清醒状态下大鼠尾动静脉插管高胰岛素-正糖钳夹实验

目的利用尾动静脉插管技术实施清醒状态下大鼠高胰岛素-正糖钳夹实验并对该技术进行评价。方法正常喂养和高脂喂养W istar大鼠各5只,喂养4周后,清醒状态下鼠尾根局部麻醉,分别行尾动静脉插管,由尾静脉输入胰岛素(0.25 U.kg-1.h-1)和葡萄糖,同时尾动脉采血,进行高胰岛素-正糖钳夹实验。结果尾动静脉插管术后大鼠血糖在正常范围内,术后血糖无明显波动,无大鼠死亡;高脂喂养组大鼠的葡萄糖输注率显著低于对照组(P<0.01);血糖变异系数和葡萄糖输入速率变异系数分别为5.361%和14.273%。结论运用尾动静脉插管术进行清醒状态下大鼠的高胰岛素-正糖钳夹实验,安全可行且实验结果稳定、准确,具有操作简便、缩短实验周期等优点。

应用扩展高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术检测肥胖伴糖耐量异常个体的胰岛素敏感性

目的应用扩展高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术检测肥胖伴糖耐量异常者的胰岛素敏感性。方法按照WHO1998肥胖及WHO1999糖尿病诊断标准,将52例研究对象分为正常体重-正常糖耐量组、超重/肥胖-正常糖耐量组、超重/肥胖糖耐量减退组及超重/肥胖糖尿病组;将超重/肥胖-正常糖耐量者进一步分为3个亚组:超重亚组、轻度肥胖亚组、中度肥胖亚组。应用核磁共振对所有研究对象进行腹内脂肪测量,以腹腔内脂肪面积100cm2为切割点,将正常糖耐量者分为非腹内型肥胖组(non-VA)及腹内型肥胖组(VA)。以扩展高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术检测机体胰岛素敏感性。结果单纯超重/肥胖、超重/肥胖伴糖耐量减退或糖尿病者的葡萄糖消失率分别为(3·25±0·13)、(3·06±0·26)和(3·19±0·44)mg·kg-1·min-1,较正常体重正常糖耐量组的(5·86±0·65)mg·kg-1·min-1显著减少(P<0·05,P<0·01);超重、轻度肥胖及中度肥胖但糖耐量正常亚组的葡萄糖消失率分别为:(3·50±0·19)、(3·03±0·13)和(2·75±0·24)mg·kg-1·min-1,较正常体重正常糖耐量组显著降低(P<0·05,P<0·01)。腹型肥胖组的葡萄糖消失率(2·97±0·12)mg·kg-1·min-1、葡萄糖氧化率(1·47±0·19)mg·kg-1·min-1较非腹型肥胖组的(4·55±0·43)mg·kg-1·min-1和(2·24±0·19)mg·kg-1·min-1显著减少(P<0·05,P<0·01)。体重指数、腰臀比、腰围、腹腔内脂肪面积分别与葡萄糖利用率呈负相关(P<0·05,P<0·01)。体重指数、腹腔内脂肪面积及腹部皮下脂肪面积分别是影响葡萄糖利用率的主要因素。结论超重/肥胖无论伴或不伴糖代谢异常,胰岛素敏感性均显著降低,腹内脂肪增多者胰岛素介导的葡萄糖利用率显著减少,总体脂和腹部脂肪与精确胰岛素敏感性指数呈负相关,总体脂和腹部脂肪是影响机体胰岛素敏感性的主要因素。

高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术的建立

目的 :建立高胰岛素 -正常葡萄糖钳夹技术。方法 :应用高胰岛素 -正常葡萄糖钳夹技术对 8例正常体重、正常糖耐量者进行了方法学的研究。结果 :在优势胰岛素浓度、血浆葡萄糖浓度稳定在正常空腹水平状态下 ,内源性胰岛素释放和肝糖产生被抑制 ,升糖激素 (皮质醇、生长激素、胰高糖素 )无明显增高。 (2 )在高胰岛素 -正常葡萄糖钳夹稳态期 ,葡萄糖利用率为 9.2 5± 0 .2 5mg/(kg .min)。 结论 :高胰岛素 -正常葡萄糖钳夹技术已成功建立。在外源性胰岛素 -葡萄糖代谢的稳定状态下 。

高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验评价Roux-en-Y胃旁路术对2型糖尿病患者胰岛素抵抗的改善作用

