-M细胞增殖抑制作用明显(P<0.05);(2)细胞免疫组化结果显示:加入不同浓度茶多酚后,PCNA表达降低(P<0.05),且随着浓度的增加更为明显。结论茶多酚抑制ACC-M细胞增殖与影响PCNA表达有关。 展开更多
关键词 茶多酚 腺样囊性癌转移细胞 增殖细胞核抗原 MTT法 免疫 细胞化学法
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水红花子总提取物及各化学部位体外抗肿瘤活性研究 被引量:3
10
作者 谢周涛 田连起 《中医学报》 CAS 2012年第12期1550-1551,共2页
目的:研究水红花子乙醇总提取物(SH1)及各化学部位对人肺高转移细胞株95D增殖的抑制作用,筛选水红花子抗肿瘤主要活性部位。方法:以人肺高转移细胞株95D作为实验用细胞株,采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比象(MTT)法对水红花子总提取物(S... 目的:研究水红花子乙醇总提取物(SH1)及各化学部位对人肺高转移细胞株95D增殖的抑制作用,筛选水红花子抗肿瘤主要活性部位。方法:以人肺高转移细胞株95D作为实验用细胞株,采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比象(MTT)法对水红花子总提取物(SH1)、石油醚部位(SH2)、乙酸乙酯部位(SH3)、丙酮部位(SH4)和甲醇部位(SH5)进行抗肿瘤活性研究。结果:水红花子各化学部位对人肺高转移细胞株95D有明显的抑制作用,水红花子乙酸乙酯部位和丙酮部位的半数抑制浓度分别为199.1 mg·L-1、261.2 mg·L-1。结论:水红花子乙酸乙酯部位和丙酮部位对人肺高转移细胞株95D细胞增殖的抑制作用较强,为水红花子主要活性部位。 展开更多
关键词 水红花子 抗肿瘤活性 化学部位 转移细胞株95D
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超支化聚缩水甘油-羟喜树碱药物递送系统对人腺样囊性癌的体外抑制作用 被引量:1
11
作者 马嘉磊 吕明明 +2 位作者 孙坚 周小康 廖建兴 《口腔颌面外科杂志》 CAS 2015年第3期190-194,共5页
目的:研究超支化聚缩水甘油-羟喜树碱药物递送系统(biodegradable hyperbranched polyglycerol-hydroxy camptothecin,d HPG-HA)对体外培养的人腺样囊性癌(高肺转移)细胞(salivary adenoid cystic carcinoma-lung metastases,SACC-LM)... 目的:研究超支化聚缩水甘油-羟喜树碱药物递送系统(biodegradable hyperbranched polyglycerol-hydroxy camptothecin,d HPG-HA)对体外培养的人腺样囊性癌(高肺转移)细胞(salivary adenoid cystic carcinoma-lung metastases,SACC-LM)的抑制作用。方法 :细胞计数试剂盒(cell counting kit,CCK8)检测药物浓度为0.001、0.01、0.1、1、10、100μg/m L的羟喜树碱(hydroxy camptothecin,HA)和含等量HA的d HPG-HA,在24、48 h对肿瘤细胞的抑制作用;流式细胞仪检测浓度为0.001、0.01、0.1、1、10μg/m L的d HPG-HA是否能诱导SACC-LM细胞凋亡。结果:HA和d HPG-HA对SACC-LM细胞增殖均有明显抑制作用,且作用呈剂量依赖性和时间依赖性;d HPG-HA对SACC-LM细胞的细胞毒性明显低于HA;d HPG-HA能诱导SACC-LM细胞凋亡。结论:dHPG的构建能达到使药物HA缓释的作用并降低其细胞毒性。 展开更多
关键词 腺样囊性癌(转移)细胞 超支化聚缩水甘油-羟喜树碱药物递送系统 抑制作用 细胞凋亡
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