目的:随着人们生活水平的提高,2型糖尿病患者逐年增加,疾病给社会和患者带来了极大的经济和生活负担。目前已证实减重手术(Roux-en-Y胃旁路手术)能改善糖尿病患者的代谢指标从而使患者获益,但具体机制仍在研究中。本研究旨在运用高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验评估腹腔镜Roux-en-Y胃旁路术对改善2型糖尿病患者胰岛素抵抗的作用。方法:通过高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验分析40例行腹腔镜Roux-en-Y胃旁路术患者术前及术后6个月的外周葡萄糖利用率(M值),同时比较术后6个月和术前空腹血糖、糖化血红蛋白、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇水平及体重指数等指标的变化。结果:腹腔镜Roux-en-Y胃旁路术后患者的外周葡萄糖利用率较术前明显升高,空腹血糖、糖化血红蛋白、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇水平及体重指数等指标较术前下降(均P<0.05)。结论:腹腔镜Roux-en-Y胃旁路术显著改善2型糖尿病患者的胰岛素抵抗,降低血糖、血脂等指标,对2型糖尿病的治疗效果肯定。

高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术的护理体会

目的探讨高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术的护理配合要点。方法对20例2型糖尿病患者进行高胰岛素-正葡萄糖钳夹试验,评价机体的胰岛素抵抗情况,总结试验的护理配合要点。结果 20例受试者均顺利完成高胰岛素-正葡萄糖钳夹试验,血标本合格。结论钳夹试验前做好充分的准备、建立良好的静脉通路、正确采血、试验中密切观察是保证试验顺利完成的关键。

大鼠高胰岛素-正血糖钳夹实验方法的比较

目的对大鼠在非麻醉状态下,双尾静脉穿刺高胰岛素-正血糖钳夹实验与局麻下尾动静脉插管高胰岛素-正血糖钳夹实验、麻醉状态下颈动静脉插管高胰岛素-正血糖钳夹实验及清醒状态下颈动静脉插管高胰岛素-正血糖钳夹实验进行比较。方法普通饲料和高脂高糖饲料喂养SD大鼠各20只,喂养8 w后,各分为4组,每组5只,其余4只作为备用鼠,分别进行4种不同的高胰岛素-正血糖钳夹实验。结果大鼠在非麻醉状态下双尾静脉穿刺术后血糖在正常范围内,且无明显波动,无大鼠死亡,试验需时最短,操作最简单,成功率最高;颈动静脉插管实验方法死亡率最高,成功率最低,操作需时最长;麻醉状态下颈动静脉插管试验方法与其他三种方法实验结果差异有统计学意义(P<0.01),其他三种方法实验结果之间差异无统计学意义(P>0.05);高脂高糖饲料喂养组大鼠的葡萄糖输注率显著低于正常饲料组(P<0.01)。结论在非麻醉状态下采用双尾静脉穿刺术行大鼠的高胰岛素-正糖钳夹实验,安全可行且实验结果稳定、准确,具有操作简便、实验周期短、术后大鼠恢复快、可多次重复进行等优点;麻醉状态下颈动静脉插管高胰岛素-正血糖钳夹实验结果不准确;大鼠饲喂高脂高糖饲料可诱发明显的胰岛素抵抗。

高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术的研究进展

高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术(简称正糖钳技术)已被公认为测定胰岛素敏感性的金标准,并在糖尿病及其治疗药物的研究中得到日益广泛且深入的应用。该技术通过同时输注外源性胰岛素与葡萄糖,升高血浆胰岛素水平,同时维持血糖在基础稳态水平。该技术减少了内源性因素对实验的影响,具有准确可靠、重复性好、避免低血糖发生等优点。现介绍该技术的原理、方法、应用等,以促进该技术在我国的进一步完善、发展及应用。

高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术的护理问题分析与对策

目的探讨影响高胰岛素-正葡萄糖钳夹试验成功建立的护理问题及护理操作技术的改进。方法对2014年1月—2015年1月45例2型糖尿病患者进行高胰岛素-正葡萄糖钳夹试验,分析影响钳夹试验成功建立的相关护理因素及护理技术操作改进。结果 45例高胰岛素-正葡萄糖钳夹试验,42例成功,3例失败。存在的问题包括操作前患者心理紧张,静脉穿刺困难,试验中途采血不畅,试验中或试验后低血糖,试验中仪器故障。通过采取改进措施对以上问题逐一克服,最终钳夹试验顺利结束。结论试验前严格检测仪器性能,选择合适的静脉留置针,保持输液及采血管路通畅,正确采血避免血液稀释,提高血糖检测的准确度,是保证高胰岛素正葡萄糖钳夹试验成功建立的关键。

清醒大鼠高胰岛素-正血糖钳夹技术的建立和应用

目的建立大鼠高胰岛素-正血糖钳夹模型,并探讨短期输注脂肪乳对清醒状态下大鼠葡萄糖输注率(GIR)的影响。方法 SPF级雄性SD大鼠10只,随机数字表法分为2组,每组5只。采用颈动、静脉插管技术,分别经颈静脉给予SD大鼠输注20%脂肪乳(脂肪乳组)和5%葡萄糖6 h(对照组),行高胰岛素-正血糖钳夹实验测定血浆游离脂肪酸(FFA)和GIR。结果与葡萄糖输注的对照组比较,脂肪乳组大鼠输注20%脂肪乳6 h后,血浆FFA水平升高到对照组的17.6倍(P<0.01),GIR下降了27%(P<0.001),胰岛素抵抗非常明显。结论成功建立大鼠高胰岛素-正血糖钳夹技术,给大鼠输注脂肪乳可导致明显的胰岛素抵抗。

高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术检测原发性高血压患者胰岛素敏感性的护理

对22例原发性高血压患者采用高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术检测其胰岛素敏感性。结果患者均一次穿刺成功并顺利完成检查测试,且均提示存在胰岛素抵抗。在钳夹技术中做好患者的心理护理、密切观察血压、准确采血、肢端保温等是检测成功的关键。

高胰岛素-正葡萄糖钳夹术评估多囊卵巢综合征患者胰岛素敏感性的研究——附67例分析

目的:了解多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者的胰岛素敏感性,为PCOS患者的早期临床干预提供依据。方法:对67例PCOS患者(体重超重组29例,正常体重组38例)和20名健康女性(对照组)行高胰岛素-正葡萄糖钳夹术测定葡萄糖代谢率以了解胰岛素敏感性,并对结果进行比较。结果:对照组葡萄糖代谢率为(12.8±1.8)mg/(kg.min)、PCOS正常体重组为(10.1±3.0)mg/(kg.min)、PCOS体重超重组为(7.6±2.7)mg/(kg.min),PCOS正常体重组及PCOS体重超重组的葡萄糖代谢率明显低于对照组(P<0.01),且PCOS体重超重组较PCOS正常体重组的葡萄糖代谢率更低(P<0.05)。PCOS患者中63%(42/67)存在胰岛素抵抗。结论:PCOS患者多有胰岛素敏感性下降,如合并肥胖则胰岛素敏感性更低,提示对此类患者应及早行高胰岛素-正葡萄糖钳夹术测定,对存在胰岛素抵抗者给予干预性治疗以减低糖尿病的发生率。

利用高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术评估腰高比与胰岛素抵抗的相关性

目的:通过高胰岛素-正葡萄糖钳夹试验验证腰高比在评估胰岛素抵抗中的临床应用价值。方法:共纳入154例受试者,检测空腹血脂谱及其他重要生化指标。所有受试者均行高胰岛素-正葡萄糖钳夹试验,并计算葡萄糖代谢率、体重指数(body mass index,BMI)、腰围、腰臀比、腰高比及HOMA指数。比较各指数预测评估受试者胰岛素抵抗的能力。结果:相关分析结果显示,腰高比(r=-0.730,P<0.001)、腰臀比(r=-0.651,P<0.001)、BMI指数(r=-0.717,P<0.001)、腰围(r=-0.716,P<0.001)均与高胰岛素-正葡萄糖钳夹试验所得葡萄糖代谢率显著相关。以葡萄糖代谢率为标准绘制ROC曲线,不同指数曲线下面积为HOMA-IR(0.860)>腰高比(0.850)>BMI(0.846)>腰围(0.837)>腰臀比(0.749)。腰高比诊断胰岛素抵抗的最佳值为0.56,此值在ROC曲线中对应了最高的灵敏度(93.9%)和特异度(66.7%)。结论:腰高比与高胰岛素-正葡萄糖钳夹试验所得的葡萄糖代谢率有较好的相关性,相较于BMI、腰围、腰臀比等有较高的敏感度及特异度,是较好评估胰岛素抵抗的简易指数,可广泛应用于流行病学研究或大型临床试验。

高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术静脉置管方法的改进

高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术（hyperinsulinemiceuglycemicclamp technique）能在胰岛素-葡萄糖代谢平衡状态下精确测定组织对胰岛素的敏感性,是目前评价机体胰岛素敏感性的＂金标准＂[1-2]。需建立2条静脉通路,一条经三通管连接后用于持续输注20%葡萄糖及胰岛素,另一条用于频繁采集血样,每5分钟1次,需要使用静脉置管。置管是否成功是高胰岛素-正葡萄糖钳夹试验成败的关键．管道通畅与否将直接影响血样的采集及试验数据的准确性。该技术耗时长、费用高，目前国内尚未广泛开展，在静脉置管方法方面的研究不多。本院开展了该项技术，改进了静脉置管方法，并总结出一套操作规程，提高了工作效率，具有重要的临床指导意义。现报道如下。

用高胰岛素正糖钳夹技术研究人参皂甙对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠中PI3K的影响

[目的]探讨人参皂甙对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠中PI3K的影响。[方法]运用高胰岛素正糖钳夹技术检测2型糖尿病胰岛素抵抗模型大鼠,通过数学模型计算出葡萄糖输注速率(GIR)。[结果]三组人参皂甙组GIR均较高脂组不同程度的提高,人参皂甙Re组的GIR和正常组、高脂组有显著性差异。以Wstern Blot方法测定肝脏组织中PI3K的含量,Rg1组的蛋白表达要比Rb1组、Re组、高脂组、对照组和正常组有显著性差异。[结论]人参皂甙在肝脏中有显著的促进PI3K磷酸化的作用。

高胰岛素正糖钳夹应用对人参皂苷调控2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠中PI3K的作用

运用高胰岛素正糖钳夹技术(Hyperinsulinemic Euglycemic Clamp,简称钳夹术)检测2型糖尿病胰岛素抵抗模型大鼠,通过数学模型计算出葡萄糖输注速率(Glucose infusion rate,GIR),3组人参皂苷组GIR均较高脂组不同程度的提高,人参皂苷Re组的GIR和正常组、高脂组有显著性差异,接近西药罗格列酮的GIR,但尚未达到正常组的水平。Re:33.05±2.75;Rb:31.14±7.02;Rg:31.08±6.83;高脂组:25.21±1.46;P<0.05,有显著性差异。取大鼠肝脏组织,抽提蛋白,以Western Blot、PCR方法测定肝脏组织中PI3K的含量,Rg1组的蛋白表达要比Rb1组、Re组、高脂组、对照组和正常组有显著性差异,P<0.05,Rb1组、Re组与对照组的蛋白表达相近,但高于高脂组,接近正常组的蛋白表达。正常血糖高胰岛素钳夹技术是在动物清醒状态时,机体对高胰岛素刺激所产生的应激反应,能更准确地反应机体整体对胰岛素敏感的作用,给药组由于增强了胰岛素的敏感性,减少了胰岛素的抵抗,3组人参皂苷组GIR均较高脂组不同程度的提高,人参皂苷Re能促进肝释放葡萄糖的能力及促进周围组织利用葡萄糖的能力增强,能促进胰岛素首先与靶细胞表面的胰岛素受体(IR)结合,激活受体β亚单位(IRβ)的酪氨酸激酶,Rg在肝脏组织中有显著的促进磷酯酰肌醇3酶(PI3K)磷酸化的作用。

高脂高糖喂养诱导妊娠期胰岛素抵抗大鼠模型的建立与评价

目的用高胰岛素-正糖钳夹试验评价高脂高糖诱导的妊娠期胰岛素抵抗大鼠模型建立。方法选取雌性SD大鼠40只,分为高脂高糖饮食-孕鼠组、高脂高糖饮食-非孕鼠组、普通饮食-孕鼠组、普通饮食-未孕组,每组10只。喂养42 d后孕鼠组与雄性大鼠2∶1合笼相应受孕,次日清晨做雌鼠阴道分泌物涂片,显微镜下观察到精子(+)定为妊娠第1天,各组继续给予高脂高糖或普通饲料,于妊娠第20天禁食12 h后分别行高胰岛素-正糖钳夹试验。结果高脂高糖饮食良-孕鼠组大鼠葡萄糖输注率(2.9±0.7)mg/(kg·min)明显低于其他各组,差异有统计学意义(P<0.05);空腹胰岛素(23.1±0.53)pmol/L明显高于其他各组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论使用高脂高糖饮食诱导可成功建立妊娠期胰岛素抵抗的大鼠模型。

胰高血糖素样肽-1对肥胖2型糖尿病大鼠胰岛素敏感性的改善作用

目的探讨胰高血糖素样肽(GLP)-1对肥胖2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛素敏感性的改善作用及机制。方法 12只6周龄雄性SD大鼠随机分为T2DM组、T2DM+GLP-1组及正常对照组(NC组)。T2DM组及T2DM+GLP-1组高脂喂养、NC组普食喂养4 w,给予T2DM组及T2DM+GLP-1组链脲佐菌素(STZ)30 mg/kg腹腔注射建立T2DM模型。受试大鼠进行高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验。T2DM+GLP-1组大鼠在钳夹实验前30 min开始持续输注GLP-1,检测钳夹实验120 min葡萄糖输注率及0、30、60、90、120 min血清胰岛素浓度。Wester印迹法测定大鼠腓肠肌丝氨酸/苏氨酸激酶(Akt)磷酸化水平。结果与NC组比较,T2DM组钳夹实验120 min葡萄糖输注率降低(P<0.05),骨骼肌Akt磷酸化水平下降;与T2DM组比较,T2DM+GLP-1组钳夹实验120 min葡萄糖输注率增加(P<0.05),骨骼肌Akt磷酸化水平升高;各组间胰岛素浓度变化无差异(P>0.05)。结论 GLP-1可以增加平静状态T2DM大鼠葡萄糖摄取,改善骨骼肌的胰岛素敏感性,这一改善作用不依赖于胰岛素浓度的增加。

初诊2型糖尿病患者短期胰岛素泵强化治疗对血浆FGF-21水平及胰岛素敏感性的影响

目的探讨短期胰岛素泵强化治疗对初诊2型糖尿病(T2DM)患者胰岛素敏感性和血浆成纤维细胞生长因子-21(FGF-21)水平的影响。方法采用自身前后对照,运用高胰岛素-正葡萄糖钳夹术评价30例新诊断T2DM患者接受2 w短期胰岛素泵(CSII)强化治疗前后胰岛素敏感性的变化,并采用酶免法测定治疗前后血浆FGF-21水平。结果 T2DM患者血浆FGF-21水平明显高于对照组〔(1.6±0.1)vs(1.1±0.4)μg/L,P<0.01〕。T2DM患者经胰岛素泵强化治疗2 w后,血浆FGF-21水平较治疗前明显下降〔(1.6±0.1)vs(1.3±0.1)μg/L,P<0.05〕。多元逐步回归分析表明,WHR、2 h PBG、SBP及FFA是影响血浆FGF-21水平的独立相关因素(YFGF-21=0.625XWHR+0.034XPBG+0.003XSBP-0.419XFFA+0.626)。结论短期胰岛素泵强化治疗可明显降低T2DM患者血浆FGF-21水平,血浆FGF-21水平与代谢紊乱有关,并可能参与了T2DM的发生和发展。

高脂高糖饲料喂养结合慢性应激促进大鼠胰岛素抵抗

目的:考察高脂高糖饲料喂养结合慢性应激对大鼠胰岛素抵抗的影响。方法:雄性大鼠分为普通饲料组、高脂高糖饲料(HFSD)组、普通饲料结合慢性应激(CS)组和高脂高糖饲料结合慢性应激(HFSD+CS)组。实验持续10周后,测量血脂、血糖及血胰岛素,高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验检测胰岛素抵抗,并检测肝细胞过氧化物酶体增殖物激活受体-α(PPAR-α)mRNA表达。结果:HFSD组、CS组和HFSD+CS组均表现胰岛素抵抗,且HFSD+CS组抵抗作用最明显。血脂异常、高血糖、高胰岛素血症、肝细胞PPAR-αmRNA表达下降在HFSD+CS组中也最明显。慢性应激结合高脂高糖饲料对胰岛素抵抗程度、高血糖及高游离脂肪酸状态产生明显的交互作用。结论:慢性应激结合高脂高糖饲料喂养可起协同作用,促进胰岛素抵抗的发生,其产生原因主要与高血清游离脂肪酸状态有关。